高中生物專題第節(jié)基因工程的基本操作程序新人教選修PPT課件

1、目 標(biāo) 定 位1預(yù) 習(xí) 導(dǎo) 學(xué)2要 點(diǎn) 精 析3思 維 升 華4知 識(shí) 構(gòu) 建5課 時(shí) 作 業(yè)7應(yīng) 用 探 究6第1頁/共60頁目 標(biāo) 定 位第2頁/共60頁1了解目的基因獲取的常見方法。2理解基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心。(重、難點(diǎn))3掌握將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法。(重點(diǎn))4理解目的基因的檢測(cè)與鑒定。第3頁/共60頁預(yù) 習(xí) 導(dǎo) 學(xué)第4頁/共60頁基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟：_、_、_、_。一、目的基因的獲取1從基因文庫中獲取目的基因：將含有某種生物_的許多DNA片段，導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的_，稱為基因文庫。基因文庫可大可小，如果它包含了一種

2、生物所有的基因，就叫_；如果它只包含一種生物的一部分基因，就叫_，如_。目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)與鑒定不同基因不同基因基因組文庫部分基因文庫cDNA文庫第5頁/共60頁2從基因文庫中獲取目的基因的具體方法：可根據(jù)基因的_序列、基因的功能、基因在染色體上的位置、基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA以及基因翻譯產(chǎn)物_等特性來獲取目的基因。3利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因：PCR技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外_特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。(1)原理：利用_原理，將基因的核苷酸序列不斷加以復(fù)制，使其呈指數(shù)方式增加。指數(shù)擴(kuò)增約為2n(n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù))。核苷酸蛋白質(zhì)復(fù)制DNA雙鏈復(fù)制

3、第6頁/共60頁(2)條件：已知目的基因的一段_序列、_、_、_。(3)過程：目的基因DNA受熱變性后解鏈為_，與引物結(jié)合，然后在_的作用下進(jìn)行延伸形成DNA。4人工合成法：_比較小，核苷酸序列已知，可以人工合成。核苷酸引物模板DNADNA聚合酶單鏈DNA聚合酶基因第7頁/共60頁是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用 結(jié)構(gòu)基因 啟動(dòng)子 DNA片段 RNA聚合酶 蛋白質(zhì) 為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來 抗生素抗性基因 第8頁/共60頁農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法Ti質(zhì)粒的TDNA表達(dá)基因槍法花粉管通道法顯微注射技術(shù)第9頁/

4、共60頁繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少等鈣離子重組表達(dá)載體DNA分子第10頁/共60頁目的基因DNA分子雜交技術(shù)轉(zhuǎn)錄出mRNAmRNA與DNA雜交技術(shù)翻譯成蛋白質(zhì)抗原抗體雜交法第11頁/共60頁思維激活1為什么要用同一種限制酶切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA分子？2用于構(gòu)建基因表達(dá)載體的質(zhì)粒為什么必須具有啟動(dòng)子和終止子？3植物基因工程常用的受體細(xì)胞為什么可以是體細(xì)胞，而動(dòng)物基因工程一般只用受精卵？第12頁/共60頁答案1目的是產(chǎn)生相同的黏性末端，便于兩者完全拼接。2導(dǎo)入到受體細(xì)胞的目的基因的表達(dá)需要調(diào)控序列，因此在插入目的基因的部位之前需有啟動(dòng)子，之后需有終止子。3植物細(xì)胞的全能性較高，可經(jīng)

5、植物組織培養(yǎng)過程成為完整植物體，因此受體細(xì)胞可以是受精卵也可以是體細(xì)胞；動(dòng)物體細(xì)胞的全能性受到嚴(yán)格限制，因此動(dòng)物基因工程中的受體細(xì)胞一般只用受精卵。第13頁/共60頁要 點(diǎn) 精 析第14頁/共60頁一、目的基因的獲取目的基因的獲取概括地說主要有兩條途徑：可以從自然界中已有的物種中分離出來可以用人工的方法合成第15頁/共60頁1從基因文庫中獲取目的基因：基因文庫的構(gòu)建實(shí)際上就遵循基因工程的基本操作程序。做法是：將某種生物體內(nèi)的DNA全部提取出來，選用適當(dāng)?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶，將DNA切成一定范圍大小的DNA片段，然后，將這些DNA片段分別與載體連接起來，導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，每個(gè)受體菌都包含了一

6、段不同的DNA片段。也就是說，這個(gè)群體包含了這種生物的所有基因，構(gòu)成了這種生物的基因組文庫。如果用某種生物發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA(也叫cDNA)片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，那么，這個(gè)受體菌群體就叫做這種生物的cDNA文庫。cDNA文庫與基因文庫的區(qū)別可具體參閱教材中的“生物技術(shù)資料卡”。第16頁/共60頁2利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因：PCR技術(shù)是利用DNA雙鏈復(fù)制的原理，將基因的核苷酸序列不斷地加以復(fù)制，使其數(shù)量呈指數(shù)方式增加。利用PCR技術(shù)獲取目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。擴(kuò)增的過程是：目的基因DNA受熱

7、變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸，如此重復(fù)循環(huán)多次。上述過程可以在PCR擴(kuò)增儀中自動(dòng)完成。第17頁/共60頁3人工合成目的基因：人工合成目的基因的方法主要有兩種。(1)反轉(zhuǎn)錄法：主要用于相對(duì)分子質(zhì)量較大而又不知其序列的基因，它是以目的基因的mRNA為模板，借助反轉(zhuǎn)錄酶合成堿基互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在DNA聚合酶的作用下合成雙鏈DNA。(2)化學(xué)合成法：即依照某一蛋白質(zhì)的氨基酸序列，通過密碼子推算出其基因序列，然后直接合成目的基因。知識(shí)貼士：由于真核細(xì)胞的基因含有不表達(dá)的DNA片段，不能直接用于基因的擴(kuò)增和表達(dá)，因此，在獲取真核細(xì)胞中的目的基因時(shí)，一

8、般是用人工合成目的基因的方法。第18頁/共60頁目的基因的分離是基因工程研究中的主要方面和操作關(guān)鍵。下面甲、乙圖表示從真核生物細(xì)胞中獲取目的基因的兩種方法，請(qǐng)回答下列問題。第19頁/共60頁(1)在甲圖中，a過程是在_酶的作用下完成的。如果用該類酶中的一種，不一定能獲取目的基因，其原因是_。(2)在乙圖中，c過程在遺傳學(xué)上稱為_，d過程稱為_，d過程需以mRNA為模板，_為原料，還需要的條件是ATP、_、DNA聚合酶等。(3)除了上述兩種方法可以獲取目的基因外，請(qǐng)你再寫出一種方法：_。第20頁/共60頁解析獲取目的基因的方法較多，甲是通過限制酶獲取目的基因，但由于切割位點(diǎn)可能在基因內(nèi)部，故可能

9、得不到想要的目的基因；乙是通過信使RNA逆轉(zhuǎn)錄形成DNA(目的基因)的過程；此外，還可通過蛋白質(zhì)中氨基酸的排列順序推測(cè)基因的脫氧核苷酸序列，再進(jìn)行化學(xué)合成。答案(1)限制性核酸內(nèi)切一種限制性核酸內(nèi)切酶只能對(duì)特定的堿基序列進(jìn)行切割，此序列若在目的基因內(nèi)部，則不能得到目的基因(2)轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄脫氧核苷酸逆轉(zhuǎn)錄酶(3)根據(jù)已知蛋白質(zhì)中的氨基酸序列，可以推知基因的脫氧核苷酸序列，再進(jìn)行化學(xué)合成第21頁/共60頁下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是()從基因文庫中獲取目的基因利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因反轉(zhuǎn)錄法通過DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成ABCD答案D第22頁/共60頁解析PCR利用的是DNA雙鏈

10、復(fù)制原理。即將雙鏈DNA之間的氫鍵打開，變成單鏈DNA，作為聚合反應(yīng)的模板。反轉(zhuǎn)錄法則是以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，先反轉(zhuǎn)錄形成互補(bǔ)的單鏈DNA，再合成雙鏈的DNA。則均不需要模板。第23頁/共60頁二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建是實(shí)施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。1構(gòu)建目的：其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。第24頁/共60頁2表達(dá)載體的組成：?jiǎn)?dòng)子目的基因終止子標(biāo)記基因。(1)目的基因外源DNA分子的有效片段。(2)啟動(dòng)子一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶的

11、識(shí)別和結(jié)合部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。第25頁/共60頁(3)終止子位于基因的尾端，也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA短片段。終止子相當(dāng)于一盞紅色信號(hào)燈，使轉(zhuǎn)錄到此終止。(4)標(biāo)記基因鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來，如抗生素抗性基因就可以作為這種基因。第26頁/共60頁3目的基因與載體的結(jié)合：將目的基因與載體結(jié)合的過程，實(shí)際上是不同來源的DNA重新組合的過程。如果以質(zhì)粒為載體，將目的基因與質(zhì)粒結(jié)合的步驟是：(1)用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)有黏性末端的切口。(2)用同種限制酶切斷目的基因，產(chǎn)生相同的黏性末端。(3)將切下的基因

12、片段，插入到質(zhì)粒的切口處，再加入適量DNA連接酶，使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒。第27頁/共60頁4差異性：由于受體細(xì)胞有動(dòng)物、植物、微生物之分，加之目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同，所以表達(dá)載體的構(gòu)建也會(huì)有差異性。知識(shí)貼士：生物之間進(jìn)行基因交流，需使用啟動(dòng)子和終止子才能比較有利于基因的表達(dá)。如通過cDNA文庫獲得的目的基因沒有啟動(dòng)子，只將編碼序列導(dǎo)入受體生物中，此目的基因無法進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記。為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平，往往還要增加一些其他調(diào)控元件，如增強(qiáng)子等。第28頁/共60頁有時(shí)需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么部位，往往要加上可以標(biāo)記存在部位的

13、基因(或做成目的基因與標(biāo)記基因的融合基因)，如綠色熒光蛋白基因等。第29頁/共60頁下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問題：第30頁/共60頁第31頁/共60頁(1)一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma切割前后，分別含有_個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。(2)若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的Sma酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越_。(3)用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Sma切割，原因是_。(4)與只使用EcoR相比較，使用BamH和Hind兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止_。(5)為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片

14、段混合，并加入_酶。(6)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了_。第32頁/共60頁解析(1)切割前質(zhì)粒為環(huán)狀，不含游離的磷酸基團(tuán)。切割后質(zhì)粒成了一個(gè)鏈狀的雙鏈DNA分子，含兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。(2)因?yàn)镾ma識(shí)別序列中均為GC堿基對(duì)，G、C之間含三個(gè)氫鍵，熱穩(wěn)定性高。(3)據(jù)題圖可知，Sma既會(huì)破壞標(biāo)記基因，也會(huì)破壞目的基因。(4)若用同種限制性內(nèi)切酶切割質(zhì)粒和外源DNA中的目的基因，因?yàn)閮啥说酿ば阅┒四軌蚧パa(bǔ)配對(duì)，會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化的情況。而用兩種限制性內(nèi)切酶切割，因?yàn)閮啥诵纬傻酿ば阅┒瞬荒軌蚧パa(bǔ)配對(duì)，不會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化。(5)DNA連接酶可以連接具有能夠互補(bǔ)配對(duì)黏性末端的DNA片段。(6)標(biāo)記

15、基因可以鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因。第33頁/共60頁答案(1)0、2(2)高(3)Sma會(huì)破壞質(zhì)粒的抗生素抗性基因、外源DNA中的目的基因(4)質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化(5)DNA連接(6)鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞第34頁/共60頁(2015聊城檢測(cè))下列關(guān)于基因表達(dá)載體的構(gòu)建描述錯(cuò)誤的是()A基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心B基因表達(dá)載體的構(gòu)建包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等部分C目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因D構(gòu)建的基因表達(dá)載體都是相同的答案D第35頁/共60頁解析基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的第二步，也是基因工程的核心；一個(gè)基因表達(dá)載體的組成除目的

16、基因外還必須具有啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等部分；目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因；由于受體細(xì)胞不同，基因表達(dá)載體的構(gòu)建也會(huì)有差別，不可能都是相同的。第36頁/共60頁三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞是實(shí)施基因工程的第三步。目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法很多，應(yīng)具體情況具體分析。不同受體細(xì)胞導(dǎo)入方法不同。第37頁/共60頁生物種生物種類類植物細(xì)胞植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方常用方法法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法顯微注射法Ca2處理法處理法受體細(xì)受體細(xì)胞胞體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵受精卵原核

17、細(xì)胞原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化過轉(zhuǎn)化過程程目的基因插入目的基因插入Ti質(zhì)粒的質(zhì)粒的TDNA上上農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌導(dǎo)導(dǎo)入植物細(xì)胞入植物細(xì)胞融融合到受體細(xì)胞的合到受體細(xì)胞的DNA表達(dá)表達(dá)目的基因表達(dá)載目的基因表達(dá)載體提純體提純?nèi)÷讶÷?受精卵受精卵)顯微顯微注射注射受精卵發(fā)受精卵發(fā)育育獲得具有新獲得具有新性狀的動(dòng)物性狀的動(dòng)物Ca2處理細(xì)胞處理細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞表達(dá)載體與感受表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合態(tài)細(xì)胞混合感感受態(tài)細(xì)胞吸收受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子分子第38頁/共60頁知識(shí)貼士：農(nóng)桿菌是一種在土壤中生活的微生物，能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，而對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒有感染力。此外，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞還可

18、采用基因槍法和花粉管通道法。以上介紹的幾種方法，在導(dǎo)入受體細(xì)胞之前，都必須進(jìn)行目的基因表達(dá)載體的構(gòu)建，也就是說導(dǎo)入受體細(xì)胞的必須是重組DNA分子，而不能直接導(dǎo)入目的基因。第39頁/共60頁采用基因工程的方法培育抗蟲棉，下列導(dǎo)入目的基因的做法正確的是()將毒素蛋白注射到棉受精卵中將編碼毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中將編碼毒素蛋白的DNA序列，與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細(xì)菌，用該細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞，再進(jìn)行組織培養(yǎng)將編碼毒素蛋白的DNA序列，與細(xì)菌質(zhì)粒重組，注射到棉的子房并進(jìn)入受精卵ABCD第40頁/共60頁解析考查基因工程的操作步驟?；蚬こ痰牟僮鞑襟E是：目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建目的基因?qū)?/p>

19、受體細(xì)胞目的基因的檢測(cè)和鑒定。本題著重考查基因工程步驟中的第三步：目的基因必須與細(xì)菌質(zhì)粒重組，形成目的基因表達(dá)載體，方可導(dǎo)入棉受精卵中。答案C第41頁/共60頁(2015濰坊檢測(cè))下列關(guān)于目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的敘述中，不正確的是()A常用原核生物作為受體細(xì)胞，是因?yàn)樵松锓敝晨?，且多為單?xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少B受體細(xì)胞所處的一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)稱為感受態(tài)C感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子需要適宜的溫度和酸堿度D感受態(tài)細(xì)胞吸收重組表達(dá)載體DNA分子的液體只要調(diào)節(jié)為適宜的pH即可，沒必要用緩沖液第42頁/共60頁答案D解析由于原核生物繁殖快，且多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少等特點(diǎn)，所

20、以早期的基因工程通常用原核生物作為受體細(xì)胞；受體細(xì)胞經(jīng)Ca2處理后，處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，稱為感受態(tài)；感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子需要在適宜的溫度和酸堿度的緩沖液中完成。第43頁/共60頁四、目的基因的檢測(cè)與鑒定目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其中遺傳特性，只有通過檢測(cè)與鑒定才能知道。這是基因工程的第四步工作，也是檢查基因工程是否做成功的一步。目的基因的檢測(cè)內(nèi)容和方法的比較如下表：第44頁/共60頁類型類型步驟步驟檢測(cè)內(nèi)容檢測(cè)內(nèi)容方法方法結(jié)果顯示結(jié)果顯示分子分子檢測(cè)檢測(cè)第一步第一步目的基因是否目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞進(jìn)入受體細(xì)胞DNA分子雜交分子雜交(DNA和

21、和DNA之之間間)是否成功顯是否成功顯示出雜交帶示出雜交帶第二步第二步目的基因是否目的基因是否轉(zhuǎn)錄出轉(zhuǎn)錄出mRNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)(DNA和和mRNA之間之間)同上同上第三步第三步目的基因是否目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)翻譯出蛋白質(zhì)抗原抗原抗體雜抗體雜交交同上同上個(gè)體個(gè)體水平水平鑒定鑒定包括做抗蟲、抗病的接種實(shí)驗(yàn)，以確定是否有抗性以及包括做抗蟲、抗病的接種實(shí)驗(yàn)，以確定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性抗性的程度；基因工程產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性比較，以確定功能是否相同比較，以確定功能是否相同第45頁/共60頁知識(shí)貼士：目的基因在受體細(xì)胞中的存在與表達(dá)是有區(qū)別

22、的。目的基因被受體細(xì)胞攝取是表達(dá)的前提，但是被攝取并不意味著被表達(dá)。由于各種因素的影響，有時(shí)還需要采取一定的措施去促使目的基因的表達(dá)。DNA探針的應(yīng)用所依據(jù)的原理是DNA分子雜交。DNA分子雜交是指DNA片段在適合的條件下能和與之互補(bǔ)的另一個(gè)片段結(jié)合。如果對(duì)最初的DNA片段進(jìn)行標(biāo)記，即成為探針。第46頁/共60頁目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性，只有通過鑒定和檢測(cè)才能知道。下列屬于目的基因檢測(cè)和鑒定的是()檢測(cè)受體細(xì)胞是否有目的基因檢測(cè)受體細(xì)胞是否有致病基因檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)ABCD第47頁/共60頁解析本題考查目的基因的檢測(cè)與鑒定。目的基

23、因的檢測(cè)首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因，方法是用DNA分子雜交技術(shù)，使DNA探針與基因組DNA雜交；其次檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是用基因探針與mRNA雜交；最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成了蛋白質(zhì)，方法是用抗原抗體雜交。答案C第48頁/共60頁利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品。下列各項(xiàng)中能說明目的基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是()A棉花二倍體細(xì)胞中檢測(cè)到細(xì)菌的抗蟲基因B大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因及其mRNAC山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人生長(zhǎng)激素DNA序列D酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白答案D第49頁/共60頁第50頁/共60頁思 維 升 華第51

24、頁/共60頁一、易混淆概念辨析1基因、基因文庫、目的基因(1)基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，是控制性狀的遺傳物質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)和功能單位，基因的脫氧核苷酸序列代表遺傳信息。第52頁/共60頁(2)基因文庫是將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入受體菌的群體中通過克隆而儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，叫做基因文庫。建立基因文庫的目的就是為獲得大量的目的基因作準(zhǔn)備。如果基因文庫中含有一種生物的所有基因，這個(gè)基因文庫就叫做基因組文庫。如果基因文庫中含有一種生物的部分基因，這個(gè)基因文庫就叫做cDNA文庫?；蛭膸炀拖喈?dāng)于某種生物的基因倉庫，儲(chǔ)備著大量的同種基因。(3)目的基因是基因工程操作中需要的外源基因，它是編碼某種蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因，如生物的抗逆性基因、抗蟲基因等。第53頁/共60頁2DNA復(fù)制、PCR技術(shù)與基因克隆(1)DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的比較DNA復(fù)制復(fù)制PCR技術(shù)技術(shù)場(chǎng)所場(chǎng)所細(xì)胞核內(nèi)細(xì)胞核內(nèi)生物體外生物體外原理原理堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)酶酶DNA聚合酶、解旋酶聚合酶、解旋酶熱穩(wěn)定熱穩(wěn)定DNA聚合酶聚合酶(Taq酶酶)條件條件 模板、模板、ATP、