藥物分析芳香胺類藥物的分析[1]

1、藥物分析第七章 芳香胺類藥物的分析Analytical of Aromatic amines藥物分析芳香胺類藥物的分析1芳香胺(Aromatic amines) 芳胺類 芳烴胺類（1）（2）例：benzocaine, procaine hydrochloride例：paracetamol, lidocaine hydrochloride例：adrenaline, dopamine hydrochloride（1）（2）例：oxprenolol, carteolol hydrochloride藥物分析芳香胺類藥物的分析1第一節(jié) 芳胺類藥物的分析結(jié)構(gòu)(Structure)1. 對氨基苯甲酸酯類 苯

2、佐卡因(benzocaine),鹽酸普魯卡因(procaine hydrochloride),鹽酸丁卡因(tetracaine hydrochloride).化學(xué)性質(zhì)(Feature)1. 芳伯氨基：重氮化偶合反應(yīng)；與芳醛縮合成Schiff堿；易氧化變色等2. 水解：受光線、熱、堿的影響；鹽酸丁卡因BABA，其余藥物PABA3. 弱堿性：叔胺氮原子，生物堿沉淀劑反應(yīng)，非水溶劑滴定4. 溶解性：游離堿，油狀液體或低熔點(diǎn)固體難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；鹽 酸鹽白色結(jié)晶粉末，具一點(diǎn)的熔點(diǎn)，易溶于水和乙醇，難溶于有機(jī)溶劑。藥物分析芳香胺類藥物的分析1結(jié)構(gòu)(Structure)2. 酰胺類對乙酰氨基酚(p

3、aracetamol),醋氨苯砜(acedapsone),鹽酸利多卡因(lidocaine hydrochloride),鹽酸布比卡因(bupivacaine hydrochloride).paracetamol acedapsonelidocaine hydrochloride化學(xué)性質(zhì)(Feature)(共性)1. 水解2. 醋酸 乙醇/硫酸 醋酸乙酯(特性)3. 對乙酰氨基酚三氯化鐵4. 弱堿性：叔胺氮原子生物沉淀劑沉淀5. 酰胺氮原子與金屬離子絡(luò)合顯色bupivacaine hydrochloride藥物分析芳香胺類藥物的分析1鑒別試驗(yàn) (Identification)芳伯氨基：苯佐卡因

4、、鹽酸普魯卡因、鹽酸普魯卡因胺 NaNO2/HCl 堿性-萘酚 有色偶氮染料（橙黃到猩紅色）潛在芳伯氨基：對乙酰氨基酚、醋氯苯砜 鹽酸或硫酸加熱水解 NaNO2/HCl 堿性-萘酚 有色偶氮染料（紅色）區(qū)別鹽酸丁卡因：（乳白色）（一）重氮化偶合反應(yīng)藥物分析芳香胺類藥物的分析1鑒別試驗(yàn)(Identification)（二）與三氯化鐵反應(yīng)（藍(lán)紫色）（三）與金屬離子反應(yīng)與銅和鈷離子反應(yīng) （具有芳酰胺結(jié)構(gòu)的，如鹽酸利多卡因） 硫酸銅/碳酸鈉試液藍(lán)紫色配合物 氯化鈷/酸性溶液亮綠色細(xì)小鈷鹽沉淀顯黃色（溶于氯仿）2. 羥肟酸鐵鹽反應(yīng)（具有芳酰胺結(jié)構(gòu)的，如鹽酸普魯卡因胺） 濃過氧化氫/加熱至沸 羥肟酸 三氯

5、化鐵 羥肟酸鐵（紫紅色）3. 與汞離子反應(yīng) 芳酰胺類，如鹽酸利多卡因 硝酸汞/硝酸，煮沸 對氨基苯甲酸酯類，如苯佐卡因 硝酸汞/硝酸，煮沸黃色紅色或橙黃色藥物分析芳香胺類藥物的分析1（四）水解產(chǎn)物反應(yīng)1. 鹽酸普魯卡因10氫氧化鈉溶液白色（加熱變?yōu)橛蜖钗铮?繼續(xù)加熱 蒸氣（二乙氨基乙醇）（能使?jié)櫇竦募t色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色） 加熱至油狀物消失 放冷、加鹽酸 白色（能溶于過量的鹽酸）2. 苯佐卡因氫氧化鈉試液 煮沸 乙醇 加入碘試液/加熱 黃色（碘仿臭氣）（五）制備衍生物測熔點(diǎn)1. 鹽酸利多卡因 三硝基苯酚 三硝基苯酚利多卡因（mp. 228232） 鹽酸布比卡因 三硝基苯酚布比卡因（mp. 194

6、）2. 鹽酸丁卡因 25硫氰酸銨溶液/5醋酸溶液 丁卡因硫氰酸鹽（ mp. 131 ） 鑒別試驗(yàn) (Identification)藥物分析芳香胺類藥物的分析1鑒別試驗(yàn)(Identification)（六）紫外特征吸收光譜藥物溶劑濃度(g/mL)max(nm)備注對乙酰氨基酚HCl(10.3g/L)-甲醇(1:99)0.4%NaOH10249860980BP2003, 8257715Chp2005用于含量測定苯佐卡因氯仿278USP24與對照吸收相同，兩者之差不超過3.0%鹽酸丁卡因pH6磷酸鹽緩沖液10310同上，兩者之差不超過2.0%鹽酸普魯卡因胺0.1mol/L NaOH102735806

7、10BP2003水5280Chp2005，片劑和注射劑鑒別醋氨苯砜無水乙醇5256，284Chp2005藥物分析芳香胺類藥物的分析1鑒別試驗(yàn) (Identification)（七）紅外吸收光譜鹽酸普魯卡因 鹽酸普魯卡因胺 波數(shù)cm-1 波數(shù)cm-1 酯羰基C=O 1692 酯基C-O 1271, 1170, 1115 二乙胺鹽N-H 2585 2645（略向高波數(shù)） 1550（ N-H 酰胺帶） 1280（ N-H酰胺帶 ） 藥物分析芳香胺類藥物的分析1特殊雜質(zhì)檢查(Detection of specific impurities)（一）對乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)工藝：對乙酰氨基酚的有色氧化產(chǎn)物

8、乙醇溶液的澄清度與顏色：中間體對氨基酚的有色氧化產(chǎn)物在乙醇中顯橙紅色或棕色。（比濁，比色）有關(guān)物質(zhì)：中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物（例：對氨基酚、對氯乙酰苯胺、O-乙酰基對乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亞胺等）藥典規(guī)定：以對氯乙酰苯胺為對照品，TLC限度檢查。對氨基酚的檢查藥物分析芳香胺類藥物的分析1特殊雜質(zhì)檢查 (Detection of specific impurities)對氨基酚乙?；煌耆蛸A藏不當(dāng)引起水解毒性較大并有色澤檢查方法： 取本品1.0g，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1ml，搖勻，放置30min；如顯色，與對乙酰氨基酚對照品1.0g加對氨

9、基酚50g用同一方法制成的對照液比較，不得更深（0.005%）。注：對氨基酚對照溶液不穩(wěn)定，應(yīng)臨用前新鮮配制。藥物分析芳香胺類藥物的分析1特殊雜質(zhì)檢查 (Detection of specific impurities)（二）鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查限度：水解產(chǎn)物對氨基苯甲酸，不得超過1.2%。檢查方法：TLC法，對氨基苯甲酸對照品對照，對二甲氨基苯甲醛溶液顯色。黃色藥物分析芳香胺類藥物的分析1含量測定 (Assay)容量分析方法 (volumetric analysis) 分光光度法 ( spectrometry )色譜法 ( chrometography ) 藥物分析芳香胺類

10、藥物的分析1亞硝酸鈉滴定法sodium nitrite method非水溶液滴定法non-aqueous titrimetry含量測定 (Assay)藥物分析芳香胺類藥物的分析1亞硝酸鈉滴定法sodium nitrite method原理：條件：1、加入適量溴化鉀加快反應(yīng) 2、加入過量鹽酸1:2.563、室溫10 30 4、滴定管尖端插入液面下滴定終點(diǎn)指示方法：1、永停法2、外指示劑法（碘化鉀淀粉）藥物分析芳香胺類藥物的分析1非水溶液滴定法non-aqueous titrimetry鹽酸丁卡因鹽酸利多卡因側(cè)鏈烴胺的叔胺氮側(cè)鏈哌啶環(huán)的叔胺氮弱堿性高氯酸非水滴定注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氫鹵

11、酸的干擾鹽酸丁卡因加醋酐以突出終點(diǎn)；例：鹽酸利多卡因的非水滴定反應(yīng)過程：指示劑：結(jié)晶紫指示劑：萘酚苯甲醇鹽酸布比卡因藥物分析芳香胺類藥物的分析1分光光度法 ( spectrometry )對乙酰氨基酚在257nm波長處有最大吸收，中國藥典2005版采用百分吸收系數(shù)（ ）法，測定對乙酰氨基酚的含量。例：對乙酰氨基酚、片劑、咀嚼片、注射液、栓劑、膠囊、顆粒劑【含量測定】 取本品約40mg，精密稱定，置250ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5ml，至100ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液10ml，加水至刻度，搖勻，照紫外可見分光廣度法（藥典Chp2005

12、版附錄A），在257nm的波長處測定吸光度，按C8H9NO2的吸收系數(shù)（ ）為715計(jì)算，即得。藥物分析芳香胺類藥物的分析1比色法芳伯氨基的重氮化偶合反應(yīng)生成有色偶氮染料專屬性差鹽酸普魯卡因與1,2-萘醌-4-磺酸鈉溶液反應(yīng)生成棕紅色化合物適用于鹽酸普魯卡因及其制劑的常規(guī)分析快速熒光測定 鹽酸普魯卡因胺結(jié)構(gòu)中的芳伯氨基與熒胺反應(yīng)，生成熒光物， 可在400nm、485nm波長處測定熒光強(qiáng)度較重氮化法靈敏、簡便，適用于普魯卡因胺制劑的測定。藥物分析芳香胺類藥物的分析1以苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，可以同時測定鹽酸普魯卡因注射液中的普魯卡因及其降解產(chǎn)物對氨基苯甲酸（PABA），不需分離提取，準(zhǔn)確簡便。色譜條件（色

13、譜柱、流動相、檢測器）測定方法（供試品溶液、對照品溶液的制備，進(jìn)樣量，計(jì)算方法）高效液相色譜法 ( HPLC )藥物分析芳香胺類藥物的分析1體內(nèi)藥物分析應(yīng)用示例：對乙酰氨基酚急性中毒的血藥濃度測定色譜條件：Nova-PackC18柱（4m, 150mm3.9mm），Nova-PackC18預(yù)柱柱溫：25，流動相為甲醇水（50:50）流速：0.8ml/min二極管陣列檢測器，檢測波長254nm血漿樣品制備：取靜脈血34ml，置含肝素抗凝劑的離心管中，離心分離5min (3000rpm)，上清液為待測血漿。吸取上述血漿1ml，加飽和硫酸鋅溶液1ml，沉淀蛋白后，加入乙醚5ml渦旋混合1min，離心20min(3000rpm)。精密吸取乙醚液3.0m