莨菪烷類抗膽堿藥物的分析學(xué)習(xí)教案

1、會計學(xué)1莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析第一頁，編輯于星期三：點 三十六分。 一、掌握莨菪烷類抗膽堿藥物的結(jié)構(gòu)特征、理化性質(zhì)、鑒別和含量測定的基本原理與方法。 二、熟悉本類藥物含量測定的酸性比色法，非水滴定法和HPLC法。第1頁/共49頁第二頁，編輯于星期三：點 三十六分。交感神經(jīng)節(jié)前纖維、副交感神經(jīng)節(jié)前節(jié)后纖維和運動神交感神經(jīng)節(jié)前纖維、副交感神經(jīng)節(jié)前節(jié)后纖維和運動神經(jīng)纖維的化學(xué)遞質(zhì)經(jīng)纖維的化學(xué)遞質(zhì) （Acetylcholine, ACh）乙酰膽堿乙酰膽堿擬擬 膽堿藥膽堿藥抗抗 膽堿藥膽堿藥第2頁/共49頁第三頁，編輯于星期三：點 三十六分。膽堿受體拮抗膽堿受體拮抗劑劑第3頁/

2、共49頁第四頁，編輯于星期三：點 三十六分。第4頁/共49頁第五頁，編輯于星期三：點 三十六分。 莨菪烷類抗膽堿藥物：是由莨菪烷衍生物莨菪烷類抗膽堿藥物：是由莨菪烷衍生物的氨基醇與不同有機酸縮合成酯的生物堿。如：的氨基醇與不同有機酸縮合成酯的生物堿。如：顛茄生物堿，古柯生物堿。顛茄生物堿，古柯生物堿。莨菪烷類藥物第5頁/共49頁第六頁，編輯于星期三：點 三十六分。結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)莨菪烷類抗莨菪烷類抗膽堿藥物膽堿藥物莨菪烷衍莨菪烷衍生的氨基生的氨基醇醇與各種與各種不同有不同有機酸縮機酸縮合合酯酯第6頁/共49頁第七頁，編輯于星期三：點 三十六分。（一）典型藥物的結(jié)構(gòu)（一）典型藥物的結(jié)構(gòu) 硫酸阿托品硫酸阿

3、托品 氫溴酸東莨菪堿氫溴酸東莨菪堿 （atropine sulfate） ( copolamine hydrobromide）NOCH3OHOHHOCH3ON,H2SO4,H2O2OHO,HBr,3H2O第7頁/共49頁第八頁，編輯于星期三：點 三十六分。NOH*135第8頁/共49頁第九頁，編輯于星期三：點 三十六分。NOHH椅式NOHH船式椅式船式第9頁/共49頁第十頁，編輯于星期三：點 三十六分。HOOHO*莨菪酸第10頁/共49頁第十一頁，編輯于星期三：點 三十六分。. H2SO4 . H2ONOOHO2第11頁/共49頁第十二頁，編輯于星期三：點 三十六分。NOOHOn莨菪烷（Tro

4、pane）骨架n莨菪醇的構(gòu)象n外消旋體第12頁/共49頁第十三頁，編輯于星期三：點 三十六分。 位位 莨菪醇莨菪醇 位位 偽莨菪醇偽莨菪醇內(nèi)消旋無旋光性內(nèi)消旋無旋光性莨菪烷骨架莨菪烷骨架1 15 53 3三個手性碳三個手性碳莨菪酸莨菪酸天然天然(-)-(-)-莨菪酸為莨菪酸為S-S-構(gòu)型構(gòu)型莨菪堿莨菪堿酯酯第13頁/共49頁第十四頁，編輯于星期三：點 三十六分。曼陀羅曼陀羅(天使的號角天使的號角)顛茄顛茄第14頁/共49頁第十五頁，編輯于星期三：點 三十六分。NOOHONOH+HOOHOH2O莨菪醇莨菪酸n堿性時易水解 n酯鍵在弱酸性、近中性條件下較穩(wěn)定 制成注射液時就要調(diào)pH值，最穩(wěn)定的pH

5、為3.5-4第15頁/共49頁第十六頁，編輯于星期三：點 三十六分。2. 堿性堿性 阿托品和東莨菪堿的結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)上含有阿托品和東莨菪堿的結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)上含有 叔胺氮原子叔胺氮原子,具有較強的堿性具有較強的堿性,易與酸成鹽。如易與酸成鹽。如 阿托品的阿托品的pKb1為為4.35。H2SO4 H2ONOOHO2135678硫酸阿托品水溶液呈中性第16頁/共49頁第十七頁，編輯于星期三：點 三十六分。第17頁/共49頁第十八頁，編輯于星期三：點 三十六分。以下藥物沒有旋光性的是以下藥物沒有旋光性的是 A氫溴酸東莨菪堿氫溴酸東莨菪堿 B阿托品阿托品 C丁溴東莨菪堿丁溴東莨菪堿 D甲溴東莨菪堿甲

6、溴東莨菪堿 E氫溴酸山莨菪堿氫溴酸山莨菪堿第18頁/共49頁第十九頁，編輯于星期三：點 三十六分。（一）托烷生物堿的（一）托烷生物堿的Vitaili鑒別反應(yīng)鑒別反應(yīng)第二節(jié) 鑒別試驗莨菪酸的特征反應(yīng) HOOCOH+3HNO3HOOCOHNO2O2NNO2+3H2OKOHC2H5OHHOOCOHNO2O2NNOHOKOHHOOCOHNO2O2NNOKO莨菪酸莨菪酸硝基化硝基化脫羧化脫羧化共軛結(jié)構(gòu)共軛結(jié)構(gòu)深紫深紫第19頁/共49頁第二十頁，編輯于星期三：點 三十六分。托烷生物堿托烷生物堿水解水解莨菪酸莨菪酸發(fā)煙硝酸發(fā)煙硝酸 三硝基衍生物三硝基衍生物KOH（C2H5OH）固體固體KOH有色的醌型產(chǎn)物有

7、色的醌型產(chǎn)物深紫色深紫色取供試品約取供試品約10mg10mg，加發(fā)煙硝酸，加發(fā)煙硝酸5 5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘渣，放冷，加滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘渣，放冷，加乙醇乙醇2 23 3滴，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。滴，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。第20頁/共49頁第二十一頁，編輯于星期三：點 三十六分。二、氧化反應(yīng)二、氧化反應(yīng)(與硫酸與硫酸-重鉻酸鉀的反應(yīng)）重鉻酸鉀的反應(yīng)）HOOCOHH2OH2SO4HOOCCH22O2CHO+2CO2H2On與硫酸及重鉻酸鉀加熱水解生成的莨菪酸被氧化為苯甲醛有苦杏仁特異臭味第21頁/共49頁第二十二頁，編輯于星期三：點 三十六分。第22頁

8、/共49頁第二十三頁，編輯于星期三：點 三十六分。第23頁/共49頁第二十四頁，編輯于星期三：點 三十六分。五、色譜鑒別法五、色譜鑒別法 一般用于已知生物堿的鑒別，主要有一般用于已知生物堿的鑒別，主要有TLCTLC、HPLCHPLC、GCGC、PCPC等等四、光譜法鑒別法四、光譜法鑒別法 紫外光譜法：紫外光譜法： 一般通過比較藥物的一般通過比較藥物的 或吸收光譜的一致性來進行鑒別以及吸光系數(shù)或吸收光譜的一致性來進行鑒別以及吸光系數(shù)minmax、 紅外光譜法：紅外光譜法：ChPChP收載的原料藥一般都采用紅外光譜法收載的原料藥一般都采用紅外光譜法進行鑒別進行鑒別第24頁/共49頁第二十五頁，編輯

9、于星期三：點 三十六分。六、硫酸鹽與溴化物反應(yīng)六、硫酸鹽與溴化物反應(yīng)阿托品阿托品+氯化鋇溶液氯化鋇溶液 白色沉淀白色沉淀氫溴酸東莨菪堿氫溴酸東莨菪堿+硝酸銀溶液硝酸銀溶液 淡黃色沉淀淡黃色沉淀藥物大都以硫酸鹽或溴化物的形式存在，藥物大都以硫酸鹽或溴化物的形式存在，通過加沉通過加沉淀試劑如硝酸銀等生成溴化銀沉淀或加入氯試劑生成溴淀試劑如硝酸銀等生成溴化銀沉淀或加入氯試劑生成溴溶于三氯甲烷而顯色溶于三氯甲烷而顯色第25頁/共49頁第二十六頁，編輯于星期三：點 三十六分。莨菪烷類生物堿的特征反應(yīng)是A與三氯化鐵反應(yīng) B與生物堿沉淀劑反應(yīng) C重氮化偶合反應(yīng)D丙二酰脲反應(yīng) EVitali反應(yīng) 第26頁/共

10、49頁第二十七頁，編輯于星期三：點 三十六分。藥物水解后，與硫酸重鉻酸鉀在加熱的條件下，生成苯甲醛，而逸出類似苦杏仁的臭味的藥物是 A氫溴酸山莨菪堿 B異煙肼 C硫酸奎寧 D鹽酸氯丙嗪 E地西泮 第27頁/共49頁第二十八頁，編輯于星期三：點 三十六分。ChP2015中收載的莨菪烷類原料藥都采用的鑒別方法是 AVitali鑒別反應(yīng) BUV鑒別 CIR鑒別 D硫酸鹽鑒別反應(yīng) E溴化物鑒別反應(yīng)第28頁/共49頁第二十九頁，編輯于星期三：點 三十六分。第三節(jié) 特殊雜質(zhì)與檢查(一）氫溴酸東莨菪堿中特殊雜質(zhì)檢查洋金花粗粉洋金花粗粉乙醇乙醇/ /滲漉滲漉滲漉液滲漉液減壓蒸減壓蒸餾餾浸浸膏膏H H2 2SO

11、SO4 4/ /提取提取酸性提取液酸性提取液NaNa2 2COCO3 3, CHCl, CHCl3 3/ /提取提取總生物堿總生物堿NaNa2 2COCO3 3, CHCl, CHCl3 3/ /分離分離東莨菪堿東莨菪堿HBr/HBr/成鹽成鹽氫溴酸東莨菪堿（粗品）氫溴酸東莨菪堿（粗品）75% C75% C2 2H H5 5OH/OH/精制精制成成品品根據(jù)其制備工藝，本根據(jù)其制備工藝，本品可通過酸度、其它品可通過酸度、其它生物堿、和易氧化物生物堿、和易氧化物質(zhì)檢查進行控制質(zhì)檢查進行控制第29頁/共49頁第三十頁，編輯于星期三：點 三十六分。 1. 1. 酸度酸度 東莨菪堿堿性很弱，對石蕊試紙幾

12、乎不顯堿性反應(yīng)。東莨菪堿堿性很弱，對石蕊試紙幾乎不顯堿性反應(yīng)。 氫溴酸東莨菪堿為強酸弱堿形成的鹽，通過其氫溴酸東莨菪堿為強酸弱堿形成的鹽，通過其5%5%水溶水溶 液的液的pHpH值為值為4.04.05.55.5，來控制本品中的酸性雜質(zhì)。，來控制本品中的酸性雜質(zhì)。 2. 2. 其他生物堿其他生物堿本品水溶液本品水溶液+ +氨試液氨試液不混濁不混濁合格合格混濁混濁存在其他生物堿存在其他生物堿+KOH試液試液混濁（東莨菪堿）混濁（東莨菪堿） 瞬間消失瞬間消失第30頁/共49頁第三十一頁，編輯于星期三：點 三十六分。主要是檢查本品在生產(chǎn)中可能引入的阿撲阿托品及主要是檢查本品在生產(chǎn)中可能引入的阿撲阿托品

13、及其它含有雙鍵的有機物質(zhì)，可使其它含有雙鍵的有機物質(zhì)，可使KMnO4溶液褪色。溶液褪色。 3. 易氧化物易氧化物 第31頁/共49頁第三十二頁，編輯于星期三：點 三十六分。（二）硫酸阿托品中有關(guān)物質(zhì)的檢查硫酸阿托品為消旋體，無旋光性，而莨菪堿為左旋體，硫酸阿托品為消旋體，無旋光性，而莨菪堿為左旋體，可以利用旋光性對莨菪堿雜質(zhì)進行檢查可以利用旋光性對莨菪堿雜質(zhì)進行檢查ChPChP用用HPLCHPLC法檢查其中有關(guān)物質(zhì)，通過峰面積的比值及保法檢查其中有關(guān)物質(zhì)，通過峰面積的比值及保留時間來控制雜質(zhì)限度留時間來控制雜質(zhì)限度第32頁/共49頁第三十三頁，編輯于星期三：點 三十六分。第四節(jié) 含量測定莨菪烷

14、類抗膽堿藥物藥理活性較強、臨床使用劑莨菪烷類抗膽堿藥物藥理活性較強、臨床使用劑量較少，因此測定方法要專屬、靈敏量較少，因此測定方法要專屬、靈敏: :酸性染料酸性染料比色法比色法非水溶液滴非水溶液滴定法定法高效液相色高效液相色譜法譜法第33頁/共49頁第三十四頁，編輯于星期三：點 三十六分。(1）酸性染料比色法）酸性染料比色法 1.1.基本原理基本原理 在一定的在一定的pHpH條件下，某些生物堿藥物可與某些酸性染料結(jié)合而呈條件下，某些生物堿藥物可與某些酸性染料結(jié)合而呈色，進而可用分光光度法進行測量色，進而可用分光光度法進行測量酸性染料酸性染料如磺酸酞類指示劑等，如溴甲酚綠、溴麝香草酚藍、溴甲酚紫

15、、如磺酸酞類指示劑等，如溴甲酚綠、溴麝香草酚藍、溴甲酚紫、溴酚藍等溴酚藍等第34頁/共49頁第三十五頁，編輯于星期三：點 三十六分。 其與酸性離子定量結(jié)合、生成具有吸收光譜明顯紅移的有色離子其與酸性離子定量結(jié)合、生成具有吸收光譜明顯紅移的有色離子對，且可以被有機溶劑定量萃取，通過測定有機相中有色離子對的特對，且可以被有機溶劑定量萃取，通過測定有機相中有色離子對的特征波長處的吸光度，即可進行含量測定。征波長處的吸光度，即可進行含量測定。有機相(BH+ In-)水相(BH+ In-)+HIn H+ In-+B H+ BH+UV 第35頁/共49頁第三十六頁，編輯于星期三：點 三十六分。2.2.影響

16、因素影響因素1. 1. 水相最佳水相最佳pH pH 值的選擇值的選擇2. 2. 酸性染料及其濃度酸性染料及其濃度3. 3. 有機溶劑的選擇有機溶劑的選擇4. 4. 水分的影響水分的影響5. 5. 酸性染料中的有色雜質(zhì)酸性染料中的有色雜質(zhì)第36頁/共49頁第三十七頁，編輯于星期三：點 三十六分。第37頁/共49頁第三十八頁，編輯于星期三：點 三十六分。 酸性染料及其濃度：定量結(jié)合，產(chǎn)物溶解性好；可定量結(jié)合，產(chǎn)物溶解性好；可稍過量稍過量 一般認(rèn)為對測定結(jié)果影響不大，只要量足夠大就可以。一般認(rèn)為對測定結(jié)果影響不大，只要量足夠大就可以。但濃度過高的話就會形成嚴(yán)重的乳化層，且不易于除去，但濃度過高的話就

17、會形成嚴(yán)重的乳化層，且不易于除去，往往影響測定結(jié)果。往往影響測定結(jié)果。 常用的酸性染料有常用的酸性染料有溴麝香草酚藍溴麝香草酚藍、溴甲酚綠溴甲酚綠、甲基橙甲基橙等，等，ChP中托烷類藥物的含量測定所選用的酸性染料主要為中托烷類藥物的含量測定所選用的酸性染料主要為溴甲酚綠。溴甲酚綠。第38頁/共49頁第三十九頁，編輯于星期三：點 三十六分。有機溶劑的選擇：提取效率高，氯仿最理想提取效率高，氯仿最理想一般應(yīng)選擇對有機堿藥物與酸性染料形成離子對萃取效一般應(yīng)選擇對有機堿藥物與酸性染料形成離子對萃取效率高、能與離子對形成氫鍵、不與或極少與水混溶的有率高、能與離子對形成氫鍵、不與或極少與水混溶的有機溶劑作

18、為萃取溶劑。機溶劑作為萃取溶劑。第39頁/共49頁第四十頁，編輯于星期三：點 三十六分。水分的影響：影響結(jié)果，脫水劑或濾紙除去水分。影響結(jié)果，脫水劑或濾紙除去水分。第40頁/共49頁第四十一頁，編輯于星期三：點 三十六分。酸性染料里面的有色雜質(zhì)影響結(jié)果，先用萃取溶劑萃取除去。影響結(jié)果，先用萃取溶劑萃取除去。第41頁/共49頁第四十二頁，編輯于星期三：點 三十六分。應(yīng)用示例氫溴酸東莨菪堿片的含量測定精密量取對照品溶液和供試品溶液各精密量取對照品溶液和供試品溶液各2ml2ml，分別置預(yù)先精密加入，分別置預(yù)先精密加入三氯三氯甲烷甲烷10ml10ml的分液漏斗中，各加的分液漏斗中，各加溴甲酚綠溴甲酚綠

19、溶液溶液4ml4ml，振搖提取后，振搖提取后，靜置使分層；分取三氯甲烷液，照紫外靜置使分層；分取三氯甲烷液，照紫外- -可見分光光度法，在可見分光光度法，在420nm420nm波長處分別測定吸光度，計算，即得。波長處分別測定吸光度，計算，即得。第42頁/共49頁第四十三頁，編輯于星期三：點 三十六分。(2）非水溶液滴定法）非水溶液滴定法 1.1.基本原理基本原理 硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二級解離，生成硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二級解離，生成SOSO4 42-2-，但在非水介質(zhì)中，只顯示一元酸解離為，但在非水介質(zhì)中，只顯示一元酸解離為HSOHSO4 4- -，所以，所以硫酸鹽類藥物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氫鹽，因此可硫酸鹽類藥物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氫鹽，因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。以用高氯酸滴定液直接滴定。第43頁/共49頁第四十四頁，編輯于星期三：點 三十六分。第44頁/共49頁第四十五頁，編輯于