實(shí)驗(yàn)常用染料

1、實(shí)驗(yàn)室常用染料性能介紹及常用藥品試劑和培養(yǎng)基的配制（一）2007-05-30 16:13生物標(biāo)本常用染料性能簡介（一）天然染料1、蘇木精 蘇木精是從南美的蘇木（熱帶豆科植物）干枝中用乙醚浸制出來的一種色素，是最常用的染料之一。蘇木精不能直接染色，必須暴露在通氣的地方，使他變成氧化蘇木精（又叫蘇木素）后才能使用，這叫做“成熟”。蘇木精的“成熟”過程需時較長，配置后時間愈久，染色力愈強(qiáng)。被染材料必須經(jīng)金屬鹽作媒劑作用后才有著色力。所以在配制蘇木精染劑時都要用媒染劑。常用的媒染劑有硫酸鋁按、鉀明礬和鐵明礬等。蘇木精是淡黃色到銹紫色的結(jié)晶體，易溶于酒精，微溶于水和甘油，是染細(xì)胞核的優(yōu)良材料，他能把細(xì)胞

2、中不同的結(jié)構(gòu)分化出各種不同的顏色。分化時組織所染的顏色因處理的情況而異，用酸性溶液（如鹽酸酒精）分化后呈紅色，水洗后仍恢復(fù)青藍(lán)色，用堿性溶液（如氨水）分化后呈藍(lán)色，水洗后呈藍(lán)黑色。2、洋紅 洋紅又叫胭脂紅或卡紅。一種熱帶產(chǎn)的雌性胭脂蟲干燥后，磨成粉末，提取出蟲紅，再用明礬處理，除去其中雜質(zhì)，就制成洋紅。單純的洋紅不能染色，要經(jīng)酸性或堿性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，堿性溶液有氨水、硼砂等。洋紅是細(xì)胞核的優(yōu)良染料，染色的標(biāo)本不易褪色。用作切片或組織塊染都適宜，尤其適宜于小型材料的整體染色。用洋紅配成的溶液染色后能保持幾年。洋紅溶液出現(xiàn)渾濁時要過濾后再用。（二）人工染料人工染

3、料，即苯胺染料或煤焦油染料，種類很多，應(yīng)用極廣。它的缺點(diǎn)是經(jīng)日光照射容易褪色，苯胺藍(lán)、亮綠、甲基綠等更易褪色。在制片中注意掌握酸堿度，并避免日光直射，也能經(jīng)幾年不褪色。1、酸性品紅 酸性品紅是酸性染料，呈紅色粉末狀，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。他是良好的細(xì)胞制染色劑，在動物制片上應(yīng)用很廣，在植物制片上用來染皮層、髓部等薄壁細(xì)胞和纖維素壁。他跟甲基綠同染，能顯示線粒體。組織切片在染色前先浸在帶酸性的水中，可增強(qiáng)它的染色力。酸性品紅容易跟堿起作用，所以染色過度，易在自來水中褪色。2、剛果紅 剛果紅是酸性染料，呈棗紅色粉末狀，能溶于水喝酒精，遇酸呈藍(lán)色。他能作染料，也用作指示劑。他在植物制片中

4、常作為蘇木精或其他細(xì)胞染料的襯墊劑。他用來染細(xì)胞質(zhì)時，能把膠制或纖維素染成紅色。在動物組織制片中用來染神經(jīng)軸、彈性纖維、胚胎材料等。剛果紅可以跟蘇木靜作二重染色，也可用作類淀粉染色，由于他能溶于水和酒精，所以洗滌和脫水處理要迅速。3、甲基藍(lán) 甲基藍(lán)是弱酸性染料，能溶于水和酒精。甲基藍(lán)在動植物的制片技術(shù)方面應(yīng)用極廣。他跟伊紅合用能染神經(jīng)細(xì)胞，也是細(xì)菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生動物的活體染色劑。甲基藍(lán)極易氧化，因此用他染色后不能長久保存。4、固綠 固綠是酸性染料，能溶于水（溶解度為4%）和酒精（溶解度為9%）。固綠是一種染含有漿質(zhì)的纖維素細(xì)胞組織的染色劑，在染細(xì)胞和植物組織上應(yīng)用極廣。

5、他和蘇木精、番紅并列為植物組織學(xué)上三中最常用的染料。5、蘇丹 蘇丹是弱酸性染料，呈紅色粉末狀，易溶于脂肪和酒精（溶解度為0.15%）。蘇丹是脂肪染色劑。 6、伊紅 這類染料種類很多。常用的伊紅Y，是酸性染料，呈紅色帶藍(lán)的小結(jié)晶或棕色粉末狀，溶于水（15攝氏度是溶解度達(dá)44%）和酒精（溶于無水酒精的溶解度為2%）。伊紅在動物制片中廣泛應(yīng)用，是很好的細(xì)胞質(zhì)染料，常用作蘇木精的襯染劑。 7、堿性品（復(fù)）紅 堿性品紅是堿性染料，呈暗紅色粉末或結(jié)晶狀，能溶于水（溶解度1%）和酒精（溶解度8%）。堿性品紅在生物學(xué)制片中用途很廣，可用來染色膠原纖維、彈性纖維、嗜復(fù)紅性顆粒和中樞神經(jīng)組織的核質(zhì)。在生物學(xué)制片中

6、用來染維管束植物的木質(zhì)化壁，又作為原球藻、輪藻的整體染色。在細(xì)菌學(xué)制片中，長用來鑒別結(jié)核桿菌。在 爾根氏反應(yīng)中用作組織化學(xué)試劑，已核查脫氧核糖核酸。 8、結(jié)晶紫 結(jié)晶紫是堿性染料，能溶于水（溶解度9%）和酒精（溶解度8.75%）。結(jié)晶紫在細(xì)胞學(xué)、組織學(xué)和細(xì)菌學(xué)等方面應(yīng)用極廣，是一種優(yōu)良的染色劑。他是細(xì)胞核染色常用的，用來顯示染色體的中心體，并可染淀粉、纖維蛋白、神經(jīng)膠質(zhì)等。凡是用番紅和蘇木精或其他染料染細(xì)胞核不能成功時，用它能得到良好的結(jié)果。用番紅和結(jié)晶紫作染色體的二重染色，染色體染成紅色，紡錘絲染成紫色，所以也是一種顯示細(xì)胞分裂的優(yōu)良染色劑。用結(jié)晶紫染纖毛，效果也很好。用結(jié)晶紫染色的切片，缺

7、點(diǎn)是不易長久保存。 9、龍膽紫 龍膽紫是混合的堿性染料，主要是結(jié)晶紫和甲基紫的混合物。在必要是，龍膽紫能跟結(jié)晶紫互相替用。醫(yī)藥上用的紫藥水，主要成分是甲基紫，需要時能代替龍膽紫和結(jié)晶紫。 10、中性紅 中性紅是弱堿性染料，呈紅色粉末狀，能溶于水（溶解度4%）和酒精（溶解度1.8%）。它的堿性溶液中呈現(xiàn)黃色，在強(qiáng)堿性溶液中呈藍(lán)色，而在弱酸性溶液中呈紅色，所以能用作指示劑。中性紅無毒，常做活體染色的染料，用來染原生動物和顯示動植物組織中活細(xì)胞的內(nèi)含物等。陳久的中性紅水溶液，用作顯示尼爾體的常用染料。 11、番紅 番紅是堿性染料，能溶于水和酒精。番紅是細(xì)胞學(xué)和動植物組織學(xué)生常用的染料，能染細(xì)胞核、染

8、色體和植物蛋白質(zhì)，示維管束植物木質(zhì)化、木栓化和角質(zhì)化的組織，還能染孢子囊。 12、亞甲藍(lán)或美藍(lán) 亞甲藍(lán)或美藍(lán)是堿性染料，呈藍(lán)色粉末狀，能溶于水（溶解度9.5%）和酒精（溶解度6%）。亞甲藍(lán)是動物學(xué)和細(xì)胞學(xué)染色上十分重要的細(xì)胞核染料，其優(yōu)點(diǎn)是染色不會過深。 13、甲基綠 甲基綠是堿性染料。它是綠色粉末狀，能溶于水（溶解度8%）和酒精（溶解度3%）。甲基綠是最有價值的細(xì)胞和染色劑，細(xì)胞學(xué)上常用來染染色質(zhì)，跟酸性品紅一起可作植物木質(zhì)部的染色。 把硫酸銅溶液緩緩倒入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中，邊加邊攪拌，如果產(chǎn)生沉淀，要過濾。本尼迪克溶液配制后能長期使用（存放時間較久而產(chǎn)生沉淀是，取上層清液使用，不必重新

9、配制）。 本尼迪克溶液用來測試食物、血液和尿中的葡萄糖，可測出0.15 0.20%的葡萄糖。這種溶液跟未知物同加熱時，如果未知物中有葡萄糖，會形成紅色的氧化亞銅沉淀物。 配方二 裴林（Fehling）溶液 （1）把34.5克硫酸銅溶于500毫升蒸餾水中。 （2）把125克氫氧化鉀（鈉）和173克酒石酸鉀鈉溶解在500毫升蒸餾水中。 上述兩種溶液應(yīng)分別保存。在檢測葡萄糖時，使他們等量的混合，加入待測物的試管內(nèi)，加熱到沸騰。如果有葡萄糖，會形成紅色的氧化亞銅沉淀物。 2、檢查淀粉的試劑 魯哥氏（Lugols）溶液（碘液） 取6克碘化鉀溶于20毫升蒸餾水中，攪拌到溶解后，加入4克碘，等碘充分溶解，在

10、加入80毫升蒸餾水，貯存在棕色試劑瓶內(nèi)。 碘液用來測試食物樣品或葉片中的淀粉，也用作染色劑，例如可染色鞭毛、纖毛和細(xì)胞核等。 3、檢查蛋白質(zhì)的試劑 配方一 米倫（Millon）試劑 在60毫升濃硝酸（比重1.42）中溶解40克汞（水浴加溫可助溶），溶解后加入兩倍體積的蒸餾水稀釋，靜置澄清后，取它上層的清液備用。這種試劑可長期保存。 在待測物中加入少量米倫試劑，加熱，如果有蛋白質(zhì)，會出現(xiàn)紅色。這種試劑不能用來測定尿中的蛋白質(zhì)。 配方二 雙縮尿試劑 分別配制10%氫氧化鈉溶液和1%硫酸銅溶液。 在3毫升待測物中加入1毫升10%氫氧化鈉溶液和1滴1%硫酸銅溶液。如果有蛋白質(zhì)，會出現(xiàn)紫色反應(yīng)。 4、檢

11、查脂肪的試劑 蘇丹（）酒精飽和溶液 取0.2克蘇丹（或蘇丹），放入純酒精中，加熱，使它充分溶解，成為飽和酒精溶液，過濾后密閉在試劑瓶內(nèi)保存?zhèn)溆谩?5、酸堿指示劑 配方一 酚酞試劑和試紙 酚酞試劑 取1克酚酞，溶解在100毫升60%的酒精溶液里，裝在試劑瓶內(nèi)密閉保存。 酚態(tài)試紙 取1克酚酞，溶解在100毫升95%酒精溶液里，加入00毫升蒸餾水。把綠紙條放入酚酞溶液中浸濕后，取出，放在無氨氣影響處晾干。 酚泰試劑（試紙） pH值變色范圍8.210，在酸性和中性溶液中都無色，再堿性溶液中呈深紅色。 配方二 紅藍(lán)石蕊試紙 取市售石蕊1克，放在80毫升10%酒精溶液中攪拌，使它溶解，然后過濾。把濾液分成

12、兩份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸，到出現(xiàn)紅色為止。另1份滴入稀氫氧化鈉溶液，到出現(xiàn)藍(lán)色為止。在上述制備的溶液中分別浸濕濾紙條，隨后取出濾紙條，放在蔽光處、無酸堿性氣體影響的地方晾干，即的紅、藍(lán)兩種石蕊試紙。 紅石蕊試紙?jiān)趬A性溶液中變藍(lán)，藍(lán)石蕊試紙?jiān)谒嵝匀芤褐凶兗t。 6、檢查二氧化碳的試劑 檢查二氧化碳的試劑，可用溴代麝香草酚藍(lán)溶液和石灰水。 配方一 溴代麝香草酚藍(lán)溶液 取0.1克溴代麝香草酚藍(lán)，溶解在100毫升蒸餾水里，滴入少量0.1%氫氧化鉀溶液，使它成為弱堿性溶液而呈藍(lán)色。 溴代麝香草酚藍(lán)溶液pH值變色范圍是6.0（黃）7.6（藍(lán)）。待測物中如果有二氧化碳，會形成碳酸而使溶液變成黃色。 配方二

13、 石灰水 在蒸餾水中加入生石灰（氧化鈣），變加邊攪拌，直到加入的生石灰不再溶解，呈飽和狀態(tài)時為止。在石灰水澄清后，傾出上層清液，用濾紙過濾，放在密閉瓶內(nèi)保存。 如果測定的物質(zhì)中有二氧化碳，會生成碳酸鈣，使石灰水變渾濁。 7、檢查細(xì)胞生活力的試劑 檢查細(xì)胞有無生活力，可用中性紅甲基藍(lán)試劑。配制的方法是先分別配制1%中性紅溶液和1%甲基藍(lán)溶液，這兩種溶液各取1份混合，用來鑒定細(xì)胞的死活。該試劑使活細(xì)胞的液泡染上紅色，而使死細(xì)胞全部染成藍(lán)色（二）分離液 1、肌細(xì)胞分離液 配方一 馬克凱郎（Maccallum）液 取1份濃硝酸、2份甘油、3份水，混合后就得到馬克凱郎液。 把新鮮的肌肉組織小塊（橫紋肌、

14、心肌和平滑?。┩度脒@種溶液里浸漬，分離時間需13日。這種溶液尤其適于分離橫紋肌核心肌細(xì)胞。 配方二 氫氧化鉀溶液 取35克氫氧化鉀，放在100毫升蒸餾水中，加熱，使它完全溶解后，在室溫下冷卻。 把新鮮的肌肉組織塊投入氫氧化鉀溶液中，浸泡1530分鐘后，肌細(xì)胞便可分離。 2、上皮細(xì)胞分離液 配方一 福爾馬林氯化鉀溶液 稱取58.44克氯化鈉，用蒸餾水溶解，再稀釋到1000毫升，加入2毫升福爾馬林。 這種溶液是很好的上皮細(xì)胞分離液，分離很迅速，而且能保護(hù)纖細(xì)的上皮細(xì)胞纖毛。小腸和氣管的上皮組織小塊，放在此溶液里2小時即可分離，口腔和皮膚上皮組織小塊的細(xì)胞分離一般需3日左右。 配方二 水和氯醛溶液

15、稱取5克水和氯醛，用蒸餾水溶解，再稀釋到100毫升，就得到5%水合氯醛溶液。 從洗凈的動物胃、腸和口腔內(nèi)壁上取下上皮組織一小塊，投入以上溶液中，浸泡2448小時。 3、神經(jīng)細(xì)胞分離液 配方一 可以用上皮細(xì)胞分離液配方一福爾馬林氯化鈉溶液來分離神經(jīng)細(xì)胞（見2）。 配方二 硼酸生理鹽水溶液 在生理鹽水溶液內(nèi)加入一些硼酸，攪拌到不再溶解時為止，使成為飽和溶液。 把脊椎灰質(zhì)和腦皮質(zhì)部位的神經(jīng)組織一小塊投入這種溶液中分離。 4、植物莖細(xì)胞分離液 杰弗里氏（Jeffreys）液 取等量的10%鉻酸溶液和10%硝酸溶液混合，成鉻酸硝酸溶液。 這種溶液用來分離木本植物莖部的導(dǎo)管、管胞、篩管、伴胞和韌皮纖維等。

16、把材料切成小塊放在水里，加熱煮沸，冷卻后再加熱煮沸。這樣重復(fù)幾次，到材料全部沉于水底后，投入分離液內(nèi)，分離時間是2448小時。 5、植物根尖細(xì)胞分離液 配方一 鹽酸酒精溶液 在1份95%酒精中慢慢的加入1份濃鹽酸，即成鹽酸酒精溶液，裝瓶密閉保存。 把植物根尖部位截下一小段，投入以上溶液中分離。 配方二 4%鹽酸溶液 配制4%鹽酸溶液。 截下植物根尖部位，投入盛有4%鹽酸溶液的小燒杯內(nèi)，在60攝氏度溫水中隔水溫?zé)?2分鐘，使根尖軟而不酥，這時分離效果最好。 6、植物纖維分離液 取10克氫氧化鈉（或氫氧化鉀），溶解在90毫升水里，制成10%氫氧化鈉（或氫氧化鉀）溶液，放在瓶里密閉保存。 把植物莖縱

17、切成細(xì)條，剪成小段后，投入分離液內(nèi)。 7、植物細(xì)胞質(zhì)壁分離液 配方一 30%蔗糖溶液 取30克蔗糖，溶解在70毫升蒸餾水里，裝瓶備用。 配方二 5%氯化鈉溶液 取5克食鹽，溶解在95毫升蒸餾水里，裝瓶備用。 配方三 5%硝酸鉀溶液 取5克硝酸鉀，溶解在95毫升蒸餾水里，裝瓶備用。 （三）生理鹽水 配方一 各種動物需用的生理鹽水 哺乳類 需用生理鹽水濃度是0.9%。稱取0.9克氯化鈉，溶解在少量蒸餾水中，稀釋到100毫升。 鳥類 需用的生理鹽水濃度是0.75%。稱取0.75克氯化鈉，溶解后用蒸餾水稀釋到100毫升。 兩棲類 需用的生理鹽水濃度是0.65%。稱取0.65克氯化鈉，溶解后用蒸餾水稀釋

18、到100毫升。 配方二 任氏（Ringers）生理鹽水 氯化鈉 6.5克 碳酸氫鈉 0.2克 氯化鉀 0.14克 磷酸二氫鈉 0.01克 氯化鈣 0.12克 先把氯化鈉、氯化鉀、碳酸氫鈉、磷酸二氫鈉分別溶解在少量蒸餾水中，混合后用蒸餾水稀釋到980毫升。然后取氯化鈣溶解在20毫升蒸餾水中，把氯化鈣溶液逐滴加入到上述溶液內(nèi)，邊滴、邊攪拌，以免產(chǎn)生不溶解的磷酸鈣沉淀。 此溶液用于變溫動物，尤其常用于兩棲類。 配方三 樂氏（Lockes）生理鹽水 氯化鈉 9.0克 碳酸氫鈉 0.10.3克 氯化鉀 0.42克 氯化鈣 0.24克 把氯化鈉、氯化鉀、碳酸氫鈉分別用少量蒸餾水溶解，混合后加蒸餾水到980

19、毫升。把氯化鈣溶解在20毫升蒸餾水里，逐滴加入上述溶液中。 以上溶液用于恒溫動物，尤其常用于哺乳類。 四）培養(yǎng)液 1、人造海水 配方一 氯化鈉( ) 24.72克 氯化鉀（ ） 0.67克 氯化鈣（ ） 1.36克 氯化鎂（ ） 4.66克 硫酸鎂（ ） 6.29克 碳酸氫鈉（ ） 0.18克 蒸餾水 加到1升 把上述各種鹽溶解在少量蒸餾水中，再加入碳酸氫鈉，最后用蒸餾水稀釋到1000毫升。 配方二 氯化鈉 45.0克 硫酸鎂 0.1克 氯化鎂 5.0克 氯化鐵（1%溶液） 1滴 先把硫酸鎂、磷酸一氫鉀、氯化鐵用少量蒸餾水溶解，加蒸餾水到980毫升。隨后取硝酸鈣溶解在20毫升蒸餾水里，把此溶液

20、逐滴加到上述溶液內(nèi)，裝瓶保存。 配方二 克諾普氏（Knops）溶液 硝酸鉀 1克 硫酸鎂 1克 磷酸二氫鉀 1克 硝酸鈣 3克 先把硝酸鉀、硫酸鎂、磷酸二氫鉀用少量蒸餾水溶解，加蒸餾水到980毫升。隨后取硝酸鈣，用20毫升蒸餾水溶解，加入到上述溶液內(nèi)。溶液灰形成白色沉淀，在使用是必須搖動。 在以上溶液中加入蔗糖溶液（14%），能刺激某些藻類形成游動孢子。該液用于培養(yǎng)綠藻。 3、植物無土培養(yǎng)液 配方 霍格倫德（Hoagland）和斯納德（Snyder）液 硝酸鈣 0.821克 硝酸鉀 0.506克 磷酸二氫鉀 0.136克 硫酸鎂 0.120克 酒石酸鐵 0.005克 把上述鹽類溶解在少量蒸餾水

21、里，然后稀釋到1000毫升。 （五）培養(yǎng)基 1、細(xì)菌培養(yǎng)基 配方一 牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基 牛肉膏 0.3克 蛋白胨 1.0克 氯化鈉 0.5克 瓊脂 1.5克 水 1000毫升 在燒杯內(nèi)加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉，用蠟筆在燒杯外作上記號后，放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后，加入瓊脂，不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補(bǔ)足失水，用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到7.27.6,分裝在各個試管里，加棉花塞，用高壓蒸汽滅菌30分鐘。 配方二 馬鈴薯培養(yǎng)基 取新鮮牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀細(xì)細(xì)剁成肉末后，加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號，煮沸，轉(zhuǎn)用文火燉

22、2小時。過濾，濾出的肉末干燥處理，濾液pH值調(diào)到7.5左右。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心，滅菌，備用。 配方四 根瘤菌培養(yǎng)基 葡萄糖 10克 磷酸氫二鉀 0.5克 碳酸鈣 3克 硫酸鎂（ ） 0.2克 酵母粉 0.4克 瓊脂 20克 水 1000毫升 1%結(jié)晶紫溶液 1毫升 先把瓊脂加水煮沸溶解，然后分別加入其他組分，攪拌使溶解后，分裝，滅菌，備用。 2、放線菌培養(yǎng)基 配方一 淀粉瓊脂培養(yǎng)基（高氏培養(yǎng)基） 可溶性淀粉 2克 硝酸鉀 0.1克 磷酸氫二鉀 0.05克 氯化鈉 0.05克 硫酸鎂 0.05克 硫酸亞鐵 0.001克 瓊脂 2克 水 1000毫升 先把淀粉放在燒杯里

23、，用5毫升水調(diào)成糊狀后，倒入95毫升水，攪勻后加入其他藥品，使它溶解。在燒杯外做好記號，加熱到煮沸時加入瓊脂，不停攪拌，待瓊脂完全溶解后，補(bǔ)足失水。調(diào)整pH值到7.27.4，分裝后滅菌，備用。 配方二 面粉瓊脂培養(yǎng)基 面粉 60克 瓊脂 20克 水 1000毫升 把面粉用水調(diào)成糊狀，加水到500毫升，放在文火上煮30分鐘。另取500毫升水，放入瓊脂，加熱煮沸到溶解后，把兩液調(diào)勻，補(bǔ)充水分，調(diào)整pH值到7.4，分裝，滅菌，備用。 3、真菌培養(yǎng)基 配方一 薩市（Sabourauds）培養(yǎng)基 蛋白胨 10克 瓊脂 20克 麥芽糖 40克 水 1000毫升 先把蛋白胨、瓊脂加水后，加熱，不斷攪拌，待瓊

24、脂溶解后，加入40克麥芽糖（或葡萄糖），攪拌，使它溶解，然后分裝，滅菌，備用。 本培養(yǎng)菌是培養(yǎng)許多種類真菌所常用的。 配方二 馬鈴薯糖瓊脂培養(yǎng)基 把馬鈴薯洗凈去皮，取200克切成小塊，加水1000毫升，煮沸半小時后，補(bǔ)足水分。在濾液中加入10克瓊脂，煮沸溶解后加糖20克（用于培養(yǎng)霉菌的加入蔗糖，用于培養(yǎng)酵母菌的加入葡萄糖），補(bǔ)足水分，分裝，滅菌，備用。 把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到7.27.4，配方中的糖，如用葡萄糖還可用來培養(yǎng)放線菌和芽孢桿菌。 配方三 黃豆芽汁培養(yǎng)基 黃豆芽 100克 瓊脂 15克 葡萄糖 20克 水 1000毫升 洗凈黃豆芽，加水煮沸30分鐘。用紗布過濾，濾液中加入瓊脂，加熱溶

25、解后放入糖，攪拌使它溶解，補(bǔ)足水分到1000毫升，分裝，滅菌，備用。 把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到7.27.4，可用來培養(yǎng)細(xì)菌和放線菌。 配方四 豌豆瓊脂培養(yǎng)基 豌豆 80粒 瓊脂 5克 水 200毫升 取80粒干豌豆加水，煮沸1小時，用紗布過濾后，在濾液中加入瓊脂，煮沸到溶解，分裝，滅菌，備用4、食用菌菌種培養(yǎng)基 配方一 馬鈴薯蔗糖-瓊脂培養(yǎng)基 20%馬鈴薯煮汁 1000毫升 蔗糖 20克 瓊脂 18克 把馬鈴薯洗凈去皮后，切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200克，加水1000毫升，煮沸20分鐘后，過濾。在濾汁中補(bǔ)足水分到1000毫升，即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖，煮沸，使它溶解后，

26、補(bǔ)足水分，分裝，滅菌，備用。使用該培養(yǎng)基對pH值要求不嚴(yán)格，可以不測定。 配方二 綜合馬鈴薯培養(yǎng)基 20%馬鈴薯煮汁 1000毫升 磷酸二氫鉀 3克 硫酸鎂 1.5克 葡萄糖 20克 維生素 10毫克 瓊脂 18克 先配制20%馬鈴薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各種組分，加熱溶解后補(bǔ)足水分，調(diào)整pH值到6。分裝，滅菌，備用。 該培養(yǎng)基用于培養(yǎng)和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種。 （六）染色劑 1、細(xì)菌染色劑 配方一 齊氏（Ziehl）石炭酸品紅染液 甲液 取石炭酸5克，溶解在95毫升蒸餾水中。 乙液 取0.3克堿性品紅，放入研缽中研磨，逐漸加入10毫升95%酒精，繼續(xù)淹沒，使它溶解。 將甲

27、液和乙液混合后，搖勻，過濾，裝瓶，備用。 配方二 羅氏（Loefflers）美藍(lán)染液 甲液 取5克美藍(lán)，溶于100毫升95%酒精中，制成美藍(lán)酒精飽和液。 乙液 取氫氧化鉀0.01克（或1%氫氧化鉀溶液1毫升），溶液也可用于放線菌染色，0.1%濃度可用于酵母菌染色。 配方三 革蘭氏（Grams）染液 用此液染色因先用甲液染色，再加乙液固定，用丙液處理，最后用丁液復(fù)染。四種液體的配方如下： 甲液（結(jié)晶紫液） （1）結(jié)晶紫 2克 95%酒精 20毫升 （2）草酸銨 0.8克 蒸餾水 80毫升 使用錢江（1）、（2）液相混，靜置48小時后使用。 乙液(碘液) 碘 1克 碘化鉀 2克 蒸餾水 300毫升

28、 將碘化鉀溶于少量蒸餾水中，然后加入碘，待碘全部溶解后，加水稀釋至300毫升。 丙液 95%酒精溶液 丁液（番紅花紅液） 2.5%番紅花紅酒精溶液 10毫升 蒸餾水 100毫升 2、細(xì)菌特殊染色劑 配方一 芽孢染液 用此配方染色是用甲液染色后，用乙液復(fù)染。 甲液 取5克孔雀綠，加入少量蒸餾水，使它溶解后，用蒸餾水稀釋到100毫升，即成孔雀綠染液。 乙液 取番紅花紅0.5克，加入少量蒸餾水，使它溶解后，用蒸餾水稀釋到100毫升，集成番紅花紅復(fù)染液。 配方二 莢膜染液 此配方先用甲液染色，后用乙液復(fù)染。 甲液 取結(jié)晶紫0.1克，溶于少量蒸餾水后，加水稀釋到100毫升，再加入0.25毫升冰醋酸一結(jié)晶

29、紫染液。 乙液 取硫酸銅（ ）31.3克，溶于少量蒸餾水后，加水稀釋到100毫升，即成20%硫酸銅脫色劑。 配方三 鞭毛染液 甲液 飽和明礬溶液 2毫升 5%石炭酸溶液 5毫升 20%丹寧酸溶液 2毫升 乙液 堿性品紅 11克 95%酒精 100毫升 使用前取甲液9毫升和乙液1毫升相混，過濾即可。 3、植物細(xì)胞壁染色劑 配方一 纖維素細(xì)胞壁染液（） 取固綠0.1克，溶于100毫升95%酒精中，即成0.1%固綠酒精溶液。 該液能染色纖維素細(xì)胞壁，還用于動植物中作漿質(zhì)染色劑。 配方二 纖維素細(xì)胞壁染液（） 氯化鋅 20克 碘化鉀 6.5克 碘 1.5克 蒸餾水加至100毫升 先把氯化鋅溶于少量蒸餾

30、水中，再加入6.5克碘化鉀，在碘完全溶解后，用蒸餾水稀釋到100毫升，即成碘氯化鋅溶液。 該染液能把細(xì)胞壁染成紫色，胞質(zhì)染成淡黃色，胞核染成棕色。 配方一 纖維素細(xì)胞壁染液（） 甲液 取1克碘和1.5克碘化鉀，溶于100毫升蒸餾水中，即成1%碘液。 乙液 取7份硫酸和3份蒸餾水相混，即成66.5%硫酸溶液。 染色時，在材料上滴加甲液，再加一滴乙液，纖維素細(xì)胞壁就染成黃色。 配方四 木質(zhì)化細(xì)胞壁染液（） 硫酸化苯胺（或鹽酸話本安） 1份 蒸餾水 70份 95%酒精 30份 硫酸 30份 將上述各組分相混，將細(xì)胞材料放入混合液里染色，可是木質(zhì)化細(xì)胞壁呈鮮黃或姜黃色。 配方五 木質(zhì)化細(xì)胞壁染液（）

31、取間苯三酚45克，溶于100毫升95%酒精中，即成間苯三酚酒精液。 先在材料上滴上1滴濃鹽酸，然后滴上間苯三酚酒精液1滴，木質(zhì)化的細(xì)胞壁就染上櫻紅或紫紅色。 配方六 木質(zhì)化細(xì)胞壁染液（） 取1克番紅，溶于99毫升蒸餾水中，即成1%番紅溶液。 4、細(xì)胞質(zhì)染色劑 配方一 伊紅染液 伊紅染液一般配用水溶液和酒精溶液兩種。 （1）取1克伊紅，溶于99毫升蒸餾水中，即成1%伊紅水溶液（市售紅墨水內(nèi)含伊紅成分，可以用紅墨水稀釋液來代替本溶液）。 （2）取1克伊紅，溶于99毫升70%酒精中，即成1%伊紅酒精溶液。 配方二 甲基藍(lán)染液 取1克甲基藍(lán)，溶于29毫升70%酒精中，加入70毫升蒸餾水，即成1%甲基藍(lán)

32、染液。 配方三 亮綠染液 取0.5克亮綠，溶解在100毫升蒸餾水中，即成0.5%亮綠溶液。 5、細(xì)胞核染色劑 配方一 甲基綠染液 取1克甲基綠，溶于99毫升蒸餾水中，加入1毫升冰醋酸。本染液能染細(xì)胞核，還用來染木質(zhì)化細(xì)胞壁。 配方二 龍膽紫染液 取1克龍膽紫，溶于少量2%醋酸溶液中，加2%醋酸溶液，直到溶液不呈深紫色止。 配方三 美藍(lán)（亞甲基藍(lán)）染液 取0.5克美藍(lán)，溶于30毫升95%酒精中，加100毫升0.01%氫氧化鉀溶液，保存在棕色瓶內(nèi) 。 此溶液能染細(xì)胞核，還用來染細(xì)菌、血和神經(jīng)組織等。 配方四 硼砂洋紅染液 取4克硼砂，溶于96毫升蒸餾水中。再加入2克洋紅，加熱溶解后煮沸30分鐘，靜置3日，用100毫升70%酒精沖淡，放置24小時后過濾。 此染液能染細(xì)胞核，還用來染糊粉粒和一般動物、植物的整體染色，如水螅、血吸蟲等整體標(biāo)本。 配方五 德氏（Delafields）蘇木精染液 甲液 取1蘇木精，溶于6毫升無水酒精中，即成蘇木精酒精溶液。 乙液 取10克銨礬溶于90