《中國藥典》2010儀器分析方法應(yīng)對

1、2022-6-1712022-6-172氣相色譜氣相色譜殘留溶劑殘留溶劑紅外光譜紅外光譜原料藥、制劑原料藥、制劑毛細(xì)管電泳毛細(xì)管電泳離子色譜離子色譜HPLC檢測器檢測器總有機碳測定法總有機碳測定法（TOC）分析技術(shù)2022-6-1732022-6-1742022-6-175正相色譜 反相色譜離子對色譜2022-6-1762022-6-1772022-6-1782022-6-1792022-6-17102022-6-171120102010版藥典二部中色譜柱的使用情況版藥典二部中色譜柱的使用情況2022-6-17122022-6-17132022-6-1714l基本原理離子色譜中發(fā)生的基本過程就

2、是離子交換，因此，離子色譜本質(zhì)上就是離子交換色譜。在離子色譜的基本組成中，重要的和與其他高效液相色譜不同的就是抑制器和電導(dǎo)檢測器，離子色譜用的泵是PEEK材料襯里的不銹鋼泵。離子交換色譜法主要用于分析有機酸、氨基酸、多肽及核酸等離子型化合物的分離。2022-6-17152022-6-17160.02.55.07.510.012.515.017.520.022.525.027.530.0-1.000.001.002.003.004.005.00新柱 德維ECD_1Smin1 - F - 2.6572 - 3.8073 - 4.2904 - CO3 - 5.1475 - 5.7476 - 9.21

3、77 - 10.2638 - 15.3239 - 21.40010 - 25.693用于氯膦酸二鈉原料藥的有關(guān)物質(zhì)與制劑的含量測定2022-6-17172022-6-17182022-6-17192022-6-17202022-6-172120102010版藥典二部采用電泳法的品種版藥典二部采用電泳法的品種20102010版藥典二部采用版藥典二部采用CECE的品種的品種2022-6-1722Minutes1516171819202122232425AU-0.006-0.004-0.0020.0000.0020.0040.0060.00818.41718.61718.8291：保留時間為18.4

4、17分鐘的是去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶，2：保留時間為18.617分鐘的是去丙氨酸-抑肽酶，3：保留時間為18.829分鐘的是抑肽酶峰 2022-6-1723Minutes1516171819202122232425AU-0.006-0.004-0.0020.0000.0020.0040.0060.00818.35418.55418.7922022-6-17242022-6-17252022-6-17262022-6-172720102010版藥典二部采用檢測器情況版藥典二部采用檢測器情況2022-6-17282022-6-17292022-6-17302022-6-1731-40.00048

5、.000136.000224.000312.000400.0000.003.507.0010.5014.0017.5021.0024.5028.0031.5035.00mvmin3.314.034.244.855.257.047.6016.2117.92-7.0008.40023.80039.20054.60070.0000.000.901.802.703.604.505.406.307.208.109.00mvmin3.314.034.244.855.257.047.6016.2117.92總雜質(zhì)：5.26%2022-6-1732-40.00048.000136.000224.000312.

6、000400.0000.003.507.0010.5014.0017.5021.0024.5028.0031.5035.00mvmin3.344.044.865.287.107.6816.4818.08-7.0008.40023.80039.20054.60070.0000.000.901.802.703.604.505.406.307.208.109.00mvmin3.344.044.865.287.107.6816.4818.08總雜質(zhì)：4.18%2022-6-17332022-6-1734原理：連續(xù)測定流通池中溶液折射率來測定試樣中各組原理：連續(xù)測定流通池中溶液折射率來測定試樣中各組分濃

7、度。分濃度。優(yōu)點：通用型檢測器優(yōu)點：通用型檢測器缺點：缺點： 1 1）對溫度變化敏感）對溫度變化敏感 2 2）對溶劑組成變化敏感，不能用于梯度檢測）對溶劑組成變化敏感，不能用于梯度檢測 3 3）屬于中等靈敏度的檢測器）屬于中等靈敏度的檢測器2022-6-17352022-6-17362022-6-17372022-6-17382022-6-1739方法學(xué)驗證的重要工具2022-6-17402022-6-17412022-6-1742Analyte PolarityIonSprayAPCIGC/MS2022-6-17432022-6-17442022-6-17452022-6-1746 1.02

8、.03.04.00102030405060708090100 1.02.03.04.05.06.00102030405060708090100質(zhì)量色譜圖質(zhì)量色譜圖總離子流圖總離子流圖2022-6-17472022-6-17482022-6-1749HNCH3OHCH3Ephedrine, MW = 1652022-6-17502022-6-17512022-6-17522022-6-17532022-6-17542022-6-17552022-6-17562022-6-17572022-6-17582022-6-17592022-6-17602022-6-17612022-6-1762HNCH

9、3OHCH3Ephedrine, MW = 1652022-6-17632022-6-17642022-6-17652022-6-17662022-6-17672022-6-17682022-6-1769通過對樣品進行分子離子峰的掃描發(fā)現(xiàn)M-H-的峰中有一個很強的407，根據(jù)樣品處理過程以及對復(fù)方各單味藥材的研究，其應(yīng)該為一有機酸的負(fù)離子峰，并初步推斷其為膽酸。（膽酸的分子量為408）。如圖所示：通過對照樣品(右)和標(biāo)準(zhǔn)品（左）的二級質(zhì)譜圖，發(fā)現(xiàn)其主要碎片峰均吻合較好。 2022-6-17702022-6-17712022-6-17722022-6-17732022-6-17742022-6-

10、17752022-6-17762022-6-17772022-6-17782022-6-17792022-6-17802022-6-17812022-6-17822022-6-17832022-6-17842022-6-17852022-6-17862022-6-17872022-6-17882022-6-17892022-6-17902022-6-17912022-6-17922022-6-1793HPLC 指紋圖譜指紋圖譜HPLC 指紋圖譜上的指紋圖譜上的10 個峰均得到了明確的指認(rèn)，指認(rèn)的峰面積之和已占總峰面積的個峰均得到了明確的指認(rèn)，指認(rèn)的峰面積之和已占總峰面積的89%。腫節(jié)風(fēng)腫節(jié)風(fēng)2

11、022-6-17945.010.015.020.025.030.0min0255075100mAU10.5010.7511.0011.2511.5011.75MPaA.Press.(Status)248nm,4nm (1.00)123456S烏靈膠囊樣品色譜圖烏靈膠囊樣品色譜圖 2022-6-17952022-6-17962022-6-1797u積雪草苷積雪草苷u羥基積雪草苷羥基積雪草苷u多對烏蘇烷型和齊多對烏蘇烷型和齊墩果烷型結(jié)構(gòu)異構(gòu)墩果烷型結(jié)構(gòu)異構(gòu)的同分異構(gòu)體的同分異構(gòu)體 主要成分主要成分原標(biāo)準(zhǔn)存在問題原標(biāo)準(zhǔn)存在問題u含量測定方法為紫外含量測定方法為紫外分光光度法，專屬性較分光光度法，專屬

12、性較差差uHPLCHPLC采用常規(guī)流動相，采用常規(guī)流動相，羥基積雪草苷難以與其羥基積雪草苷難以與其同分異構(gòu)體分離同分異構(gòu)體分離解決方案解決方案u加入手性流動相添加入手性流動相添加劑加劑-環(huán)糊精，實環(huán)糊精，實現(xiàn)積雪草苷、羥基積現(xiàn)積雪草苷、羥基積雪草苷多成分同系統(tǒng)雪草苷多成分同系統(tǒng)定量定量困擾已久的難題困擾已久的難題2022-6-1798羥基積雪草苷羥基積雪草苷 積雪草苷積雪草苷 羥基積雪草苷（羥基積雪草苷（medecassosidemedecassoside）C48H78O20C48H78O20積雪草苷積雪草苷B B（asiaticosideasiaticoside B B）C48H78O20C

13、48H78O202022-6-1799u“綿茵陳綿茵陳”及及“茵茵陳蒿陳蒿”性狀完全不性狀完全不同同u有效成分差異較大有效成分差異較大藥材基原劃分藥材基原劃分藥材質(zhì)量控制藥材質(zhì)量控制u以具利膽作用的綠原以具利膽作用的綠原酸和對羥基苯乙酮為酸和對羥基苯乙酮為指標(biāo)指標(biāo)u建立綿茵陳的多成分建立綿茵陳的多成分含量測定含量測定u藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)大幅提藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)大幅提高高提取物質(zhì)量控制提取物質(zhì)量控制u對茵陳提取物進行深入透對茵陳提取物進行深入透徹的研究徹的研究u比較不同提取方法的指紋比較不同提取方法的指紋圖譜，提出最優(yōu)的提取工圖譜，提出最優(yōu)的提取工藝藝u從根本保證了該提取物質(zhì)從根本保證了該提取物質(zhì)量的穩(wěn)定可

14、控量的穩(wěn)定可控2022-6-17100綠原酸 u 指紋圖譜及多成分含量測定等項目的指紋圖譜及多成分含量測定等項目的建立，全面控制茵陳提取物質(zhì)量建立，全面控制茵陳提取物質(zhì)量1234567S8910茵陳茵陳金銀花金銀花梔子梔子黃芩苷黃芩苷茵梔黃注射液指紋圖譜的11個共有峰的來源2022-6-17101u采用采用GC-MSGC-MS對其中對其中三個主要的雜質(zhì)峰三個主要的雜質(zhì)峰進行歸屬進行歸屬u闡明其化學(xué)結(jié)構(gòu)闡明其化學(xué)結(jié)構(gòu)薄荷腦中雜質(zhì)歸屬薄荷腦中雜質(zhì)歸屬全面的方法學(xué)考察全面的方法學(xué)考察u對三個雜質(zhì)峰進行全面對三個雜質(zhì)峰進行全面的考察的考察u專屬性試驗專屬性試驗u穩(wěn)定性試驗穩(wěn)定性試驗全面反映提取物質(zhì)量全

15、面反映提取物質(zhì)量u有關(guān)物質(zhì)的檢查有關(guān)物質(zhì)的檢查u含量測定含量測定u重金屬及有害元素的檢查重金屬及有害元素的檢查u溶解性、熔點、比旋度溶解性、熔點、比旋度薄荷腦有關(guān)物質(zhì)測定的氣相色譜圖薄荷腦有關(guān)物質(zhì)測定的氣相色譜圖6.006.507.007.508.008.509.009.5010.0010.5011.0011.5012.00100000020000003000000400000050000006000000700000080000009000000 1e+07 1.1e+07Time-AbundanceTIC: FL-50.D 6.90 7.59 10.16 10.45薄荷腦溶液的總離子流圖薄荷腦溶液的總離子流圖Is