實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本操作20081111

1、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù) 溫州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心溫州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心 為了確保實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確為了確保實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和可重復(fù)性，必須掌握規(guī)范的動(dòng)物實(shí)性和可重復(fù)性，必須掌握規(guī)范的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)。驗(yàn)操作技術(shù)。 嫻熟的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)和技巧，是實(shí)驗(yàn)研嫻熟的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)和技巧，是實(shí)驗(yàn)研究的保證。究的保證。 動(dòng)物具有自衛(wèi)能力，不會(huì)講話，不領(lǐng)人情，動(dòng)物具有自衛(wèi)能力，不會(huì)講話，不領(lǐng)人情，更不會(huì)自動(dòng)服從。更不會(huì)自動(dòng)服從。 減少動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)或傷害，避免實(shí)驗(yàn)人員減少動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)或傷害，避免實(shí)驗(yàn)人員出現(xiàn)意外和受傷。出現(xiàn)意外和受傷。 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備v理論準(zhǔn)備：

2、理論準(zhǔn)備：v了解動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)了解動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)v查閱關(guān)于實(shí)驗(yàn)方法的參考文獻(xiàn)查閱關(guān)于實(shí)驗(yàn)方法的參考文獻(xiàn)v制定研究計(jì)劃和方案制定研究計(jì)劃和方案v條件準(zhǔn)備：條件準(zhǔn)備：v動(dòng)物、儀器、器械、藥品動(dòng)物、儀器、器械、藥品v實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所和飼養(yǎng)場(chǎng)所實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所和飼養(yǎng)場(chǎng)所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定性別鑒定年齡的大致判斷妊娠檢查分組與編號(hào)本章主要內(nèi)容本章主要內(nèi)容常規(guī)采血方法給藥途徑與方法麻醉方法處死方法第一節(jié)第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定 原則：原則： 安靜環(huán)境安靜環(huán)境 動(dòng)作輕柔和熟練動(dòng)作輕柔和熟練 善待動(dòng)物：善待動(dòng)物： 多一份愛就多一份收獲多一份愛就多一份收獲小鼠小鼠大鼠大鼠豚鼠豚鼠家兔家兔狗狗貓貓猴猴

3、第二節(jié)第二節(jié) 性別鑒定性別鑒定 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)有雌雄各半、雌雄不拘等。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)有雌雄各半、雌雄不拘等。 性成熟后，雌雄動(dòng)物易區(qū)分：性成熟后，雌雄動(dòng)物易區(qū)分： 外生殖器外生殖器 第二性征第二性征 新生動(dòng)物？冬季天冷時(shí)的兔子？新生動(dòng)物？冬季天冷時(shí)的兔子？大鼠和小鼠兔、豚鼠第三節(jié)第三節(jié) 年齡的大致判斷年齡的大致判斷 提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)要有動(dòng)物出生和生長(zhǎng)記錄。提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)要有動(dòng)物出生和生長(zhǎng)記錄。根據(jù)卡片記錄來準(zhǔn)確判斷年齡。根據(jù)卡片記錄來準(zhǔn)確判斷年齡。 如無記錄則要根據(jù)該動(dòng)物的生長(zhǎng)曲線、牙如無記錄則要根據(jù)該動(dòng)物的生長(zhǎng)曲線、牙齒、爪子或者毛色特征來大致判斷。齒、爪子或者毛色特征來大致判斷。常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成年體重

4、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成年體重 動(dòng)物動(dòng)物 小鼠小鼠 大鼠大鼠 豚鼠豚鼠 家兔家兔 貓貓 狗狗 體重體重 18-28g 180-280g 350-650g 2-3kg 1.5-2.5kg 9-15kg 小鼠小鼠ICR生長(zhǎng)曲線CBA/J生長(zhǎng)曲線初生小鼠即可發(fā)聲，初生小鼠即可發(fā)聲，嗅覺和味覺敏感嗅覺和味覺敏感3日臍帶脫落，開始日臍帶脫落，開始長(zhǎng)毛并出現(xiàn)胡須長(zhǎng)毛并出現(xiàn)胡須46日雙耳聳立日雙耳聳立78日開始爬行，下門齒長(zhǎng)出，被毛濃密日開始爬行，下門齒長(zhǎng)出，被毛濃密911日有聽覺，被毛長(zhǎng)齊日有聽覺，被毛長(zhǎng)齊911日聽覺發(fā)育完全，被毛長(zhǎng)齊日聽覺發(fā)育完全，被毛長(zhǎng)齊1214日開眼，上門齒出，開始采食、飲水日開眼，上門齒出

5、，開始采食、飲水能跳躍，能抓取東西能跳躍，能抓取東西3周后可斷奶獨(dú)立生活周后可斷奶獨(dú)立生活雄鼠：6.90g雌鼠：6.40gSD生長(zhǎng)曲線大鼠大鼠初生仔鼠無毛、閉眼、耳孔閉合、6-7克耳朵張開開始長(zhǎng)毛被毛明顯8-10天下門齒長(zhǎng)出14-17天開眼19天第一對(duì)臼齒長(zhǎng)出21天第二對(duì)臼齒長(zhǎng)出、可以斷乳雄鼠：52g，雌鼠：50g豚鼠豚鼠 一般年幼豚鼠牙齒短而白，爪軟而短，眼睛圓亮，行一般年幼豚鼠牙齒短而白，爪軟而短，眼睛圓亮，行動(dòng)活潑，被毛有光澤，且緊貼身體動(dòng)活潑，被毛有光澤，且緊貼身體 。而老年豚鼠則相。而老年豚鼠則相反，牙齒和爪均較長(zhǎng)，眼睛朦朧，行動(dòng)遲緩。反，牙齒和爪均較長(zhǎng)，眼睛朦朧，行動(dòng)遲緩。 可根據(jù)

6、體重粗略地判斷年齡。同日齡豚鼠，雌性體重可根據(jù)體重粗略地判斷年齡。同日齡豚鼠，雌性體重略高于雄性。實(shí)驗(yàn)對(duì)年齡要求比較嚴(yán)格時(shí)，必須由卡略高于雄性。實(shí)驗(yàn)對(duì)年齡要求比較嚴(yán)格時(shí)，必須由卡片記錄提供準(zhǔn)確年齡。片記錄提供準(zhǔn)確年齡。日齡/d初生720306090120180體重/g50-115100-120150-200170-220240-300330-400400-470520-600兔兔年齡判斷的重要標(biāo)志：門齒和爪。年齡判斷的重要標(biāo)志：門齒和爪。門齒：門齒： 青年兔：潔白、短小、整齊。青年兔：潔白、短小、整齊。 老年兔：暗黃、厚長(zhǎng)、不整齊、破損。老年兔：暗黃、厚長(zhǎng)、不整齊、破損。趾爪：趾爪： 1歲，紅

7、多于白，歲，紅多于白， =1歲，紅色與白色相當(dāng)，歲，紅色與白色相當(dāng)， 1歲，白多于紅色。歲，白多于紅色。 另外，家兔皮薄而緊，眼神明亮，行動(dòng)活潑的為青年另外，家兔皮薄而緊，眼神明亮，行動(dòng)活潑的為青年兔；皮厚而松，眼神頹廢，行動(dòng)遲緩的為老年兔。兔；皮厚而松，眼神頹廢，行動(dòng)遲緩的為老年兔。狗狗 主要依據(jù)牙齒的生長(zhǎng)情況、磨損程度、外形、主要依據(jù)牙齒的生長(zhǎng)情況、磨損程度、外形、 顏顏色等來綜合鑒定色等來綜合鑒定: 2030 天開始長(zhǎng)牙，第天開始長(zhǎng)牙，第 10 個(gè)月牙個(gè)月牙 齒已全部長(zhǎng)出。齒已全部長(zhǎng)出。 隨著年齡的增長(zhǎng)，乳齒脫落而長(zhǎng)出恒齒。隨著年齡的增長(zhǎng)，乳齒脫落而長(zhǎng)出恒齒。2-4個(gè)月，更個(gè)月，更換門齒

8、，換門齒，56 個(gè)月更換犬齒。個(gè)月更換犬齒。 幼年狗的牙齒潔白而無磨損，幼年狗的牙齒潔白而無磨損，12 歲時(shí)，下歲時(shí)，下 頜的前門頜的前門齒逐漸被磨損，齒逐漸被磨損，23 歲時(shí)，前門齒的尖銳端被磨損而消歲時(shí)，前門齒的尖銳端被磨損而消失。而上頜失。而上頜 前門齒在前門齒在 23 歲時(shí)才開始磨損。在歲時(shí)才開始磨損。在 45 歲歲時(shí)，其尖銳端也被磨損消失，且時(shí)，其尖銳端也被磨損消失，且 牙齒發(fā)黃。到牙齒發(fā)黃。到 1012 歲時(shí)，牙根全部磨損。歲時(shí)，牙根全部磨損。年齡年齡 犬齒更換和磨損情況犬齒更換和磨損情況2 2個(gè)月以下個(gè)月以下僅有乳齒僅有乳齒( (白、細(xì)、尖白、細(xì)、尖) )2 24 4個(gè)月個(gè)月更換

9、門齒更換門齒4 46 6個(gè)月個(gè)月更換犬齒更換犬齒( (白，牙尖圓鈍白，牙尖圓鈍) )6 61010個(gè)月個(gè)月更換臼齒更換臼齒1 1歲歲牙長(zhǎng)齊，潔白光亮。門齒有尖突牙長(zhǎng)齊，潔白光亮。門齒有尖突2 2歲歲下門齒尖突部分磨乎下門齒尖突部分磨乎3 3歲歲上、下門齒尖突大部分磨平上、下門齒尖突大部分磨平4 45 5歲歲上、下門齒開始磨損呈微斜面，并發(fā)黃上、下門齒開始磨損呈微斜面，并發(fā)黃6 68 8歲歲門齒磨成齒根，犬齒發(fā)黃、磨損門齒磨成齒根，犬齒發(fā)黃、磨損9 91010歲歲唇部、胡須發(fā)白唇部、胡須發(fā)白1010歲以上歲以上門齒磨損，犬齒不齊全，牙根黃，唇邊胡須全白門齒磨損，犬齒不齊全，牙根黃，唇邊胡須全白第

10、四節(jié)第四節(jié) 妊娠檢查妊娠檢查 臨床檢查和實(shí)驗(yàn)室檢查：臨床檢查和實(shí)驗(yàn)室檢查： 外部檢查法外部檢查法 摸胎法摸胎法 陰道檢查法：大小鼠、豚鼠、地鼠陰道檢查法：大小鼠、豚鼠、地鼠 直腸檢查法：大動(dòng)物直腸檢查法：大動(dòng)物 超聲波檢查法超聲波檢查法 孕酮含量測(cè)定法孕酮含量測(cè)定法 青蛙試驗(yàn)：猴青蛙試驗(yàn)：猴大小鼠陰道涂片檢查陰栓檢查第五節(jié)第五節(jié) 分組與編號(hào)分組與編號(hào) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前，必須對(duì)動(dòng)物進(jìn)行隨機(jī)分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前，必須對(duì)動(dòng)物進(jìn)行隨機(jī)分組，再編號(hào)標(biāo)記。組，再編號(hào)標(biāo)記。 隨機(jī)化分組：避免人為影響隨機(jī)化分組：避免人為影響一、分組一、分組 例例1：將：將14只小鼠隨機(jī)分成兩組。只小鼠隨機(jī)分成兩組。 先將小鼠編為先將小

11、鼠編為114號(hào)，號(hào)， 在隨機(jī)數(shù)字表上任點(diǎn)一數(shù)，按任意方在隨機(jī)數(shù)字表上任點(diǎn)一數(shù)，按任意方向連續(xù)抄向連續(xù)抄14個(gè)隨機(jī)數(shù)字。或者用計(jì)算器個(gè)隨機(jī)數(shù)字。或者用計(jì)算器產(chǎn)生隨機(jī)數(shù)字。產(chǎn)生隨機(jī)數(shù)字。 編排如下：編排如下：動(dòng)物編號(hào)動(dòng)物編號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14隨機(jī)數(shù)日隨機(jī)數(shù)日 16 22 77 94 39 49 54 43 54 82 17 37 93 23歸歸 組組 B B A B A A B A B B A A A A 奇數(shù)代表奇數(shù)代表A織，偶數(shù)代表織，偶數(shù)代表B組組 A組：組： 3 5 6 8 11 12 13 14 B組：組： 1 2 4 7 9 10 調(diào)整分

12、組：接剛才隨機(jī)數(shù)字調(diào)整分組：接剛才隨機(jī)數(shù)字23繼續(xù)抄表得繼續(xù)抄表得隨機(jī)數(shù)字隨機(jī)數(shù)字78，用，用78除以除以8（因?yàn)樾枰眩ㄒ驗(yàn)樾枰袮組組的的8個(gè)數(shù)字調(diào)整掉一個(gè)），得余數(shù)個(gè)數(shù)字調(diào)整掉一個(gè)），得余數(shù)6，所以把，所以把A組的第組的第6個(gè)動(dòng)物，即個(gè)動(dòng)物，即12號(hào)動(dòng)物調(diào)整到號(hào)動(dòng)物調(diào)整到B組。組。 最終分組最終分組A組：組： 3 5 6 8 11 13 14B組：組： 1 2 4 7 9 10 12 注意：注意： 如果如果A組多組多3個(gè)，則再取個(gè)，則再取1個(gè)隨機(jī)數(shù)字，除以個(gè)隨機(jī)數(shù)字，除以7。 如果除盡，則寫下除數(shù)當(dāng)做余數(shù)。如果除盡，則寫下除數(shù)當(dāng)做余數(shù)。例例2：12只大鼠隨機(jī)分為只大鼠隨機(jī)分為3組組大鼠編

13、號(hào)大鼠編號(hào)112在隨機(jī)數(shù)字表上任點(diǎn)一數(shù)，按任意方向連續(xù)抄在隨機(jī)數(shù)字表上任點(diǎn)一數(shù)，按任意方向連續(xù)抄12個(gè)個(gè)隨機(jī)數(shù)字。隨機(jī)數(shù)字。每個(gè)數(shù)分別用每個(gè)數(shù)分別用3除，記錄余數(shù)（整除記下除，記錄余數(shù)（整除記下3） 根據(jù)余數(shù)分組根據(jù)余數(shù)分組大鼠編號(hào)：大鼠編號(hào)：1， 2， 3， 4， 5， 6， 7， 8， 9， 10， 11， 12隨機(jī)數(shù)字：隨機(jī)數(shù)字：08，27，01，50，15，29，39，39，43，79， 69，10余數(shù)：余數(shù)： 2， 3， 1， 2， 3， 2， 3， 3， 1， 1， 3， 1組別：組別： B， C， A， B， C， B， C， C， A， A，C， A A：3，9，10，12 B

14、；1， 4， 6 C：2， 5， 7， 8，11 調(diào)整分組：接剛才隨機(jī)數(shù)字調(diào)整分組：接剛才隨機(jī)數(shù)字10繼續(xù)抄表得隨機(jī)數(shù)繼續(xù)抄表得隨機(jī)數(shù)字字61，用，用61除以除以5（因?yàn)樾枰眩ㄒ驗(yàn)樾枰袰組的組的5個(gè)數(shù)字調(diào)個(gè)數(shù)字調(diào)整掉一個(gè)），得余數(shù)整掉一個(gè)），得余數(shù)1，所以把，所以把C組的第組的第1個(gè)動(dòng)物，個(gè)動(dòng)物，即即2號(hào)動(dòng)物調(diào)整到號(hào)動(dòng)物調(diào)整到B組。組。 最終分組最終分組 A：3，9，10，12 B；1， 2 ，4，6 C：5，7，8，11例例2：6只大鼠隨機(jī)將每只分為只大鼠隨機(jī)將每只分為1組組大鼠編號(hào)大鼠編號(hào)16 在隨機(jī)數(shù)字表上任點(diǎn)一數(shù)，按任意方向連續(xù)抄在隨機(jī)數(shù)字表上任點(diǎn)一數(shù)，按任意方向連續(xù)抄6個(gè)隨機(jī)數(shù)字

15、。個(gè)隨機(jī)數(shù)字。每個(gè)數(shù)分別用每個(gè)數(shù)分別用6、5、4、3、2、1除，記錄余數(shù)（整除記下除數(shù)）除，記錄余數(shù)（整除記下除數(shù)） 根據(jù)余數(shù)分組根據(jù)余數(shù)分組:余數(shù)余數(shù)3則把則把C記下；記下； 余數(shù)余數(shù)1 ，則把剩下的第，則把剩下的第1個(gè)字母?jìng)€(gè)字母A記下；第記下；第3個(gè)余數(shù)個(gè)余數(shù)1，把剩下的第，把剩下的第1個(gè)字母?jìng)€(gè)字母B記下記下大鼠編號(hào)：大鼠編號(hào)：1， 2， 3， 4， 5， 6隨機(jī)數(shù)字：隨機(jī)數(shù)字：33，46，10，52，68，07除數(shù)：除數(shù)： 6， 5， 4， 3， 2， 1 余數(shù)：余數(shù)： 3， 1， 2， 1， 2， 1，A組別：組別：BCDEF二、編號(hào)和標(biāo)記二、編號(hào)和標(biāo)記1、染色法：淺色動(dòng)物、染色法：淺

16、色動(dòng)物 3.5-5苦味酸溶液（黃色）苦味酸溶液（黃色） 0.5%中性紅或堿性品紅溶液（紅色）中性紅或堿性品紅溶液（紅色） 2硝酸銀溶液（咖啡色，涂后光照硝酸銀溶液（咖啡色，涂后光照10分鐘）分鐘） 煤焦油酒精溶液（黑色）煤焦油酒精溶液（黑色） 龍膽紫溶液（紫色）龍膽紫溶液（紫色）2、打耳孔法：小型動(dòng)物、打耳孔法：小型動(dòng)物 3、剪剪趾趾法：法：小小型型動(dòng)動(dòng)物物139號(hào)？4、剪尾法：大、小鼠，僅限與兩組間區(qū)分、剪尾法：大、小鼠，僅限與兩組間區(qū)分5、針刺法、針刺法(紋身紋身) ：刺號(hào)鉗，中、大型動(dòng)物：刺號(hào)鉗，中、大型動(dòng)物6、號(hào)牌法：耳標(biāo)簽、項(xiàng)圈、腿圈，中、大、號(hào)牌法：耳標(biāo)簽、項(xiàng)圈、腿圈，中、大 型動(dòng)

17、物型動(dòng)物7、剪毛法：大動(dòng)物、剪毛法：大動(dòng)物8、 籠子標(biāo)號(hào)籠子標(biāo)號(hào)三、去毛三、去毛1、剪毛：彎頭剪毛剪、剪毛：彎頭剪毛剪2、拔毛：大小鼠尾靜脈、家兔耳緣靜脈注射、拔毛：大小鼠尾靜脈、家兔耳緣靜脈注射3、剃毛：將剃毛部位先用剪刀粗剪一遍，蘸、剃毛：將剃毛部位先用剪刀粗剪一遍，蘸溫肥皂水潤(rùn)濕，用剃刀順著被毛方向剃毛；溫肥皂水潤(rùn)濕，用剃刀順著被毛方向剃毛；如用電動(dòng)剃毛推剪，則逆被毛向剃毛。如用電動(dòng)剃毛推剪，則逆被毛向剃毛。4、化學(xué)脫毛：、化學(xué)脫毛：常用脫毛劑常用脫毛劑8%硫化鈉水溶液硫化鈉水溶液硫化鈉硫化鈉3份，洗衣粉份，洗衣粉1份、淀粉份、淀粉7份，加水份，加水調(diào)成糊狀調(diào)成糊狀硫化鋇硫化鋇50克，氧

18、化鋅克，氧化鋅25克，淀粉克，淀粉25克，克，加水加水100毫升調(diào)成糊狀毫升調(diào)成糊狀硫化鈉硫化鈉10克，生石灰克，生石灰15克，加水到克，加水到100毫毫升，適合犬和其他大動(dòng)物。升，適合犬和其他大動(dòng)物。第六節(jié)第六節(jié) 常規(guī)采血方法常規(guī)采血方法 正式實(shí)驗(yàn)前后，常需采血測(cè)定生化指標(biāo)。正式實(shí)驗(yàn)前后，常需采血測(cè)定生化指標(biāo)。1、大小鼠：、大小鼠：v眶靜脈叢（竇）：眶靜脈叢（竇）： 少量多次采大小鼠血。少量多次采大小鼠血。 小鼠小鼠0.20.3ml，大鼠，大鼠0.40.6mlv摘眼球：用于一次大量采小鼠血，可得到摘眼球：用于一次大量采小鼠血，可得到45體重的血量。體重的血量。v尾靜脈：用于少量多次采大小鼠血

19、。尾靜脈：用于少量多次采大小鼠血?？綮o脈叢采血眶靜脈叢采血摘眼球采血尾靜脈采血v剪頭：用于一次性大量采小鼠血，可得到剪頭：用于一次性大量采小鼠血，可得到0.51.0ml的血量的血量v大血管：包括頸動(dòng)脈（靜脈），股動(dòng)脈大血管：包括頸動(dòng)脈（靜脈），股動(dòng)脈（靜脈），腋下動(dòng)脈（靜脈），腹主動(dòng)脈。（靜脈），腋下動(dòng)脈（靜脈），腹主動(dòng)脈。此方法不常用于小鼠采血，而多用于大鼠此方法不常用于小鼠采血，而多用于大鼠一次性大量采血。可得一次性大量采血?？傻?ml左右血量。左右血量。v心臟采血：小鼠少用，可用于大鼠一次性心臟采血：小鼠少用，可用于大鼠一次性（開胸，（開胸，右心室右心室）或多次采血（不開胸）。）或多次采

20、血（不開胸）。鼠斷頭器2 、家兔、家兔 ：v耳緣靜脈：可反復(fù)采血，每次耳緣靜脈：可反復(fù)采血，每次510ml。v耳中央靜脈：可反復(fù)采血，每次耳中央靜脈：可反復(fù)采血，每次1015ml。v心臟采血心臟采血v可用于一次性（開胸）或可用于一次性（開胸）或 多次采血（不開多次采血（不開胸）。胸）。v一次性開胸采血可得到一次性開胸采血可得到80100ml血量。血量。v頸動(dòng)靜脈采血：頸動(dòng)靜脈采血：v用于一次性采血，需要手術(shù)，可得血量用于一次性采血，需要手術(shù)，可得血量8010ml。3、豚鼠：、豚鼠：v心臟采血：可用于一次性（開胸）或多心臟采血：可用于一次性（開胸）或多次采血（不開胸）。次采血（不開胸）。v一次性

21、開胸采血可得到一次性開胸采血可得到510ml血量。血量。v背跖靜脈采血：用于少量反復(fù)采血。背跖靜脈采血：用于少量反復(fù)采血。4、犬貓：前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢外側(cè)小隱、犬貓：前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢外側(cè)小隱靜脈。也可頸靜脈（動(dòng)脈）或心臟采血靜脈。也可頸靜脈（動(dòng)脈）或心臟采血5、豬：前腔靜脈采血或耳大靜脈采血、豬：前腔靜脈采血或耳大靜脈采血6、羊：頸靜脈采血、羊：頸靜脈采血7、猴：前肢頭靜脈、后肢皮下靜脈或耳緣、猴：前肢頭靜脈、后肢皮下靜脈或耳緣靜脈等。靜脈等。8、禽類：翼下靜脈、禽類：翼下靜脈常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的最大安全采血量與最小致死采血量動(dòng)物種類最大安全采血量(mL)最小致死采血量(mL)小鼠0.1 0.

22、3大鼠 1 2豚鼠 5 10家兔 10 40 狗 50 300 猴 15 60采血場(chǎng)所有充足的光線；室溫夏季最好保持采血場(chǎng)所有充足的光線；室溫夏季最好保持在在2528，冬季，冬季，1520為宜；為宜；采血用具有采用部位一般需要進(jìn)行消毒；采血用具有采用部位一般需要進(jìn)行消毒；采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥；采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥；若需抗凝全血，在注射器或試管內(nèi)需預(yù)先加若需抗凝全血，在注射器或試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑。入抗凝劑。v常用抗凝劑：常用抗凝劑： 肝素：抑制凝血酶活力，阻止血小板凝集。肝素：抑制凝血酶活力，阻止血小板凝集。純品肝素純品肝素1mg125U，10U20U抗抗1m

23、l血血凝集，但通常應(yīng)用凝集，但通常應(yīng)用23倍劑量。倍劑量。 用法：可配成用法：可配成1%肝素溶液，用時(shí)取肝素溶液，用時(shí)取0.1ml于試管內(nèi)，于試管內(nèi)，100烘干，每管可抗凝烘干，每管可抗凝510ml血?；蛴醚?。或用1%肝素溶液濕潤(rùn)采血注肝素溶液濕潤(rùn)采血注射器。射器。 肝素可改變蛋白質(zhì)等電點(diǎn)，當(dāng)用鹽析法分肝素可改變蛋白質(zhì)等電點(diǎn)，當(dāng)用鹽析法分離蛋白作分類測(cè)定時(shí)，不可用肝素抗凝。離蛋白作分類測(cè)定時(shí)，不可用肝素抗凝。 枸櫞酸鈉：使凝血必需的鈣離子失活。枸櫞酸鈉：使凝血必需的鈣離子失活。常用常用35%水溶液，堿性較強(qiáng)。水溶液，堿性較強(qiáng)。 草酸鹽合劑：草酸銨草酸鹽合劑：草酸銨1.2g，草酸鉀，草酸鉀0.8

24、g，福爾馬林福爾馬林1.0ml，加蒸餾水至，加蒸餾水至100ml。使。使凝血必需的鈣離子失活。每毫升血加草凝血必需的鈣離子失活。每毫升血加草酸鹽合劑酸鹽合劑0.1ml。 氟化鈉：每毫升血加氟化鈉：每毫升血加6mg。其他體液采集其他體液采集1、胸水、腹水采集：穿刺、胸水、腹水采集：穿刺2、消化液采集：唾液，胃液，胰液，膽汁、消化液采集：唾液，胃液，胰液，膽汁3、精液采集：中、大動(dòng)物用假陰道，小動(dòng)、精液采集：中、大動(dòng)物用假陰道，小動(dòng)物穿刺附睪來采集精液。物穿刺附睪來采集精液。4、腦脊液采集：手術(shù)或小腦延髓池抽取、腦脊液采集：手術(shù)或小腦延髓池抽取5、骨髓采集：大動(dòng)物活體穿刺，小動(dòng)物處、骨髓采集：大動(dòng)

25、物活體穿刺，小動(dòng)物處死后取股骨或胸骨骨髓死后取股骨或胸骨骨髓6、尿液采集：、尿液采集：v代謝籠收集代謝籠收集v導(dǎo)尿管采集導(dǎo)尿管采集v膀胱穿刺膀胱穿刺v壓迫排尿壓迫排尿第七節(jié)第七節(jié) 給藥途徑與方法給藥途徑與方法 在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?dòng)物種類、藥物類型來決定動(dòng)物目的、動(dòng)物種類、藥物類型來決定動(dòng)物的給藥途徑與方法。的給藥途徑與方法。1、自動(dòng)口服：加入飼料或飲水、自動(dòng)口服：加入飼料或飲水2、投喂藥片：掰開口，放到舌根部、投喂藥片：掰開口，放到舌根部3、灌胃（、灌胃（i.g)4、直腸給藥、直腸給藥 5、呼吸道給藥、呼吸道給藥 6、滴鼻、滴鼻 7、點(diǎn)眼

26、、點(diǎn)眼8、經(jīng)皮膚給藥：常用于檢測(cè)藥物、毒物、經(jīng)皮膚給藥：常用于檢測(cè)藥物、毒物、化妝品等的透皮吸收、局部作用、致敏作化妝品等的透皮吸收、局部作用、致敏作用等。家兔和豚鼠選擇脊柱兩側(cè)皮膚，大用等。家兔和豚鼠選擇脊柱兩側(cè)皮膚，大小鼠常采取浸尾方式。小鼠常采取浸尾方式。 9、皮內(nèi)注射、皮內(nèi)注射(i.d)：一般用于接種或過敏實(shí)：一般用于接種或過敏實(shí)驗(yàn)。將藥液注射在真皮和表皮之間。驗(yàn)。將藥液注射在真皮和表皮之間。10、皮下注射、皮下注射(s.c)： 頸背部、腋下、腿、頸背部、腋下、腿、側(cè)腹。側(cè)腹。11、肌肉注射、肌肉注射(i.m)：股內(nèi)側(cè)部肌肉。股內(nèi)側(cè)部肌肉。 12、腹腔注射、腹腔注射(i.p)：下腹部腹

27、中線兩側(cè)：下腹部腹中線兩側(cè)13、靜脈注射、靜脈注射(i.v)：v 小鼠：尾靜脈小鼠：尾靜脈v 大鼠：尾靜脈、陰莖靜脈、舌下靜脈、大鼠：尾靜脈、陰莖靜脈、舌下靜脈、淺背側(cè)跖靜脈淺背側(cè)跖靜脈v大小鼠尾部有大小鼠尾部有4對(duì)動(dòng)靜脈，其中背腹各有對(duì)動(dòng)靜脈，其中背腹各有1根動(dòng)脈、兩側(cè)各有根動(dòng)脈、兩側(cè)各有1根靜脈很明顯。根靜脈很明顯。尾靜脈注射陰莖靜脈注射陰莖靜脈注射舌下靜脈注射舌下靜脈注射猴的后肢皮下靜脈注射猴的后肢皮下靜脈注射淺背側(cè)跖靜脈淺背側(cè)跖靜脈v豚鼠：淺背側(cè)跖靜脈、耳靜脈注射豚鼠：淺背側(cè)跖靜脈、耳靜脈注射v家兔：耳靜脈注射家兔：耳靜脈注射v豬：耳緣靜脈豬：耳緣靜脈v貓、狗：前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢外側(cè)

28、小隱靜脈貓、狗：前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢外側(cè)小隱靜脈注射注射14、腦腔注射、腦腔注射15、關(guān)節(jié)腔注射：、關(guān)節(jié)腔注射：16、椎管內(nèi)注射：注射入蛛網(wǎng)膜下腔、椎管內(nèi)注射：注射入蛛網(wǎng)膜下腔17、淋巴囊內(nèi)注射：蛙和蟾蜍、淋巴囊內(nèi)注射：蛙和蟾蜍注射途徑注射途徑小鼠小鼠大鼠大鼠豚鼠豚鼠兔兔狗狗腹腔腹腔0.21.0 1325510515肌肉肌肉0.10.2 0.20.5 0.20.5 0.5125靜脈靜脈0.20.5 1215310515皮下皮下0.10.5 0.510.5213310幾種動(dòng)物不同給藥途徑的常用注射量（毫升） 第八節(jié)第八節(jié) 麻醉方法麻醉方法 對(duì)動(dòng)物實(shí)施麻醉，是動(dòng)物福利的措施。對(duì)動(dòng)物實(shí)施麻醉，是動(dòng)物

29、福利的措施。 如不實(shí)施麻醉，動(dòng)物嚴(yán)重應(yīng)激，影響實(shí)如不實(shí)施麻醉，動(dòng)物嚴(yán)重應(yīng)激，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，甚至死亡。驗(yàn)結(jié)果，甚至死亡。 動(dòng)物清醒狀態(tài)下，可能會(huì)傷及人員。動(dòng)物清醒狀態(tài)下，可能會(huì)傷及人員。1、麻醉方法、麻醉方法：v全麻全麻 吸入麻醉，靜脈注射、腹腔注射。吸入麻醉，靜脈注射、腹腔注射。v局麻局麻 浸潤(rùn)麻醉。根據(jù)手術(shù)，按皮下、筋膜、浸潤(rùn)麻醉。根據(jù)手術(shù)，按皮下、筋膜、肌肉、腹膜、骨膜等順序逐步深入注射肌肉、腹膜、骨膜等順序逐步深入注射到術(shù)野周圍。到術(shù)野周圍。常用麻醉劑的用法及劑量 麻醉劑 動(dòng)物種類 給藥途徑 劑量(mg/kg) 常用濃度() 戊巴比妥鈉犬、兔靜脈303 腹腔 4050 3大鼠、小鼠、豚鼠

30、 腹腔 4050 2硫噴妥鈉 犬、兔 靜脈 15-20 2 大鼠 腹腔 40 1 小鼠 腹腔 15-20 1氯胺酮犬、貓 腹腔 10-40 10 大鼠、小鼠 腹腔 100200 10 氯醛糖 兔 靜脈 80-100 2 大鼠 腹腔 50 2烏拉坦 兔 靜脈750-1000 30 大鼠、小鼠 皮下或肌肉 800-1000 20 使用全身麻醉劑的注意事項(xiàng)使用全身麻醉劑的注意事項(xiàng) 動(dòng)物禁食動(dòng)物禁食101012h12h，麻醉前動(dòng)物禁用瀉藥麻醉前動(dòng)物禁用瀉藥 ，麻麻醉后動(dòng)物必須保持呼吸道通暢和暴露組織醉后動(dòng)物必須保持呼吸道通暢和暴露組織( ( 眼眼球、腸等球、腸等 ) ) 的濕潤(rùn)和營(yíng)養(yǎng)。的濕潤(rùn)和營(yíng)養(yǎng)。 動(dòng)物在麻醉期體溫容易下降動(dòng)物在麻醉期體溫容易下降，要采取保溫措施。要采取保溫措施。 注射麻醉劑必須緩慢注射麻醉劑必須緩慢，同時(shí)觀察肌肉緊張性、同時(shí)觀察肌肉緊張性、角膜反射和對(duì)皮膚夾捏的反應(yīng)角膜反射和對(duì)皮膚夾捏的反應(yīng)，當(dāng)這些活動(dòng)明當(dāng)這些活動(dòng)明顯減弱或消失時(shí)顯減弱或消失時(shí)，立即停止注射。立即停止注射。 配制的藥液濃度要適中配制的藥液濃度要適中，不可過高不可過高，以免麻醉以免麻醉過急過急；也不能過低也不能過低，以減少注人溶液的體積。以減少注人溶液的體積。 犬、豬、猴等大動(dòng)物可在麻醉前給予一些藥物犬、豬、猴