消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全

1、 第三章 消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全李文姝 基本概念基本概念 消毒（消毒（disinfection）：殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物、殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物、 并不一定殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的并不一定殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的 方方 法。法。 滅菌（滅菌（sterilization）：殺死：殺死 物體上所有微生物的方法物體上所有微生物的方法(包括芽包括芽 孢孢)。 清潔（清潔（cleaning）：除去塵埃和污穢以減少微生物數(shù)量的方法。：除去塵埃和污穢以減少微生物數(shù)量的方法。 無菌（無菌（asepsis）：不存在活菌的意思：不存在活菌的意思。 無菌操作無菌操作：防止細(xì)菌進(jìn)入

2、人體或其他物品的操作技術(shù)。：防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。 防腐（防腐（antisepsis）：體外防止或抑制細(xì)菌生長繁殖的方法。：體外防止或抑制細(xì)菌生長繁殖的方法。消毒滅菌消毒滅菌例：例： 外科手術(shù)外科手術(shù) 無菌操作無菌操作 內(nèi)服抗生素內(nèi)服抗生素 抑菌抑菌 接種環(huán)火焰燒灼接種環(huán)火焰燒灼無菌無菌 火化火化滅菌滅菌 局部皮膚局部皮膚75%75%酒精擦拭酒精擦拭 消毒消毒 一、消毒滅菌的方法 常用的消毒和滅菌方法可分為 物理和化學(xué)兩種方法物理和化學(xué)兩種方法( (一一) ) 物理滅菌法物理滅菌法熱力滅菌法熱力滅菌法輻射殺菌法輻射殺菌法濾過除菌法濾過除菌法干燥與低溫抑菌法干燥與低溫抑菌法 熱力

3、滅菌熱力滅菌 原理原理： 破壞菌體蛋白質(zhì)與核酸，使其肽破壞菌體蛋白質(zhì)與核酸，使其肽 鏈斷裂，蛋白質(zhì)鏈斷裂，蛋白質(zhì) 變性凝固，核酸變性凝固，核酸 解鏈崩解解鏈崩解, 導(dǎo)致細(xì)菌死亡。導(dǎo)致細(xì)菌死亡。 種類：種類： 常用熱力滅菌法常用熱力滅菌法種類種類方法方法效果效果用途用途干干熱熱焚燒焚燒用焚燒爐燃燒用焚燒爐燃燒滅菌滅菌廢棄污物、尸體廢棄污物、尸體燒灼燒灼火焰燒灼火焰燒灼滅菌滅菌接種環(huán)，試管口接種環(huán)，試管口干烤干烤紅外線紅外線干烤箱，熱空氣干烤箱，熱空氣160-170C 2h電磁波熱效應(yīng)電磁波熱效應(yīng)滅菌滅菌滅菌滅菌玻璃器皿等耐高溫的物玻璃器皿等耐高溫的物品品醫(yī)療器械醫(yī)療器械濕濕熱熱煮沸法煮沸法100

4、C，5-10分分鐘，沸水鐘，沸水消毒消毒飲水和食具飲水和食具高壓蒸高壓蒸氣滅菌氣滅菌法法高壓蒸氣滅菌器高壓蒸氣滅菌器103.4Kpa121.3C15-20分分鐘鐘滅菌滅菌耐高溫耐高溫耐濕物耐濕物品品巴氏消巴氏消毒法毒法種類種類效果效果 用途用途濕濕熱熱巴斯德創(chuàng)用，巴斯德創(chuàng)用，61.1-62.830分鐘，分鐘，71.7 30秒鐘秒鐘（常用）（常用） 消毒（消毒（殺死病殺死病原菌，不破壞原菌，不破壞營養(yǎng)成分）營養(yǎng)成分）牛奶，酒類牛奶，酒類方法方法流通蒸氣流通蒸氣法法100 蒸氣蒸氣1530分鐘分鐘消毒（殺死細(xì)菌消毒（殺死細(xì)菌繁殖體，不殺死繁殖體，不殺死芽胞）芽胞）不耐高溫、高壓物品不耐高溫、高壓物

5、品間歇滅菌間歇滅菌法法反復(fù)多次流動(dòng)蒸氣反復(fù)多次流動(dòng)蒸氣滅菌滅菌不耐高溫、高壓物品不耐高溫、高壓物品濕熱效力大于干熱濕熱效力大于干熱 原因原因 （1）濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固變性）濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固變性 （2）濕熱的穿透力比干熱大）濕熱的穿透力比干熱大 （3）濕熱的濕熱的蒸汽蒸汽有潛熱效應(yīng)有潛熱效應(yīng) 輻射殺菌法輻射殺菌法 紫外線（紫外線（ ultraviolet ray,UV) : 260nm-266nm（最佳殺菌波長）（最佳殺菌波長） 殺菌原理殺菌原理：使：使DNA上相鄰的上相鄰的T堿基通過共價(jià)鍵結(jié)合成堿基通過共價(jià)鍵結(jié)合成 二聚二聚 體，干擾體，干擾DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)菌死亡復(fù)制

6、與轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)菌死亡 特點(diǎn)：特點(diǎn)： 穿透力弱穿透力弱 適用范圍適用范圍：適于空氣和物體表面消毒適于空氣和物體表面消毒 電離輻射電離輻射 如如 ： -ray， -ray 機(jī)理機(jī)理: 干擾干擾DNA 合成、破壞細(xì)胞膜、酶系統(tǒng)紊亂等合成、破壞細(xì)胞膜、酶系統(tǒng)紊亂等 適用物品：不耐熱的物品（食品、藥品及醫(yī)療用品）適用物品：不耐熱的物品（食品、藥品及醫(yī)療用品） 微波（微波（microwave) 機(jī)理：熱效應(yīng)機(jī)理：熱效應(yīng) 適用物品：非金屬物品、食品適用物品：非金屬物品、食品 濾過除菌法（濾過除菌法（filtrationfiltration） 機(jī)理：用物理機(jī)理：用物理阻留阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌除去的方

7、法將液體或空氣中的細(xì)菌除去, , 以達(dá)到除菌目的以達(dá)到除菌目的 器具：濾菌器（器具：濾菌器（filterfilter） 適用物品：不耐高溫物品（適用物品：不耐高溫物品（血清、毒素、抗生素）以及血清、毒素、抗生素）以及 空氣等的除菌空氣等的除菌 干燥與低溫抑菌法干燥與低溫抑菌法在低溫狀態(tài)下真空抽去水分冷凍真空干燥法：用途：保存菌種用途：保存菌種 （二）化學(xué)消毒滅菌法（二）化學(xué)消毒滅菌法 消毒劑殺菌機(jī)理：消毒劑殺菌機(jī)理：1.使菌體蛋白變性和凝固使菌體蛋白變性和凝固 酚、醇、酸鹼、醛類，酚、醇、酸鹼、醛類， 重金屬鹽類（高濃度）重金屬鹽類（高濃度） 2 .干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)（酶失活）干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)（

8、酶失活） 氧化劑、氧化劑、重金屬鹽類（低濃度）重金屬鹽類（低濃度） 3. 損傷細(xì)菌細(xì)胞膜損傷細(xì)菌細(xì)胞膜 酚類（低濃度）、表面活性劑酚類（低濃度）、表面活性劑 按殺菌能力又可將消毒劑可分按殺菌能力又可將消毒劑可分消毒劑類型種類殺菌機(jī)理范圍高效消毒劑高效消毒劑含氯消毒劑次氯酸鈉等酶失活和氧化飲用水、地面等過氧化物類過氧化氫等酶活性喪失物品表面和皮膚醛類甲醛、戊二醛蛋白、核酸變性器械環(huán)氧乙烷環(huán)氧乙烷蛋白、核酸變性醫(yī)療器械中效消毒劑中效消毒劑含碘消毒劑含碘消毒劑碘酊、碘伏氧化、沉淀蛋白皮膚、體溫計(jì)等醇類醇類乙醇或異丙醇蛋白變性皮膚、體溫計(jì)等低效消毒劑低效消毒劑季銨鹽類季銨鹽類新潔爾滅表面活性劑地面、皮

9、膚等氯己定氯己定表面活性劑皮膚黏膜等高錳酸鉀高錳酸鉀高錳酸鉀氧化餐具、水果等類別 作用機(jī)制 常用種類酚類 蛋白變性，細(xì)胞膜損傷 石炭酸醇類 蛋白變性 乙醇（70%-75%）氧化劑 氧化、蛋白沉淀 高錳酸鉀、過氧乙酸 碘酒重金屬鹽 氧化、蛋白酶變性 紅汞、硫柳汞表面活性劑改變細(xì)胞膜通透性 新潔爾滅染料 干擾氧化、抑制繁殖 龍膽紫烷化劑 菌體蛋白質(zhì)及核酸烷基化 甲醛、烷氧乙烷常用消毒劑的種類（按化學(xué)成分）常用消毒劑的種類（按化學(xué)成分）常用消毒劑的應(yīng)用種類種類使用濃度使用濃度用途用途石炭酸石炭酸3%5%地面、器具表面、皮膚消毒地面、器具表面、皮膚消毒乙醇乙醇70%75%皮膚、體溫計(jì)消毒皮膚、體溫計(jì)消

10、毒高錳酸鉀高錳酸鉀0.1%皮膚、尿道、蔬菜、水果消毒皮膚、尿道、蔬菜、水果消毒紅汞紅汞2%皮膚、粘膜、小創(chuàng)傷消毒皮膚、粘膜、小創(chuàng)傷消毒硫柳汞硫柳汞0.1%皮膚消毒、手術(shù)部位消毒皮膚消毒、手術(shù)部位消毒過氧乙酸過氧乙酸0.2%0.3% 塑料、玻璃器材消毒塑料、玻璃器材消毒碘酒碘酒2.0%2.5% 皮膚消毒皮膚消毒新潔爾滅新潔爾滅0.41.6%手術(shù)洗手、浸泡手術(shù)器械手術(shù)洗手、浸泡手術(shù)器械龍膽紫龍膽紫2%4%淺表創(chuàng)傷消毒淺表創(chuàng)傷消毒生物滅菌法抗生素抗生素Antibiotic細(xì)菌素細(xì)菌素Bacteriocin 噬菌體噬菌體Bacteriophage 二、消毒滅菌的應(yīng)用二、消毒滅菌的應(yīng)用 醫(yī)療器械物品的消

11、毒滅菌醫(yī)療器械物品的消毒滅菌 室內(nèi)空氣的消毒滅菌室內(nèi)空氣的消毒滅菌 手和皮膚的消毒手和皮膚的消毒 黏膜的消毒黏膜的消毒 病人排泄物和分泌物的消毒滅菌病人排泄物和分泌物的消毒滅菌 病人污染物品的消毒病人污染物品的消毒 飲水的消毒飲水的消毒 環(huán)境的消毒環(huán)境的消毒根據(jù)消毒或滅菌對(duì)象，選擇合適的消毒滅菌方法根據(jù)消毒或滅菌對(duì)象，選擇合適的消毒滅菌方法消毒劑消毒劑微生物微生物 環(huán)境環(huán)境性質(zhì)性質(zhì)濃度濃度作用時(shí)間作用時(shí)間種類種類數(shù)量數(shù)量有機(jī)物有機(jī)物溫度溫度酸鹼度酸鹼度三、影響消毒滅菌效果的因素三、影響消毒滅菌效果的因素 級(jí)別級(jí)別處理對(duì)象處理對(duì)象一級(jí)一級(jí)對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境危害較低，對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境危害較低

12、，不具有不具有對(duì)健康成對(duì)健康成人、動(dòng)植物致病的人、動(dòng)植物致病的致病因子致病因子。二級(jí)二級(jí)對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危具有中等危害或具有潛在危險(xiǎn)的致病因子險(xiǎn)的致病因子，對(duì)健康成人、動(dòng)植物和環(huán)境不會(huì)造，對(duì)健康成人、動(dòng)植物和環(huán)境不會(huì)造成嚴(yán)重危害，成嚴(yán)重危害，具具有有效的預(yù)防和治療措施有有效的預(yù)防和治療措施。三級(jí)三級(jí)對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性具有高度危險(xiǎn)性，主要通過，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴(yán)重的甚至是致命的疾病，或氣溶膠使人類傳染上嚴(yán)重的甚至是致命的疾病，或?qū)?dòng)植物和環(huán)境具有高度危害的致病因子。對(duì)動(dòng)植物和環(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有通常有預(yù)防治療措施預(yù)防治療措施。四級(jí)四級(jí) 對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性具有高度危險(xiǎn)性，通過氣溶，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險(xiǎn)的致病因膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知