--光學(xué)顯微鏡

1、光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造、原理及使用戒毒管理局檢驗(yàn)培訓(xùn)班課件戒毒管理局檢驗(yàn)培訓(xùn)班課件 甘超甘超 2014.8.8主要內(nèi)容一、顯微鏡的結(jié)構(gòu)二、顯微鏡的光學(xué)原理及幾個基本概念三、顯微鏡的使用及注意事項(xiàng)目的與要求一、掌握顯微鏡低倍鏡、高倍鏡、油鏡的使用二、熟悉使用顯微鏡時的規(guī)則三、了解顯微鏡各個部件的功能顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)目鏡目鏡：安裝在鏡筒的上：安裝在鏡筒的上端，起著將物鏡所放大端，起著將物鏡所放大的物像進(jìn)一步放大的作的物像進(jìn)一步放大的作用。每臺顯微鏡通常配用。每臺顯微鏡通常配置置2 23 3個不同放大個不同放大倍率倍率的的目鏡目鏡，常見的有，常見的有5 5、1010和和1515（表示放表示放大倍數(shù)）的大倍

2、數(shù)）的目鏡目鏡，可根，可根據(jù)不同的需要選擇使用，據(jù)不同的需要選擇使用，最常使用的是最常使用的是1010目鏡。目鏡。 物鏡：安裝在物鏡轉(zhuǎn)換物鏡：安裝在物鏡轉(zhuǎn)換器上。每臺光鏡一般有器上。每臺光鏡一般有3 34 4之個不同放大之個不同放大倍率倍率的物鏡，每個物鏡由數(shù)的物鏡，每個物鏡由數(shù)片凸透鏡和凹透鏡組合片凸透鏡和凹透鏡組合而成，是顯微鏡最主要而成，是顯微鏡最主要的光學(xué)部件，決定著光的光學(xué)部件，決定著光鏡分辨力的高低。常用鏡分辨力的高低。常用物鏡的放大倍數(shù)有物鏡的放大倍數(shù)有1010、4040和和100100等幾種。等幾種。一般一般1010的物鏡稱為低的物鏡稱為低倍鏡；將倍鏡；將4040的稱為高的稱為

3、高倍鏡；將倍鏡；將100100的稱為的稱為油鏡。油鏡。保護(hù)成像的光路與亮度連接目鏡和物鏡 連接鏡座和鏡臂 承載中間部分元件載物臺作用是安放載玻片，形狀有圓形和方形兩種，其中方形的面積為120mm110mm。中心有一個通光孔，通光孔后方左右兩側(cè)各有一個安裝壓片夾用的小孔。分為固定式與移動式兩種。有的載物臺的縱橫坐標(biāo)上都裝有游標(biāo)尺，一般讀數(shù)為0.1mm，游標(biāo)尺可用來測定標(biāo)本的大小，也可用來對被檢部分做標(biāo)記。 聚光器安裝在載物臺下，其作用是將光源經(jīng)反光鏡反射來的光線聚焦于樣品上，以得到最強(qiáng)的照明，使物象獲得明亮清晰的效果。聚光器的高低可以調(diào)節(jié)，使焦點(diǎn)落在被檢物體上，以得到最大亮度。調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)X軸軸Y軸

4、方向軸方向都是升降鏡筒，調(diào)節(jié)焦距，以便觀察清楚物像，粗準(zhǔn)焦螺旋的升降范圍大，屬于粗略調(diào)節(jié)，細(xì)準(zhǔn)焦螺旋的升降范圍小，屬于精確調(diào)節(jié)。 2 顯微鏡的光學(xué)原理2.1折射和折射率 光線在均勻的各向同性介質(zhì)中，兩點(diǎn)之間以直線傳播，當(dāng)通過不同密度介質(zhì)的透明物體時，則發(fā)生折射現(xiàn)象，這是由于光在不同介質(zhì)的傳播速度不同造成的。 2.2凸透鏡的五種成象規(guī)律(1) 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以外時，則在象方二倍焦距以內(nèi)、焦點(diǎn)以外形成縮小的倒立實(shí)象； (2) 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距上時，則在象方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實(shí)象； (3) 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以內(nèi)，焦點(diǎn)以外時，則在象方二倍焦距以外形成放大的倒立

5、實(shí)象； (4) 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)上時，則象方不能成象； (5) 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)以內(nèi)時，則象方也無象的形成，而在透鏡物方的同側(cè)比物體遠(yuǎn)的位置形成放大的直立虛象。顯微鏡的成像原理 顯微鏡和放大鏡起著同樣的作用，就是把近處的微小物體成一放大的像，以供人眼觀察。只是顯微鏡比放大鏡可以具有更高的放大率而已。 物體位于物鏡前方，離開物鏡的距離大于物鏡的焦距，但小于兩倍物鏡焦距。所以，它經(jīng)物鏡以后，必然形成一個倒立的放大的實(shí)像AB。 AB靠近F2的位置上。再經(jīng)目鏡放大為虛像AB后供眼睛觀察。目鏡的作用與放大鏡一樣。所不同的只是眼睛通過目鏡所看到的不是物體本身，而是物體被物鏡所成的已經(jīng)放大了一次

6、的像。 3 顯微鏡的幾個基本概念光源：能發(fā)射光波的物體。 可見光頻率范圍：7.51014 - 3.91014 Hz。 真空中對應(yīng)的波長范圍：390nm 760nm 相應(yīng)光色：紫、藍(lán)、青、綠、黃、橙、紅分辨率(鑒別距離)：顯微鏡能分辨的最小距離，用D表示。顯微鏡的鑒別距離越小，分辨率越高。 D=0.61/ nsin D：分辨率 :光波的波長 N:介質(zhì)折射率 :物鏡鏡口角孔徑角：由標(biāo)本上一點(diǎn)發(fā)出的進(jìn)入物鏡最邊緣光線L和進(jìn)入物鏡中心光線OA之間的夾角稱為孔徑角。數(shù)值孔徑：令NA = nsin , 叫物鏡的數(shù)值孔徑。 數(shù)值孔徑與顯微鏡的分辨率有密切關(guān)系，越短，NA越大，分辨率越高。物鏡數(shù)值孔徑放大率

7、在顯微鏡下所看到的物像和實(shí)際物體之間的大小比例叫顯微鏡的放大率或放大倍數(shù)。顯微鏡下物像的放大主要由物鏡、鏡筒長度、目鏡所決定。適合的放大倍數(shù)決定于物鏡的數(shù)值孔徑，一船應(yīng)為數(shù)值孔徑的5001000倍。顯微鏡放大倍數(shù)放大倍數(shù)顯微鏡的放大倍數(shù)顯微鏡的放大倍數(shù) 為目鏡倍數(shù)乘物鏡倍數(shù)，為目鏡倍數(shù)乘物鏡倍數(shù)，如目鏡為如目鏡為10倍，物鏡為倍，物鏡為40倍倍,則放大倍數(shù)為則放大倍數(shù)為4010倍（放大倍（放大400倍）。優(yōu)良的顯微鏡可倍）。優(yōu)良的顯微鏡可放大放大2000倍。倍。 使用顯微鏡的操作規(guī)程使用顯微鏡的操作規(guī)程（1）搬動顯微鏡必須要）搬動顯微鏡必須要用右手握緊執(zhí)手用右手握緊執(zhí)手，左手，左手托住鏡座，才

8、能托住鏡座，才能做較遠(yuǎn)做較遠(yuǎn)距離的移動。距離的移動。顯微鏡的使用顯微鏡的使用（2）將顯微鏡置于實(shí)驗(yàn)臺上時，應(yīng)放在身體）將顯微鏡置于實(shí)驗(yàn)臺上時，應(yīng)放在身體的左前方，右側(cè)可放記錄本或繪圖紙等。的左前方，右側(cè)可放記錄本或繪圖紙等。顯微鏡的使用顯微鏡的使用（3）使用顯微鏡前，首先要調(diào)節(jié)好光源。在）使用顯微鏡前，首先要調(diào)節(jié)好光源。在實(shí)驗(yàn)室中可利用燈光或自然光，但不能用直實(shí)驗(yàn)室中可利用燈光或自然光，但不能用直射的陽光，以免損傷眼睛。為了迅速而正確射的陽光，以免損傷眼睛。為了迅速而正確地對光，應(yīng)先用地對光，應(yīng)先用10物鏡，把光圈放到最大物鏡，把光圈放到最大位置。在用眼睛觀察目鏡中視野的同時，轉(zhuǎn)位置。在用眼睛

9、觀察目鏡中視野的同時，轉(zhuǎn)動反光鏡，使視野的光線最明亮、最均勻。動反光鏡，使視野的光線最明亮、最均勻。如果靠近光源，可用平面的反光鏡；如果光如果靠近光源，可用平面的反光鏡；如果光源距離較遠(yuǎn)，可用凹面的反光鏡。源距離較遠(yuǎn)，可用凹面的反光鏡。顯微鏡的使用顯微鏡的使用（4）進(jìn)行觀察時，應(yīng)先用進(jìn)行觀察時，應(yīng)先用10物鏡。為了避免物鏡。為了避免物鏡壓壞制片（在使用高倍物鏡時最易發(fā)生），物鏡壓壞制片（在使用高倍物鏡時最易發(fā)生），必須用下面方法聚焦：即一方面從側(cè)面注視物必須用下面方法聚焦：即一方面從側(cè)面注視物鏡與制片間的距離；一方面轉(zhuǎn)動粗聚焦器，使鏡與制片間的距離；一方面轉(zhuǎn)動粗聚焦器，使鏡筒逐漸下降，直到接近

10、蓋玻片為止。觀察目鏡筒逐漸下降，直到接近蓋玻片為止。觀察目鏡視野，慢慢轉(zhuǎn)動粗聚焦器使鏡筒逐漸上升，鏡視野，慢慢轉(zhuǎn)動粗聚焦器使鏡筒逐漸上升，直到看清制片中的影像為止直到看清制片中的影像為止。然后轉(zhuǎn)動鏡頭轉(zhuǎn)。然后轉(zhuǎn)動鏡頭轉(zhuǎn)換器用高倍物鏡（換器用高倍物鏡（40或或44）觀察。使用）觀察。使用高倍物鏡如需要用細(xì)聚焦器聚焦時，其旋鈕轉(zhuǎn)高倍物鏡如需要用細(xì)聚焦器聚焦時，其旋鈕轉(zhuǎn)動量最好不要大于半圈動量最好不要大于半圈注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)（1）任何旋鈕轉(zhuǎn)動有困難時，絕不能用力過大，）任何旋鈕轉(zhuǎn)動有困難時，絕不能用力過大，而應(yīng)查明原因，排除障礙。如果自己不能解決時，而應(yīng)查明原因，排除障礙。如果自己不能解決時，要向指

11、導(dǎo)教師說明，幫助解決。要向指導(dǎo)教師說明，幫助解決。（2）保持顯微鏡的清潔，盡量避免灰塵落到鏡頭）保持顯微鏡的清潔，盡量避免灰塵落到鏡頭上，否則容易磨損鏡頭。必須盡量避免試劑或溶上，否則容易磨損鏡頭。必須盡量避免試劑或溶液沾污或滴到顯微鏡上，這些都能損壞顯微鏡。液沾污或滴到顯微鏡上，這些都能損壞顯微鏡。特別是高倍物鏡很容易被染料或試劑沾污，如被特別是高倍物鏡很容易被染料或試劑沾污，如被沾污時，應(yīng)立即用擦鏡紙擦拭干凈。顯微鏡用過沾污時，應(yīng)立即用擦鏡紙擦拭干凈。顯微鏡用過后，應(yīng)用清潔棉布輕輕擦拭（不包括物鏡和目鏡后，應(yīng)用清潔棉布輕輕擦拭（不包括物鏡和目鏡鏡頭）。鏡頭）。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)（3）要保護(hù)物

12、鏡、目鏡和聚光器中的透鏡。光學(xué)）要保護(hù)物鏡、目鏡和聚光器中的透鏡。光學(xué)玻璃比一般玻璃的硬度小，易于損傷。擦拭光學(xué)玻璃比一般玻璃的硬度小，易于損傷。擦拭光學(xué)透鏡時，只能用專用的擦鏡紙，不能用棉花，棉透鏡時，只能用專用的擦鏡紙，不能用棉花，棉布或其它物品擦拭。擦?xí)r要先將擦鏡紙折疊為幾布或其它物品擦拭。擦?xí)r要先將擦鏡紙折疊為幾折（不少于四折），從一個方向輕輕擦拭鏡頭，折（不少于四折），從一個方向輕輕擦拭鏡頭，每擦一次，擦鏡紙就要折疊一次。然后繞著物鏡每擦一次，擦鏡紙就要折疊一次。然后繞著物鏡或目鏡的軸旋轉(zhuǎn)地輕輕擦拭。如不按上述方式擦或目鏡的軸旋轉(zhuǎn)地輕輕擦拭。如不按上述方式擦拭，落在鏡頭上的灰塵很易損傷透鏡，出現(xiàn)一條拭，落在鏡頭上