微生物基礎知識的培訓

1、引言引言v一、微生物學及其發(fā)展史一、微生物學及其發(fā)展史v二、微生物定義及特性二、微生物定義及特性v三、微生物的五大共性三、微生物的五大共性v四、微生物的種類四、微生物的種類v五、微生物的形態(tài)五、微生物的形態(tài)v六、微生物的結構六、微生物的結構v七、微生物的污染七、微生物的污染v八、微生物的控制八、微生物的控制v九、生產環(huán)境的空氣潔凈度監(jiān)測九、生產環(huán)境的空氣潔凈度監(jiān)測一、微生物學及其發(fā)展史一、微生物學及其發(fā)展史v微生物學（微生物學（mocrobiology）就是研究那些?。┚褪茄芯磕切┬〉帽仨毥柚@微鏡才能看見的活生物體。得必須借助顯微鏡才能看見的活生物體。v我們研究微生物的生命活動，達到控制腐敗

2、我們研究微生物的生命活動，達到控制腐敗微生物和病原微生物的活動，以防止食品、微生物和病原微生物的活動，以防止食品、藥品變質和杜絕因其引起的病害。藥品變質和杜絕因其引起的病害。一、微生物學及其發(fā)展史一、微生物學及其發(fā)展史v1、公元前二千多年夏禹時代，就有釀酒的記、公元前二千多年夏禹時代，就有釀酒的記載，釀酒的記載，釀酒就必須有酵母菌參與。載，釀酒的記載，釀酒就必須有酵母菌參與。v2、十七世紀荷蘭人呂文虎克，用自制顯微鏡、十七世紀荷蘭人呂文虎克，用自制顯微鏡首先觀察到微生物（細菌）。首先觀察到微生物（細菌）。v3、十九世紀，法國科學家斯德，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵和、十九世紀，法國科學家斯德，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵和腐敗是微生

3、物的作用結果，為了防止酒類變腐敗是微生物的作用結果，為了防止酒類變質，他創(chuàng)造加溫處理方法質，他創(chuàng)造加溫處理方法“巴氏消毒法巴氏消毒法”。二、微生物定義二、微生物定義 v微生物微生物(microorganism) 是指存在于自然界的一大群形體微小、結構是指存在于自然界的一大群形體微小、結構簡單、進化低級、肉眼直接看不見，必須借簡單、進化低級、肉眼直接看不見，必須借助光學顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)助光學顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍，甚至數(shù)萬倍才能觀察到的微小生物。千倍，甚至數(shù)萬倍才能觀察到的微小生物。二、微生物的特征二、微生物的特征v小（形體微?。盒。ㄐ误w微?。簃（微米）級在光學

4、顯微（微米）級在光學顯微鏡下可見、鏡下可見、nm（納米）級在電子顯微鏡下可（納米）級在電子顯微鏡下可見見v簡（結構簡單）：單細胞、簡單的多細胞、簡（結構簡單）：單細胞、簡單的多細胞、非細胞非細胞v低（進化低級）：原核類、真核類、非細胞低（進化低級）：原核類、真核類、非細胞類類三、微生物的五大共性三、微生物的五大共性v1、體積小，面積大、體積小，面積大 為五大共性的基礎。小體積大面積系統(tǒng)必然有一個為五大共性的基礎。小體積大面積系統(tǒng)必然有一個巨大的營養(yǎng)物吸收面、代謝廢物的排泄面、環(huán)境信巨大的營養(yǎng)物吸收面、代謝廢物的排泄面、環(huán)境信息的接收面。息的接收面。v2、吸收多，轉化快、吸收多，轉化快 為其高速

5、生長繁殖和產生大量代謝產物提供了充分為其高速生長繁殖和產生大量代謝產物提供了充分的物質基礎。的物質基礎。v3、生長旺，繁殖快、生長旺，繁殖快 微生物具有極高的生長和繁殖速度。微生物具有極高的生長和繁殖速度。三、微生物的五大共性三、微生物的五大共性v4、適應強，易變異、適應強，易變異 微生物對環(huán)境條件尤其是惡劣的微生物對環(huán)境條件尤其是惡劣的“極端環(huán)境極端環(huán)境”有驚人的適應能力有驚人的適應能力 ，堪稱生物界之最。，堪稱生物界之最。 微生物的個體一般都是單細胞、簡單多細胞微生物的個體一般都是單細胞、簡單多細胞或非細胞，通常都是單倍體，繁殖快與外界或非細胞，通常都是單倍體，繁殖快與外界環(huán)境直接接觸，即

6、使變異的頻率特別低，也環(huán)境直接接觸，即使變異的頻率特別低，也可在短時間內產生大量變異的后代。最常見可在短時間內產生大量變異的后代。最常見的變異形式是基因突變。的變異形式是基因突變。三、微生物的五大共性三、微生物的五大共性v5、分布廣，種類多、分布廣，種類多 地球上除了火山的中心區(qū)域外，從土壤圈、地球上除了火山的中心區(qū)域外，從土壤圈、水圈、大氣圈直至巖石圈，到處都有微生物水圈、大氣圈直至巖石圈，到處都有微生物的蹤跡。的蹤跡。 地球上有地球上有200萬種生物，其中微生物有萬種生物，其中微生物有20萬萬種之多。種之多。 四、微生物的種類四、微生物的種類v微生物根據(jù)其不同的進化水平和性狀上的明微生物根

7、據(jù)其不同的進化水平和性狀上的明顯差別可分為原核微生物、真核微生物和非顯差別可分為原核微生物、真核微生物和非細胞微生物三大類群。細胞微生物三大類群。v原核微生物：細菌、放線菌、藍細菌、立克原核微生物：細菌、放線菌、藍細菌、立克次氏體、支原體、衣原體、螺旋體、蛭弧菌次氏體、支原體、衣原體、螺旋體、蛭弧菌等。等。v真核微生物：霉菌、酵母菌等真核微生物：霉菌、酵母菌等v非細胞類微生物：病毒非細胞類微生物：病毒(個體微小，可通過細個體微小，可通過細菌濾器菌濾器) 等等五、微生物的形態(tài)五、微生物的形態(tài)v細菌的形態(tài)：球狀、桿狀、螺旋狀細菌的形態(tài)：球狀、桿狀、螺旋狀v酵母菌的形態(tài)：球狀、卵圓狀、橢圓狀、柱酵母

8、菌的形態(tài)：球狀、卵圓狀、橢圓狀、柱狀或香腸狀等狀或香腸狀等v霉菌的形態(tài)：絲狀霉菌的形態(tài)：絲狀v病毒的形態(tài)：球狀、卵圓形、磚形、桿狀、病毒的形態(tài)：球狀、卵圓形、磚形、桿狀、絲狀、蝌蚪狀等絲狀、蝌蚪狀等放線桿菌放線桿菌弧狀菌弧狀菌酵母菌酵母菌 葡萄球菌葡萄球菌 沙門氏菌沙門氏菌乳酸桿菌乳酸桿菌 梭狀芽孢桿菌梭狀芽孢桿菌 黑曲霉黑曲霉六、微生物的結構六、微生物的結構細菌的結構：細菌的結構：v基本結構：細基本結構：細胞壁、細胞膜、胞壁、細胞膜、細胞質、細胞細胞質、細胞核核v特殊結構：莢特殊結構：莢膜、芽孢等膜、芽孢等細菌的結構：細菌的結構：v細胞壁：位于細胞表面，是一層較為堅韌、略具彈細胞壁：位于細胞

9、表面，是一層較為堅韌、略具彈性的結構。其功能是可以保護細胞免受機械或滲透性的結構。其功能是可以保護細胞免受機械或滲透壓的破壞，維持細胞的外形。細胞壁是多孔性的，壓的破壞，維持細胞的外形。細胞壁是多孔性的，具有一定的屏障作用，水和某些化學物質可以通過，具有一定的屏障作用，水和某些化學物質可以通過，但對大分子物質有阻攔作用。但對大分子物質有阻攔作用。v細胞膜：是外側緊貼于細胞壁而內側包圍細胞質的細胞膜：是外側緊貼于細胞壁而內側包圍細胞質的一層柔軟而富有彈性的半透性薄膜。它是一個重要一層柔軟而富有彈性的半透性薄膜。它是一個重要的代謝活動中心，具有多種新陳代謝所需的酶。的代謝活動中心，具有多種新陳代謝

10、所需的酶。細菌的結構：細菌的結構：v細胞質：無色透明，呈粘液狀。其內含有某細胞質：無色透明，呈粘液狀。其內含有某些結構和內含物。些結構和內含物。v細胞核：細菌的核位于細胞質內，沒有核膜、細胞核：細菌的核位于細胞質內，沒有核膜、核仁，沒有固定形態(tài)，結構也很簡單，因而核仁，沒有固定形態(tài)，結構也很簡單，因而稱之為原核。稱之為原核。v莢膜：有些細菌在一定營養(yǎng)條件下，可向細莢膜：有些細菌在一定營養(yǎng)條件下，可向細胞壁表面分泌一層松散透明、粘度極大、粘胞壁表面分泌一層松散透明、粘度極大、粘液狀或膠質狀的物質稱為莢膜。液狀或膠質狀的物質稱為莢膜。細菌的結構：細菌的結構：v芽孢：細菌在一定環(huán)境條件下或處在一定的

11、芽孢：細菌在一定環(huán)境條件下或處在一定的生活階段，細胞質脫水濃縮，在菌體內形成生活階段，細胞質脫水濃縮，在菌體內形成一個折光性圓形或橢圓形的個體。其對熱力、一個折光性圓形或橢圓形的個體。其對熱力、干燥、輻射、化學消毒等理化因素有強大的干燥、輻射、化學消毒等理化因素有強大的抵抗力。抵抗力。炭疽桿菌（芽孢形成炭疽桿菌（芽孢形成 ）七、微生物污染七、微生物污染v 為什么要對為什么要對食品食品生產進行微生物控制生產進行微生物控制？1、致?。阂鹑思皠又参锊『?。致?。阂鹑思皠又参锊『?。 我們不我們不能讓我們的顧客有感染致病微生物的潛能讓我們的顧客有感染致病微生物的潛在危險。在危險。2、致腐、致霉：致腐、

12、致霉：導致產品變質導致產品變質v污染就是指當某物與不潔污染就是指當某物與不潔凈的或腐壞物接觸或混合凈的或腐壞物接觸或混合在一起使該物變的不純凈在一起使該物變的不純凈或不適用時，即受污染?；虿贿m用時，即受污染。v簡單的說當一個產品中存簡單的說當一個產品中存在不需要的物質時，他即在不需要的物質時，他即受到了污染受到了污染污染的形式和載體污染的形式和載體:污染的形式污染的形式:v 塵埃粒子塵埃粒子v 微生物微生物污染的載體污染的載體:空氣、水、表面、人?？諝?、水、表面、人。微生物的污染途徑微生物的污染途徑v 自身污染：由于患者和員工自身攜帶微生自身污染：由于患者和員工自身攜帶微生 物而污染。物而污染

13、。v 接觸污染：由于和非無菌的用具、器械或接觸污染：由于和非無菌的用具、器械或 人的接觸而污染。人的接觸而污染。v 空氣污染：由于空氣中所含微生物的沉降、空氣污染：由于空氣中所含微生物的沉降、 附著或被吸入而污染。附著或被吸入而污染。v 其他污染：由于其他因素（如昆蟲）而污染。其他污染：由于其他因素（如昆蟲）而污染。控制微生物的污染途徑控制微生物的污染途徑v 有效地阻止室外的污染侵入室內。有效地阻止室外的污染侵入室內。v 迅速有效地排除室內已發(fā)生的污染。迅速有效地排除室內已發(fā)生的污染。v 控制污染源，減少污染發(fā)生量?？刂莆廴驹?，減少污染發(fā)生量。防止交叉污染防止交叉污染 ？v有需要有需要時時要洗

14、手及消毒要洗手及消毒v盡量減少盡量減少直接以直接以雙手接觸原輔料雙手接觸原輔料v接觸原輔料接觸原輔料的表面及用具的表面及用具 用用后后清洗清洗 轉換產品時轉換產品時清洗清洗 手的衛(wèi)生手的衛(wèi)生v每只手可攜帶每只手可攜帶40萬個細菌；剛洗萬個細菌；剛洗過的手，每平方厘米也可檢驗出過的手，每平方厘米也可檢驗出3200個細菌個細菌 。v110萬個細菌萬個細菌/1cm2 皮膚表面皮膚表面!洗手的重要性洗手的重要性:v用流水（如自來水）洗手，能使手上的用流水（如自來水）洗手，能使手上的致病微生物減少致病微生物減少80%；v用皂液充分洗手，再用自來水沖洗能使用皂液充分洗手，再用自來水沖洗能使致病微生物減少致

15、病微生物減少95%。v洗手后正確使用消毒劑能使致病微生物洗手后正確使用消毒劑能使致病微生物減少減少99%。洗手的正確方法洗手的正確方法正正確確洗洗手手的的步步驟驟更衣更衣更衣更衣標準更衣程序：標準更衣程序： 一更：脫衣一更：脫衣?lián)Q鞋換鞋洗手洗手二更：穿潔凈服二更：穿潔凈服/戴帽子戴帽子/戴口罩戴口罩緩沖：消毒雙手緩沖：消毒雙手 潔凈區(qū)潔凈區(qū).更衣更衣著衣種類著衣種類 測定日期測定日期 細菌數(shù)細菌數(shù)/100CM/100CM上衣內側上衣內側 使用五日后使用五日后 300300 外側外側 使用五日后使用五日后 200200褲子內側褲子內側 使用五日后使用五日后 450450 外側外側 使用五日后使用

16、五日后 7070帽子內側帽子內側 使用五日后使用五日后 100100 外側外側 使用五日后使用五日后 150150口罩內側口罩內側 使用一日后使用一日后 2200022000 外側外側 使用使用一日后一日后 100100襪子內側襪子內側 使用一日后使用一日后 3000030000 外側外側 使用一日后使用一日后 28002800更衣的目的：更衣的目的：想混進去，沒門想混進去，沒門！主要的微生物污染源主要的微生物污染源v 空氣空氣v 水水v 設備設備v 原輔料原輔料v 人員人員主要的微生物污染源主要的微生物污染源-空氣空氣v灰塵灰塵“微生物的飛行器微生物的飛行器”。v進入潔凈室（區(qū)）的空氣要經過

17、空氣凈進入潔凈室（區(qū)）的空氣要經過空氣凈化系統(tǒng)的處理?；到y(tǒng)的處理。v潔凈室（區(qū)）要定期消毒。使用的消毒潔凈室（區(qū)）要定期消毒。使用的消毒劑不得對設備、物料和成品產生污染。劑不得對設備、物料和成品產生污染。消毒劑品種應定期更換，防止產生耐藥消毒劑品種應定期更換，防止產生耐藥菌株。菌株。 主要的微生物污染源主要的微生物污染源-水水v水體是微生物廣泛分布的第二個天然環(huán)境。水體是微生物廣泛分布的第二個天然環(huán)境。 v水中的細菌來自土壤、塵埃、污水、人畜排泄水中的細菌來自土壤、塵埃、污水、人畜排泄物及垃圾等。物及垃圾等。 v藥品生產質量管理規(guī)范藥品生產質量管理規(guī)范第四章第四章設備設備第第三十四條中明確規(guī)

18、定：純化水、注射用水的制三十四條中明確規(guī)定：純化水、注射用水的制備、儲存和分配應能防止微生物的滋生和污染。備、儲存和分配應能防止微生物的滋生和污染。儲罐和輸送管道所用材料應無毒、耐腐蝕。管儲罐和輸送管道所用材料應無毒、耐腐蝕。管道的設計和安裝應避免死角、盲管。儲罐和管道的設計和安裝應避免死角、盲管。儲罐和管道要規(guī)定清洗、滅菌周期。道要規(guī)定清洗、滅菌周期。 主要的微生物污染源主要的微生物污染源- 設備設備v幾乎沒有細菌不幾乎沒有細菌不“吃吃”的東西的東西v設備和器具與設備和器具與食食品直接接觸品直接接觸 設備和器具的清洗設備和器具的清洗v清潔程序必須經過驗證清潔程序必須經過驗證v按清洗周期清洗按

19、清洗周期清洗v清洗和存放設備、器具處應與生產區(qū)域潔凈等級清洗和存放設備、器具處應與生產區(qū)域潔凈等級相同相同主要的微生物污染源主要的微生物污染源- 原輔料原輔料 包括厡輔料、內包裝材料。包括厡輔料、內包裝材料。 - 厡輔料微生物的限度標準？厡輔料微生物的限度標準？ - 內包裝材料微生物的限度標準？內包裝材料微生物的限度標準？ 符合藥典或行業(yè)標準符合藥典或行業(yè)標準 厡輔料、內包裝材料的貯存：厡輔料、內包裝材料的貯存： - 包裝嚴密，不得破損，污染。包裝嚴密，不得破損，污染。 - 清潔貯存。清潔貯存。主要的微生物污染源主要的微生物污染源- 人員人員人體內外微生物的分布人體內外微生物的分布 1、皮膚、

20、皮膚 2、口腔、口腔 3、上呼吸道、上呼吸道 4、下呼吸道、下呼吸道 5、胃腸道、胃腸道 6、泌尿生殖道、泌尿生殖道v人是潔凈室中最大的污染源人是潔凈室中最大的污染源 1、人在代謝過程中會釋放和分泌污染物。、人在代謝過程中會釋放和分泌污染物。 2、人體表面、衣服能沾染、攜帶污染物。、人體表面、衣服能沾染、攜帶污染物。3、人在潔凈室內的各種動作也會產生微粒和微生物。、人在潔凈室內的各種動作也會產生微粒和微生物。主要的微生物污染源主要的微生物污染源- 人員人員 NoYes人體散發(fā)的塵粒數(shù)人體散發(fā)的塵粒數(shù): （萬個（萬個/ /每分鐘）每分鐘） 10 50 100-250人員不良行為所產生的污染人員不

21、良行為所產生的污染:當有如下行為時將相應增加微粒的產生量當有如下行為時將相應增加微粒的產生量:- 吸煙者的呼吸吸煙者的呼吸 500%-噴嚏噴嚏 2000%-搓手搓手 200%-行走行走 200%-跺腳跺腳 5000%極端環(huán)境下的微生物極端環(huán)境下的微生物v在自然界中，存在著一些可在絕大多數(shù)微生在自然界中，存在著一些可在絕大多數(shù)微生物所不能生長的高溫、低溫、高酸、高堿、物所不能生長的高溫、低溫、高酸、高堿、高鹽、高壓和高輻射強度等極端環(huán)境下生活高鹽、高壓和高輻射強度等極端環(huán)境下生活的微生物，如嗜熱菌、嗜冷菌、嗜酸菌、嗜的微生物，如嗜熱菌、嗜冷菌、嗜酸菌、嗜堿菌、嗜鹽菌、嗜壓菌、耐輻射菌等，它們堿菌

22、、嗜鹽菌、嗜壓菌、耐輻射菌等，它們被稱為極端環(huán)境微生物。被稱為極端環(huán)境微生物。八、微生物的控制八、微生物的控制v（一）（一）5個基本概念個基本概念v（二）消毒劑的種類（二）消毒劑的種類v（三）常用的消毒劑（三）常用的消毒劑v（四）四種滅菌的方法（四）四種滅菌的方法（一）（一）5個基本概念個基本概念v 抑菌：抑制體內或體外細菌的生長繁殖。抑菌：抑制體內或體外細菌的生長繁殖。v 防腐：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方防腐：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法。細菌一般不死亡。使用同一種化學藥品法。細菌一般不死亡。使用同一種化學藥品在低濃度時為防腐劑，在高濃度時為消毒劑。在低濃度時為防腐劑，在高濃度時為消

23、毒劑。（一）（一）5個基本概念個基本概念v 消毒：殺滅物體上病原微生物的方法。并消毒：殺滅物體上病原微生物的方法。并不一定殺死含芽孢的細菌或非病原微生物。不一定殺死含芽孢的細菌或非病原微生物。用來消毒的藥品叫消毒劑。一般消毒劑在常用來消毒的藥品叫消毒劑。一般消毒劑在常用濃度下只對細菌的繁殖體有效，對其芽孢用濃度下只對細菌的繁殖體有效，對其芽孢則需提高消毒劑的濃度和延長作用時間。則需提高消毒劑的濃度和延長作用時間。（一）（一）5個基本概念個基本概念v 無菌：不存在活菌。無菌：不存在活菌。v 滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。比滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。比消毒要求高，它殺滅了包括細菌芽孢在

24、內的消毒要求高，它殺滅了包括細菌芽孢在內的全部病原微生物和非病原微生物。全部病原微生物和非病原微生物。（一）（一）5個基本概念個基本概念v滅菌和消毒的比較：滅菌和消毒的比較：共性：殺滅微生物以控制其污染和防止傳染。共性：殺滅微生物以控制其污染和防止傳染。區(qū)別：區(qū)別：1、殺滅微生物完全性的差異。滅菌要求完全殺滅微生、殺滅微生物完全性的差異。滅菌要求完全殺滅微生物，滅菌后的藥品不應含有活的微生物。而消毒不完物，滅菌后的藥品不應含有活的微生物。而消毒不完全殺滅微生物，只能殺滅一部分微生物即病原微生物。全殺滅微生物，只能殺滅一部分微生物即病原微生物。這是相對的。因為強效消毒劑在適宜條件下可能達到這是相

25、對的。因為強效消毒劑在適宜條件下可能達到滅菌效果；在不適宜條件下滅菌，有不完全殺滅微生滅菌效果；在不適宜條件下滅菌，有不完全殺滅微生物的可能。物的可能。2、方法上的差異：滅菌方法具有多樣性，消毒常借助、方法上的差異：滅菌方法具有多樣性，消毒常借助化學物質?；瘜W物質。3、效果檢查的差異：滅菌效果用無菌檢查法檢測，而、效果檢查的差異：滅菌效果用無菌檢查法檢測，而消毒效果以消毒劑的效價來評定。消毒效果以消毒劑的效價來評定。（二）消毒劑的種類（二）消毒劑的種類v1、重金屬及其化合物、重金屬及其化合物v2、有機化合物、有機化合物v3、鹵族元素及其化合物、鹵族元素及其化合物v4、表面活性劑、表面活性劑v5

26、、染料、染料（三）常用的消毒劑（三）常用的消毒劑v潔凈室（區(qū)）常用的消毒劑潔凈室（區(qū)）常用的消毒劑v甲醛薰蒸（作用機制：阻抑菌細胞核蛋白質合成甲醛薰蒸（作用機制：阻抑菌細胞核蛋白質合成) 甲醛有揮發(fā)性，對眼睛、皮膚有刺激性，引起皮膚甲醛有揮發(fā)性，對眼睛、皮膚有刺激性，引起皮膚硬化或皺褶，不宜做皮膚消毒用。）硬化或皺褶，不宜做皮膚消毒用。）v 0.1%新潔爾滅溶液新潔爾滅溶液(作用機制：使蛋白質變性，破作用機制：使蛋白質變性，破壞細胞膜。壞細胞膜。)v75%酒精溶液（常用于皮膚消毒。能迅速殺死細菌酒精溶液（常用于皮膚消毒。能迅速殺死細菌繁殖體，對一般病毒有一定的消毒作用。）繁殖體，對一般病毒有一

27、定的消毒作用。） v5%來蘇水來蘇水(甲酚皂甲酚皂)溶液（溶液（作用機制：損傷細胞膜作用機制：損傷細胞膜 ）（四）滅菌的方法（四）滅菌的方法v1、熱力滅菌、熱力滅菌v2、氣體滅菌、氣體滅菌v3、輻射滅菌、輻射滅菌v4、過濾滅菌、過濾滅菌（四）滅菌的方法（四）滅菌的方法v1、熱力滅菌：、熱力滅菌： 主要是利用高溫的致死作用，使微生物的蛋主要是利用高溫的致死作用，使微生物的蛋白質和核酸等重要生物高分子發(fā)生變性、破白質和核酸等重要生物高分子發(fā)生變性、破壞，而導致細胞死亡。壞，而導致細胞死亡。 分為干熱滅菌與濕熱滅菌分為干熱滅菌與濕熱滅菌（四）滅菌的方法（四）滅菌的方法(1)干熱滅菌：灼燒與火焰滅菌干

28、熱滅菌：灼燒與火焰滅菌 、干烤滅菌、干烤滅菌v灼燒主要用于接種工具滅菌，如接種針、接種環(huán)、灼燒主要用于接種工具滅菌，如接種針、接種環(huán)、刀、剪等在火焰上燒灼即可達到徹底滅菌。刀、剪等在火焰上燒灼即可達到徹底滅菌。v火焰滅菌是在無菌操作中，將試管口、玻璃瓶口、火焰滅菌是在無菌操作中，將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反復通過火焰數(shù)次，利用火焰對管口硅氟塑料塞等反復通過火焰數(shù)次，利用火焰對管口等進行滅菌，防止管口污染，作為無菌操作過程中等進行滅菌，防止管口污染，作為無菌操作過程中的輔助滅菌手段。的輔助滅菌手段。 v干烤滅菌是利用熱輻射及干熱空氣進行滅菌。干烤滅菌是利用熱輻射及干熱空氣進行滅菌。（四）滅

29、菌的方法（四）滅菌的方法(2)濕熱滅菌法：通過熱蒸汽或沸水使細菌蛋白質變性濕熱滅菌法：通過熱蒸汽或沸水使細菌蛋白質變性而殺滅微生物的方法。而殺滅微生物的方法。包括：煮沸滅菌、流通蒸汽滅菌、高壓蒸汽滅菌包括：煮沸滅菌、流通蒸汽滅菌、高壓蒸汽滅菌v煮沸滅菌：加熱使水至沸而殺滅細菌的方法。凡不煮沸滅菌：加熱使水至沸而殺滅細菌的方法。凡不適于高壓蒸汽滅菌的物品可常壓下在水中煮沸一段適于高壓蒸汽滅菌的物品可常壓下在水中煮沸一段時間達到滅菌目的。時間達到滅菌目的。v流通蒸汽滅菌：常壓下，用蒸籠、蒸鍋等在流通蒸汽滅菌：常壓下，用蒸籠、蒸鍋等在100滅菌。僅可殺死細菌繁殖體，不能完全殺滅芽孢。滅菌。僅可殺死細

30、菌繁殖體，不能完全殺滅芽孢。（四）滅菌的方法（四）滅菌的方法v高壓蒸汽滅菌：通過加壓提高蒸汽溫度，穿透高壓蒸汽滅菌：通過加壓提高蒸汽溫度，穿透力強、溫度高、滅菌效果最好。是最可靠最適力強、溫度高、滅菌效果最好。是最可靠最適用最廣泛的滅菌方法，凡耐高溫和潮濕的物品用最廣泛的滅菌方法，凡耐高溫和潮濕的物品可應用本法滅菌。可應用本法滅菌。v注意事項：完全排出高壓滅菌器內的冷空氣。注意事項：完全排出高壓滅菌器內的冷空氣。（冷空氣存在時，同一表壓下所達到的溫度值（冷空氣存在時，同一表壓下所達到的溫度值偏低，不符合規(guī)定的要求，滅菌就不徹底。偏低，不符合規(guī)定的要求，滅菌就不徹底。（四）滅菌的方法（四）滅菌的

31、方法v2、氣體滅菌：利用化學消毒劑形成的氣體來殺滅、氣體滅菌：利用化學消毒劑形成的氣體來殺滅微生物。微生物。v臭氧殺菌消毒臭氧殺菌消毒v廣泛存在于自然界中，雷雨過后的空氣有一種清廣泛存在于自然界中，雷雨過后的空氣有一種清新的感覺，是因為空中放電產生臭氧，消滅了空新的感覺，是因為空中放電產生臭氧，消滅了空氣中的微生物，凈化了空氣。氣中的微生物，凈化了空氣。v臭氧具有強烈的殺菌消毒作用。其殺菌消毒原理臭氧具有強烈的殺菌消毒作用。其殺菌消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結構不穩(wěn)定，很快是：臭氧在常溫、常壓下分子結構不穩(wěn)定，很快自行分解成氧和單個氧分子，后者具有很強的活自行分解成氧和單個氧分子，后者具

32、有很強的活性，對細菌具有很強的氧化作用，臭氧氧化性，對細菌具有很強的氧化作用，臭氧氧化 （四）滅菌的方法（四）滅菌的方法 分解了細菌內氧化葡萄糖所必需的酶，從而分解了細菌內氧化葡萄糖所必需的酶，從而破壞其細胞膜，將它殺死。多余的氧原子則破壞其細胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會自行重新結合成為普通氧分子，不存在任會自行重新結合成為普通氧分子，不存在任何有毒殘留物，故稱為無污染消毒劑。不但何有毒殘留物，故稱為無污染消毒劑。不但對各種細菌（包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠對各種細菌（包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠膿桿菌及雜菌等）有極強的殺滅能力，且對膿桿菌及雜菌等）有極強的殺滅能力，且對殺死霉菌也很有效。殺死

33、霉菌也很有效。 （四）滅菌的方法（四）滅菌的方法v3、輻射滅菌、輻射滅菌 （1）電離輻射）電離輻射:用引起電離的用引起電離的X射線、射線、射線滅菌。射線滅菌。 電離輻射對微生物的致死作用，主要是細胞內生物電離輻射對微生物的致死作用，主要是細胞內生物化學的變化所致。化學的變化所致。 輻射的藥品、食品的安全問題：輻射滅菌用于藥品輻射的藥品、食品的安全問題：輻射滅菌用于藥品或食品都應經過安全試驗，完全有必要進行科學全或食品都應經過安全試驗，完全有必要進行科學全面的評價，高劑量的輻射更應慎重。面的評價，高劑量的輻射更應慎重。（2）電磁波輻射（包括紫外線）電磁波輻射（包括紫外線波長波長190350nm、

34、紅外線紅外線波長波長0.771000m、微波、微波波長波長11000mm）。）。（四）滅菌的方法（四）滅菌的方法v紫外線滅菌紫外線滅菌1、 紫外線輻射的穿透力很弱，因此主要用于無菌室、紫外線輻射的穿透力很弱，因此主要用于無菌室、某些工作區(qū)的空氣滅菌、物體表面滅菌。某些工作區(qū)的空氣滅菌、物體表面滅菌。2、實踐工作中在無菌室無菌柜凈化工作臺工作室及、實踐工作中在無菌室無菌柜凈化工作臺工作室及車間安裝紫外燈，一般僅起殺死空氣中部分微生物車間安裝紫外燈，一般僅起殺死空氣中部分微生物的作用，而不能起到完全滅菌的作用。的作用，而不能起到完全滅菌的作用。3、紫外線消毒方法驗證中紫外燈需確認的參數(shù)主要、紫外線

35、消毒方法驗證中紫外燈需確認的參數(shù)主要有紫外線的波長、紫外線強度、燈管的壽命。有紫外線的波長、紫外線強度、燈管的壽命。4、紫外燈消毒的效果與紫外線強度、照射時間、溫、紫外燈消毒的效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關，還需通過驗證來確定。度與濕度等因素有關，還需通過驗證來確定。5、注意事項：紫外線直射對眼、皮膚有損害。紫外、注意事項：紫外線直射對眼、皮膚有損害。紫外線照射過程中產生臭氧，臭氧過多對眼及鼻腔有刺線照射過程中產生臭氧，臭氧過多對眼及鼻腔有刺激，產生頭暈、胸悶、血壓降低，所以無菌室及凈激，產生頭暈、胸悶、血壓降低，所以無菌室及凈化工作臺紫外線照射停止后，請稍等片刻，讓臭氧化工

36、作臺紫外線照射停止后，請稍等片刻，讓臭氧消散，方可進行實驗操作。消散，方可進行實驗操作。（四）滅菌的方法（四）滅菌的方法v4、過濾滅菌：以物理的方法除去介質中的微、過濾滅菌：以物理的方法除去介質中的微生物。常將空氣或液體中的微生物及雜質用生物。常將空氣或液體中的微生物及雜質用不同材料制成的薄膜濾器過濾得到無菌、無不同材料制成的薄膜濾器過濾得到無菌、無雜質的空氣或液體。雜質的空氣或液體。v濾過病毒的濾膜孔徑為濾過病毒的濾膜孔徑為25 100nm；濾過細濾過細菌的濾膜孔徑為菌的濾膜孔徑為0.220.45m。九、生產環(huán)境的空氣潔凈度監(jiān)測九、生產環(huán)境的空氣潔凈度監(jiān)測 根據(jù)根據(jù)GMP的有的有關規(guī)定，潔凈

37、關規(guī)定，潔凈室分為四個等室分為四個等級，即級，即100級、級、10，000級區(qū)、級區(qū)、100，000級和級和300，000級，級，各級別的要求各級別的要求如下：如下：潔凈度潔凈度級別級別塵粒最大允許數(shù)塵粒最大允許數(shù)/立方米立方米微生物最大允許數(shù)微生物最大允許數(shù)0.5m5m浮游菌浮游菌/立立方米方米沉降菌沉降菌/皿皿100級級3,50005110,000級級350,0002,0001003100,000級級3,500,00020,00050010300,000級級10,500,00060,0001,00015九、生產環(huán)境的空氣潔凈度監(jiān)測九、生產環(huán)境的空氣潔凈度監(jiān)測v浮游菌和沉降菌測試浮游菌和沉降

38、菌測試 我國對醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和控制區(qū)的浮游菌和我國對醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和控制區(qū)的浮游菌和沉降菌的測試，國家標準有明確規(guī)定。沉降菌的測試，國家標準有明確規(guī)定。九、生產環(huán)境的空氣潔凈度監(jiān)測九、生產環(huán)境的空氣潔凈度監(jiān)測v浮游菌測試：浮游菌測試： 采用浮游細菌采樣器采用浮游細菌采樣器v原理：根據(jù)顆粒撞擊原理，在抽氣泵作用下，把采樣空氣中的原理：根據(jù)顆粒撞擊原理，在抽氣泵作用下，把采樣空氣中的細菌分離出來?？諝庵屑毦话阍诩毦蛛x出來?？諝庵屑毦话阍?m左右，不同粒徑的顆粒左右，不同粒徑的顆粒有不同的沖擊慣性。當空氣通過狹縫加速后，氣流速度大，有不同的沖擊慣性。當空氣通過狹縫加速后，氣流速度大，0.5m以上的粒子，由于慣性沖擊到培養(yǎng)皿里的培養(yǎng)基上被粘以上的粒子，由于慣性沖擊到培養(yǎng)