第四章動物干細胞_第1頁
第四章動物干細胞_第2頁
第四章動物干細胞_第3頁
第四章動物干細胞_第4頁
第四章動物干細胞_第5頁
已閱讀5頁,還剩57頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、胚胎干細胞胚胎干細胞2007年十大科學(xué)突破年十大科學(xué)突破v發(fā)現(xiàn)人類基因組個體間差異發(fā)現(xiàn)人類基因組個體間差異 v用皮膚細胞培育出胚胎干細胞用皮膚細胞培育出胚胎干細胞 v發(fā)現(xiàn)銀河系能量最大的宇宙射線發(fā)現(xiàn)銀河系能量最大的宇宙射線 v發(fā)現(xiàn)人體蛋白受體結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)人體蛋白受體結(jié)構(gòu) v發(fā)現(xiàn)超越硅電子的器件發(fā)現(xiàn)超越硅電子的器件 v證實量子霍爾效應(yīng)證實量子霍爾效應(yīng) v發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)T細胞具有分工作戰(zhàn)能力細胞具有分工作戰(zhàn)能力 v發(fā)現(xiàn)高效低成本制藥技術(shù)發(fā)現(xiàn)高效低成本制藥技術(shù) v發(fā)現(xiàn)人類大腦記憶的關(guān)健中心發(fā)現(xiàn)人類大腦記憶的關(guān)健中心 v編制挑戰(zhàn)人類智力的電腦游戲編制挑戰(zhàn)人類智力的電腦游戲 2008年十大科學(xué)突破年十大科學(xué)突破v

2、在火星山發(fā)現(xiàn)冰在火星山發(fā)現(xiàn)冰v用干細胞培育器官用干細胞培育器官v在銀河系內(nèi)發(fā)現(xiàn)與生命起源有關(guān)的糖分子在銀河系內(nèi)發(fā)現(xiàn)與生命起源有關(guān)的糖分子v治愈艾滋病治愈艾滋病v超級計算機超級計算機v為癌癥患者做基因組測序為癌癥患者做基因組測序v碳納米管制成的擴音器碳納米管制成的擴音器v測出現(xiàn)今溫室氣體水平為測出現(xiàn)今溫室氣體水平為800,000年來的最高值年來的最高值v把水變成燃料把水變成燃料v干細胞技術(shù)干細胞技術(shù) 2010年十大科學(xué)突破年十大科學(xué)突破v科學(xué)家首次觀測到宏觀物體量子效應(yīng)科學(xué)家首次觀測到宏觀物體量子效應(yīng)v合成生物學(xué)合成生物學(xué) v尼安德特人基因組尼安德特人基因組vHIV預(yù)防預(yù)防 v外顯子組測序外顯子

3、組測序/罕見疾病基因罕見疾病基因 v分子動力學(xué)模擬分子動力學(xué)模擬 v量子模擬器量子模擬器 v下一世代的基因組學(xué)下一世代的基因組學(xué) vRNA的重新編程的重新編程 v大鼠的回歸大鼠的回歸 2012年十大科學(xué)突破年十大科學(xué)突破v希格斯玻色子希格斯玻色子v丹尼索瓦人基因組丹尼索瓦人基因組v讓干細胞形成卵子讓干細胞形成卵子v好奇號的著陸系統(tǒng)好奇號的著陸系統(tǒng)vX射線激光解開蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)射線激光解開蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)v基因組的精密工程基因組的精密工程v馬約拉納費米子馬約拉納費米子vENCODE項目項目v大腦大腦/機器界面機器界面v中微子混合角中微子混合角 第一節(jié)第一節(jié) 干細胞的概念和分類干細胞的概念和分類一、干細

4、胞的概念一、干細胞的概念 干細胞(干細胞(Stem cellStem cell)是一群具有無限的或者是一群具有無限的或者永生的永生的自我更新能力自我更新能力,至少能夠產(chǎn)生一種高度分,至少能夠產(chǎn)生一種高度分化的子代細胞的細胞化的子代細胞的細胞(分化潛能),(分化潛能),是個體生命是個體生命過程中產(chǎn)生和存在的一個特殊細胞群體。過程中產(chǎn)生和存在的一個特殊細胞群體。v全能干細胞全能干細胞v多能干細胞多能干細胞v單能干細胞單能干細胞按分化潛能按分化潛能按發(fā)育狀態(tài)按發(fā)育狀態(tài)胚胎干細胞胚胎干細胞成體干細胞成體干細胞二、干細胞的分類二、干細胞的分類ES細胞細胞EG細胞細胞EC細胞細胞造血干細胞造血干細胞間充質(zhì)

5、干細胞間充質(zhì)干細胞神經(jīng)干細胞神經(jīng)干細胞肝臟干細胞等肝臟干細胞等全能干細胞:全能干細胞: (Totipotent Totipotent stem cellstem cell)具有形成完整個體的分化潛能。具有形成完整個體的分化潛能。如哺乳動物的受精卵及如哺乳動物的受精卵及8 8細胞期細胞期以前的卵裂球。以前的卵裂球。多能干細胞:多能干細胞:(pluripotent pluripotent stem cellstem cell)具有分化出多種細胞組織的潛能。具有分化出多種細胞組織的潛能。如造血干細胞、神經(jīng)干細胞。如造血干細胞、神經(jīng)干細胞。單能干細胞:單能干細胞:(multipotent multip

6、otent stem cellstem cell)只能向一種或兩種密切相關(guān)的細只能向一種或兩種密切相關(guān)的細胞類型分化。如上皮組織基底層胞類型分化。如上皮組織基底層的干細胞,肌肉中的成肌細胞。的干細胞,肌肉中的成肌細胞。胚胎干細胞胚胎干細胞 來自早期胚胎、原始生殖細胞、或畸來自早期胚胎、原始生殖細胞、或畸胎瘤組織等的干細胞胎瘤組織等的干細胞萬能細胞萬能細胞成體干細胞成體干細胞一群分布在成體組織中尚未分化的、一群分布在成體組織中尚未分化的、具有自我更新、并負有構(gòu)建和補充某具有自我更新、并負有構(gòu)建和補充某種組織的各種類型細胞潛能的干細胞種組織的各種類型細胞潛能的干細胞。如骨髓造血干細胞(如骨髓造血干

7、細胞(HSCHSC),),間質(zhì)干細間質(zhì)干細胞(胞(MSCMSC),),神經(jīng)干細胞(神經(jīng)干細胞(NSCNSC) 第二節(jié)第二節(jié) 胚胎干細胞胚胎干細胞v胚胎干細胞研究的進展胚胎干細胞研究的進展v胚胎干細胞的生物學(xué)特性胚胎干細胞的生物學(xué)特性 v胚胎干細胞系的建立胚胎干細胞系的建立 v胚胎干細胞的應(yīng)用胚胎干細胞的應(yīng)用v1958年年, Stevens最早發(fā)現(xiàn)了畸胎瘤干細胞最早發(fā)現(xiàn)了畸胎瘤干細胞v1981年年, Evans和和Martin分別成功地分離和體外培養(yǎng)了小鼠的胚胎分別成功地分離和體外培養(yǎng)了小鼠的胚胎干細胞干細胞v1995年年, Thomson等人分離建立了第一株靈長類動物的胚胎干細等人分離建立了第

8、一株靈長類動物的胚胎干細胞胞v1998年年, Thomson等建立了第一株人類胚胎干細胞等建立了第一株人類胚胎干細胞v1998年年, Shamblott等建立了第一株人類生殖干細胞等建立了第一株人類生殖干細胞v2006年年, Takahashi等建立了第一株小鼠等建立了第一株小鼠iPSv2007年年, Takahashi等建立了第一株人等建立了第一株人iPSv2008年,年,Andrew French首次用字體皮膚細胞克隆出人類胚胎,首次用字體皮膚細胞克隆出人類胚胎,但未能成功提取出胚胎干細胞但未能成功提取出胚胎干細胞一、胚胎干細胞研究的進展情況一、胚胎干細胞研究的進展情況二、胚胎干細胞的生物

9、學(xué)特性二、胚胎干細胞的生物學(xué)特性1. 形態(tài)特征形態(tài)特征v體積小、核大,有一個或多個核仁;體積小、核大,有一個或多個核仁;v胚胎干細胞克隆緊密堆積,無明顯的界限,胚胎干細胞克隆緊密堆積,無明顯的界限,形似鳥巢形似鳥巢顯微鏡下的人胚胎干細胞顯微鏡下的人胚胎干細胞2.2.生化特征生化特征v具有堿性磷酸酶和端粒酶活性;具有堿性磷酸酶和端粒酶活性;v表達表達SSEA-3SSEA-3、SSEA-4SSEA-4等;等;v表達表達OCT-4OCT-4蛋白;蛋白;v無無X X染色體失活。染色體失活。3. 其他特征其他特征v二倍體核型二倍體核型v具有無限增殖能力具有無限增殖能力v具有發(fā)育的多潛能性具有發(fā)育的多潛能

10、性v能夠形成嵌合體能夠形成嵌合體v具有培養(yǎng)細胞的所有特征,缺乏細胞周期中的具有培養(yǎng)細胞的所有特征,缺乏細胞周期中的G1期的檢驗點期的檢驗點三、胚胎干細胞系的建立(以小鼠三、胚胎干細胞系的建立(以小鼠ESES為例)為例)1.1.培養(yǎng)體系的選擇和準(zhǔn)備培養(yǎng)體系的選擇和準(zhǔn)備飼養(yǎng)層細胞:飼養(yǎng)層細胞: STO成纖維細胞系:已建系的細胞成纖維細胞系:已建系的細胞 MEF:小鼠胚胎成纖維細胞:小鼠胚胎成纖維細胞無飼養(yǎng)層無飼養(yǎng)層: 培養(yǎng)液培養(yǎng)液+人重組人重組LIF 含含LIF的條件培養(yǎng)液的條件培養(yǎng)液:大鼠心肌細胞條件培養(yǎng)液大鼠心肌細胞條件培養(yǎng)液 大鼠肝細胞株大鼠肝細胞株BRL條件培養(yǎng)液條件培養(yǎng)液2.2.胚胎的來

11、源胚胎的來源v胚胎的發(fā)育階段:胚胎的發(fā)育階段:囊胚囊胚v小鼠胚胎來源小鼠胚胎來源 母小鼠超數(shù)排卵受精后采集母小鼠超數(shù)排卵受精后采集v人胚胎的來源人胚胎的來源 多來自人工受精卵體外培養(yǎng)而來多來自人工受精卵體外培養(yǎng)而來 普通培養(yǎng)法普通培養(yǎng)法v囊胚在分離培養(yǎng)液中培養(yǎng)囊胚在分離培養(yǎng)液中培養(yǎng)25dv吸取吸取ICM,胰酶消化,用培養(yǎng)液中和酶,胰酶消化,用培養(yǎng)液中和酶v分散后分散后ICM小團塊與飼養(yǎng)層細胞共培養(yǎng),小團塊與飼養(yǎng)層細胞共培養(yǎng),7天后更換天后更換培養(yǎng)液,形成細胞克隆。培養(yǎng)液,形成細胞克隆。v離散細胞克隆為單細胞,轉(zhuǎn)移到新的飼養(yǎng)層細胞,離散細胞克隆為單細胞,轉(zhuǎn)移到新的飼養(yǎng)層細胞,形成小的細胞克隆即分

12、離培養(yǎng)成功。形成小的細胞克隆即分離培養(yǎng)成功。3.3.胚胎干細胞的分離(酶消化法)胚胎干細胞的分離(酶消化法)免疫外科法免疫外科法v用用0.5%鏈霉蛋白酶,溶解去除透明帶鏈霉蛋白酶,溶解去除透明帶v利用兔抗鼠抗體和豚鼠血清處理胚胎,利用兔抗鼠抗體和豚鼠血清處理胚胎,溶解去除滋胚層,獲得溶解去除滋胚層,獲得ICMv后續(xù)操作同普通培養(yǎng)法后續(xù)操作同普通培養(yǎng)法4.4.胚胎干細胞的增殖培養(yǎng)胚胎干細胞的增殖培養(yǎng)飼養(yǎng)層培養(yǎng):飼養(yǎng)層培養(yǎng):v特殊的培養(yǎng)液特殊的培養(yǎng)液:用DMEM培養(yǎng)液,還要加非必須氨基酸;-巰基乙醇。v以成纖維細胞為飼養(yǎng)細胞。以成纖維細胞為飼養(yǎng)細胞。v有時需加入有時需加入LIFLIF,抑制細胞分化

13、,抑制細胞分化無飼養(yǎng)層培養(yǎng):無飼養(yǎng)層培養(yǎng):條件培養(yǎng)基條件培養(yǎng)基 未分化的人胚胎干細胞未分化的人胚胎干細胞A.小鼠成纖維飼養(yǎng)細胞上培養(yǎng)小鼠成纖維飼養(yǎng)細胞上培養(yǎng)8天后的天后的ICM(標(biāo)尺(標(biāo)尺100um)B.ICM中分離出的中分離出的H9細胞系(標(biāo)尺細胞系(標(biāo)尺100um)C. H9細胞系(標(biāo)尺細胞系(標(biāo)尺50um)D.在無小鼠胚胎成纖維細胞,但有在無小鼠胚胎成纖維細胞,但有LIF(20ng/ml)的條件下培養(yǎng))的條件下培養(yǎng)5d后,后,H9細胞發(fā)生分化(標(biāo)尺細胞發(fā)生分化(標(biāo)尺100um)5.5.胚胎干細胞的鑒定胚胎干細胞的鑒定v堿性磷酸酶檢測堿性磷酸酶檢測v特異性表面抗原表達的鑒定特異性表面抗原表

14、達的鑒定v端粒酶活性的檢測端粒酶活性的檢測v核型分析核型分析v體外分化能力鑒定體外分化能力鑒定v體內(nèi)分化能力鑒定體內(nèi)分化能力鑒定v嵌合能力的鑒定嵌合能力的鑒定具有堿性磷酸酶具有堿性磷酸酶和端粒酶活性;和端粒酶活性;表達表達SSEA-3、SSEA-4等;等;表達表達OCT-4蛋白;蛋白;正常二倍體核型正常二倍體核型發(fā)育的多潛能性發(fā)育的多潛能性能形成嵌合體能形成嵌合體干細胞培養(yǎng)過程干細胞培養(yǎng)過程第三節(jié)第三節(jié) 成體干細胞成體干細胞一、成體干細胞的概念一、成體干細胞的概念 指一群分布在成體組織中尚未分化的、指一群分布在成體組織中尚未分化的、具有自我更新、并負有構(gòu)建和補充某種組織的具有自我更新、并負有構(gòu)

15、建和補充某種組織的各種類型細胞潛能的干細胞。各種類型細胞潛能的干細胞。 v慢周期性慢周期性v自我更新和再生能力的有限性自我更新和再生能力的有限性v可塑性可塑性: : 超越特定組織、分化成其他超越特定組織、分化成其他組織的功能性細胞,參與其他損傷組組織的功能性細胞,參與其他損傷組織的修復(fù)??椀男迯?fù)。二、成體干細胞的生物學(xué)特性二、成體干細胞的生物學(xué)特性三、成體干細胞的類別三、成體干細胞的類別v造血干細胞造血干細胞v神經(jīng)干細胞神經(jīng)干細胞v皮膚干細胞皮膚干細胞v間充質(zhì)干細胞間充質(zhì)干細胞v肝臟干細胞等肝臟干細胞等4.1 概念概念 人體內(nèi)比較獨特的體細胞群,人體內(nèi)比較獨特的體細胞群,具有高度的自我更新能力

16、和多向分具有高度的自我更新能力和多向分化潛能,能夠長期重建造血和修復(fù)化潛能,能夠長期重建造血和修復(fù)損傷。損傷。4.2 來源來源v骨髓;1/400v臍帶血;1/10000v外周血;1/100000v胎兒造血系統(tǒng);v胚胎干細胞和胚胎生殖細胞。4.3 生物學(xué)特性生物學(xué)特性v體內(nèi)終身存在,采用不對稱的分裂方式體內(nèi)終身存在,采用不對稱的分裂方式 v具有向髓系、淋巴系多向分化的潛能,移植具有向髓系、淋巴系多向分化的潛能,移植后能夠重建造血的同時重建免疫后能夠重建造血的同時重建免疫v表面標(biāo)志物:表面標(biāo)志物:CD34+4.4 分離分離v密度梯度離心,獲得單核細胞密度梯度離心,獲得單核細胞v含固化抗體的細胞分離

17、柱(含固化抗體的細胞分離柱(CD34+)4.5 鑒定(鑒定(特異性的表面標(biāo)志)特異性的表面標(biāo)志)CD34分子分子:表達于造血干細胞、一部分造血祖細:表達于造血干細胞、一部分造血祖細胞、小血管內(nèi)皮細胞及胚胎成纖維細胞的表面。胞、小血管內(nèi)皮細胞及胚胎成纖維細胞的表面。結(jié)合其他表面標(biāo)志,可將結(jié)合其他表面標(biāo)志,可將CD34+細胞分為若干亞群細胞分為若干亞群vCD38分子:小鼠分子:小鼠CD34+CD38+更原始更原始 人人CD34+CD38-更幼稚更幼稚vAC133分子:跨膜糖蛋白分子:跨膜糖蛋白vVEGFR2:血管內(nèi)皮生長因子受體:血管內(nèi)皮生長因子受體24.6 臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用 造血干細胞移植是治療

18、血液系造血干細胞移植是治療血液系統(tǒng)疾病、先天性遺傳疾病以及多統(tǒng)疾病、先天性遺傳疾病以及多發(fā)性轉(zhuǎn)移性腫瘤疾病的最有效方發(fā)性轉(zhuǎn)移性腫瘤疾病的最有效方法法第四節(jié)第四節(jié) 干細胞的定向分化干細胞的定向分化一、干細胞分化的機制一、干細胞分化的機制v基因差異表達基因差異表達:強化某些基因的表達并抑制另一些強化某些基因的表達并抑制另一些基因的表達,形成某個單一譜系所特有的基因表達型。基因的表達,形成某個單一譜系所特有的基因表達型。v奢侈基因奢侈基因:對細胞自身生存并無直接影響對細胞自身生存并無直接影響,不是必,不是必需的,需的,但卻決定著細胞向特殊類型分化但卻決定著細胞向特殊類型分化。v細胞質(zhì)成分細胞質(zhì)成分:

19、調(diào)節(jié)基因差異表達的物質(zhì)存在于細胞調(diào)節(jié)基因差異表達的物質(zhì)存在于細胞質(zhì)中。每個子細胞所繼承細胞質(zhì)的差異決定了各子細質(zhì)中。每個子細胞所繼承細胞質(zhì)的差異決定了各子細胞沿特定的方向分化。胞沿特定的方向分化。v細胞間的相互作用細胞間的相互作用: 細胞誘導(dǎo):細胞誘導(dǎo):是一部分細胞對鄰近細胞產(chǎn)生影響是一部分細胞對鄰近細胞產(chǎn)生影響,并決并決定鄰近細胞分化方向及形態(tài)發(fā)生的過程。定鄰近細胞分化方向及形態(tài)發(fā)生的過程。 細胞抑制:細胞抑制:在胚胎發(fā)育中在胚胎發(fā)育中,已分化的組織細胞產(chǎn)生抑已分化的組織細胞產(chǎn)生抑素素,抑制鄰近細胞進行同樣分化抑制鄰近細胞進行同樣分化,以避免相同的器官重復(fù)以避免相同的器官重復(fù)發(fā)生或過度發(fā)育。

20、發(fā)生或過度發(fā)育。v細胞外物質(zhì)的介導(dǎo)作用細胞外物質(zhì)的介導(dǎo)作用:包括細胞外基質(zhì)、黏附分子、包括細胞外基質(zhì)、黏附分子、激素和細胞因子等。目前研究最多的是生長因子。激素和細胞因子等。目前研究最多的是生長因子。二、胚胎干細胞的定向分二、胚胎干細胞的定向分化化v改變細胞的培養(yǎng)條件改變細胞的培養(yǎng)條件 與輔助細胞共培養(yǎng)與輔助細胞共培養(yǎng) 在半固體培養(yǎng)基中原位生長分化在半固體培養(yǎng)基中原位生長分化 加入誘導(dǎo)細胞分化的因子或化學(xué)物質(zhì),加入誘導(dǎo)細胞分化的因子或化學(xué)物質(zhì), 如如VGEF、bFGF 、DMSO和和RA等等v將某種分化誘導(dǎo)因子的基因轉(zhuǎn)入將某種分化誘導(dǎo)因子的基因轉(zhuǎn)入ES細胞內(nèi)細胞內(nèi)v體內(nèi)定向分化體內(nèi)定向分化,使

21、使ES細胞多數(shù)分化為該組織特異性的細胞細胞多數(shù)分化為該組織特異性的細胞胚胎干細胞的誘導(dǎo)分化:胚胎干細胞的誘導(dǎo)分化: 胎牛血清,骨髓基質(zhì)細胞共培養(yǎng)胎牛血清,骨髓基質(zhì)細胞共培養(yǎng)胚胎干細胞胚胎干細胞造血細胞造血細胞 RARA胚胎干細胞胚胎干細胞神經(jīng)細胞神經(jīng)細胞 DMSODMSO胚胎干細胞胚胎干細胞肌肉細胞肌肉細胞 TGF-B1, VEGF, bFGFTGF-B1, VEGF, bFGF胚胎干細胞胚胎干細胞血管和內(nèi)皮細胞血管和內(nèi)皮細胞 RA+RA+胰島素胰島素+T3+T3胚胎干細胞胚胎干細胞脂肪細胞脂肪細胞 BMP-2, BMP-4BMP-2, BMP-4胚胎干細胞胚胎干細胞軟骨細胞軟骨細胞 地塞米松

22、,磷酸甘油地塞米松,磷酸甘油胚胎干細胞胚胎干細胞骨細胞骨細胞 基因轉(zhuǎn)染基因轉(zhuǎn)染胚胎干細胞胚胎干細胞胰島素分泌細胞胰島素分泌細胞人胚胎干細胞注射至免疫缺陷小鼠的后腿肌肉中形成的各種組織:人胚胎干細胞注射至免疫缺陷小鼠的后腿肌肉中形成的各種組織:(a)腸樣結(jié)構(gòu);)腸樣結(jié)構(gòu);(b)神經(jīng)上皮花結(jié);神經(jīng)上皮花結(jié);(c)骨骼;)骨骼;(d)軟骨軟骨 ;(e)橫紋??;橫紋??;(f)腎腎Culturing Hematopoietic Stem Cell三、造血干細胞的定向分化三、造血干細胞的定向分化四、四、ESC與與ASC的比較的比較種類種類優(yōu)點優(yōu)點缺點缺點ESC可分化為各種類型的組織細胞可分化為各種類型的組

23、織細胞可建立穩(wěn)定的細胞系可建立穩(wěn)定的細胞系可形成嵌合體可形成嵌合體胚胎干細胞的來源胚胎干細胞的來源免疫排斥免疫排斥是原始胚細胞,有發(fā)生畸胎瘤的危險是原始胚細胞,有發(fā)生畸胎瘤的危險ASC克服免疫排斥克服免疫排斥,實現(xiàn)個性化治療實現(xiàn)個性化治療比比ESC更安全更安全臨床應(yīng)用可行性強臨床應(yīng)用可行性強人們尚未從成人體內(nèi)全部組織中分離人們尚未從成人體內(nèi)全部組織中分離出出ASCASC含量甚微,很難分離和純化,且含量甚微,很難分離和純化,且數(shù)量隨年齡增長而降低數(shù)量隨年齡增長而降低1.生產(chǎn)特定的細胞用于細胞療法生產(chǎn)特定的細胞用于細胞療法v體外受精的囊胚提取的胚胎干細胞體外受精的囊胚提取的胚胎干細胞v成體干細胞成

24、體干細胞v病人體細胞克隆囊胚提取的胚胎干細胞病人體細胞克隆囊胚提取的胚胎干細胞v誘導(dǎo)多能干細胞誘導(dǎo)多能干細胞2.人造器官人造器官v美國麻省總醫(yī)院的科學(xué)家將在實驗室培育的人工腎臟移植美國麻省總醫(yī)院的科學(xué)家將在實驗室培育的人工腎臟移植到小鼠體內(nèi)后,這個通過到小鼠體內(nèi)后,這個通過“生物工程生物工程”法制造的器官成功法制造的器官成功地發(fā)揮了正常腎臟的功能地發(fā)揮了正常腎臟的功能盡管效率上還不如天然腎臟盡管效率上還不如天然腎臟 v研究者通過去掉老鼠肝臟上的細胞,剩下一個研究者通過去掉老鼠肝臟上的細胞,剩下一個“支架支架”,然后將然后將2億個健康的肝細胞分億個健康的肝細胞分4次、每次次、每次10分鐘注射到支

25、分鐘注射到支架上進行培植,成功培植出人造老鼠活肝,在實驗室存活架上進行培植,成功培植出人造老鼠活肝,在實驗室存活10天之久,并能夠分解毒素。天之久,并能夠分解毒素。人造腎臟人造腎臟3.藥物安全評價藥物安全評價v藥物研發(fā)行業(yè)中一個掩藏的很深的黑暗秘密,那就是很藥物研發(fā)行業(yè)中一個掩藏的很深的黑暗秘密,那就是很少有藥物在用于人體試驗前先在人類疾病細胞中進行試少有藥物在用于人體試驗前先在人類疾病細胞中進行試驗,利用干細胞技術(shù)可以改變這一狀況。驗,利用干細胞技術(shù)可以改變這一狀況。v新加坡研制新加坡研制“人造肝臟人造肝臟”用于新藥毒性試驗用于新藥毒性試驗 小結(jié)小結(jié)v掌握干細胞的概念和分類掌握干細胞的概念和

26、分類v掌握胚胎干細胞的生物學(xué)特性和建系方法掌握胚胎干細胞的生物學(xué)特性和建系方法v掌握組織干細胞的特性掌握組織干細胞的特性v理解干細胞定向分化機制,掌握胚胎干細理解干細胞定向分化機制,掌握胚胎干細胞定向分化的方法胞定向分化的方法作業(yè):作業(yè): 以造血干細胞所講內(nèi)容為依以造血干細胞所講內(nèi)容為依據(jù),查找資料,從概念、來源、據(jù),查找資料,從概念、來源、生物學(xué)特性、分離、鑒定及臨生物學(xué)特性、分離、鑒定及臨床應(yīng)用等方面寫出另一種組織床應(yīng)用等方面寫出另一種組織干細胞的相關(guān)研究資料。干細胞的相關(guān)研究資料。iPS細胞細胞v2006年日本京都大學(xué)年日本京都大學(xué)Yamanaka研究小組采用體外基因轉(zhuǎn)染技術(shù),從研究小組

27、采用體外基因轉(zhuǎn)染技術(shù),從24個因子中篩選出個因子中篩選出Oct4,Sox2,c-Myc和和Klf4等四個轉(zhuǎn)錄因子,通過反轉(zhuǎn)等四個轉(zhuǎn)錄因子,通過反轉(zhuǎn)錄病毒將上述錄病毒將上述4個轉(zhuǎn)錄因子導(dǎo)入小鼠成纖維細胞,篩選出多潛能干細胞個轉(zhuǎn)錄因子導(dǎo)入小鼠成纖維細胞,篩選出多潛能干細胞系,并將該類干細胞命名為系,并將該類干細胞命名為iPS細胞。細胞。v2007年該小組將人的體細胞重編程為年該小組將人的體細胞重編程為iPS細胞。細胞。v2008 年年Kim 研究小組利用慢病毒載體攜帶研究小組利用慢病毒載體攜帶Oct4 和和c-Myc 或或Oct4與與Klf4 兩種轉(zhuǎn)錄因子就可以將成人的神經(jīng)干細胞誘導(dǎo)為兩種轉(zhuǎn)錄因子

28、就可以將成人的神經(jīng)干細胞誘導(dǎo)為iPS 細胞。細胞。v2009 年年Kim 等僅用等僅用Oct4 基因成功將小鼠神經(jīng)干細胞誘導(dǎo)為基因成功將小鼠神經(jīng)干細胞誘導(dǎo)為iPS 細胞。細胞。v2009年年Woltjen 等采用轉(zhuǎn)座子進行轉(zhuǎn)導(dǎo),可獲得無載體和轉(zhuǎn)基因的等采用轉(zhuǎn)座子進行轉(zhuǎn)導(dǎo),可獲得無載體和轉(zhuǎn)基因的iPS 細胞,提高了安全性。細胞,提高了安全性。v2009年年Zhou 等利用等利用4 個轉(zhuǎn)錄因子的重組蛋白個轉(zhuǎn)錄因子的重組蛋白(Oct4,Sox2,c-Myc 和和Klf4)就誘導(dǎo)出多能干細胞,拉近了走進臨床的距離。就誘導(dǎo)出多能干細胞,拉近了走進臨床的距離。成體干細胞臨床應(yīng)用成體干細胞臨床應(yīng)用從從200

29、1年到年到2008年,干細胞應(yīng)年,干細胞應(yīng)用的疾病類型主要包括:用的疾病類型主要包括:下肢缺血性疾病下肢缺血性疾病心臟系統(tǒng)疾病心臟系統(tǒng)疾病神經(jīng)系統(tǒng)疾病神經(jīng)系統(tǒng)疾病遺傳性疾病遺傳性疾病骨類疾病和肝臟類疾病等骨類疾病和肝臟類疾病等應(yīng)用的細胞類型:應(yīng)用的細胞類型:自體或異體骨髓單個核自體或異體骨髓單個核細胞異基因臍血單個核細胞細胞異基因臍血單個核細胞外周血單個核細胞外周血單個核細胞胎腦神經(jīng)干細胞等胎腦神經(jīng)干細胞等生命倫理學(xué)原則的應(yīng)用:生命倫理學(xué)原則的應(yīng)用:人類胚胎干細胞研究問題人類胚胎干細胞研究問題支持和反對治療性克隆的論證支持和反對治療性克隆的論證人類胚胎的道德地位人類胚胎的道德地位反對者的理由反

30、對者的理由v胚胎細胞團是有生命的,是神圣的。胚胎細胞團是有生命的,是神圣的。v治療性克隆和生殖性克隆之間只有一步之遙治療性克隆和生殖性克隆之間只有一步之遙,扮演上帝的角色最終將導(dǎo)致人類面臨無法預(yù)扮演上帝的角色最終將導(dǎo)致人類面臨無法預(yù)見的可怕災(zāi)難。見的可怕災(zāi)難。v技術(shù)不成熟技術(shù)不成熟 v反對的國家:聯(lián)合國、美國和哥斯達黎加等反對的國家:聯(lián)合國、美國和哥斯達黎加等支持者的理由支持者的理由v治療性克隆為人類戰(zhàn)勝醫(yī)學(xué)難題帶來了曙光,給科治療性克隆為人類戰(zhàn)勝醫(yī)學(xué)難題帶來了曙光,給科學(xué)設(shè)置倫理道德底線的思想是阻礙科技進步的精神學(xué)設(shè)置倫理道德底線的思想是阻礙科技進步的精神枷鎖。枷鎖。v胚胎細胞還不是真正意義上的人胚胎細胞還不是真正意義上的人v支持的國家:中國、英國、比利時、新加坡、日本支持的國家:中國、英國、比利時、新加坡、日本和韓國等和韓國等v胚胎是人胚胎是人(person)?v胚胎是生命?胚胎是生命?v什么是人?什么是人?v我們對胚胎應(yīng)持的態(tài)度?我們對胚胎應(yīng)持的態(tài)度?胚胎是胚胎是“人人”嗎?嗎?人的定義人的定義 具有特定人類基因組、具有意識能力具有特定人類基因組、具有意識能力或潛在的意識能力、處于社會關(guān)系中的實或潛在的意識能力、處于社會關(guān)系中的實體體(出生為準(zhǔn)出生為準(zhǔn))。胚胎是人類生物學(xué)生命。胚胎是人類生物學(xué)生命(human biological l

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論