生理藥理實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

1、制藥工程專業(yè)生理藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書撰寫人： 龔妍春 審定人：程丹目錄第一章 動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器、設(shè)備2第一章 動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器、設(shè)備2第二章 動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)常用手術(shù)器械3第三章 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物及其選擇7第四章 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法9第五章 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號捉拿固定方法13第六章 動(dòng)物的麻醉16第七章 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的取血與處死方法18第八章 組織分離和插管術(shù)20第九章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的觀察、記錄及其處理24實(shí)驗(yàn)一 人體動(dòng)脈血壓測定26實(shí)驗(yàn)二 心音聽診28實(shí)驗(yàn)三 坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備30實(shí)驗(yàn)四 脊髓反射的基本特征和反射弧的分析31實(shí)驗(yàn)五 藥物在體內(nèi)的分布及藥動(dòng)學(xué)研究33實(shí)驗(yàn)六 給藥劑量、給藥

2、途徑對藥物作用的影響及藥物的協(xié)同作用34實(shí)驗(yàn)七 小鼠促性腺激素促排卵作用的觀察35實(shí)驗(yàn)八 缺氧及藥物影響36實(shí)驗(yàn)九 阿斯匹林的鎮(zhèn)痛作用38實(shí)驗(yàn)十 臟器功能狀態(tài)對藥物作用的影響40實(shí)驗(yàn)十一 呋塞米對大鼠的利尿作用41 第一部分 緒論本指導(dǎo)書是根據(jù)生理藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課程實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱編寫的，適用于制藥工程專業(yè)。一、本課程實(shí)驗(yàn)的作用與任務(wù)本課程是在生理藥理學(xué)的基礎(chǔ)上，開設(shè)的一門基礎(chǔ)性兼綜合性的實(shí)驗(yàn)課。生理藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)是一門研究生物正常機(jī)能、疾病發(fā)生機(jī)制和藥物作用規(guī)律的實(shí)驗(yàn)性學(xué)科，為學(xué)生提供了一個(gè)理論聯(lián)系實(shí)際，大膽實(shí)踐操作和積極思考的機(jī)會(huì)，以使其掌握基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的基本規(guī)律，為發(fā)揮創(chuàng)造性思維提供了一個(gè)思考和實(shí)踐的機(jī)

3、會(huì)。讓每個(gè)學(xué)生通過實(shí)際操作來更好地訓(xùn)練他們的實(shí)驗(yàn)技術(shù)技能；在實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上指導(dǎo)教師隨時(shí)組織學(xué)生進(jìn)行討論，以使學(xué)生們理解和掌握所學(xué)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，更好地融會(huì)貫通理論知識(shí)。自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)使學(xué)生將技術(shù)性、綜合性、探索創(chuàng)新性的實(shí)驗(yàn)融合在一起，通過自己的獨(dú)立實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和實(shí)踐，培養(yǎng)了學(xué)生的創(chuàng)新思維和獨(dú)立分析問題、解決問題的能力。 二、本課程實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)知識(shí)1.了解機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)的基本方法和常用儀器裝備；2.學(xué)習(xí)和掌握機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)的基本機(jī)能和基本操作；3.認(rèn)識(shí)人體及其他生物體的正常功能、疾病模型及藥物作用的基本規(guī)律；4.培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)研究的基本素質(zhì)，培養(yǎng)學(xué)生客觀地對事物進(jìn)行觀察、比較、分析和綜合的能力，以及獨(dú)立思考、解決實(shí)際問

4、題的能力。三、本課程實(shí)驗(yàn)教學(xué)項(xiàng)目及其教學(xué)要求實(shí)驗(yàn)方式：以學(xué)生自己動(dòng)手為主，老師在適當(dāng)時(shí)間予以提示；對實(shí)驗(yàn)中所出現(xiàn)的一些現(xiàn)象多向?qū)W生提出問題，培養(yǎng)其分析問題的能力，并注意與理論知識(shí)的有機(jī)結(jié)合；在設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)中，要求學(xué)生查閱資料進(jìn)行設(shè)計(jì)分析，老師以提點(diǎn)糾正為主；嚴(yán)格要求使操作技能規(guī)范化，老師作示范，強(qiáng)調(diào)其要點(diǎn)學(xué)生自己練?；疽螅鹤⒅厣硭幚韺W(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技能的掌握與提高，克服盲目追求新穎而忽視基礎(chǔ)的傾向；實(shí)驗(yàn)課前要預(yù)習(xí)，明確每次實(shí)驗(yàn)的目的與基本步驟，并作好預(yù)習(xí)報(bào)告；在實(shí)驗(yàn)中要有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度，尊重事實(shí)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果，要善于發(fā)現(xiàn)新現(xiàn)象；培養(yǎng)團(tuán)結(jié)合作的精神，包括學(xué)生與老師、組與組、組長與組員之間的密配合。六、

5、考核與報(bào)告實(shí)驗(yàn)成績包括實(shí)驗(yàn)過程表現(xiàn)成績、實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績2部分，分別占實(shí)驗(yàn)總成績的30%和70%。實(shí)驗(yàn)過程表現(xiàn)成績（占30%）包括：實(shí)驗(yàn)操作是否正確規(guī)范、學(xué)習(xí)態(tài)度是否認(rèn)真、實(shí)驗(yàn)結(jié)果如何是否符合邏輯、清掃值日等方面。實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績（占70%）包括：實(shí)驗(yàn)報(bào)告的格式是否正確、原理是否論述清楚，實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析討論是否正確，報(bào)告字跡是否清楚等方面。七、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)置與內(nèi)容序號實(shí)驗(yàn)名稱內(nèi)容提要實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)每組人數(shù)實(shí)驗(yàn)類型實(shí)驗(yàn)要求備注1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本操作方法與生物信號采集系統(tǒng)的基本操作了解機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)課的目的和基本方法、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則及注意事項(xiàng)，掌握實(shí)驗(yàn)動(dòng)物蟾蜍、家兔和小鼠的基本操作方法，熟悉相關(guān)手術(shù)器械的使用和注意事項(xiàng)。12驗(yàn)

6、證性必做2人體動(dòng)脈血壓測定掌握測定動(dòng)脈血壓的方法，理解測定動(dòng)脈血壓的原理；并要求能較準(zhǔn)確地測出人體肱動(dòng)脈的收縮壓與舒張壓的正常值。22驗(yàn)證性必做3心音聽診初步學(xué)習(xí)心音聽診的方法，加深理解正常心音的特點(diǎn)及產(chǎn)生機(jī)理，為心臟藥理奠定基礎(chǔ)。，22驗(yàn)證性選做4脊髓反射的基本特征和反射弧的分析通過對脊蛙的屈肌反射的分析，探討反射弧的完整性與反射活動(dòng)的關(guān)系22驗(yàn)證性必做5坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備實(shí)驗(yàn)中常用蟾蜍或蛙坐骨神經(jīng)干標(biāo)本來觀察興奮性、興奮過程、刺激的一些規(guī)律以及骨骼肌的收縮及其特點(diǎn)等。故坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備是生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本操作技術(shù)。 32驗(yàn)證性必做6缺氧及藥物的影響掌握藥物的作用對耗氧量的影響：分別

7、給小鼠腹腔注射苯氯、異丙嗪混合液和異丙腎上腺素等，觀察在不同藥物影響下機(jī)體的耗氧特征，了解條件因素在缺氧發(fā)生中的重要性和臨床應(yīng)用冬眠療法的意義。52綜合性選做7藥物在體內(nèi)的分布及藥動(dòng)學(xué)研究測定小白鼠口服磺胺甲噁唑后一定時(shí)間血藥濃度。52驗(yàn)證性必做8給藥劑量、給藥途徑對藥物作用的影響及藥物的協(xié)同作用觀察不同劑量以相同途徑給予戊巴比妥鈉和以不同途徑給予同劑量戊巴比妥鈉時(shí)，所引起藥理作用的差別32驗(yàn)證性必做9小鼠促性腺激素促排卵作用的觀察通過本實(shí)驗(yàn)了解促性腺激素的促排卵作用。通過利用外源性促性腺激素，增加卵巢的生理活性，激發(fā)多個(gè)卵泡在一個(gè)動(dòng)情周期發(fā)育成熟并排卵。22驗(yàn)證性選做10阿斯匹林的鎮(zhèn)痛作用了

8、解化學(xué)刺激法的實(shí)驗(yàn)原理，觀察阿斯匹林的鎮(zhèn)痛作用。22驗(yàn)證性必做11臟器功能狀態(tài)對藥物作用的影響觀察腎臟功能損害對硫酸鎂作用的影響。32驗(yàn)證性必做12視野與盲點(diǎn)的測定實(shí)驗(yàn)的條件下證明盲點(diǎn)的存在，并測出盲點(diǎn)大小22驗(yàn)證性選做13ABO血型鑒定掌握ABO血型鑒定的原理22驗(yàn)證性選做14心臟有效不應(yīng)期、心室期前收縮與代償間歇的測定觀察心肌不應(yīng)期、期前收縮和代償間歇，并分析其機(jī)制52綜合性選做 第一章 動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器、設(shè)備隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，先進(jìn)的科學(xué)儀器設(shè)備在動(dòng)物生理學(xué)研究中廣泛地利用，才使我們對生命活動(dòng)的有了更為本質(zhì)的認(rèn)識(shí)。因此學(xué)習(xí)和掌握動(dòng)物生理常用儀器、設(shè)備的使用方法，對做好動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)也

9、十分重要。進(jìn)行動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)所需的儀器總體上可分為四大系統(tǒng)（圖2-1）   (1)刺激系統(tǒng): 是對欲研究的對象施加刺激,引起其生理功能變化（即產(chǎn)生興奮）的一套儀器設(shè)備。多種刺激因素，如光、聲、電、溫度、機(jī)械及化學(xué)因素都可興奮組織，使其產(chǎn)生生理活動(dòng)的變化。但生理實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用最多的還是電刺激，因?yàn)殡姶碳ぽ^容易控制、對組織沒有或損傷很小、引導(dǎo)方便、可重復(fù)使用。電刺激系統(tǒng)包括電子刺激器、刺激隔離器和各種電極。  (2)引導(dǎo)、換能系統(tǒng)：生理功能變化的信號只有用一定的儀器設(shè)備顯示、記錄下來才有研究的價(jià)值，因此需要有一定的裝置能將其引導(dǎo)到顯示、記錄儀器上。若生理信號是電信號，引導(dǎo)

10、系統(tǒng)可能是引導(dǎo)電極，包括記錄單細(xì)胞活動(dòng)的玻璃微電極和記錄一群細(xì)胞電活動(dòng)的金屬電極；若生理現(xiàn)象為其它能量形式時(shí)，如機(jī)械收縮、壓力、振動(dòng)、溫度和某種化學(xué)成分變化等，都需要將原始生理信號轉(zhuǎn)換為電的信號，加以引導(dǎo)，這就是各種形式的換能器。  (3)信號調(diào)節(jié)放大系統(tǒng)：有的生理信號較為微弱，尚需進(jìn)行適當(dāng)?shù)姆糯?。信號調(diào)節(jié)系統(tǒng)是是一種放大器或放大器的組合，對信號基線的位置和輸出信號幅度的高低（增益，信號的Y軸）進(jìn)行調(diào)節(jié)。最原始的經(jīng)典儀器是各式各樣的杠桿、瑪利式氣鼓、各種檢壓計(jì)等。現(xiàn)代儀器設(shè)備包括示波器、記錄儀中的放大器部分和專用的前置放大器、微電極放大器等。  (4)顯示與記錄系統(tǒng)：有用紙

11、帶記錄、顯示屏記錄或顯示信號的儀器。通過調(diào)節(jié)相關(guān)的旋鈕調(diào)節(jié)走紙速度或掃描速度（信號的X軸）將信號擴(kuò)展開來。記紋鼓是一種較為原始的經(jīng)典記錄儀。由于計(jì)算機(jī)技術(shù)的發(fā)展，計(jì)算機(jī)生物信號采集處理系統(tǒng)已在生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中廣泛應(yīng)用，有替代刺激器、放大器、示波器和記錄儀的趨勢。進(jìn)行動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)有時(shí)還需要添置一些維持生命的系統(tǒng)，如恒溫槽、一些器官或細(xì)胞的灌流裝置、神經(jīng)屏蔽盒（室）、人工呼吸機(jī)等。動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備種類繁多、更新速度快，各院校的儀器設(shè)備差距甚大，這里只能作粗略的介紹，讓學(xué)生對動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備的發(fā)展有個(gè)初步了解。 第二章 動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)常用手術(shù)器械一、常用手術(shù)器械 動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)常用手術(shù)器械與醫(yī)

12、學(xué)外科手術(shù)器械大致相同,但也有一些專用器械.現(xiàn)僅介紹常規(guī)的手術(shù)器械。 (1)手術(shù)刀  手術(shù)刀主要用來切開皮膚和臟器。手術(shù)刀片有圓刃、尖刃和彎刃三種。刀柄也分多種，最常用的是4號刀柄和7號刀柄（圖3.1-1）?？筛鶕?jù)手術(shù)部位、性質(zhì)的需要自由拆裝和更換變鈍或損壞的手術(shù)刀片（圖3.1-2）。 持刀的方式有4種(圖3.1-3)，其中“執(zhí)弓式”是一種常用的的持刀方式。其動(dòng)作范圍廣泛而靈活，用于腹部、頸部或股部的皮膚切口。   (2)手術(shù)剪和粗剪刀   手術(shù)剪分鈍頭剪、尖頭剪。其尖端有直、彎之分。主要用于剪皮膚、肌肉等軟組織。也可用來分離組織，即利用剪刀尖

13、插入組織間隙，分離無大血管的結(jié)締組織。另外，還有一種小型的眼科剪，主要用于剪血管和神經(jīng)等軟組織。一般說來，深部操作宜用彎剪，不致誤傷。剪線大多為鈍頭直剪，剪毛用鈍頭、尖端上翹的。正確執(zhí)剪姿勢是用拇指與無名指持剪，食指置于手術(shù)剪的上方（圖3.1-4）。粗剪刀，為普通的剪刀。在蛙類的實(shí)驗(yàn)中，常用來剪蛙的脊柱、骨和皮膚等粗硬組織。   (3)手術(shù)鑷  手術(shù)鑷種類很多，名稱也不統(tǒng)一，常用的有無齒鑷和有齒鑷兩種,用于夾住或提起組織，以便剝離、剪斷或縫合。有齒鑷用于提起皮膚、皮下組織、筋膜、肌腱等較堅(jiān)韌的組織，使其不易滑脫。但有齒鑷不能用以夾持重要器官，以免造成損傷。無齒鑷用

14、于夾持神經(jīng)、血管、腸壁或其他臟器,較脆弱組織，而不致使之受損傷。正確執(zhí)鑷方法如圖3.1-5，用力適當(dāng)?shù)匕殉种?#160; (4)血管鉗  血管鉗又稱止血鉗，有直、彎、帶齒和蚊式鉗等數(shù)種。主要用于夾血管或止血點(diǎn)，以達(dá)止血的目的。也用于分離組織、牽引縫線，把持或拔縫針等。正確持鉗和持剪方法相同（圖3.1-6）。開放血管鉗的方法是利用右手已套入血管鉗的拇指與無名指相對擠壓，繼而兩指向相反的方向旋開，放開血管鉗(圖3.1-7)。    (5) 骨鉗  在打開顱腔和骨髓腔時(shí)，用于咬切骨質(zhì)。    (6)顱骨鉆 

15、用于開顱時(shí)鉆孔。    (7)氣管插管 急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，插入氣管，以保證呼吸通暢，或做人工呼吸。將一端接氣鼓或換能器，可記錄呼吸運(yùn)動(dòng)。    (8)血管插管 有動(dòng)脈插管和靜脈插管。一些小型動(dòng)物的動(dòng)脈插管可用16號輸血針頭磨平來替代。在急性實(shí)驗(yàn)時(shí)插入動(dòng)脈，另一端接壓力換能器或水銀檢壓計(jì)，以記錄血壓。靜脈插管插入靜脈后固定，以便在實(shí)驗(yàn)過程中隨時(shí)用注射器向靜脈血管中注入藥物和溶液。    (9)金屬探針 專門用來毀壞蛙類腦和脊髓。    (10)玻璃分針 專用于分離神經(jīng)與

16、血管等組織。    (11)蛙心夾 使用時(shí)將夾的前端在蛙心室舒張時(shí)夾住心室尖，尾端用線系在換能器（或扛桿）上。    (12)動(dòng)脈夾 用于阻斷動(dòng)脈血流。    (13)蛙板 一塊20 cm×15 cm的木板，用于固定蛙類。    各種手術(shù)器械使用后，都應(yīng)及時(shí)清洗，齒間、軸間的血跡也應(yīng)用小刷刷洗干凈。洗凈后用干布擦拭干，忌用火烤烘干或重?fù)?。久置不用的金屬器械?yīng)檫油保護(hù)。二、手術(shù)器械的消毒方法    在慢性實(shí)驗(yàn)中，手術(shù)器械必須進(jìn)行事前消毒。

17、常用的滅菌和消毒方法有煮沸消毒法、高壓蒸汽消毒法和化學(xué)藥品消毒法。    (1)煮沸消毒法  是比較簡單方便的消毒方法，除要求速干的物品外，可廣泛地應(yīng)用于多種物品的消毒。一般用蒸餾水加熱，水沸3-5分鐘后將器械放到消毒鍋內(nèi)，等到第二次水沸時(shí)計(jì)算時(shí)間，15分鐘可以將一般的細(xì)菌殺滅，但不能殺滅具有頑強(qiáng)抵抗力的細(xì)菌芽胞。對懷疑有芽胞污染的器械，必須煮沸60分鐘以上。有時(shí)為了提高消毒效果，可在水中加入2% 碳酸氫鈉，可以提高水的沸點(diǎn)至102105 左右。這樣，既可以加強(qiáng)滅菌能力，并能防止金屬器械生銹（但對橡膠制品有害）。煮沸滅菌時(shí)，器械或物品應(yīng)放在水面以下，煮沸

18、器的蓋子應(yīng)關(guān)閉嚴(yán)密，以保持沸水的溫度。    (2)高壓蒸汽滅菌  高壓蒸汽滅菌法需要特制的滅菌器。通常用蒸汽壓1520 lb/in2，溫度可達(dá)121.6126.6 ，維持30分鐘左右，能殺滅所有的細(xì)菌，包括具有頑強(qiáng)抵抗力的細(xì)菌芽胞，因此是比較可靠的滅菌方法。更高的壓力或更長的時(shí)間，并無必要，相反有可能損壞物品的質(zhì)量，尤其不宜于橡膠制品和銳利器械的滅菌。   (3)化學(xué)藥品消毒法  做為滅菌的手段，化學(xué)藥品消毒法，并不理想，其消毒的能力受藥物的濃度、溫度、作用時(shí)間等因素的影響。但化學(xué)藥品消毒法不需特殊設(shè)備，使用方便

19、，尤其對于某些不宜用熱力滅菌的用品的消毒，仍不失為一個(gè)有用的補(bǔ)充手段。器械在浸泡入化學(xué)消毒劑之前，應(yīng)該將沾染污物洗凈，尤其是油脂覆蓋的器械，妨礙化學(xué)藥品對器械的消毒作用，所以應(yīng)該事先仔細(xì)將油脂擦凈。為了避免化學(xué)消毒劑對組織的有害作用，消毒后的器械在使用前應(yīng)該用開水沖洗干凈。 常用的化學(xué)消毒劑有：LJ-強(qiáng)化戊二醛（加入亞硝酸鈉可防銹），70%酒精（不適宜金屬器械的消毒），0.1%新潔而滅(加入亞硝酸鈉可防銹)，酶皂溶液,甲醛溶液等。浸泡金屬器械的時(shí)間不應(yīng)小于30 min,除酒精、新潔爾滅外，其它消毒劑消毒的器械在使用前應(yīng)注意用無菌鹽水沖洗干凈。第三章 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物及其選擇現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中

20、，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是指根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要,有目的、有計(jì)劃地進(jìn)行人工飼養(yǎng)、繁殖及科學(xué)培育而成的動(dòng)物。供科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、檢測等方面使用的實(shí)驗(yàn)對象和材料。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必需具有明確的生物學(xué)特性和清楚的遺傳背景，并且是在對其身上攜帶的微生物 、寄生蟲嚴(yán)格控制下培育和馴化出來的。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按遺傳學(xué)分類有：近交系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，即純系動(dòng)物；封閉群動(dòng)物；雜交一代動(dòng)物（F1代）。按微生物控制程度分級有：一級，普通動(dòng)物；二級，清潔級動(dòng)物；三級，無特定病原體動(dòng)物，即SPF動(dòng)物；四級，無菌動(dòng)物，即GF動(dòng)物。    有時(shí)我們也用一些野生動(dòng)物、家畜、家禽和魚類進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。但由于它們或因遺傳背景不清楚，或因其健康

21、狀況有差異，對刺激的敏感性不同、機(jī)體反應(yīng)也不一致，造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性較差，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性也相對較差，因此不能被國際會(huì)議的認(rèn)可，它們只能被稱為實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物不能與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等同，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可包括在實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物中，但在不十分嚴(yán)格的情況下，有時(shí)這二名詞又互相通用。一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類和特性   (1)蟾蜍與蛙  蟾蜍與蛙屬于兩棲綱，無尾目類，變溫動(dòng)物。易飼養(yǎng)和捕捉，一般是野外捕捉后直接供實(shí)驗(yàn)室使用。也可短期飼養(yǎng)于潮濕地方，幾天可以不食或喂以草和昆蟲等。因蟾蜍和蛙的一些基本的生命活動(dòng)與恒溫動(dòng)物相似，而且離體組織器官所需的生活條件比較簡單，容易控制和掌握，因此被廣

22、泛用于生理學(xué)科研和教學(xué)中。用蟾蜍（蛙）腓腸肌和坐骨神經(jīng)可觀察外周神經(jīng)及其肌肉的功能，研究興奮性、興奮、興奮的傳導(dǎo)和傳遞、肌肉的收縮等基本生理現(xiàn)象。蟾蜍（蛙）離體心臟可用于研究心臟的生理功能。利用蟾蜍（蛙）的整體實(shí)驗(yàn)可進(jìn)行脊休克、脊髓反射、反射弧、微循環(huán)等研究。蟾蜍還可用于生殖生理、藥理學(xué)、胚胎發(fā)育、免疫學(xué)等的研究。   (2)家兔        哺乳綱，嚙齒目，兔科。家兔品種很多，常用的有青紫蘭兔：體質(zhì)強(qiáng)壯，適應(yīng)性強(qiáng)，易于飼養(yǎng)，生長快；中國本地兔（白家兔）：抵抗力不如青紫蘭兔；新西蘭白兔是近年引進(jìn)的大型優(yōu)

23、良品種，成熟體重可達(dá)44.5kg；大耳白兔：耳朵長而大，血管清晰，皮膚白色，但抵抗力較差；家兔性情溫順，灌胃、取血方便；由于兔耳緣靜脈淺表，易暴露，是靜脈給藥的最佳部位；兔的減壓神經(jīng)在頸部與迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)分開而單獨(dú)成為一束，常用于心血管反射活動(dòng)、呼吸運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)、泌尿功能調(diào)節(jié)的研究；兔的消化道運(yùn)動(dòng)活躍，典型可用于消化道運(yùn)動(dòng)及平滑肌特性的研究。兔的大腦皮層運(yùn)動(dòng)區(qū)機(jī)能定位已具有一定的雛形，因此兔也常用于大腦皮層功能定位和去大腦僵直、神經(jīng)放電活動(dòng)等實(shí)驗(yàn)。此外，家兔還用于免疫學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、生殖生理學(xué)、眼科以及臨床疾病的研究。    (3)小白鼠  

24、0;   哺乳綱，嚙齒目，鼠科。體型較小，成熟早，繁殖力強(qiáng)，小鼠性情溫順，易于捕捉，操作方便。小鼠實(shí)驗(yàn)研究資料豐富、參考對比性強(qiáng)；其實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性、可靠性和重復(fù)性高，被廣泛用于各類科研實(shí)驗(yàn)中，如用于生理學(xué)小腦功能障礙等實(shí)驗(yàn)；藥理學(xué)、腫瘤學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)以及臨床疾病的實(shí)驗(yàn)研究。        (4)大白鼠  哺乳綱，嚙齒目，鼠科。性情不如小白鼠溫順，受驚嚇或捕捉方法粗暴時(shí)，表現(xiàn)兇暴，易咬人。但具有小白鼠其它優(yōu)點(diǎn)，因此也用途廣泛。大鼠離體器官可進(jìn)行大鼠離體靜態(tài)肺順應(yīng)性實(shí)驗(yàn)；整體可用于胃酸分泌、胃排空、垂體

25、、腎上腺系統(tǒng)的研究。大鼠還用于生殖生理、胚胎學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、腫瘤學(xué)以及遺傳學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究。大鼠大腦各部的生理功能立體定位已相當(dāng)成熟和標(biāo)準(zhǔn)化，是研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)的極好材料。      (5)豚鼠        哺乳綱，嚙齒目，豚鼠科，又稱荷蘭豬。豚鼠耳蝸管發(fā)達(dá)，聽覺靈敏，在生理學(xué)上，用于耳蝸微音器電位的實(shí)驗(yàn)，也用于臨床聽力的實(shí)驗(yàn)研究。除此之外，還用于離體心臟及腸、子宮平滑肌實(shí)驗(yàn)，其乳頭肌和心房肌常用于心肌細(xì)胞電生理特性及動(dòng)作電位的實(shí)驗(yàn)，也用于傳染病、變態(tài)反應(yīng)、維生素C缺乏等實(shí)驗(yàn)研究。&#

26、160;       (6)貓 哺乳綱,食肉目,貓科。貓的血壓較穩(wěn)定，大腦和小腦均很發(fā)達(dá)，頭蓋骨和腦的形狀固定，是腦神經(jīng)生理學(xué)的較好實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。貓眼能按照光線的強(qiáng)弱變化而靈敏地調(diào)節(jié)瞳孔大小。生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中，同樣用電極探針插入貓大腦各部位的生理學(xué)研究方面現(xiàn)已完全標(biāo)準(zhǔn)化，可以在清醒條件下研究神經(jīng)遞質(zhì)等活性物質(zhì)的釋放和條件反射，外周神經(jīng)與中樞神經(jīng)的聯(lián)系。還可做去大腦僵直、交感神經(jīng)的瞬膜和虹膜反應(yīng)以及呼吸、心血管反射的調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)等。此外，貓也用于藥理學(xué)和臨床疾病的實(shí)驗(yàn)研究。    (7)狗    

27、哺乳綱，肉食目，犬科。狗聽覺、嗅覺靈敏，反應(yīng)敏捷，對外界環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)。易飼養(yǎng)，可調(diào)教，能很好地配合實(shí)驗(yàn)研究的需要。狗具有發(fā)達(dá)的血液循環(huán)與神經(jīng)系統(tǒng)，內(nèi)臟構(gòu)造及其比例與人的相似,是較理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。在生理學(xué)中常用于心血管系統(tǒng)、脊髓傳導(dǎo)、大腦皮層功能定位、條件反射、內(nèi)分泌腺摘除和各種消化系統(tǒng)功能的實(shí)驗(yàn)研究。狗還用于藥理學(xué)、毒理學(xué)、行為學(xué)、腫瘤學(xué)、核醫(yī)學(xué)以及臨床某些疾病的研究。狗特別應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)外科學(xué)的研究，是臨床探索新手術(shù)方法和觀察手術(shù)療效的首選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇    生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中做好動(dòng)物的選擇和準(zhǔn)備關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。 除了按照不同實(shí)驗(yàn)的特殊要求選擇相應(yīng)的種

28、屬、品種、品系微生物學(xué)背景外 ，對個(gè)體的選擇首先要挑選健康的動(dòng)物。其次，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和要求，結(jié)合動(dòng)物解剖生理特點(diǎn)挑選(見前述)。有時(shí)為充分利用動(dòng)物，節(jié)省時(shí)間和經(jīng)費(fèi)，在不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的情況下，可利用同一動(dòng)物完成不同的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。此外，在動(dòng)物飼養(yǎng)時(shí)還應(yīng)對飼料加以控制，包括營養(yǎng)素要求及搭配、合理加工、無發(fā)霉變質(zhì)等；設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)化，如飼養(yǎng)環(huán)境的溫度、濕度、光照、空氣清潔度、噪音控制等也應(yīng)做進(jìn)一步了解和管理。 在進(jìn)行慢性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，常選擇年輕健康的動(dòng)物。在手術(shù)前數(shù)周內(nèi)訓(xùn)練動(dòng)物，使其熟悉實(shí)驗(yàn)環(huán)境。實(shí)驗(yàn)前12小時(shí)停止喂食物，但需喂水。實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)實(shí)行無菌操作，實(shí)驗(yàn)后需精心護(hù)理和喂養(yǎng)。第四章 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法

29、60; 一、經(jīng)口投藥法    (1)口服法   口服法是將能溶于水并且在水溶液中較穩(wěn)定的藥物放入動(dòng)物飲水中，不溶于水的藥物混于動(dòng)物飼料內(nèi)，由動(dòng)物自行攝入。該方法技術(shù)簡單，給藥時(shí)動(dòng)物接近自然狀態(tài)，不會(huì)引起動(dòng)物應(yīng)激反應(yīng)，適用于多數(shù)動(dòng)物慢性藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn)，如抗高血壓藥物的藥效、藥物毒性測試等。其缺點(diǎn)是動(dòng)物飲水和進(jìn)食過程中，總有部分藥物損失，藥物攝入量計(jì)算不準(zhǔn)確，而且由于動(dòng)物本身狀態(tài)、飲水量和攝食不同，藥物攝入量不易保證，影響藥物作用分析的準(zhǔn)確性。    (2)灌服法 灌服法是將動(dòng)物適當(dāng)固定，強(qiáng)迫動(dòng)物攝入藥物。這種方法能準(zhǔn)確

30、把握給藥時(shí)間和劑量，及時(shí)觀察動(dòng)物的反應(yīng)，適合于急性和慢性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，但經(jīng)常強(qiáng)制性操作易引起動(dòng)物不良生理反應(yīng)，甚至操作不當(dāng)引起動(dòng)物死亡。故應(yīng)熟練掌握該項(xiàng)技術(shù)。強(qiáng)制性給藥方法主要有兩種：    固體藥物口服    一人操作時(shí)用左手從背部抓住動(dòng)物頭部，同時(shí)以拇、食指壓迫動(dòng)物口角部位使其張口，右手用鑷子夾住藥片放于動(dòng)物舌根部位，然后讓動(dòng)物閉口吞咽下藥物。    液體藥物灌服    小白鼠與大白鼠一般由一人操作，左手捏持小白鼠頭、頸、背部皮膚，或握住大白鼠以固定動(dòng)物，使動(dòng)物腹部

31、朝向術(shù)者，右手將連接注射器的硬質(zhì)胃管由口角處插入口腔，用胃管將動(dòng)物頭部稍向背側(cè)壓迫，使口腔與食管成一直線，將胃管沿上顎壁輕輕插入食道，小白鼠一般用3 cm，大白鼠一般用5 cm的胃管(圖3.4-1)。插管時(shí)應(yīng)注意動(dòng)物反應(yīng)，如插入順利，動(dòng)物安靜，呼吸正常，可注入藥物；如動(dòng)物劇烈掙扎或插入有阻力，應(yīng)拔出胃管重插，如將藥物灌入氣管，可致動(dòng)物立即死亡。 給家兔灌服時(shí)宜用兔固定箱或由兩人操作。助手取坐位，用兩腿夾住動(dòng)物腰腹部，左手抓免雙耳，右手握持前肢，以固定動(dòng)物；術(shù)者將木制開口器橫插入兔口內(nèi)并壓住舌頭，將胃管經(jīng)開口器中央小孔沿上腭壁插入食道約15 cm，將胃管外口置一杯水中，看是否有氣泡冒出，檢測是否

32、插入氣管，確定胃管不在氣管后，即可注入藥物(圖3.4-2)。二、注射給藥   (1)淋巴囊注射    青蛙與蟾蜍皮下有多個(gè)淋巴囊，注射藥物易于吸收，適合于該類動(dòng)物全身給藥。常用注射部位為胸、腹和股淋巴囊。為防止注入藥物自針眼處漏出，胸淋巴囊注射時(shí)應(yīng)將針頭刺入口腔，由口腔組織穿刺到胸部皮下，注入藥物。股淋巴囊注射時(shí)應(yīng)由小腿刺入，經(jīng)膝關(guān)節(jié)穿刺到股部皮下，注射藥液量一般為0.250.5 m1(圖3.4-3)。   (2)皮下注射    皮下注射是將藥物注射于皮膚

33、與肌肉之間，適合于所有哺乳動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮下注射一般應(yīng)由兩人操作，熟練者也可一人完成。由助手將動(dòng)物固定，術(shù)者用左手捏起皮膚，形成皮膚皺褶，右手持注射器刺入皺褶皮下，將針頭輕輕左右擺動(dòng)，如擺動(dòng)容易，表示確已刺入皮下，再輕輕抽吸注射器，確定沒有刺入血管后，將藥物注入(圖3.4-4)。拔出針頭后應(yīng)輕輕按壓針刺部位，以防藥液漏出，并可促進(jìn)藥物吸收。鴿、禽類常選用翼下注射。   (3)肌肉注射    肌肉血管豐富，藥物吸收速度快，故肌內(nèi)注射適合于幾乎所有水溶性和脂溶性藥物，特別適合于狗、貓、兔等肌肉發(fā)達(dá)的動(dòng)物。而小白鼠、大白鼠、豚鼠因

34、肌肉較少，肌肉注射稍有困難，必要時(shí)可選用股部肌肉。鳥類選用胸肌或腓腸肌。肌內(nèi)注射一般由兩人操作，小動(dòng)物也可由一人完成。助手固定動(dòng)物，術(shù)者用左手指輕壓注射部位，右手持注射器刺入肌肉，回抽針?biāo)?，如無回血，表明未刺入血管，將藥物注入，然后拔出針頭，輕輕按摩注射部位，以助藥物吸收。   (4)腹腔注射    腹腔吸收面積大，藥物吸收速度快，故腹腔注射適合于多種刺激性小的水溶性藥物的用藥，并且是嚙齒類動(dòng)物常用給藥途徑之一。腹腔注射穿刺部位一般選在下腹部正中線兩側(cè)，該部位無重要器官。腹腔注射可由兩人完成，熟練者也可一人完成。助手固定動(dòng)物

35、，并使其腹部向上，術(shù)者將注射器針頭在選定部位刺入皮下，然后使針頭與皮膚成45o°角緩慢刺入腹腔，如針頭與腹內(nèi)小腸接觸，一般小腸會(huì)自動(dòng)移開，故腹腔注射較為安全(圖3.4-5)。刺入腹腔時(shí)，術(shù)者可有阻力突然減小的感覺，再回抽針?biāo)?，確定針頭未刺入小腸、膀胱或血管后，緩慢注入藥液。   (5)靜脈注射    靜脈注射將藥物直接注入血液，毋需經(jīng)過吸收階段，藥物作用最快，是急、慢性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)最常用的給藥方法。靜脈注射給藥時(shí)，不同種類的動(dòng)物由于其解剖結(jié)構(gòu)的不同，應(yīng)選擇不同的靜脈血管。   兔耳緣靜脈注射 

36、60;  將家兔置于兔固定箱內(nèi)，沒有兔固定箱時(shí)可由助手將家兔固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，并特別注意兔頭不能隨意活動(dòng)。剪除兔耳外側(cè)緣被毛，用乙醇輕輕擦拭或輕揉耳緣局部，使耳緣靜脈充分?jǐn)U張。用左手拇指和中指捏住兔耳尖端，食指墊在兔耳注射處的下方（或以食指、中指夾住耳根，拇指和無名指捏住耳的尖端）,右手持注射器由近耳尖處將針(6號或7號針頭)刺入血管（圖3.3-7,3.4-6）。再順血管腔向心臟端刺進(jìn)約1cm，回抽針?biāo)ǎ缬醒硎敬_已刺入靜脈，然后由左手拇指、食指和中指將針頭和兔耳固定好。右手緩慢推注藥物入血液。如感覺推注阻力很大，并且局部腫脹，表示針頭已滑出血管，應(yīng)重新穿刺。注意兔耳緣靜脈

37、穿刺時(shí)應(yīng)盡可能從遠(yuǎn)心端開始，以便重復(fù)注射。   小白鼠與大白鼠尾靜脈注射        小白鼠尾部有三根靜脈，兩側(cè)和背部各一根，兩側(cè)的尾靜脈更適合于靜脈注射。注射時(shí)先將小白鼠置于鼠固定筒內(nèi)或扣在燒杯中，讓尾部露出，用乙醇或二甲苯反復(fù)擦拭尾部或浸于4050的溫水中加熱1分鐘，使尾靜脈充分?jǐn)U張。術(shù)者用左手拉尾尖部，右手持注射器(以4號針頭為宜)將針頭刺入尾靜脈，然后左手捏住鼠尾和針頭，右手注入藥物(圖3.4-7)。如推注阻力很大，局部皮膚變白，表示針頭未刺入血管或滑脫，應(yīng)重新穿刺，注射藥液

38、量以015 m1只為宜。幼年大白鼠也可做尾靜脈注射，方法與小白鼠相同，但成年大白鼠尾靜脈穿刺困難，不宜采用尾靜脈注射。    狗前肢頭靜脈注射  狗前肢小腿前內(nèi)側(cè)有較粗的頭靜脈和后肢外側(cè)小隱靜脈，是狗靜脈注射較方便的部位。注射時(shí)先剪去該部位被毛，以酒精消毒。用壓脈帶綁扎肢體根部，或由助手握緊該部位，使頭靜脈充分?jǐn)U張。術(shù)者左手抓住肢體末端，右手持注射器刺入靜脈，此時(shí)可見明顯回血，然后放開壓脈帶，左手固定針頭，右手緩慢注入藥物(圖3.4-8)。   第五章 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號捉拿固定方法一、動(dòng)物編號方法    &

39、#160; 大動(dòng)物多用掛牌法或用鋁環(huán)固定在耳朵上，牌或環(huán)上有編號；羊或豬多用耳缺法（圖3.3-1），原則是左個(gè)右十，上三下一, 如:右耳下邊有兩個(gè)缺口,左耳上方有兩個(gè)缺口下方有一個(gè)缺口,則編號為27號。 小動(dòng)物可用苦味酸或硝酸銀涂于體表不同部位（圖3.3-2）。原則是：先左后右，從前到后。用單一顏色可標(biāo)記110號，若用兩種顏色配合使用，其中一種顏色代表個(gè)位數(shù)，另一種代表十位數(shù)，可編到99號。            二、動(dòng)物捉拿和固定方法    在實(shí)驗(yàn)過程中，為了手術(shù)

40、操作方便，順利進(jìn)行實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的觀察記錄，必須將動(dòng)物麻醉和固定在特制的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上(圖3.3-3)。固定動(dòng)物的方法一般多采用仰臥位，它適用作頸、胸、腹、股等部位的實(shí)驗(yàn)；俯臥位適用于作腦和脊髓部位的實(shí)驗(yàn)。      (1)狗的捆綁與固定   至少由23人進(jìn)行。捆綁前實(shí)驗(yàn)者應(yīng)先對其輕柔撫摸，避免使其驚恐或激怒；用一條粗棉繩兜住上、下頜，在上頜處打一結(jié)(勿太緊)，再繞回下頜打第二個(gè)結(jié)，然后將繩引向頭后部，在頸項(xiàng)上打第三個(gè)結(jié)且在其上打一活結(jié)（圖3.3-4）。切記住兜繩時(shí)，要注意觀察狗的動(dòng)向，以防被其咬傷。如狗不能合作，須用長柄狗頭鉗夾持其頸部，并按倒

41、在地，以限制其頭部活動(dòng)，再按上述方法捆綁其嘴。捆嘴后使其側(cè)臥，一人固定其肢體，另一人注射麻醉藥。此時(shí)，應(yīng)注意狗可能出現(xiàn)掙扎，甚至大小便俱下，以及由于這種捆綁動(dòng)作往往致使狗呼吸急促，甚至屏氣等問題。待動(dòng)物進(jìn)入到麻醉狀態(tài)后，立即松捆，以防窒息。 將麻醉好的狗仰臥置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，用特制的狗頭夾固定狗頭(圖3.3-3)。固定前將狗舌拽出口外，避免堵塞氣道。將狗嘴伸入鐵圈，再將直鐵桿插入上、下頜之間，再下旋鐵桿，使彎形鐵條緊壓犬的下頜（仰臥固定）或壓在鼻梁上（俯臥固定）。再將狗頭夾固定在手術(shù)臺(tái)上。 固定好狗頭后，取繩索用其一端分別綁在前肢的腕關(guān)節(jié)上部和后肢的踝關(guān)節(jié)上部，繩索的另一端分別固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)同側(cè)的固

42、定鉤上。固定兩前肢時(shí)，亦可將兩根繩索交叉從犬的背后穿過并將對側(cè)前肢壓在繩索下,分別綁在實(shí)驗(yàn)臺(tái)兩例的固定鉤上。若采取俯臥位固定時(shí)，綁前肢的繩索可不交叉，直接綁在同側(cè)的固定鉤上。   (2)貓  捉持貓時(shí)應(yīng)戴手套，防止被其抓傷（圖3.4-5）。先將貓關(guān)入特制的玻璃容器中，投入乙醚棉團(tuán)對其進(jìn)行快速麻醉，然后乘其未醒立即固定在貓袋或?qū)嶒?yàn)臺(tái)上。   (3)兔  捉持家兔時(shí)只須實(shí)驗(yàn)者和助手將其抓牢或按住即可。正確捉持方法為：一手抓住家兔頸背部皮膚，輕輕提起，另一手托住其臀部，使其呈坐位姿勢（圖3.4-6）。   兔可固定在兔盒

43、或兔臺(tái)上（3.4-7）。在手術(shù)臺(tái)上用兔頭夾固定頭部(圖3.3-3A),把嘴套入鐵圈內(nèi)，調(diào)整鐵圈至最適位置然后將兔頭夾的鐵柄固定在手術(shù)臺(tái)上?；蛴靡桓^粗棉線繩一端打個(gè)活結(jié)套住兔的兩只上門齒，另一端栓在實(shí)驗(yàn)臺(tái)前端的鐵柱上。做頸部手術(shù)時(shí),可將一粗注射器筒墊于動(dòng)物的項(xiàng)下,以抬高頸部,便于操作。兔的四肢固定和狗相同。 (4)小鼠、大鼠  實(shí)驗(yàn)者右手捉住小鼠尾，鼠會(huì)本能地向前爬行。左手攥緊鼠頸背部皮膚，使其腹部向上，拉直軀干，并以左手小指和掌部夾住其尾固定在左手上（圖3.3-8）?？勺鞲骨宦樽?。亦可用金屬筒、有機(jī)玻璃筒或鐵絲籠式固定器固定，露出尾部，作尾靜脈注射。 捉持大鼠的方法基本同小鼠。大鼠

44、在驚恐或激怒時(shí)會(huì)咬人，捉拿時(shí)可戴防護(hù)手套，或用厚布蓋住鼠身作防護(hù)，握住整個(gè)身體，并固定頭骨，防止被咬傷。動(dòng)作應(yīng)輕柔，切忌粗暴。也可用鉗子夾持。最后再根據(jù)需要，將大鼠置于固定籠內(nèi)或捆綁四肢。   (5)豚鼠右手橫握豚鼠腹前部，左手輕托后肢（圖3.3-9）。   (6)蛙  實(shí)驗(yàn)者一手拇指、食指和中指控制蛙兩前肢，無名指和小指壓住兩后肢（圖3.3-10）。第六章 動(dòng)物的麻醉在急、慢性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，手術(shù)前均應(yīng)將動(dòng)物麻醉，以減輕或消除動(dòng)物的痛苦，保持安靜狀態(tài),從而保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。由于麻醉藥品的作用特點(diǎn)不同，動(dòng)物的藥物耐受性有種屬或個(gè)體間差異及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及

45、要求不同，因此正確選擇麻醉藥品的種類、用藥劑量及給藥途徑十分重要。理想的麻醉藥品應(yīng)當(dāng)是對動(dòng)物麻醉完善，其毒性和對生理功能干擾最小，使用方便。 一、麻醉前的準(zhǔn)備工作   (1)熟悉麻醉藥品的特點(diǎn)    根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容合理選用麻醉藥。例如，烏拉坦對兔和貓的麻醉效果好，較穩(wěn)定，不影響動(dòng)物的循環(huán)及呼吸功能。氯醛糖很少抑制神經(jīng)系統(tǒng)的活動(dòng)，適用于保留生理反射的實(shí)驗(yàn)。乙醚對心肌功能有直接抑制作用，但興奮交感腎上腺系統(tǒng)，全身淺麻醉時(shí)，可增加心輸出量20。硫噴妥鈉對交感神經(jīng)抑制作用明顯，因副交感神經(jīng)功能相對增強(qiáng)而誘發(fā)喉痙攣。   (2

46、)麻醉前應(yīng)核對藥物名稱；檢查藥品有無變質(zhì)或過期失效。   (3)狗、貓等手術(shù)前應(yīng)禁食12小時(shí)，以減輕嘔吐反應(yīng)。   (4)需在全麻下進(jìn)行手術(shù)的慢性實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，可適當(dāng)給予麻醉輔助藥。例如，皮下注射嗎啡鎮(zhèn)靜止痛，注射阿托品減少呼吸道分泌物的產(chǎn)生等。二、全身麻醉       (1)吸入麻醉  揮發(fā)性麻醉藥經(jīng)面罩或氣管插管進(jìn)行開放式吸人麻醉。常用的吸入麻醉劑是乙醚。乙醚為無色易揮發(fā)的液體，有特殊的刺激性氣味，易燃易爆，應(yīng)用時(shí)應(yīng)遠(yuǎn)離火源。乙醚可用于多種動(dòng)物的麻醉，麻醉時(shí)對動(dòng)物的

47、呼吸、血壓無明顯影響，麻醉速度快，維持時(shí)間短，更適合于時(shí)間短的手術(shù)和實(shí)驗(yàn)，如去大腦僵直、小腦損毀實(shí)驗(yàn)等，也可用于兇猛動(dòng)物的誘導(dǎo)麻醉。給狗吸入乙醚麻醉時(shí)可用特制的鐵絲狗嘴套套住狗嘴，由助手將狗固定于手術(shù)臺(tái)，術(shù)者用23層紗布覆蓋狗嘴套，然后將乙醚不斷滴于紗布上，使狗吸入乙醚。狗吸入乙醚后，往往由于中樞抑制解除而首先有一個(gè)興奮期，動(dòng)物掙扎，呼吸快而不規(guī)則，甚至出現(xiàn)呼吸暫停，如呼吸暫停應(yīng)將紗布取下，等動(dòng)物呼吸恢復(fù)后再繼續(xù)吸入乙醚，繼后動(dòng)物逐漸進(jìn)入外科麻醉期，呼吸逐漸平穩(wěn)均勻，角膜反射消失或極其遲鈍，對疼痛反應(yīng)消失，即可進(jìn)行手術(shù)。   麻醉貓、大白鼠、小白鼠時(shí)可將動(dòng)物置于適當(dāng)大小的玻

48、璃罩中，再將浸有乙醚的棉球或紗布放入罩內(nèi)，并密切注意動(dòng)物反應(yīng)，特別是呼吸變化，直到動(dòng)物麻醉。給家兔麻醉時(shí)，可將浸有乙醚的棉球置于一個(gè)大燒杯中，術(shù)者左手持燒杯，右手抓兔雙耳，使其口鼻伸入燒杯內(nèi)吸入乙醚，直到動(dòng)物麻醉。    乙醚麻醉注意事項(xiàng)：乙醚吸入麻醉中常刺激呼吸道黏膜而產(chǎn)生大量分泌物，易造成呼吸道阻塞，可在麻醉前半小時(shí)皮下注射阿托品(0.1m1/kg)，以減少呼吸道黏膜分泌物。乙醚吸入過程中動(dòng)物掙扎，呼吸變化較大，乙醚吸入量及速度不易掌握，應(yīng)密切注意動(dòng)物反應(yīng)，以防吸入過多，麻醉過度而使動(dòng)物死亡。   (2)注射麻醉 

49、60; 常用烏拉坦、戊巴比妥鈉及氯醛糖等。主要給藥途徑有。    靜脈注射：腹腔注射;肌肉注射;皮下注射;皮下淋巴囊注射(見3.4.2)三、局部麻醉      局部麻醉藥物可可逆地阻斷神經(jīng)纖維傳導(dǎo)沖動(dòng)產(chǎn)生局部麻醉作用。進(jìn)行局部麻醉時(shí),藥物接近神經(jīng)纖維的方式主要有兩種：（1）用作表面麻醉時(shí),藥物通過點(diǎn)眼、噴霧或涂布作用于粘膜表面，轉(zhuǎn)而透過粘膜接觸粘膜下神經(jīng)末梢而發(fā)揮作用。該藥物除具有麻醉作用外，還有較強(qiáng)的穿透力，如的卡因、利多卡因；（2）作浸潤麻醉時(shí)，用注射的方法將藥物送到神經(jīng)纖維旁。此類藥物只需有局部麻醉作用，不一定要求有強(qiáng)

50、大的穿透力，如普魯卡因(對氨苯甲酸酯)、可卡因、利多卡因（其效力是普魯卡因的2倍）。用作局部麻醉的藥物的濃度一般為1%2%，通常用0.5%1%. 另外, 河豚毒(劇毒,一般僅用納克10-9)可阻斷Na+通道,起到阻滯神經(jīng)傳導(dǎo)作用。箭毒、三碘季銨酚、妥開利、靜松靈、846等能阻斷神經(jīng)-肌肉接頭的傳遞作用，在手術(shù)中用作肌松劑。四、麻醉效果的觀察 動(dòng)物的麻醉效果直接影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果麻醉過淺，動(dòng)物會(huì)因疼痛而掙扎，甚至出現(xiàn)興奮狀態(tài)，呼吸心跳不規(guī)則，影響觀察。麻醉過深，可使機(jī)體的反應(yīng)性降低，甚至消失，更為嚴(yán)重的是抑制延髓的心血管活動(dòng)中樞和呼吸中樞，導(dǎo)致動(dòng)物死亡。因此，在麻醉過程中必須善于判斷

51、麻醉程度，觀察麻醉效果。判斷麻醉程度的指標(biāo)有：    (1)呼吸：動(dòng)物呼吸加快或不規(guī)則，說明麻醉過淺，若呼吸由不規(guī)則轉(zhuǎn)變?yōu)橐?guī)則且平穩(wěn)，說明已達(dá)到麻醉深度；若動(dòng)物呼吸變慢，且以腹式呼吸為主，說明麻醉過深動(dòng)物有生命危險(xiǎn)。    (2)反射活動(dòng)：主要觀察角膜反射或睫毛反射，若動(dòng)物的角膜反射靈敏，說明麻醉過淺；若角膜反射遲鈍，麻醉程度適宜；角膜反射消失，伴瞳孔散大，則麻醉過深。    (3)肌張力：動(dòng)物肌張力亢進(jìn)，一般說明麻醉過淺；全身肌肉松弛，麻醉合適。    (4)皮膚夾捏反應(yīng)：

52、麻醉過程中可隨時(shí)用止血鉗或有齒鑷夾捏動(dòng)物皮膚若反應(yīng)靈敏，則麻醉過淺；若反應(yīng)消失，則麻醉程度合適。 總之，觀察麻醉效果要仔細(xì)，上述四項(xiàng)指標(biāo)要綜合考慮，最佳麻醉深度的標(biāo)志是：動(dòng)物臥倒、四肢及腹部肌肉松弛、呼吸深慢而平穩(wěn)、皮膚夾掐反射消失、角膜反射明顯遲鈍或消失、瞳孔縮小。在靜脈注射麻醉時(shí)還要邊注入藥物邊觀察。只有這樣，才能獲得理想的麻醉效果。五、麻醉注意事項(xiàng)      (1)麻醉前應(yīng)正確選用麻醉藥品、用藥劑量及給藥途徑。     (2)進(jìn)行靜脈麻醉時(shí)，先將總用藥量的三分之一快速注入，使動(dòng)物迅速渡過興奮期，余下的三分之二量則應(yīng)緩慢

53、注射，并密切觀察動(dòng)物麻醉狀態(tài)及反應(yīng)，以便準(zhǔn)確判斷麻醉深度。    (3)如麻醉較淺，動(dòng)物出現(xiàn)掙扎或呼吸急促等，需補(bǔ)充麻醉藥以維持適當(dāng)?shù)穆樽?。一次補(bǔ)充藥量不宜超過原總用藥量的五分之一。    (4)麻醉過程中，應(yīng)隨時(shí)保持呼吸道通暢，并注意保溫。    (5)在手術(shù)操作復(fù)雜、創(chuàng)傷大、實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長或麻醉深度不理想等情況下，可配合局部浸潤麻醉或基礎(chǔ)麻醉。嗎啡抑制呼吸中樞和心血管中樞的活動(dòng)，增高顱內(nèi)壓，減少胰液和膽汁的分泌，還有抗利尿作用，不宜用于呼吸、循環(huán)、消化及腎臟等實(shí)驗(yàn)。但因嗎啡具有很好的止痛及鎮(zhèn)靜作用，有時(shí)

54、用作基礎(chǔ)麻醉。    (6)實(shí)驗(yàn)中注意液體的輸入量及排出量，維持體液平衡，防止酸中毒及肺水腫的發(fā)生。第七章 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的取血與處死方法一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的采（?。┭椒?血液常被比喻為觀察內(nèi)環(huán)境的窗口，在需要檢測內(nèi)環(huán)境變化的生理實(shí)驗(yàn)中常需要采取血液樣本。因?qū)嶒?yàn)動(dòng)物解剖結(jié)構(gòu)和體型大小差異，及所需血量的不同，取血方法不盡相同。   (1)兔    耳中央動(dòng)脈取血   乙醇涂擦耳中央動(dòng)脈部位，使其充分?jǐn)U張，用注射器刺入耳中央動(dòng)脈抽取動(dòng)脈血樣，一次性取血時(shí)也可用刀片切一小口，讓血液自然流出，收取血樣；

55、取血后用棉球壓迫局部，予以止血。    股動(dòng)脈取血    將家兔仰臥位固定。術(shù)者左手以動(dòng)脈搏動(dòng)為標(biāo)志，確定穿刺部位，右手將注射器針頭刺入股動(dòng)脈，如流出血為鮮紅色，表示穿刺成功，應(yīng)迅速抽血，拔出針頭，壓迫止血。    耳緣靜脈取血  耳緣靜脈可供采取少量靜脈血樣，方法與前述耳緣靜脈注射給藥相似。    心臟穿刺取血  將家兔仰臥位固定，剪去心前區(qū)被毛，用碘酒消毒皮膚。術(shù)者用裝有7號針頭的注射器，在胸骨左緣第三肋間或在心跳搏動(dòng)最顯著部位刺入心臟，刺入心臟后血液

56、一般可自動(dòng)流入注射器，或者邊刺入邊抽吸，直至抽出血液。抽血后迅速拔出針頭。心臟取血可獲得較大量的血樣。注：如需要抗凝血樣時(shí)，應(yīng)事先在注射器或毛細(xì)管內(nèi)加入適量抗凝劑，如枸櫞酸鈉或肝素，將它門均勻浸潤注射器或毛細(xì)管內(nèi)壁，然后烘干備用。   (2)大白鼠和小白鼠    斷尾取血  固定動(dòng)物，露出尾部，用二甲苯擦拭尾部皮膚或?qū)⑹笪步?550的熱水中數(shù)分鐘，使其血管充分?jǐn)U張，然后擦干，剪去尾尖數(shù)毫米，讓血自行流出，也可從尾根向尾尖輕輕擠壓，促進(jìn)血液流出，同時(shí)收集血樣，取血后用棉球壓迫止血。該方法取血量較少(圖3.6-1)。 

57、;   眼球后靜脈叢取血   術(shù)者用左手抓持動(dòng)物，拇指、中指從背側(cè)稍用力捏住頭頸部皮膚，阻斷靜脈回流，食指壓迫動(dòng)物頭部以固定，右手將一特制的毛細(xì)吸管(45o)自內(nèi)眥部(眼瞼和眼球之間)插入，并沿眼眶壁向眼底方向旋轉(zhuǎn)插進(jìn)，直至有靜脈血自動(dòng)流入毛細(xì)吸管，取到需要的血樣后，拔出吸管 (圖3.6-2) 。    心臟取血  適用于取血量較大時(shí)，方法與家兔心臟取血相同，但所用針頭可稍短。   (3)狗   一般采用前肢頭靜脈取血，方法同靜脈注射給藥。 二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的

58、處死方法   (1)頸椎脫臼法   頸椎脫臼常用于小白鼠，術(shù)者左手持鑷子或用拇指、食指固定鼠頭后部，右手捏住鼠尾，用力向后上方牽拉，聽到鼠頸部喀嚓聲即頸椎脫位、脊髓斷裂，鼠瞬間死亡。   (2)斷頭、毀腦法   斷頭、毀腦常用于蛙類?？捎眉舻都羧ヮ^部，或用金屬探針經(jīng)枕骨大孔破壞腦和脊髓而致死。大鼠和小鼠也可用斷頭法處死，術(shù)者需戴手套，兩手分別抓住鼠頭與鼠身，拉緊并暴露頸部，由助手持剪刀，從頸部剪斷鼠頭。   (3)空氣拴塞法  術(shù)者用50100 ml注射器

59、，向靜脈血管迅速注入空氣，氣體栓塞血管而使動(dòng)物死亡。使貓與家兔致死的空氣量為1020 m1，狗為70150 m1。   (4)放血法   鼠可用摘除眼球，從眼眶動(dòng)靜脈大量放血而致死。       家兔和貓可在麻醉狀態(tài)下切開頸部，分離出頸總動(dòng)脈，用止血鉗或動(dòng)脈夾夾閉兩端，在其中間剪斷血管后，緩慢打開止血鉗或動(dòng)脈夾，輕壓胸部可迅速放出大量血液，動(dòng)物立即死亡。    狗在麻醉狀態(tài)下，可橫向切開股三角區(qū)，切斷股動(dòng)靜脈，血液噴出，同時(shí)用自來水沖洗出血部位，防止血液凝固，幾分鐘

60、后動(dòng)物死亡。第八章 組織分離和插管術(shù)一、除去被毛    在動(dòng)物手術(shù)前，應(yīng)將手術(shù)部位的被毛去除，以利于手術(shù)進(jìn)行。根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)需要可采用不同的去除被毛方法。    (1)剪毛法  這是生理教學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的方法，適合于急性實(shí)驗(yàn)。用彎頭剪或粗剪刀，剪毛范圍需大于切口的長度。剪毛時(shí)需用一手將皮膚繃平，另一手持剪刀貼于皮膚，逆著毛的朝向剪毛。剪下的毛應(yīng)立即浸泡入水中，以免到處飛揚(yáng)。    (2)拔毛法   大、小鼠皮下注射或家兔子耳緣靜脈注射取血時(shí)常用此法。操作時(shí)，將動(dòng)物固定后，用拇指、

61、食指將所需部位被毛拔去，涂上一層凡士林，可更清楚地顯示出血管。    (3)剃毛法   大動(dòng)物慢性手術(shù)時(shí)采用。先用刷子沾濕肥皂水將需去毛的被毛充分浸潤透，然后用剃毛刀順被毛進(jìn)行剃毛。若采用電動(dòng)剃刀，則逆被毛方向剃毛。    (4)脫毛法  采用化學(xué)脫毛劑將動(dòng)物的被毛脫去。此方法常用于大動(dòng)物作無菌手術(shù)，觀察動(dòng)物局部血液循環(huán)及其他各種病理變化。將動(dòng)物需脫毛部位的被毛先用剪刀盡量剪短，用棉球蘸脫毛劑在脫毛部位涂成薄層，經(jīng)2至3分鐘后，用溫水洗去脫毛部位脫下的毛，再用干紗布將水擦干，涂上一層油脂(脫毛劑種類及使用

62、見附錄)。二、切口和止血    (1)切口    根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊蟠_定手術(shù)切口的部位和大小，如腸切除取腹正中切口，腎切除取左背部切口，必要時(shí)做出標(biāo)志。進(jìn)行切口時(shí)，用一手拇指和食指向兩側(cè)繃緊皮膚使其固定。另一手持刀，使刀刃與欲切開的組織垂直，以適當(dāng)?shù)牧Χ纫淮吻虚_皮膚和皮下組織為佳。  組織要逐層切開，并以按皮膚紋理或各組織的纖維方向切開為佳。組織的切開處應(yīng)選擇無重要血管及神經(jīng)橫貫的地方，以免將其損傷。用幾把皮鉗夾住皮膚切口邊緣暴露手術(shù)野，以利進(jìn)一步分離、結(jié)扎、插管等操作。   (2)止血手術(shù)過程中所造成的出

63、血必須及時(shí)止住。完善的止血不僅可以防止繼續(xù)失血，還可以使術(shù)野清楚地顯露，有利于手術(shù)的順利進(jìn)行。止血的方法有：    鉗夾止血法  此法用于出血點(diǎn)明確的血管出血，使用時(shí)只需將止血鉗鉗住出血點(diǎn)即可，小血管出血鉗住一會(huì)兒放松后可不再出血，大的血管出血，應(yīng)鉗住后再用結(jié)扎法止血。    壓迫止血法  此法用于小血管的大面積滲血。使用時(shí)將滅菌紗布或棉球用溫?zé)嵘睇}水打濕擰干后按壓在出血部位片刻或用明膠海棉覆蓋即可。干紗布只用來吸血或壓迫止血，不能用來揩擦組織，以免損傷組織和剛形成的凝血塊脫落。    燒烙止血法  用專用電刀直接燒灼出血點(diǎn)即可。此法常用于滲血和小血管出血。止血快，效果好，但對組織有一定損害。    結(jié)扎止血法  此法主要用于出血點(diǎn)明確的大血管出血，是一種較為可靠的止血方法。使用時(shí)先用止血鉗將出血點(diǎn)鉗住，確認(rèn)出血點(diǎn)后用絲線將其扎住。肌肉的血管豐富，肌肉組織出血時(shí)要與肌肉一同結(jié)扎。為了避免肌肉組織出血，在分離肌肉時(shí)，若切口與肌纖維的方向一致，應(yīng)鈍性分離；若方向不一致，則應(yīng)采取兩端結(jié)扎，從中間切斷的方法。三、肌肉神經(jīng)，血管的