藥物定量分析與分析方法的效能指標(biāo)

1、第三章第三章 藥物定量分析與分析方法藥物定量分析與分析方法的效能指標(biāo)的效能指標(biāo)第一節(jié)第一節(jié) 定量分析樣品的前處理方法定量分析樣品的前處理方法 概述概述 1.1.為什么要對(duì)定量分析的樣品進(jìn)行前處理？為什么要對(duì)定量分析的樣品進(jìn)行前處理？ 含鹵素有機(jī)藥物含鹵素有機(jī)藥物 R-X （F，Cl, Br, I ） 金屬有機(jī)藥物金屬有機(jī)藥物 R-O-Me（有機(jī)酸或酚的（有機(jī)酸或酚的 含金屬有機(jī)藥物含金屬有機(jī)藥物 金屬鹽；結(jié)合不牢固）金屬鹽；結(jié)合不牢固） 有機(jī)金屬藥物有機(jī)金屬藥物 R-Me （結(jié)合牢固）（結(jié)合牢固） 2. 常用的處理方法常用的處理方法 不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 藥物分析中常用

2、的分析方法藥物分析中常用的分析方法 經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法1.不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法：不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法： 直接測(cè)定法、水解后測(cè)定法、氧化還原后測(cè)定直接測(cè)定法、水解后測(cè)定法、氧化還原后測(cè)定法法2.經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法：經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法： 濕法破壞、干法破壞、氧瓶燃燒法濕法破壞、干法破壞、氧瓶燃燒法一、含鹵素有機(jī)藥物的分析一、含鹵素有機(jī)藥物的分析 含鹵素有機(jī)藥物系指藥物分子結(jié)含鹵素有機(jī)藥物系指藥物分子結(jié)構(gòu)中所含鹵素直接與芳環(huán)或脂肪鏈相構(gòu)中所含鹵素直接與芳環(huán)或脂肪鏈相連者，而不包括某些有機(jī)藥物的鹵酸連者，而不包括某些有機(jī)藥物的鹵酸鹽或氫鹵酸鹽鹽或氫鹵酸鹽結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

3、：CX（一）鹵原子的活潑性（一）鹵原子的活潑性1. 1. 鹵原子與碳原子直接相連，鹵原鹵原子與碳原子直接相連，鹵原子的活潑性和它直接相連的烴基的結(jié)子的活潑性和它直接相連的烴基的結(jié)構(gòu)有很大關(guān)系構(gòu)有很大關(guān)系（1）乙烯型鹵和芳鹵）乙烯型鹵和芳鹵 不活潑不活潑CH2CH XX（2）烯丙型鹵和芐鹵）烯丙型鹵和芐鹵 活潑活潑CH2XCH2CH CH2X（3）鹵代烷型）鹵代烷型 介于兩者之間介于兩者之間CH2CH (CH2)nX n22. 分子中所含鹵原子的個(gè)數(shù)分子中所含鹵原子的個(gè)數(shù) 分子中所含鹵原子的個(gè)數(shù)越多，分子中所含鹵原子的個(gè)數(shù)越多，活潑性越強(qiáng)，特別是同一碳上含多個(gè)活潑性越強(qiáng)，特別是同一碳上含多個(gè)鹵原

4、子或一個(gè)苯環(huán)上含多個(gè)鹵原子時(shí)，鹵原子或一個(gè)苯環(huán)上含多個(gè)鹵原子時(shí)，活潑性增強(qiáng)更加明顯活潑性增強(qiáng)更加明顯3. 鹵素的種類鹵素的種類IBrClF結(jié)合的牢固程度結(jié)合的牢固程度鹽酸胺碘酮鹽酸胺碘酮OCH2CH2CH2CH3COOCH2CH2N(C2H5)2IIHClHNNFNC2H5OCOOH諾氟沙星諾氟沙星（二）含鹵素有機(jī)藥物的分析（二）含鹵素有機(jī)藥物的分析XXC適當(dāng)?shù)奶幚碇苯踊亓骱鬁y(cè)定法直接回流后測(cè)定法堿性或酸性還原后測(cè)定法堿性或酸性還原后測(cè)定法氧瓶燃燒分解后測(cè)定法氧瓶燃燒分解后測(cè)定法1. 直接回流后測(cè)定法直接回流后測(cè)定法 本法是將含鹵素有機(jī)藥物溶于適當(dāng)本法是將含鹵素有機(jī)藥物溶于適當(dāng)溶劑（如乙醇）中

5、，加入氫氧化鈉溶溶劑（如乙醇）中，加入氫氧化鈉溶液（及一定量過(guò)量的硝酸銀滴定液）液（及一定量過(guò)量的硝酸銀滴定液）后，加熱回流使其水解，將有機(jī)結(jié)合后，加熱回流使其水解，將有機(jī)結(jié)合的鹵素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)機(jī)的鹵素離子，然后的鹵素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)機(jī)的鹵素離子，然后采用銀量法（采用銀量法（Volhard法）測(cè)定。法）測(cè)定。 本法適用于含鹵素有機(jī)藥物結(jié)構(gòu)本法適用于含鹵素有機(jī)藥物結(jié)構(gòu)中鹵素中鹵素原子結(jié)合不牢固的藥物（如鹵原子結(jié)合不牢固的藥物（如鹵原子和脂肪碳原子相連者）。原子和脂肪碳原子相連者）。 原理原理 三氯叔丁醇在氫氧化鈉溶液中三氯叔丁醇在氫氧化鈉溶液中加熱回流水解，氯元素全部轉(zhuǎn)變成氯加熱回流水解，氯元素全部轉(zhuǎn)變成氯

6、化鈉，然后用化鈉，然后用剩余剩余滴定法，即于水解滴定法，即于水解液中加硝酸酸化，再加入定量液中加硝酸酸化，再加入定量過(guò)量過(guò)量的的硝酸銀滴定液，使硝酸銀滴定液，使Cl-生成生成AgCl沉淀，沉淀，過(guò)量的硝酸銀，以過(guò)量的硝酸銀，以Fe3+為指示劑，用為指示劑，用硫氰酸銨液硫氰酸銨液回滴回滴定。定。 例三氯叔丁醇的測(cè)定例三氯叔丁醇的測(cè)定 ChP（2000）CCl3 C(CH3)2 OH + 4NaOH 回流回流(CH3)2 CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2ONaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 AgNO3 + NH4SCNAgSCN + NH4NO3（淡棕紅色）（淡棕

7、紅色）(Ksp=1.561010 )(Ksp=1.010 12 )Fe3+ + SCN Fe (SCN) 2+ 2. 堿性或酸性還原后測(cè)定法堿性或酸性還原后測(cè)定法 本法是將含鹵素有機(jī)藥物在堿性或本法是將含鹵素有機(jī)藥物在堿性或酸性下，加還原劑（如鋅粉）加熱回酸性下，加還原劑（如鋅粉）加熱回流，藥物產(chǎn)生還原裂解反應(yīng)，使有機(jī)流，藥物產(chǎn)生還原裂解反應(yīng)，使有機(jī)結(jié)合的鹵素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)機(jī)的鹵素離子，結(jié)合的鹵素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)機(jī)的鹵素離子，然后采用銀量法（然后采用銀量法（Fajans法）測(cè)定。法）測(cè)定。 本法適用于測(cè)定結(jié)構(gòu)中碘與苯環(huán)本法適用于測(cè)定結(jié)構(gòu)中碘與苯環(huán)直接相連，且一個(gè)苯環(huán)上含多個(gè)碘原直接相連，且一個(gè)苯環(huán)上含多個(gè)碘

8、原子的含鹵素有機(jī)藥物子的含鹵素有機(jī)藥物。 （1） 堿性還原后測(cè)定法堿性還原后測(cè)定法例例 泛影酸的測(cè)定泛影酸的測(cè)定 ChP (2000) 取本品約取本品約0.4g，精密稱定，精密稱定，加氫氧化鈉溶加氫氧化鈉溶液液30ml與鋅粉與鋅粉1.0g，加熱回流，加熱回流30min，放冷，放冷，冷凝管用少量水洗滌，濾過(guò)，燒瓶與濾器用水冷凝管用少量水洗滌，濾過(guò)，燒瓶與濾器用水洗滌洗滌3次，每次次，每次15ml，洗液與濾液合并，加冰，洗液與濾液合并，加冰醋酸醋酸5ml與曙紅鈉指示液與曙紅鈉指示液5滴，用硝酸銀滴定液滴，用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定。每滴定。每1ml硝酸銀滴定液硝酸銀滴定液(0.1mol

9、/L)相當(dāng)于相當(dāng)于20.46mg的的C11H9 I 3N2O4。COOHINHCOCH3IIH3COCHN+ 11NaOH + Zn回流回流COONaN H2 H2N+ 3NaI + 2CH3COONa+ 2Na2ZnO2 + H2O （2）酸性還原后測(cè)定法酸性還原后測(cè)定法 取本品的干燥品約取本品的干燥品約0.4g，精密稱定，精密稱定，加鋅加鋅粉粉1g及冰醋酸及冰醋酸10ml，加熱回流，加熱回流30min，放冷，放冷，冷凝管用水冷凝管用水30ml洗滌，用脫脂棉過(guò)濾，燒瓶與洗滌，用脫脂棉過(guò)濾，燒瓶與脫脂棉用水洗滌脫脂棉用水洗滌2次，每次次，每次20ml，洗液與濾液，洗液與濾液合并，加四溴酚酞乙酯

10、指示液合并，加四溴酚酞乙酯指示液1ml ，用硝酸銀，用硝酸銀滴定液滴定液(0.1mol/L)滴定。終點(diǎn)時(shí)黃色沉淀變?yōu)榫G滴定。終點(diǎn)時(shí)黃色沉淀變?yōu)榫G色。每色。每1ml硝酸銀滴定液硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于19.031mg的的C11H12 I 3NO2。例例 碘番酸的測(cè)定碘番酸的測(cè)定 JP (13)3. 氧瓶燃燒分解后測(cè)定法氧瓶燃燒分解后測(cè)定法 （1）原理）原理 氧瓶燃燒法：氧瓶燃燒法：將有機(jī)藥物放入將有機(jī)藥物放入充滿氧充滿氧氣氣的的密閉密閉燃燒瓶中進(jìn)行燃燒瓶中進(jìn)行燃燒燃燒，并將燃燒所，并將燃燒所產(chǎn)生的欲測(cè)物質(zhì)產(chǎn)生的欲測(cè)物質(zhì)吸收吸收于適當(dāng)?shù)奈找褐校谶m當(dāng)?shù)奈找褐?，然后根?jù)欲測(cè)物

11、質(zhì)的性質(zhì)，采用適宜的分然后根據(jù)欲測(cè)物質(zhì)的性質(zhì)，采用適宜的分析方法進(jìn)行鑒別、檢查或含量測(cè)定析方法進(jìn)行鑒別、檢查或含量測(cè)定NaClHClOClCNaOH2 溶液點(diǎn)燃 適用于含鹵素、硫、氮、硒等適用于含鹵素、硫、氮、硒等有機(jī)藥物的分析有機(jī)藥物的分析 本法特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速、破壞完本法特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速、破壞完全，尤其適用于微量樣品的分析全，尤其適用于微量樣品的分析 （ 2） 儀器與材料儀器與材料 儀器裝置儀器裝置 燃燒瓶為燃燒瓶為500、1000或或2000ml無(wú)色、磨口、厚壁、無(wú)色、磨口、厚壁、硬質(zhì)玻璃錐型瓶；瓶塞硬質(zhì)玻璃錐型瓶；瓶塞空空心，底部熔封鉑絲一根，心，底部熔封鉑絲一根，下端呈螺旋狀或網(wǎng)狀下

12、端呈螺旋狀或網(wǎng)狀稱樣用材料及稱樣稱樣用材料及稱樣 A. 固體樣品固體樣品 無(wú)灰濾紙無(wú)灰濾紙 B. 液體樣品液體樣品 紙袋（透明膠紙）紙袋（透明膠紙） C. 軟膏類樣品：將適量樣品置不含軟膏類樣品：將適量樣品置不含被測(cè)成分的蠟油紙中包裹嚴(yán)密，外層被測(cè)成分的蠟油紙中包裹嚴(yán)密，外層再用無(wú)灰濾紙包裹再用無(wú)灰濾紙包裹吸收液吸收液 A. 作用：吸收液的作用是將樣品經(jīng)作用：吸收液的作用是將樣品經(jīng)燃燒分解所產(chǎn)生的各種價(jià)態(tài)的鹵素、燃燒分解所產(chǎn)生的各種價(jià)態(tài)的鹵素、硫、氮、硒等，定量地吸收并轉(zhuǎn)變?yōu)榱?、氮、硒等，定量地吸收并轉(zhuǎn)變?yōu)橐欢ǖ谋阌跍y(cè)定的價(jià)態(tài)一定的便于測(cè)定的價(jià)態(tài)氧氣氧氣B. 吸收液的選擇吸收液的選擇氟氟 水水

13、 氯氯 NaOH溶液溶液溴溴 H2O2-NaOH NaOH-硫酸肼飽和溶液硫酸肼飽和溶液碘碘 NaOH硫酸肼飽和溶液硫酸肼飽和溶液硫硫 NaOH或或H2O2 硒硒 硝酸溶液硝酸溶液（3）操作方法）操作方法燃燒瓶燃燒前的準(zhǔn)備燃燒瓶燃燒前的準(zhǔn)備 用洗液洗凈后，按各藥品項(xiàng)下的規(guī)定加用洗液洗凈后，按各藥品項(xiàng)下的規(guī)定加入吸收液，將瓶口用水濕潤(rùn)，小心急速地入吸收液，將瓶口用水濕潤(rùn)，小心急速地通入氧氣通入氧氣1min，立即用表面皿覆蓋瓶口。，立即用表面皿覆蓋瓶口。樣品的準(zhǔn)備樣品的準(zhǔn)備 取樣品適量，精密稱定后按規(guī)定方法取樣品適量，精密稱定后按規(guī)定方法包裹，固定于鉑絲下端的網(wǎng)內(nèi)或螺旋處。包裹，固定于鉑絲下端的網(wǎng)

14、內(nèi)或螺旋處。樣品的燃燒樣品的燃燒 點(diǎn)燃包有供試品的濾紙尾部，迅速放點(diǎn)燃包有供試品的濾紙尾部，迅速放入燃燒瓶中，按緊瓶塞，加水少量封閉瓶入燃燒瓶中，按緊瓶塞，加水少量封閉瓶口，燃燒完畢（應(yīng)無(wú)黑色碎片），充分振口，燃燒完畢（應(yīng)無(wú)黑色碎片），充分振搖，使生成的煙霧完全吸入吸收液中，放搖，使生成的煙霧完全吸入吸收液中，放置置15min，用水少量沖洗瓶塞及鉑絲，合，用水少量沖洗瓶塞及鉑絲，合并洗液及吸收液，同法另做空白試驗(yàn)。然并洗液及吸收液，同法另做空白試驗(yàn)。然后按各藥品項(xiàng)下規(guī)定的方法進(jìn)行鑒別、檢后按各藥品項(xiàng)下規(guī)定的方法進(jìn)行鑒別、檢查或含量測(cè)定。查或含量測(cè)定。 待分解樣品量待分解樣品量 燃燒瓶的體積燃燒

15、瓶的體積 35mg（微量分析）（微量分析） 150250ml 2030mg（半微量分析）（半微量分析） 300500ml 5060mg 1000ml 0.60.7g或更多或更多 2000ml或特殊結(jié)或特殊結(jié)構(gòu)的燃燒瓶構(gòu)的燃燒瓶例例 磺溴酞鈉的含量測(cè)定磺溴酞鈉的含量測(cè)定 ChP (2000)BrBrBrBrCCOOHOSO3NaSO3NaOHBrBrBrBrOSOHHOSONaOOONaOOO燃燒分解燃燒分解O2HBr + S2- + SO4 + HBr + S2- NaBr + Na2SO4 + H2O NaOH, H2O2溴溴 取本品約取本品約0.2g，照氧瓶燃燒法（附錄，照氧瓶燃燒法（附錄

16、 C）進(jìn)行有機(jī)破壞，選用）進(jìn)行有機(jī)破壞，選用1000ml燃燒瓶，以燃燒瓶，以0.4%氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液10ml，濃過(guò)氧化氫溶液，濃過(guò)氧化氫溶液0.5ml與水與水10ml作為吸收液，俟生成的煙霧完作為吸收液，俟生成的煙霧完全吸入吸收液后，用水稀釋至全吸入吸收液后，用水稀釋至100ml，煮沸，煮沸5分鐘，放冷，加稀硝酸使成酸性，精密加硝分鐘，放冷，加稀硝酸使成酸性，精密加硝酸銀滴定液（酸銀滴定液（0.1mol/l）20ml，搖勻，再加硫，搖勻，再加硫酸鐵胺指示液酸鐵胺指示液2mL，用硫氰酸胺滴定液，用硫氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試

17、驗(yàn)校正。每校正。每1mL硝酸銀滴定液硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于7.990mg的溴的溴(Br)。98：140. 氧瓶燃燒法中的裝置有A. 磨口硬質(zhì)玻璃錐形瓶B. 磨口軟質(zhì)玻璃錐形瓶C. 鉑絲D. 鐵絲E. 鋁絲96：133（99x：138）選擇氧瓶燃燒法所必備的實(shí)驗(yàn)物品A. 磨口硬質(zhì)玻璃錐形瓶B. 鉑絲C. 普通濾紙D. 氫氣 E. 無(wú)灰濾紙99：76氧瓶燃燒法測(cè)定含氯有機(jī)藥物時(shí)所用的吸收液多數(shù)為A. H2O2溶液B. H2O2NaOH溶液C. NaOH溶液D硫酸肼飽和液E. NaOH硫酸肼飽和液99：134. 氧瓶燃燒法可用于A. 含鹵素有機(jī)藥物的含量測(cè)定B. 醚類藥物的含量

18、測(cè)定C. 檢查甾體激素類藥物中的氟D. 檢查甾體激素類藥物中的硒E. 芳酸類藥物的含量測(cè)定二、含金屬有機(jī)藥物的分析二、含金屬有機(jī)藥物的分析 含金屬的有機(jī)藥物：含金屬的有機(jī)藥物：金屬原子不與碳金屬原子不與碳原子直接相連，通常為有機(jī)酸及酚的原子直接相連，通常為有機(jī)酸及酚的金屬鹽或配位化合物金屬鹽或配位化合物 如如酒石酸銻鉀、葡萄糖酸銻鈉、酒石酸銻鉀、葡萄糖酸銻鈉、富馬酸亞鐵富馬酸亞鐵 有機(jī)金屬藥物有機(jī)金屬藥物：金屬原子直接與碳：金屬原子直接與碳原子以共價(jià)鍵相連，結(jié)合比較牢固原子以共價(jià)鍵相連，結(jié)合比較牢固 如如卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利CCHOCHOOOCOOSbSbOOCOO

19、OCHOCHC2K+ 3H2O酒石酸銻鉀酒石酸銻鉀CCHCCOOOFeOMg(C17H35COO)2硬脂酸鎂硬脂酸鎂富馬酸亞鐵富馬酸亞鐵CH2OHCHOHCHOCHOCHOCOO-SbOHOSbO-OCHCHCHCCHOOCH2-OOHOHONa39H2O葡萄糖酸銻鈉葡萄糖酸銻鈉NHCONH2AsOOHHO卡巴胂卡巴胂HgOCOCH3醋酸苯汞醋酸苯汞OCH2COONaCONHCH2CHCH2HgOHOCH3汞撒利汞撒利含金屬有機(jī)藥物定量分析前的含金屬有機(jī)藥物定量分析前的處理方法處理方法 不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 直接測(cè)定法直接測(cè)定法; ;經(jīng)水解后測(cè)定法經(jīng)水解后測(cè)定法; ;經(jīng)

20、還原經(jīng)還原- -汞齊化后測(cè)定法汞齊化后測(cè)定法 經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 濕法破壞濕法破壞( (硝酸硝酸- -高氯酸法高氯酸法; ;硝酸硝酸- -硫酸硫酸法法; ;硫酸硫酸- -硫酸鹽法等硫酸鹽法等););干法破壞干法破壞（一）不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法（一）不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法1. 直接測(cè)定法直接測(cè)定法 適用于金屬原子不直接與碳原子適用于金屬原子不直接與碳原子相連的含金屬有機(jī)藥物或某些相連的含金屬有機(jī)藥物或某些CM鍵鍵結(jié)合不牢固的有機(jī)金屬藥物。結(jié)合不牢固的有機(jī)金屬藥物。富馬酸亞鐵的含量測(cè)定富馬酸亞鐵的含量測(cè)定 ChP (2000) 取本品約取本品約0.3g，精密稱定，精密稱定，加

21、稀硫酸加稀硫酸 15ml，加熱溶解后，加熱溶解后，放冷，加新沸過(guò)的放冷，加新沸過(guò)的冷水冷水50ml與鄰二氮菲指示液與鄰二氮菲指示液2 滴，立即用滴，立即用硫酸鈰滴定液硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml硫酸鈰滴硫酸鈰滴定液定液(0.1mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于16.99mg 。C4H2FeO4原理原理Fe2+ + Ce4+ Ce3+ + Fe2+ NN3Fe2+ + e NN3Fe3+紅色紅色淺藍(lán)色淺藍(lán)色OCCHOFeHCCOOOOCCHOHCCO+Fe2+2. 用硫酸水解后測(cè)定法用硫酸水解后測(cè)定法例例 硬脂酸鎂的測(cè)定

22、硬脂酸鎂的測(cè)定 ChP（2000） 取本品約取本品約0.1g，精密稱定，精密加硫酸，精密稱定，精密加硫酸滴定液滴定液(0.05mol/L) 50ml，煮沸至油滴澄清，煮沸至油滴澄清，繼續(xù)加熱繼續(xù)加熱10min，放冷至室溫，加甲基橙，放冷至室溫，加甲基橙指示液指示液12滴，用氫氧化鈉滴定液滴，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定。每滴定。每1ml硫酸滴定液硫酸滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于2.016mg的的MgO。原理：原理：Mg(C17 H35COO)2 + H2SO4 MgSO4 + 2 C17 H35COOH2NaOH + H2SO4 Na2SO4 + 2H2O 某些含汞有機(jī)

23、藥物，由于某些含汞有機(jī)藥物，由于CHg鍵不牢固，在水溶液（冰?。┲械渭渔I不牢固，在水溶液（冰浴）中滴加硫酸使其水解，將有機(jī)汞定量轉(zhuǎn)化成硫酸使其水解，將有機(jī)汞定量轉(zhuǎn)化成硫酸汞，再用硫氰酸銨滴定液滴定。硫酸汞，再用硫氰酸銨滴定液滴定。3. 經(jīng)還原經(jīng)還原-汞齊化后測(cè)定法汞齊化后測(cè)定法 本法系在酸性或堿性溶液中，加本法系在酸性或堿性溶液中，加鋅粉、加熱回流，將藥物中有機(jī)結(jié)合鋅粉、加熱回流，將藥物中有機(jī)結(jié)合的汞還原析出金屬汞，并與過(guò)量的鋅的汞還原析出金屬汞，并與過(guò)量的鋅生成鋅汞齊。將鋅汞齊溶于硝酸后，生成鋅汞齊。將鋅汞齊溶于硝酸后，選用適當(dāng)?shù)姆椒y(cè)定汞的含量，并換選用適當(dāng)?shù)姆椒y(cè)定汞的含量，并換算成含汞

24、有機(jī)藥物的含量。算成含汞有機(jī)藥物的含量。 （二）經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法（二）經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 適用于金屬原子與碳原子結(jié)合牢適用于金屬原子與碳原子結(jié)合牢固的有機(jī)金屬藥物。固的有機(jī)金屬藥物。1. 濕法破壞濕法破壞 （1 1） 硝酸硝酸- -高氯酸法高氯酸法 本法適用于血、尿、組織等生物樣品本法適用于血、尿、組織等生物樣品的破壞，有機(jī)金屬藥物經(jīng)破壞后，得到的的破壞，有機(jī)金屬藥物經(jīng)破壞后，得到的無(wú)機(jī)金屬離子一般呈高價(jià)態(tài)。無(wú)機(jī)金屬離子一般呈高價(jià)態(tài)。 本法不能用于含氮雜環(huán)藥物的破壞本法不能用于含氮雜環(huán)藥物的破壞（破壞不完全）（破壞不完全） （2） 硝酸硝酸- -硫酸法硫酸法 本法適用于大多數(shù)有機(jī)物質(zhì)的破

25、壞，本法適用于大多數(shù)有機(jī)物質(zhì)的破壞，破壞得到的無(wú)機(jī)金屬離子均為高價(jià)態(tài)。破壞得到的無(wú)機(jī)金屬離子均為高價(jià)態(tài)。 本法不能用于含堿土金屬有機(jī)藥物的本法不能用于含堿土金屬有機(jī)藥物的破壞（堿土金屬與硫酸成不溶性的硫酸鹽）破壞（堿土金屬與硫酸成不溶性的硫酸鹽） （3） 硫酸硫酸- -硫酸鹽法硫酸鹽法 本法是往樣品中加入濃硫酸作氧化劑，本法是往樣品中加入濃硫酸作氧化劑，加入硫酸鹽提高硫酸的沸點(diǎn)，增強(qiáng)硫酸的加入硫酸鹽提高硫酸的沸點(diǎn)，增強(qiáng)硫酸的氧化破壞能力，且防止硫酸的分解損失。氧化破壞能力，且防止硫酸的分解損失。 本法常用于含砷或銻有機(jī)藥物的破壞，本法常用于含砷或銻有機(jī)藥物的破壞，破壞得到的無(wú)機(jī)金屬離子多為低價(jià)

26、態(tài)。破壞得到的無(wú)機(jī)金屬離子多為低價(jià)態(tài)。 （4） 其它濕法其它濕法 硝酸硝酸硫酸硫酸高氯酸法高氯酸法 硫酸硫酸氧化劑法（過(guò)氧化氫法、高錳氧化劑法（過(guò)氧化氫法、高錳酸鉀）酸鉀） 破壞后，金屬呈高價(jià)態(tài)破壞后，金屬呈高價(jià)態(tài)2. 干法破壞干法破壞 適用于濕法不易破壞完全的有適用于濕法不易破壞完全的有機(jī)物以及某些不能用硫酸進(jìn)行破壞機(jī)物以及某些不能用硫酸進(jìn)行破壞的有機(jī)藥物。不適用于含易揮發(fā)性的有機(jī)藥物。不適用于含易揮發(fā)性金屬（如汞、砷等）有機(jī)藥物的破金屬（如汞、砷等）有機(jī)藥物的破壞壞注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：（1）加熱或灼燒時(shí)，應(yīng)控制溫度在）加熱或灼燒時(shí)，應(yīng)控制溫度在420以下以下（2）一定要灰化完全）一定要灰化

27、完全（3）經(jīng)本法破壞后，所得灰分往往不）經(jīng)本法破壞后，所得灰分往往不易溶解，但不要輕易棄去易溶解，但不要輕易棄去第二節(jié) 分析方法的效能指標(biāo) 一、目的 證明所采用的分析方法適合于相應(yīng)的檢測(cè)要求，方法驗(yàn)證過(guò)程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品標(biāo)準(zhǔn)起草和修訂說(shuō)明中。 二、用途（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草時(shí)，分析方法需經(jīng)驗(yàn)證。（二）藥物合成方法變更、制劑的組分變更、原分析方法進(jìn)行修訂時(shí)，分析方法需經(jīng)驗(yàn)證。三、需驗(yàn)證的分析項(xiàng)目1. 鑒別試驗(yàn)；2. 雜質(zhì)定量或限度檢查；3. 原料或制劑中有效成分含量測(cè)定；4. 制劑中其它成分（降解產(chǎn)物、防腐劑等）的測(cè)定；5. 溶出度、釋放度等功能檢查中的溶出量等的測(cè)試方法。 驗(yàn)證內(nèi)容有：準(zhǔn)確

28、度、精密度驗(yàn)證內(nèi)容有：準(zhǔn)確度、精密度（重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、（重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專屬性、檢測(cè)限、定量限、線性、范專屬性、檢測(cè)限、定量限、線性、范圍和耐用性圍和耐用性四、驗(yàn)證內(nèi)容 （一）（一） 準(zhǔn)確度（準(zhǔn)確度（accuracy） 準(zhǔn)確度是指用該方法測(cè)定的結(jié)果與準(zhǔn)確度是指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，用百分回真實(shí)值或參考值接近的程度，用百分回收率表示。收率表示。 測(cè)定回收率R（recovery）的具體方法可采用“回收試驗(yàn)法”和“加樣回收試驗(yàn)法”。 回收試驗(yàn) 空白+已知量A的對(duì)照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）測(cè)定，測(cè)定值為M%100AMR 加樣回收試驗(yàn) 已準(zhǔn)確測(cè)定藥物含量P的真實(shí)

29、樣品+已知量A的對(duì)照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）測(cè)定，測(cè)定值為M%100APMR 數(shù)據(jù)要求 規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測(cè)定結(jié)果評(píng)價(jià)，如制備三個(gè)不同濃度樣品各測(cè)三次。1. 含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度 原料藥可原料藥可用已知純度的對(duì)照品或樣用已知純度的對(duì)照品或樣品進(jìn)行測(cè)定，或用本法所得結(jié)果與已品進(jìn)行測(cè)定，或用本法所得結(jié)果與已建立準(zhǔn)確度的另一方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)建立準(zhǔn)確度的另一方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較。行比較。 制劑制劑可用含己知量被測(cè)物的各組可用含己知量被測(cè)物的各組分混合物進(jìn)行測(cè)定，即采用在空白輔分混合物進(jìn)行測(cè)定，即采用在空白輔料中加入原料藥對(duì)照品的方法。料中加入原料藥對(duì)照品的方法。 如不能得到制劑的全部

30、組分，可向如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定，制劑中加入已知量的被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定，或與另一個(gè)已建立準(zhǔn)確度的方法比較或與另一個(gè)已建立準(zhǔn)確度的方法比較結(jié)果。結(jié)果。 中藥分析的準(zhǔn)確度一般用加樣回中藥分析的準(zhǔn)確度一般用加樣回收試驗(yàn)衡量。中藥回收率一般要求在收試驗(yàn)衡量。中藥回收率一般要求在95105%范圍內(nèi)，有些方法操作步驟范圍內(nèi)，有些方法操作步驟繁多時(shí)，可要求在繁多時(shí)，可要求在90110%范圍內(nèi)。范圍內(nèi)。RSD一般在一般在3%以內(nèi)。以內(nèi)。 2雜質(zhì)定量測(cè)定的準(zhǔn)確度雜質(zhì)定量測(cè)定的準(zhǔn)確度 可向原料藥或制劑中加入已知量雜可向原料藥或制劑中加入已知量雜質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。如果不能得到雜質(zhì)或降質(zhì)

31、進(jìn)行測(cè)定。如果不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法測(cè)定結(jié)果與另一成解產(chǎn)物，可用本法測(cè)定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較。熟的方法進(jìn)行比較。 （二）（二）精密度（精密度（precision） 精密度精密度是指在規(guī)定條件下，同一個(gè)均勻樣品，是指在規(guī)定條件下，同一個(gè)均勻樣品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。用偏差（程度。用偏差（d）、標(biāo)準(zhǔn)偏差）、標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD)、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)（變異系數(shù)，（變異系數(shù)，CV）表示。表示。 偏差（d）：測(cè)量值與平均值之差xxdi標(biāo)準(zhǔn)（偏）差（SD或S）12nxxSi相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)（偏）差（RSD），也稱變異系數(shù)（CV）%100

32、 xSRSD 1. 重復(fù)性重復(fù)性 在相同條件下，由同一個(gè)在相同條件下，由同一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度；在規(guī)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度；在規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用定的范圍內(nèi)，至少用9次測(cè)定結(jié)果評(píng)價(jià)，次測(cè)定結(jié)果評(píng)價(jià)，如制備三個(gè)不同濃度樣品各測(cè)三次或把如制備三個(gè)不同濃度樣品各測(cè)三次或把被測(cè)物濃度當(dāng)作被測(cè)物濃度當(dāng)作100%，至少測(cè)，至少測(cè)6次進(jìn)行次進(jìn)行評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)。 2. 中間精密度中間精密度 同一實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)同一實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備所得結(jié)果間由不同分析人員用不同設(shè)備所得結(jié)果的精密度?？疾祀S機(jī)變動(dòng)因素的影響。的精密度。考察隨機(jī)變動(dòng)因素的影響。變動(dòng)因素為不同日期、不同分析人員、變

33、動(dòng)因素為不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備不同設(shè)備 3. 重現(xiàn)性重現(xiàn)性 不同實(shí)驗(yàn)室，不同分析人不同實(shí)驗(yàn)室，不同分析人員測(cè)定結(jié)果的精密度。當(dāng)分析方法將被員測(cè)定結(jié)果的精密度。當(dāng)分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。法定標(biāo)準(zhǔn)采用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。如建立藥典分析方法時(shí)通過(guò)協(xié)同檢驗(yàn)得如建立藥典分析方法時(shí)通過(guò)協(xié)同檢驗(yàn)得出重現(xiàn)性結(jié)果，協(xié)同檢驗(yàn)的過(guò)程、重現(xiàn)出重現(xiàn)性結(jié)果，協(xié)同檢驗(yàn)的過(guò)程、重現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說(shuō)明中。性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說(shuō)明中。 （三）（三） 檢測(cè)限（檢測(cè)限（limit of detection， LOD） 檢測(cè)限系指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)限系指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低量。是限度試

34、驗(yàn)參數(shù)，檢測(cè)出的最低量。是限度試驗(yàn)參數(shù)，無(wú)需定量測(cè)定。常用無(wú)需定量測(cè)定。常用%、ppm、ppb表示。表示。1非儀器分析目視法非儀器分析目視法 用已知濃度的被測(cè)物，試驗(yàn)出能被用已知濃度的被測(cè)物，試驗(yàn)出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量?？煽康貦z測(cè)出的最低濃度或量。 2信噪比法信噪比法 用于能顯示基線噪音的分析方法用于能顯示基線噪音的分析方法（儀器分析方法），是把已知低濃度（儀器分析方法），是把已知低濃度試樣測(cè)出的信號(hào)與空白樣品測(cè)出的信試樣測(cè)出的信號(hào)與空白樣品測(cè)出的信號(hào)進(jìn)行比較，算出能被可靠地檢測(cè)出號(hào)進(jìn)行比較，算出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。一般以信噪比的最低濃度或量。一般以信噪比（S/N）3 1

35、或或2 1時(shí)的相應(yīng)濃度或時(shí)的相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測(cè)限。注入儀器的量確定檢測(cè)限。3數(shù)據(jù)要求數(shù)據(jù)要求 應(yīng)附測(cè)試圖譜，說(shuō)明測(cè)試過(guò)程和檢應(yīng)附測(cè)試圖譜，說(shuō)明測(cè)試過(guò)程和檢測(cè)限結(jié)果。測(cè)限結(jié)果。 （四）定量限（1imit of quantitation，LOQ） 指樣品中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度。常用%、ppm、ppb表示。 （五）專屬性（五）專屬性（specificity） 指有其指有其他成分（雜質(zhì)、降解物、輔料等）可他成分（雜質(zhì)、降解物、輔料等）可能存在情況下采用的方法能準(zhǔn)確測(cè)定能存在情況下采用的方法能準(zhǔn)確測(cè)定出被測(cè)物的特性，能反映該方法在有出被測(cè)物的特性，能反映該

36、方法在有共存物時(shí)對(duì)供試物準(zhǔn)確而專屬的測(cè)定共存物時(shí)對(duì)供試物準(zhǔn)確而專屬的測(cè)定能力。是指該法用于復(fù)雜樣品分析時(shí)能力。是指該法用于復(fù)雜樣品分析時(shí)相互干擾程度的度量。相互干擾程度的度量。 （六）（六） 線性線性 在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。 數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。系數(shù)和線性圖。（七）范圍（七）范圍 指達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性指達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性的條件下，測(cè)試方法適用的高低限濃度的條件下，測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。或量的區(qū)間。（八）

37、（八） 耐用性耐用性 指測(cè)定條件稍有變動(dòng)時(shí)，指測(cè)定條件稍有變動(dòng)時(shí)，結(jié)果不受影響的承受程度，為常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果不受影響的承受程度，為常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。是衡量實(shí)驗(yàn)室和工作人員之提供依據(jù)。是衡量實(shí)驗(yàn)室和工作人員之間在正常情況下實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性的尺度。間在正常情況下實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性的尺度。 （九）應(yīng)用（九）應(yīng)用 1. 鑒別試驗(yàn)除專屬性、耐用性外，鑒別試驗(yàn)除專屬性、耐用性外，其它都不要求。其它都不要求。 2. 雜質(zhì)的限量檢查除專屬性、檢測(cè)雜質(zhì)的限量檢查除專屬性、檢測(cè)限、耐用性外，其它都不要求。雜質(zhì)的限、耐用性外，其它都不要求。雜質(zhì)的定量測(cè)定除檢測(cè)限外，其它都要求。定量測(cè)定除檢測(cè)限外，其它都要求。 3. 含量測(cè)定

38、及溶出量測(cè)定除檢測(cè)限、含量測(cè)定及溶出量測(cè)定除檢測(cè)限、定量限外，其它都要求。定量限外，其它都要求。（十）各種含量測(cè)定方法對(duì)效能指標(biāo)（十）各種含量測(cè)定方法對(duì)效能指標(biāo)的要求的要求 1. 1. 容量分析法：用原料藥精制品容量分析法：用原料藥精制品( (含量含量99.599.5) )或?qū)φ掌房疾旆椒ǖ幕驅(qū)φ掌房疾旆椒ǖ木芏龋鄬?duì)標(biāo)準(zhǔn)差一般應(yīng)不大于精密度，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差一般應(yīng)不大于0.20.2；進(jìn)行回收率試驗(yàn)。；進(jìn)行回收率試驗(yàn)?；厥章室话阍诨厥章室话阍?9.799.7100.3100.3之間之間。 2. 2. UV法法：用適當(dāng)濃度的精制品進(jìn)行用適當(dāng)濃度的精制品進(jìn)行測(cè)定，其測(cè)定，其RSD一般不大于一般不大于1

39、。制劑的。制劑的測(cè)定測(cè)定，回收率一般應(yīng)在，回收率一般應(yīng)在98102之之間。間。 線性：線性：吸光度吸光度A一般在一般在0.20.7，濃度點(diǎn)濃度點(diǎn)n5。用濃度。用濃度c對(duì)對(duì)A作線性回歸作線性回歸處理，得一直線方程，方程的截距應(yīng)處理，得一直線方程，方程的截距應(yīng)近于零。近于零。 3. HPLC法：要求法：要求RSD2，回收回收率率98102之間。之間。 線性范圍：用精制品配制一系列線性范圍：用精制品配制一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度點(diǎn)n應(yīng)為應(yīng)為57，用濃，用濃度度c對(duì)峰高對(duì)峰高h(yuǎn)或被測(cè)物的響應(yīng)值之比進(jìn)或被測(cè)物的響應(yīng)值之比進(jìn)行回歸處理，建立回歸方程，行回歸處理，建立回歸方程，r應(yīng)大應(yīng)大于于0.999，截距應(yīng)趨于零。，截距應(yīng)趨于零。 專屬性：要考查輔料、有關(guān)物質(zhì)專屬性：要考查輔料、有關(guān)物質(zhì)或降解產(chǎn)物對(duì)主藥的色譜峰是否有干或降解產(chǎn)物對(duì)主藥的色譜峰是否有干擾，如有干擾應(yīng)設(shè)法排除擾，如有干擾應(yīng)設(shè)法排除99：73. 精密度是指（B） A. 測(cè)得的測(cè)量值與真值接近的程度 B. 測(cè)得的一組測(cè)量值彼此符合的程度 C. 表示該法測(cè)量的正確性 D. 在各種正常試驗(yàn)條件下，對(duì)同一 樣品分析所得結(jié)果的準(zhǔn)確程度 E. 對(duì)供試物準(zhǔn)確而專屬的測(cè)定能力99x：76精密度是指該法（D） A. 測(cè)得的測(cè)量值與真值接近的程度 B. 測(cè)得的測(cè)量值與回收率接近的程度 C. 測(cè)量的正確性 D. 測(cè)得的一組測(cè)