常見血液腫瘤FISH檢測小冊

1、常見血液腫瘤FISH檢測小冊一.FISH是什么FISH即熒光原位雜交技術(shù)（Fluorescence in situ hybridization），是在細(xì)胞遺傳學(xué)水平上檢測染色體及基因數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常的一種分子病理檢測技術(shù)。其基本原理是利用標(biāo)記了熒光素的核酸作為探針，按照堿基互補(bǔ)原則，與待檢樣本中與之互補(bǔ)的核酸經(jīng)過變性-退火而形成雜交雙鏈核酸，然后通過熒光顯微鏡進(jìn)行檢測和分析。FISH技術(shù)具有直觀、快速、敏感性高和方便靈活等特點(diǎn)，目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床的腫瘤遺傳學(xué)及各種基因相關(guān)疾病的分型與個(gè)體化治療等多個(gè)領(lǐng)域。二.血液腫瘤的診斷分型MICM：血液腫瘤診斷的精確分型是臨床選擇正確治療方案的前提，目前

2、國際上通用的是結(jié)合細(xì)胞形態(tài)學(xué)（Morphology）、免疫學(xué)（Immunology）、細(xì)胞遺傳學(xué)（Cytogenetics）和分子生物學(xué)（Molecular）的MICM分型。l 形態(tài)學(xué)診斷(Morphology)細(xì)胞學(xué)：外周血、骨髓涂片，淋巴結(jié)穿刺組織學(xué)：骨髓、淋巴結(jié)活檢l 免疫學(xué)檢查(Immunology)免疫組化（IHC），流式細(xì)胞（FCM）l 細(xì)胞遺傳學(xué)檢查(Cytogenetics)核型分析，熒光原位雜交（FISH）l 分子生物學(xué)檢查(Molecular)PCR，DNA測序三.FISH技術(shù)的作用及優(yōu)勢FISH作為一項(xiàng)很重要的分子遺傳學(xué)檢測技術(shù)，在血液腫瘤的診斷中有很大的作用，得到了NC

3、CN等國內(nèi)外各大血液腫瘤診療指南的認(rèn)可和建議。目前與血液腫瘤相關(guān)的FISH探針有接近100種，常用的就有60種左右，包括急慢性白血病、骨髓增生異常綜合癥（MDS）、多發(fā)性骨髓瘤（MM）、淋巴瘤等多種血液腫瘤。FISH技術(shù)的相對優(yōu)勢：l FISH技術(shù)更敏感，可檢測出核型分析檢測不出的細(xì)微缺失或易位，如MDS中的5q缺失綜合征；l FISH技術(shù)不需要中期分裂相細(xì)胞，而核型分析需要培養(yǎng)時(shí)間較長且需要較高的操作要求；l FISH技術(shù)是在細(xì)胞形態(tài)的基礎(chǔ)上進(jìn)行結(jié)果判讀，可有效地降低假陰性或假陽性的風(fēng)險(xiǎn)，而PCR技術(shù)經(jīng)過倍增擴(kuò)增，不能在形態(tài)的基礎(chǔ)上判讀，對實(shí)驗(yàn)要求高，易產(chǎn)生假陰性或假陽性。四.常用的血液FI

4、SH檢測探針1急性粒細(xì)胞白血?。ˋML）：樣本建議骨髓 AML1/ETO融合基因（M2b分型） PML/RARA融合基因（M3分型） CBFB基因斷裂（M4分型） KMT2A（MLL）基因斷裂（預(yù)后差，治療失敗風(fēng)險(xiǎn)高） 其他：8號染色體、CBFB/MYH11基因融合、RARA基因斷裂、5q缺失、7q缺失、EVI基因斷裂2慢性粒細(xì)胞白血?。–ML）：樣本優(yōu)先骨髓 BCR/ABL（DF）融合基因檢測（指導(dǎo)格列衛(wèi)用藥） 嗜酸性粒細(xì)胞增多癥（格列衛(wèi)作用靶標(biāo)）：PDGFRA基因斷裂、PDGFRB基因斷裂、FGFR1基因斷裂 其他：BCR/ABL（ES）、BCR/ABL（SF）、i（17q）、ASS基因缺

5、失3急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）：樣本建議骨髓 ETV6（TEL）/AML1融合基因（預(yù)后較好，但易復(fù)發(fā)） TCF3（E2A）基因斷裂（標(biāo)準(zhǔn)化療后易早期復(fù)發(fā)） BCR/ABL融合基因（易迅速復(fù)發(fā)，對挽救性化療反應(yīng)不佳） 兒童急性淋巴細(xì)胞白血病染色體及基因異常（4、10、17、TEL/AML1、KMT2A基因斷裂、BCR/ABL（DF），預(yù)后評估及治療方案的選擇） 其他： TCF3（E2A）/PBX1、4、10、17；MYC基因斷裂、IGH基因斷裂、KMT2A基因斷裂、CDKN2A（P16）基因缺失4慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL）：樣本優(yōu)先外周血或骨髓 慢性淋巴細(xì)胞白血病染色體及基因異常（P53、

6、RB1（13q14）、ATM（11q22）、D13S25（13q14）、12，預(yù)后評估及治療方案的選擇） 其他：DLEU1（13q14）、P53、ATM（11q22）、MYC基因擴(kuò)增、6q、TERC、GLI、12、BCL2/IGH、CCND3/IGH5骨髓增生異常綜合癥（MDS）：樣本建議骨髓 骨髓增生異常綜合癥染色體及基因異常（5q、7q、20q、8、X/Y，預(yù)后評估及治療方案的選擇） 其他：5q、7q、20q、EGR1、EVI1基因斷裂、X/Y6多發(fā)性骨髓瘤（MM）：樣本建議骨髓 多發(fā)性骨髓瘤染色體及基因異常（P53、1q21、RB1（13q14）、D13S319（13q14）、IGH，預(yù)

7、后評估及治療方案的選擇） 其他：CCND1（BCL1）/IGH、MAF/IGH、FGFR3/IGH、MAFB/IGH、CCND3/IGH、11q23及DLEU1、P53、15q22及6q21、1q21及1p36、IGH基因斷裂7淋巴瘤：樣本建議骨髓或淋巴結(jié)穿刺 MYC/IGH融合基因（輔助診斷伯基特淋巴瘤、高分級B細(xì)胞淋巴瘤的治療） BCL2/IGH融合基因（輔助診斷濾泡性淋巴瘤） ALK基因斷裂（輔助診斷間變性大細(xì)胞淋巴瘤，指導(dǎo)克唑替尼用藥） CCND1（BCL1）/IGH融合基因（輔助診斷套細(xì)胞淋巴瘤，鑒別診斷MCL和CLL） IGH基因斷裂（發(fā)生于多種類型的淋巴瘤中，與超過50種基因融合

8、） MALT1基因斷裂（輔助診斷粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤，指導(dǎo)HP化療方案） BCL6基因斷裂（DLBCL中預(yù)后較佳，指導(dǎo)治療方案）8骨髓移植后嵌合狀態(tài)監(jiān)測（X、Y） X和Y染色體檢測五.常見血液腫瘤FISH探針介紹血液腫瘤中常見FISH探針有四種類型，應(yīng)用于基因融合、斷裂、擴(kuò)增和缺失檢測。檢測類型探針舉例所含靶標(biāo)正常信號典型異常信號基因融合BCR/ABL（DF）融合基因檢測探針GSP BCRGSP ABL1基因斷裂IGH基因斷裂檢測探針GSP IGH基因擴(kuò)增MYC基因擴(kuò)增檢測探針GSP MYCCSP 8基因缺失P53基因缺失檢測探針GSP P53CSP 17注：*紅色標(biāo)記表示該基因探針標(biāo)記紅色

9、熒光素（R），熒光顯微鏡相應(yīng)濾塊下觀察為紅色信號點(diǎn)（某些參數(shù)濾塊下顯示為橙色信號）；*綠色標(biāo)記表示該基因探針標(biāo)記了綠色熒光素（G），熒光顯微鏡相應(yīng)濾塊下觀察為綠點(diǎn)信號點(diǎn)；*黃色標(biāo)記表示該基因探針包含一組分別標(biāo)記了紅、綠兩種熒光素的探針組合，熒光顯微鏡單通道濾塊下可觀察到相應(yīng)顏色信號點(diǎn)（綠色或紅色信號點(diǎn)），雙通道濾塊下可觀察到紅綠相鄰或重疊信號（融合，F(xiàn)）。1.急性粒細(xì)胞白血?。ˋML）常用FISH檢測靶標(biāo)：AML1/ETO基因融合、PML/RARA基因融合、CBFB基因斷裂、MLL基因斷裂l AML1/ETO融合基因檢測M2b分型的標(biāo)志1）輔助診斷：AML1/ETO融合基因在M2患者中的發(fā)生率

10、20%-40%，在M2b亞型中發(fā)生率高達(dá)90%，是M2b分型的標(biāo)志，在M1和M4中少見。2）判斷預(yù)后：AML1/ETO融合基因陽性是預(yù)后好的標(biāo)志，患者對治療反應(yīng)佳，完全緩解率可達(dá)90%，5年無病生存可達(dá)50%-70%。l PML/RARA融合基因檢測M3分型的標(biāo)志1）輔助診斷：PML/RARA融合基因可見于95%以上的APL中，成為M3的一個(gè)特異標(biāo)志，預(yù)后好，約占全部AML的9%。2）指導(dǎo)用藥：全反式維甲酸（ATRA）和三氧化二砷能靶向降解PML/RARA融合蛋白，恢復(fù)野生型PML和RARA基因功能，解除其對基因轉(zhuǎn)錄的抑制，誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分化和凋亡，使APL得到有效治療。ATRA與化療聯(lián)合使用可

11、使APL的完全緩解率達(dá)90%-95%，并可使70%以上的患者得到長期生存。l CBFB基因斷裂M4E0特征性的遺傳學(xué)改變1）輔助診斷：CBFB基因斷裂重組是AML的特征性染色體異常，占總AML患者的5%-10%和23%的M4患者，通常見于AML-M4E0亞型，在M2，M5及M4（無嗜酸性粒細(xì)胞增多）中較少?，F(xiàn)在認(rèn)為CBFB基因斷裂重組是M4E0特征性的遺傳學(xué)改變。2）判斷預(yù)后：大多數(shù)CBFB基因斷裂重組的AML患者對化療敏感、預(yù)后較好。l MLL基因斷裂1）輔助診斷：在成人急性髓細(xì)胞白血病(AML)中，則主要見于M4/M5亞型。2）判斷預(yù)后：除t(9；11)，t(10；11)以外，大部分MLL

12、重排白血病緩解率低，并且第一次緩解后極易復(fù)發(fā)，生存期短，預(yù)后很差。在AML中單純MLL斷裂提示預(yù)后中等。2.慢性粒細(xì)胞白血?。–ML）常用FISH檢測靶標(biāo)：BCR/ABL基因融合l BCR/ABL融合基因檢測CML診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”1）輔助診斷：t(9；22)(q34；q11)易位形成的BCR/ABL融合基因是CML的標(biāo)志物，95%CML患者可檢測出典型的t(9；22)(q34；q11)易位，約5%的CML患者通過核型分析難以檢測到Ph染色體，但可檢測出融合基因存在，仍被歸為Ph+ CML分類。2）指導(dǎo)用藥：對初診患者進(jìn)行BCR/ABL檢測，可以進(jìn)行酪氨酸激酶抑制劑受益人群篩查。格列衛(wèi)可用于治療

13、費(fèi)城染色體陽性的慢性髓性白血病(Ph+ CML)的慢性期、加速期或急變期。3）療效監(jiān)測：Ph染色體存在于CML的整個(gè)病程中，治療緩解后，仍持續(xù)存在，只有消除Ph陽性克隆，才能達(dá)到最終治愈。FISH可用于治療期間患者體內(nèi)BCR/ABL融合基因細(xì)胞量動(dòng)態(tài)變化的檢測，用于后續(xù)的治療方案選擇及藥物使用效果評估。3.嗜酸粒細(xì)胞增多癥（HE）常用FISH檢測靶標(biāo)：PDGFRA基因斷裂、PDGFRB基因斷裂和FGFR1基因斷裂2008年WHO將具有PDGFRA、PDGFRB或FGFR1基因斷裂異常，伴嗜酸性粒細(xì)胞增多的髓系和淋巴系腫瘤獨(dú)立成一個(gè)新類“Myeloid/lymphoid neoplasms wi

14、th eosinophilia associated with rearrangements of PDGFRA, PDGFRB, or FGFR1”。這類患者具有PDGFRA基因重排、PDGFRB基因重排或FGFR1基因重排，即使不伴有BCR/ABL融合基因，依然對酪氨酸激酶抑制劑伊馬替尼（imatinib）治療敏感，治療后完全緩解率高。4.急性淋巴細(xì)胞白血病（ALL）常用FISH檢測靶標(biāo)：ETV6（TEL）/AML1基因融合，TCF3（E2A）基因斷裂，BCR/ABL基因融合，KMT2A（MLL）基因斷裂及4、10、17號染色體數(shù)目異常ALL中遺傳學(xué)改變發(fā)生的頻率可達(dá)80%-90%，遺傳學(xué)

15、變異較大，但大部分是特異性改變，與特定的形態(tài)學(xué)和免疫學(xué)表型有關(guān)。ALL中遺傳學(xué)改變主要是兩種形式，一是染色體結(jié)構(gòu)異常，二是染色體數(shù)目的異常。l ETV6（TEL）/AML1基因融合ETV6（TEL）/AML1融合基因在兒童ALL中的發(fā)生率高達(dá)20%-25%，是目前兒童ALL最常見的染色體重排。大多數(shù)研究發(fā)現(xiàn)ETV6（TEL）/AML1陽性的兒童ALL治療效果很好，5年EFS和總生存率達(dá)到89%和97%，是預(yù)后良好的指標(biāo)之一。l TCF3（E2A）基因斷裂約3%-5%的兒童ALL攜帶E2A基因斷裂。早期研究認(rèn)為TCF3（E2A）/PBX1陽性的ALL患兒易發(fā)生早期復(fù)發(fā)，預(yù)后不佳，故曾將其作為高危

16、因素之一。核型分析容易導(dǎo)致20%-25%漏診，而FISH可克服這一缺點(diǎn)。l BCR/ABL基因融合t(9；22)易位形成的BCR/ABL融合基因，約25%成人ALL及2-10%兒童ALL出現(xiàn)t（9；22）易位，但已被認(rèn)為是最重要的預(yù)后不良的因素之一。一旦檢測出BCR/ABL融合基因，患兒即被劃分為高危，接受更為強(qiáng)烈的化療或造血干細(xì)胞移植。但大多數(shù)患兒仍會治療失敗，5年EFS只有28.6%。l MLL基因斷裂MLL基因改變在急性白血病中的發(fā)生率約為5%-10%，但在嬰兒ALL中則高達(dá)79%。t(4；11)(q21；q23)易位形成的MLL/AF4融合基因最為常見(占41%)，是預(yù)后不良的重要標(biāo)志

17、，5年EFS只有26.7%。l 4、10、17號染色體異常兒童ALL約25%有染色體數(shù)目的增加，以4、10、17號染色體受累較為多見。4、10和17染色體三體是獨(dú)立的預(yù)后良好的指標(biāo)，這類患者7年EFS大于90%。5.慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL）常用FISH檢測靶標(biāo)：13q-，+12，17p-，11q-慢性淋巴細(xì)胞白血病是一種進(jìn)展緩慢、惰性的腫瘤，約占所有白血病的30%，多起源于B細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化，淋巴細(xì)胞分化受阻于未成熟階段，易伴發(fā)自身免疫病和低丙球蛋白血癥。約90%的B細(xì)胞CLL伴有特異性染色體及基因異常。由于CLL白血病細(xì)胞增殖低下，體外培養(yǎng)增殖慢，進(jìn)入分裂中期的細(xì)胞少，傳統(tǒng)的核型分析有困難

18、。常規(guī)染色體顯帶技術(shù)僅22%CLL可檢測到克隆性染色體異常，由于加用B細(xì)胞分裂刺激劑，近50%CLL檢測到克隆性染色體異常。近年來，隨著間期FISH技術(shù)的應(yīng)用，CLL染色體異常的檢出率大大提高，可達(dá)到75%-80%。最常見的為13q-，其次為+12、11q-、17p-、14q32重排、6q-，對這些遺傳學(xué)異常的檢測可以預(yù)測疾病的預(yù)后和治療反應(yīng)情況。l 13q-（含D13S25和RB1）13q缺失是CLL最常見的染色體異常，40%-60%的CLL出現(xiàn)該異常。單純del(13q14)常于BinetA期時(shí)出現(xiàn)，預(yù)后較好，或與正常核型患者相似；中位生存期133個(gè)月，無治療生存期最長達(dá)92個(gè)月。若伴有+

19、12、11q-等其它染色體異常，則預(yù)后通常較差。l +12（即CSP12）+12是最早發(fā)現(xiàn)的B-CLL常見染色體異常，其發(fā)生率約為15%-35%，通常伴有其它核型異常。+12患者約50%以上伴有不典型的淋巴細(xì)胞形態(tài)，SmIg和FMC7強(qiáng)表達(dá)，Binet分期提前，疾病進(jìn)展，對嘌呤類似物的反應(yīng)較差生存期短，預(yù)后差，因而需要積極的治療。但僅有+12改變，無復(fù)雜核型異常，細(xì)胞形態(tài)正常者，預(yù)后與核型正常者基本相似。l 17p-（含P53/CSP17）7%-11%的CLL患者伴有17p（P53）缺失，細(xì)胞形態(tài)多不典型，多處于疾病晚期(BinetB、C期)，對多種治療(包括核苷類似物)反應(yīng)差，生存期短。具有

20、17p-核型異常的CLL患者多數(shù)預(yù)后不良，早期即出現(xiàn)疾病進(jìn)展，且大多數(shù)化療方案治療效果較差，因?yàn)槎鄶?shù)化療方案中的細(xì)胞毒藥物都含有嘌呤類似物，其發(fā)揮作用主要依賴完好的P53介導(dǎo)的促凋亡機(jī)制。因此P53基因是否缺失為臨床治療方案的選擇提供指導(dǎo)，對于有P53基因缺失的患者，應(yīng)選用不涉及P53信號傳導(dǎo)系統(tǒng)的藥物。l 11q（ATM）缺失11q-是CLL另外一個(gè)預(yù)后較差的核型異常，常規(guī)核型分析檢出率<5%，而應(yīng)用FISH可以提高到20%。ATM缺失的發(fā)生率為12%-20%，一些患者即便在初診時(shí)沒有ATM缺失，但隨著疾病進(jìn)展，可出現(xiàn)ATM的缺失，提示ATM的缺失與CLL進(jìn)展密切相關(guān)。6.骨髓髓增生異

21、常綜合征（MDS）常用FISH檢測靶標(biāo)：5q-，7q-，20q-，+8，-Y克隆性細(xì)胞遺傳學(xué)異?？梢娪?0%-70%的原發(fā)性MDS和95%左右的治療相關(guān)性MDS(t-MDS)。晚期階段的MDS其染色體畸變率較早期階段MDS更高,其類型也更為復(fù)雜。MDS染色體異常檢出的高低也和染色體檢測的方法有關(guān)：采用CC技術(shù)只在31%-49%的原發(fā)性MDS患者中檢出染色體異常，而采用FISH結(jié)果在79%的MDS中檢出了染色體異常。MDS細(xì)胞遺傳學(xué)異常的類型呈現(xiàn)很大的異質(zhì)性：包括各種染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常，幾乎涉及每對染色體。其中，除5q-見于5q-綜合征外，絕大多數(shù)缺乏特異性。但MDS的染色體畸變主要以染色體缺

22、失和數(shù)目異常(增加或丟失)為主，提示其發(fā)病的分子機(jī)制主要為腫瘤抑制基因丟失或失活或者與單倍基因劑量不足有關(guān)。MDS染色體異常中累及5、7、8、20號染色體的異常最為多見，其發(fā)生率分別為20.8%、19.2%、16.9%和6.4%。這些染色體異常既可以單獨(dú)出現(xiàn)，也可以聯(lián)合出現(xiàn)。不同類型的MDS中，染色體異常的發(fā)生情況也是不同的。染色體核型對MDS有獨(dú)立的預(yù)后價(jià)值?？偟膬A向是：正常核型比異常核型預(yù)后好，單一異常比復(fù)雜異常預(yù)后好(-7例外)，核型穩(wěn)定比核型演變預(yù)后好。1997年國際預(yù)后積分系統(tǒng)(IPSS)將MDS的染色體異常分為3種不同的預(yù)后亞型：(1)高危：7號染色體異常和復(fù)雜的染色體異常；(2)

23、低危：單純5q-，單純20q-，-Y，和正常核型；(3)中危：其他異常，如+8等。l 5q-（含TERT/5q33和TERT/5q31）5q缺失是AML和MDS中最為常見的重排；5q內(nèi)部出現(xiàn)缺失（5q31-q33）出現(xiàn)于10-15%的MDS患者中，而5號染色體異常約占與治療相關(guān)的MDS的40%以上。-5/5q-的患者預(yù)后較好，可用于指導(dǎo)臨床進(jìn)行預(yù)后判斷和治療方案的選擇，如可采用促進(jìn)造血、誘導(dǎo)分化和生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑等方式進(jìn)行治療。-5/5q-的MDS患者在接受來那度胺治療后可達(dá)到完全臨床緩解和細(xì)胞遺傳學(xué)緩解，但經(jīng)常會出現(xiàn)復(fù)發(fā)。l -7/7q-（含D7S486/CSP7和D7S522/CSP7）7號

24、染色體缺失或7q缺失與MDS的復(fù)發(fā)性異常相關(guān)，約發(fā)生于5-10%AML（M4及M6）、約15%成人MDS、40%兒童MDS及50%與治療相關(guān)的AML/MDS。-7/7q-的患者預(yù)后較差，可用于指導(dǎo)臨床進(jìn)行預(yù)后判斷和治療方案的選擇，如可采用AML聯(lián)合化療和造血干細(xì)胞移植進(jìn)行治療。l 20q-（即D20S108）20q缺失見于骨髓增殖性疾?。∕PD）/MDS（4%）/AM（1%）等疾病中。-20/20q-的患者預(yù)后較好，可用于指導(dǎo)臨床進(jìn)行預(yù)后判斷和治療方案的選擇，如可采用促進(jìn)造血、誘導(dǎo)分化和生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑等方式進(jìn)行治療。l +8（即CSP8）+8是原發(fā)性MDS最常見的核型異常，國內(nèi)報(bào)道+8的檢出概

25、率（21.1%）高于國外（10%），可以出現(xiàn)于FAB分型的每一種MDS亞型，在IPSS積分系統(tǒng)中屬于中等預(yù)后指標(biāo)。7.多發(fā)性骨髓瘤（MM）常用FISH檢測靶標(biāo)：13q-，17p-，1q21擴(kuò)增，IGH基因斷裂多發(fā)性骨髓瘤是一種最常見的惡性漿細(xì)胞病，占造血系統(tǒng)惡性腫瘤的10%，其特征是單克隆漿細(xì)胞惡性增生并分泌大量單克隆免疫球蛋白，引起骨痛、病理性骨折、造血異常、單克隆球蛋白血癥及腎功能受損等一系列臨床變化。目前通用的MM診斷標(biāo)準(zhǔn)主要是標(biāo)準(zhǔn)WHO（2001）和國際MM工作組（2003）。此種疾病容易誤診，誤診率高達(dá)60%。臨床研究發(fā)現(xiàn)，MM的發(fā)生發(fā)展中伴隨著多種特異的細(xì)胞遺傳學(xué)層次上的相關(guān)基因數(shù)

26、目或結(jié)構(gòu)的改變。細(xì)胞遺傳學(xué)改變在MM發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用，MM常涉及多種染色體異常，主要為數(shù)目異常，染色體核型異常分為超二倍體和非超二倍體兩大類，其中超二倍體常見染色體改變是+3、+5、+7、+9、+11、+15、+19、+2l。非超二倍體主要累及-8、-13、-14、-17、-22等。在MM染色體異常中結(jié)構(gòu)改變較少見，主要有1號染色體(1p缺失或1q擴(kuò)增)、13q-、14q(多為與14q32有關(guān)的幾種重排)等。染色體分析需要有較好的中期分裂相，由于骨髓瘤細(xì)胞為終末分化細(xì)胞，增長率較低，很難獲得足夠分裂相進(jìn)行分析，常規(guī)細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)檢出率低15%-20%，F(xiàn)ISH技術(shù)可提高至38%-54%。

27、l 13q-（含D13S319和RB1）13號染色體部分或完全缺失是MM常見的染色體異常，在MM發(fā)病機(jī)制中較早發(fā)現(xiàn)，是該病預(yù)后及生存期預(yù)測重要指標(biāo)之一。采用FISH技術(shù)檢測檢出率可達(dá)30%-50%。RB1缺失，中位生存期為42.3個(gè)月，預(yù)后中等；D13S319缺失，中位生存期為42.3個(gè)月，預(yù)后中等。l P53P53基因異常在初診的MM檢出率約5%-10%。P53缺失中位生存期為24.7個(gè)月，預(yù)后差。P53基因參與細(xì)胞的凋亡過程，它的缺失將導(dǎo)致化療藥物的不敏感性，臨床也證實(shí)具有del（17p）異?；颊邿o論是接受傳統(tǒng)化療還是大劑量化療，甚至是ASCT，療效和生存情況均比基因正常者差。l 1q21

28、1q21（CKS1B）是MM中最為常見的遺傳學(xué)異常，CKS1B基因擴(kuò)增導(dǎo)致細(xì)胞周期循環(huán)的上調(diào)，從而引起很多增殖性疾病。1q21擴(kuò)增往往與MM的浸潤表型相關(guān)，預(yù)后差，疾病進(jìn)展快。l IGH基因斷裂大約40-60%的MM患者發(fā)生IGH基因斷裂及易位，IGH基因易位的伙伴染色體，主要包括11q13(BCL1/CCND1)、4p16.3（FGFR3）、16q23(MAF)、20q11(MAFB)和6p21(CCND3)等。較常見的易位：t(11；14)(q13；q32)、t(4；14)(p16；q32)和t(14；16)(q32；q23)分別大約20%、15%和5%患者存在。t(11；14)(q13；q32)預(yù)后較好，t(4；14)(p16；q32)的患者與其他遺傳亞型的患者相比具有顯著較差的預(yù)后。8.淋巴瘤常用FISH檢測靶標(biāo)：CCND1/IGH基因融合、BCL2/IGH基因融合、MYC基因斷裂、BCL6基因斷裂、MALT1基因斷裂l CCND1/IGH基因融合t(11；14)易位后形成CCND1/IGH融合基因，IGH基因附近的增強(qiáng)子使CyclinD1過表達(dá)應(yīng)用范圍套細(xì)胞淋巴瘤的診斷性指標(biāo)，95%左右的MCL患者具有t（11；14）（q13；q32）染色體易位，可用于MCL與其他淋巴瘤（CLL/SLL）鑒別診斷。l BCL2/IGH基因融合t(14；18)易位后形成的BCL2/IG