血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制ppt課件

1、血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制血型概述 血型是人類(lèi)血液以血型抗原為表現(xiàn)型的遺傳性狀，ABO血型系統(tǒng)和Rh血型系統(tǒng)是紅細(xì)胞的兩大血型抗原抗體系統(tǒng)，在臨床輸血和血液遺傳學(xué)研討上有重要意義。 血型鑒定(blood typing)是臨床輸血的首要問(wèn)題，正確的血型鑒定是保證輸血平安的前提條件。主要內(nèi)容ABO血型系統(tǒng)ABO血型系統(tǒng)抗原ABO血型系統(tǒng)抗體ABO血型系統(tǒng)亞型ABO血型鑒定 檢測(cè)原理鑒定方法方法學(xué)評(píng)價(jià)質(zhì)量控制RH血型系統(tǒng)RH血型系統(tǒng)抗原RH血型系統(tǒng)抗體RH血型鑒定 檢測(cè)原理鑒定方法方法學(xué)評(píng)價(jià)質(zhì)量控制ABO血型系統(tǒng)抗體分為天然抗體和免疫性抗體天然抗體主要為IgM型免疫球蛋白免疫性抗體那么來(lái)自母嬰血

2、型不合的妊娠或血型不合的輸血，通常是來(lái)自母體的IgG型免疫球蛋白。ABO血型系統(tǒng)抗體兩種抗體的比較特性IgM型IgG型分子量（kD）1000160耐熱性（70）破壞穩(wěn)定與紅細(xì)胞結(jié)合最適溫度（）4-2537與紅細(xì)胞反應(yīng)介質(zhì)生理鹽水酶處理或清蛋白溶液被血型物質(zhì)中和能不能通過(guò)胎盤(pán)不能能ABO血型系統(tǒng)亞型A抗原的主要亞型有A1和A2，均能與抗A血清發(fā)生直接凝集反響。AB血型中也存在相應(yīng)的A1 B和A2 B亞型。B亞型較少見(jiàn)，且抗原性弱，故臨床意義不大。ABO血型檢測(cè)原理血型抗原與相應(yīng)抗體在反響介質(zhì)中構(gòu)成紅細(xì)胞和相應(yīng)血型抗體結(jié)合的免疫復(fù)合物，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集景象。正向定型direct typing反向

3、定型indirect typing鑒定方法血凝實(shí)驗(yàn) 玻片法試管法全自動(dòng)微板法 流式細(xì)胞技術(shù)酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)微柱凝膠實(shí)驗(yàn)鑒定方法鹽水凝集法salt medium test鑒定方法正定型，玻片法鑒定方法玻片法評(píng)價(jià)它是目前臨床常用的血型鑒定的初篩實(shí)驗(yàn)方法。具有操作簡(jiǎn)便，節(jié)省資料的優(yōu)點(diǎn)。但弱凝集反響需求借助顯微鏡察看確定。鑒定方法反定型，試管法鑒定方法試管法評(píng)價(jià)優(yōu)點(diǎn)試管法是交叉配血實(shí)驗(yàn)中最根底的實(shí)驗(yàn)方法之一。與玻片法原理一樣，但是借助試管更大的反響空間，并對(duì)待測(cè)紅細(xì)胞予以一定的濃度的稀釋或者參與更多的待測(cè)紅細(xì)胞，經(jīng)過(guò)低速離心后可根據(jù)有無(wú)肉眼可見(jiàn)凝集反響來(lái)判別結(jié)果。由于待測(cè)紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)稀釋?zhuān)谝欢ǔ潭壬蠝p

4、少了血液中非特異性抗體的濃度，從而提高了實(shí)驗(yàn)的敏感性。比玻片法更具有準(zhǔn)確可靠的優(yōu)點(diǎn)。鑒定方法試管法評(píng)價(jià)缺陷只能檢測(cè)出完全抗體抗A、抗B引起的血型不合，對(duì)免疫性抗體引起的血型不合不能檢出，有輸血史或不明輸血史及妊娠史不能用該法。本實(shí)驗(yàn)中的生理鹽水對(duì)血清漿中的抗體有稀釋作用，易導(dǎo)致配血結(jié)果假陰性。易受冷凝集素的干擾。方法學(xué)評(píng)價(jià)鹽水凝集法 操作簡(jiǎn)便，無(wú)需特殊儀器。玻片法：無(wú)需離心，適用于血型普查。但反響時(shí)間長(zhǎng)，靈敏度差，凝集較弱時(shí)易導(dǎo)致定型錯(cuò)誤。不適于反向定型。試管法：用離心法加速反響，所需時(shí)間短，適于急診定型。因離心加強(qiáng)紅細(xì)胞凝集，可發(fā)現(xiàn)較弱的凝集景象，有助于檢出亞型，故為常用血型鑒定方法。只能檢

5、測(cè)完全抗體易受冷凝集素干擾鑒定方法凝膠微柱法鑒定方法凝膠微柱法的結(jié)果方法學(xué)評(píng)價(jià)凝膠微柱法反復(fù)性好，特異性和靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確。試劑本錢(qián)較高，需用離心設(shè)備。根據(jù)不同需求可選用中性凝膠、特異凝膠或抗球蛋白凝膠作為反響介質(zhì)。結(jié)果既可肉眼察看，也可用血型分析儀分析。鑒定方法全自動(dòng)微板法規(guī)范化加樣、孵育、離心、懸浮、靜止反響前后吸光度值添加數(shù)值的計(jì)算對(duì)血型進(jìn)展正定型與反定型方法學(xué)評(píng)價(jià)全自動(dòng)微板法此法正反定型實(shí)驗(yàn)，準(zhǔn)確率高，且能提高檢測(cè)靈敏度，使弱凝集樣本更加易顯現(xiàn)?？焖佟?zhǔn)確、自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)，適宜批量操作。血型微量化檢測(cè)具有節(jié)約大量昂貴抗血清、縮短檢測(cè)時(shí)間、操作程序簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，目前在各大采供血機(jī)構(gòu)已

6、得到廣泛運(yùn)用。鑒定方法流式細(xì)胞技術(shù)稀釋?zhuān)簩⒋郎y(cè)血樣的紅細(xì)胞用生理鹽水稀釋成百分之五的紅細(xì)胞懸液。標(biāo)志：分裝各管分別等比參與熒光素標(biāo)志抗體，避光放置15min待受檢紅細(xì)胞上的血型抗原與相應(yīng)熒光標(biāo)志抗體結(jié)合后，用生理鹽水洗滌離心除去未結(jié)合抗體。檢測(cè)：重懸后立刻用流式細(xì)胞儀檢測(cè)與熒光標(biāo)志抗體結(jié)合的紅細(xì)胞，經(jīng)過(guò)軟件分析，從而得到待測(cè)樣本的紅細(xì)胞血型。方法學(xué)評(píng)價(jià)流式細(xì)胞術(shù)在細(xì)胞分型方面具有速度快、靈敏度高、特異性好，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，反復(fù)性好。特別合順運(yùn)用于ABO血型亞型的快速鑒定。目前有研討指出流式細(xì)胞技術(shù)亦可經(jīng)過(guò)分別孕婦血液中的胎兒紅細(xì)胞用于產(chǎn)前非侵入性胎兒血型檢測(cè)。質(zhì)量控制1.規(guī)范血清 要求：新穎，在

7、有效期內(nèi)，效價(jià)高，凝集力強(qiáng)，嚴(yán)防污染常用的抗血清有：人血清ABO血型抗體：穩(wěn)定性高，已滅活補(bǔ)體人ABO血型單克隆抗體：穩(wěn)定性較人血清抗體的穩(wěn)定性差質(zhì)量控制2.被檢紅細(xì)胞 標(biāo)本新穎，嚴(yán)防污染。某些疾病出現(xiàn)假凝集，可加做本身血清和紅細(xì)胞，本身紅細(xì)胞和生理鹽水對(duì)照實(shí)驗(yàn)及結(jié)合反定型結(jié)果進(jìn)展鑒定。當(dāng)疑有血漿成分干擾血型鑒定時(shí)可用生理鹽水反復(fù)洗滌紅細(xì)胞以除干擾。質(zhì)量控制3.實(shí)驗(yàn)器材 器材清潔、枯燥、標(biāo)志清楚。用試管法定型時(shí)，應(yīng)同時(shí)進(jìn)展正向和反向定型。須設(shè)置對(duì)照。紅細(xì)胞濃度按要求配置，紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體的比例適當(dāng)。反響溫度、反響時(shí)間、離心時(shí)間。弱A亞型和弱B亞型，肉眼判別必同時(shí)須用顯微鏡復(fù)查。Rh血型系統(tǒng)抗原

8、及抗體Rh血型系統(tǒng)抗原目前已發(fā)現(xiàn)的Rh抗原有45種，其中與人類(lèi)關(guān)系最為親密的是D、E、C、c、e五種。D抗原的抗原性最強(qiáng)。Rh血型系統(tǒng)抗體絕大多數(shù)Rh抗體由輸血或妊娠刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的IgG型免疫性抗體。主要Rh血型系統(tǒng)抗體有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五種，其中抗D最為常見(jiàn)。Rh血型檢測(cè)方法酶介質(zhì)法聚凝胺實(shí)驗(yàn)polybrene testRh血型檢測(cè)方法抗球蛋白實(shí)驗(yàn)antiglobulin testRh血型檢測(cè)方法人源鹽水介質(zhì)抗D實(shí)驗(yàn)低離子強(qiáng)度溶液實(shí)驗(yàn)Company Logo方法學(xué)評(píng)價(jià) 方 法 評(píng) 價(jià)酶介質(zhì)法（直接法） 簡(jiǎn)單、快速、經(jīng)濟(jì)，但靈敏度低。酶介質(zhì)法（間接法） 簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、靈敏?？?/p>

9、鑒定抗原和檢測(cè)抗體。 但較費(fèi)時(shí)，準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性較差低離子強(qiáng)度溶液試驗(yàn) 反應(yīng)時(shí)間短，靈敏度高聚凝胺試驗(yàn) 快速、靈敏、準(zhǔn)確性高，應(yīng)用較多抗球蛋白試驗(yàn) 檢查不完全抗體最可靠方法，但操作復(fù)雜， 費(fèi)時(shí)，試劑較貴。多用于新生兒溶血病的診 斷及因血型不合輸血產(chǎn)生的血型抗體的檢測(cè)人源鹽水介質(zhì)抗D試驗(yàn) 操作簡(jiǎn)單，特異性和靈敏度均高，應(yīng)用廣泛， 但試劑昂貴質(zhì)量保證檢測(cè)前標(biāo)本處置：標(biāo)本新穎，嚴(yán)防污染。為防止假陰性，被檢紅細(xì)胞要用生理鹽水充分洗滌。試劑和器材：運(yùn)用有效期內(nèi)的合格試劑?？寡逡咨票９?，防治污染。運(yùn)用的儀器、器材清潔枯燥。質(zhì)量保證檢測(cè)中抗原抗體比例、介質(zhì)濃度反響時(shí)間、反響溫度、離心條件陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照

10、及試劑對(duì)照紅細(xì)胞上的Rh抗原與相應(yīng)抗體反響構(gòu)成的凝集較弱，察看結(jié)果不可用力振搖當(dāng)結(jié)果可疑時(shí)，須用顯微鏡察看確認(rèn)質(zhì)量保證檢測(cè)后復(fù)查實(shí)驗(yàn)全過(guò)程，填寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告，查對(duì)無(wú)誤后方可發(fā)出報(bào)告。標(biāo)本置4保管1周以上，以備復(fù)查。臨床上血型檢查的質(zhì)量控制1、 醫(yī)務(wù)人員的問(wèn)題臨床醫(yī)生臨床護(hù)士抽取血標(biāo)本時(shí)，未校正患者的姓名、床號(hào)檢驗(yàn)科人員沒(méi)有對(duì)報(bào)告核對(duì)正確，呵斥血型鑒定錯(cuò)誤臨床上血型檢查的質(zhì)量控制2、 被檢紅細(xì)胞血型測(cè)定的錯(cuò)誤血型：檢測(cè)時(shí)只用肉眼察看結(jié)果，微弱、細(xì)小的凝集未看到冷凝集素：在支原體肺炎、肝硬化等疾病患者血清中，冷凝集素很高，嚴(yán)重干擾血型鑒定。ABO亞型：抗原構(gòu)造和位點(diǎn)數(shù)改動(dòng)導(dǎo)致的弱表現(xiàn)。ABO血型抗體減弱：當(dāng)獻(xiàn)血者血清中抗A和抗B效價(jià)減弱，其反定型格局總表現(xiàn)為AB型。臨床上血型檢查的質(zhì)量控制3、 其它要素輸血或妊娠：產(chǎn)生不規(guī)那么抗體類(lèi)B抗原：某些受腸道革蘭氏陰性桿菌感染的病人，紅細(xì)胞獲得了類(lèi)B抗原，A型病人可誤定為AB型，O型誤定為B型磺胺類(lèi)藥物：注射青霉素后，有些人的血清中含有青霉素抗體，而青霉素已吸附在紅細(xì)胞外表，當(dāng)此