植物組織培養(yǎng)之具體植物學(xué)習(xí)教案

1、會計學(xué)1植物植物(zhw)組織培養(yǎng)之具體植物組織培養(yǎng)之具體植物(zhw)第一頁，共67頁。株無性系。株無性系。近近400種植物離體繁殖已獲成功。蘭花、無子種植物離體繁殖已獲成功。蘭花、無子西瓜、馬鈴薯、楊樹西瓜、馬鈴薯、楊樹(yn sh)等已在種苗等已在種苗生產(chǎn)上廣泛應(yīng)用。生產(chǎn)上廣泛應(yīng)用。第1頁/共67頁第二頁，共67頁。繁殖速度繁殖速度(sd)快，經(jīng)濟快，經(jīng)濟效益高效益高占用占用(zhn yn)空間小，不受季節(jié)限制，空間小，不受季節(jié)限制，便于工廠化育苗便于工廠化育苗繁殖各種珍稀、涉危苗木和突繁殖各種珍稀、涉危苗木和突變體，為育種服務(wù)變體，為育種服務(wù)離體繁殖周期：離體繁殖周期：13個月個月繁殖

2、系數(shù)：幾十繁殖系數(shù)：幾十幾百倍幾百倍又稱快繁又稱快繁離體繁殖是建立在體離體繁殖是建立在體細胞系的基礎(chǔ)上，細胞系的基礎(chǔ)上，是在人工控制的環(huán)是在人工控制的環(huán)境條件下，不會造境條件下，不會造成性狀分離，也不成性狀分離，也不會退化，同時還可會退化，同時還可避免病蟲害的侵染避免病蟲害的侵染。第2頁/共67頁第三頁，共67頁。手指手指(shuzh)玫瑰玫瑰 第3頁/共67頁第四頁，共67頁。第4頁/共67頁第五頁，共67頁。蘆薈蘆薈(l hu)、煙草、油菜、煙草、油菜等等 第5頁/共67頁第六頁，共67頁。無菌母株無菌母株(m zh)制備制備增殖增殖(zngzh)、分化、分化植株植株(zhzh)再生及鑒定

3、再生及鑒定煉苗和移植煉苗和移植基本程序與技術(shù)基本程序與技術(shù)培養(yǎng)基中激素配比培養(yǎng)基中激素配比激素種類及濃度激素種類及濃度基本培養(yǎng)基組成基本培養(yǎng)基組成滲透壓滲透壓逐步過渡逐步過渡培養(yǎng)基篩選培養(yǎng)基篩選材料滅菌材料滅菌第6頁/共67頁第七頁，共67頁。第7頁/共67頁第八頁，共67頁。傷）傷）第8頁/共67頁第九頁，共67頁。n培養(yǎng)時間培養(yǎng)時間 3050d （出芽，（出芽，葉）葉）第9頁/共67頁第十頁，共67頁。n移栽移栽n移入馴化苗圃（蛭石組成）移入馴化苗圃（蛭石組成）1520d n移入苗圃移入苗圃第10頁/共67頁第十一頁，共67頁。甘蔗甘蔗(gn zhe)、胡蘿卜、石、胡蘿卜、石刁柏等刁柏等

4、第11頁/共67頁第十二頁，共67頁。FLash第12頁/共67頁第十三頁，共67頁。三倍體無籽西瓜、甘蔗三倍體無籽西瓜、甘蔗(gn zhe)、香蕉、香、香蕉、香石竹、絲石竹等石竹、絲石竹等 第13頁/共67頁第十四頁，共67頁。第14頁/共67頁第十五頁，共67頁。球莖芽型葉柄表面產(chǎn)生圓球形小突起球莖芽，一端出芽一端出根遺傳性較穩(wěn)定，球莖芽可直接放入土中種植觀葉海棠球莖芽型葉柄表面產(chǎn)生圓球形小突起球莖芽，一端出芽一端出根遺傳性較穩(wěn)定，球莖芽可直接放入土中種植觀葉海棠球莖芽型葉柄表面產(chǎn)生圓球形小突起球莖芽，一端出芽一端出根遺傳性較穩(wěn)定，球莖芽可直接放入土中種植觀葉海棠球莖芽型葉柄表面產(chǎn)生圓球形

5、小突起球莖芽，一端出芽一端出根遺傳性較穩(wěn)定，球莖芽可直接放入土中種植觀葉海棠球莖芽型葉柄表面產(chǎn)生圓球形小突起球莖芽，一端出芽一端出根遺傳性較穩(wěn)定，球莖芽可直接放入土中種植觀葉海棠球莖芽型葉柄表面產(chǎn)生圓球形小突起球莖芽，一端出芽一端出根遺傳性較穩(wěn)定，球莖芽可直接放入土中種植觀葉海棠球莖芽型葉柄表面產(chǎn)生圓球形小突起球莖芽，一端出芽一端出根遺傳性較穩(wěn)定，球莖芽可直接放入土中種植觀葉海棠球莖球莖(qijng)(qijng)芽型芽型 葉柄表面產(chǎn)生圓球形小突起葉柄表面產(chǎn)生圓球形小突起球莖球莖(qijng)芽，一端出芽一端出根芽，一端出芽一端出根 遺傳性較穩(wěn)定遺傳性較穩(wěn)定(wndng)，球莖芽可直接，球莖芽

6、可直接放入土中種植放入土中種植 唐唐菖菖蒲蒲觀觀葉葉海海棠棠第15頁/共67頁第十六頁，共67頁。第16頁/共67頁第十七頁，共67頁。第17頁/共67頁第十八頁，共67頁。狼尾蕨狼尾蕨第18頁/共67頁第十九頁，共67頁。第19頁/共67頁第二十頁，共67頁。微枝扦插微枝扦插(qinch)(qinch)型型 帶芽的小插條在試管內(nèi)進行無菌扦插帶芽的小插條在試管內(nèi)進行無菌扦插 為木本植物進行快速繁殖為木本植物進行快速繁殖(fnzh)的主要方式的主要方式 葡萄、楊樹葡萄、楊樹 第20頁/共67頁第二十一頁，共67頁。第21頁/共67頁第二十二頁，共67頁。植物種類植物種類染病毒種類染病毒種類植物種

7、類植物種類染病毒種類染病毒種類菊花菊花康乃馨康乃馨水仙水仙月季月季葡萄葡萄無花果無花果1911410265矮牽牛矮牽牛馬鈴薯馬鈴薯大蒜大蒜蘋果蘋果草莓草莓桃桃51724362423第22頁/共67頁第二十三頁，共67頁。蘋果銹果病蘋果銹果病薄荷病毒病薄荷病毒病病病第23頁/共67頁第二十四頁，共67頁。郁金香雜色郁金香雜色(z s)花花郁金香正常郁金香正常(zhngchng)花花第24頁/共67頁第二十五頁，共67頁。細胞內(nèi)繁殖速度相對較慢；另細胞內(nèi)繁殖速度相對較慢；另外，病毒是通過篩管組織或胞外，病毒是通過篩管組織或胞間聯(lián)絲傳播至其他組織細胞的，間聯(lián)絲傳播至其他組織細胞的，而莖尖分生組織無分

8、化，沒有而莖尖分生組織無分化，沒有維管組織。）維管組織。）第25頁/共67頁第二十六頁，共67頁。第26頁/共67頁第二十七頁，共67頁。(5) (5) 抑制因子抑制因子 1976 1976年，年，Martin-TanguyMartin-Tanguy等提出了抑制等提出了抑制因子假說，認為在分生組織因子假說，認為在分生組織中存在有某種抑制因子。中存在有某種抑制因子。第27頁/共67頁第二十八頁，共67頁。第28頁/共67頁第二十九頁，共67頁。第29頁/共67頁第三十頁，共67頁。第30頁/共67頁第三十一頁，共67頁。第31頁/共67頁第三十二頁，共67頁。熱空氣處理脫毒法熱空氣處理脫毒法將試

9、驗?zāi)钢暝诟邷厣L室中生長一個將試驗?zāi)钢暝诟邷厣L室中生長一個(y )階段，使其頂端分生組織和次階段，使其頂端分生組織和次生分生組織迅速生長，然后切取其生分生組織迅速生長，然后切取其莖尖分生組織進行離體培養(yǎng)。莖尖分生組織進行離體培養(yǎng)。生長室溫度（生長室溫度（35 40）光照強度（光照強度（300010000Lx)第32頁/共67頁第三十三頁，共67頁。繼代繼代 無煙草花葉病毒無煙草花葉病毒(TMV) 無黃瓜花葉病毒無黃瓜花葉病毒(CMV) 次數(shù)次數(shù) 25 30 37 25 30 37 0 0/20 8/21 - - 1 0/20 0/20 0/20 5/18 4/19 10/21 2 0/20

10、0/20 0/20 8/20 10/20 11/20 3 0/20 0/20 8/20 10/20 8/20 11/20 4 0/20 0/20 5/20 5 4/20 1/20 5/20結(jié)論結(jié)論: 病毒種類不同病毒種類不同,愈傷組織反復(fù)繼代愈傷組織反復(fù)繼代(j di)兼熱處理的效果不兼熱處理的效果不同；同；TMV、CMV均經(jīng)均經(jīng)37熱處理，脫毒效果最好。熱處理，脫毒效果最好。第33頁/共67頁第三十四頁，共67頁。 其它效果其它效果 香石竹（康乃馨）在香石竹（康乃馨）在3840下經(jīng)兩下經(jīng)兩個月處理個月處理(chl)可除去全部病毒。可除去全部病毒。第34頁/共67頁第三十五頁，共67頁。馬鈴薯

11、在馬鈴薯在37下處理下處理1020天能除去天能除去(ch q)卷葉病毒。卷葉病毒。第35頁/共67頁第三十六頁，共67頁。第36頁/共67頁第三十七頁，共67頁。第37頁/共67頁第三十八頁，共67頁。莖尖莖尖大小大小(mm)培培養(yǎng)養(yǎng)數(shù)數(shù)荊芥鑒定之病斑荊芥鑒定之病斑總病斑總病斑 接種葉數(shù)接種葉數(shù) 平均病斑數(shù)平均病斑數(shù)/葉葉無病毒莖尖無病毒莖尖 數(shù)目數(shù)目 % 0.1 0.25 0.5 0.75 1.01.0 3 20 30 9 4 5 3 13 0.2 137 61 2.2 1198 70 17.1 429 12 35.3 432 11 39.2 1972 20 98.6 2 66 8 40 4

12、 13 1 11 0 0 0 0第38頁/共67頁第三十九頁，共67頁。莖尖培養(yǎng)法脫除植物病毒的技術(shù)莖尖培養(yǎng)法脫除植物病毒的技術(shù)(jsh)關(guān)鍵關(guān)鍵 莖尖越小對培莖尖越小對培養(yǎng)基的要求越養(yǎng)基的要求越高，成功率越高，成功率越低。低。第39頁/共67頁第四十頁，共67頁。n用很小的莖尖來培養(yǎng)，去除病用很小的莖尖來培養(yǎng)，去除病毒幾率大，獲得無病毒苗的可毒幾率大，獲得無病毒苗的可能性大。能性大。第40頁/共67頁第四十一頁，共67頁。第41頁/共67頁第四十二頁，共67頁。關(guān)系（蘋果關(guān)系（蘋果46月取材嫁月取材嫁接成活率較接成活率較高。）高。）第42頁/共67頁第四十三頁，共67頁。n該方法的缺點該方法

13、的缺點(qudin)：n存在存在20%30%左右的變異左右的變異率，無病毒苗苗期較長。柑橘率，無病毒苗苗期較長。柑橘要要68年才能結(jié)果。年才能結(jié)果。第43頁/共67頁第四十四頁，共67頁。胚珠胚珠(pi zh)第44頁/共67頁第四十五頁，共67頁。第45頁/共67頁第四十六頁，共67頁。n（c c）繼代培養(yǎng)的愈傷組織抗性變）繼代培養(yǎng)的愈傷組織抗性變異。異。第46頁/共67頁第四十七頁，共67頁。第47頁/共67頁第四十八頁，共67頁。第48頁/共67頁第四十九頁，共67頁。n或在提純過程中喪失了必備的抗或在提純過程中喪失了必備的抗原結(jié)構(gòu)；原結(jié)構(gòu)；n植物體內(nèi)的單寧物質(zhì)使植物體內(nèi)的單寧物質(zhì)使病毒

14、喪失了抗原性質(zhì)。病毒喪失了抗原性質(zhì)。第49頁/共67頁第五十頁，共67頁。病毒感染病毒感染人工注射人工注射(zhsh)異體蛋白異體蛋白動物動物動物動物植物植物帶該種病毒帶該種病毒血清反應(yīng)血清反應(yīng)+免疫球蛋白免疫球蛋白（抗原）（抗原）（抗體）（抗體）（抗原）（抗原）第50頁/共67頁第五十一頁，共67頁。第51頁/共67頁第五十二頁，共67頁。 馬鈴薯馬鈴薯X病毒侵染千日紅（病毒侵染千日紅（葉片葉片(ypin)呈枯斑）呈枯斑） 馬鈴薯馬鈴薯M病毒侵染千日紅（病毒侵染千日紅（葉片葉片(ypin)呈突起枯斑）呈突起枯斑）第52頁/共67頁第五十三頁，共67頁。嫁接法嫁接法 一些木本多年生果樹或草莓等

15、無一些木本多年生果樹或草莓等無性繁殖草本植物，其病毒不是通過性繁殖草本植物，其病毒不是通過汁液而是其他介體傳播汁液而是其他介體傳播如草莓黃如草莓黃化病毒是由蚜蟲（化病毒是由蚜蟲（Mtzus fragaefolii）傳播的，這種病毒鑒）傳播的，這種病毒鑒定定(jindng)可采用嫁接法，即用可采用嫁接法，即用鑒定鑒定(jindng)植株芽作接穗，指植株芽作接穗，指示植物作砧木。根據(jù)指示植物的表示植物作砧木。根據(jù)指示植物的表現(xiàn)判斷是否脫除了病毒?，F(xiàn)判斷是否脫除了病毒。第53頁/共67頁第五十四頁，共67頁。第54頁/共67頁第五十五頁，共67頁。第55頁/共67頁第五十六頁，共67頁。第56頁/共

16、67頁第五十七頁，共67頁。脫毒苗保存(bocn)第57頁/共67頁第五十八頁，共67頁?；ㄋ幓ㄋ?huyo)及花粉培養(yǎng)及花粉培養(yǎng)概念概念(ginin)及意義及意義花藥培養(yǎng)花藥培養(yǎng)(piyng)屬屬于于器官培養(yǎng)器官培養(yǎng)(piyng)范范疇疇花粉培養(yǎng)屬于花粉培養(yǎng)屬于細胞培養(yǎng)范疇細胞培養(yǎng)范疇也稱小孢子培養(yǎng)也稱小孢子培養(yǎng)第58頁/共67頁第五十九頁，共67頁。育種年限育種年限n獲得育種中間材料獲得育種中間材料n與誘變育種相結(jié)合可以提高與誘變育種相結(jié)合可以提高誘變頻率誘變頻率n與細胞融合相結(jié)合，使這一與細胞融合相結(jié)合，使這一育種途徑更具有實際應(yīng)用意育種途徑更具有實際應(yīng)用意義義n作為遺傳工程受體更為有效作為遺傳工程受體更為有效n用作基礎(chǔ)遺傳研究的各個領(lǐng)用作基礎(chǔ)遺傳研究的各個領(lǐng)域域第59頁/共67頁第六十頁，共67頁。第60頁/共67頁第六十一頁，