免疫球蛋白和抗體(2)

1、關(guān)于免疫球蛋白與抗體 (2)第一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 免疫球蛋白與抗 體 （ Ig, Ab）第二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月2 掌握免疫球蛋白與抗體的概念及五類免疫球蛋白的特性。 熟悉免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)、水解片段與功能； 了解人工制備抗體的類型及臨床應(yīng)用。本章學習要求第三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月3第一節(jié) 概述 抗體：受抗原刺激后，由B淋巴細胞分化成的漿細胞產(chǎn)生的能與相應(yīng)抗原特異結(jié)合的免疫球蛋白。 抗體主要存在于血清中，也見于其他體液和外分泌液中，故將抗體介導的免疫稱為體液免疫。 一、抗體抗原B漿細胞抗體TT效應(yīng)淋巴細胞第四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于

2、2022年6月41、Ab 的發(fā)現(xiàn)： 1890年，Behring 和北里在德國Koch實驗室使用白喉脫毒外毒素注射馬，在馬血清中發(fā)現(xiàn)了一種能中和白喉外毒素的物質(zhì)，稱為“抗毒素” ，并挽救了成千上萬的白喉患兒。60%死亡率降到26%。 醫(yī)學史上的一個重要里程碑，人類防治傳染病的重要方法血清療法誕生了。獲1901年的第一屆諾貝爾獎第五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月52、證明是球蛋白證明：抗體是球蛋白； 但球蛋白并非都具有抗體活性第六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 指具有抗體活性或化學結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白。 與抗體概念的異同。二、免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）抗

3、體：生物學功能免疫球蛋白：化學結(jié)構(gòu) IgAb第七張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月7免疫球蛋白存在形式分泌型（secreted immunoglobulin, sIg ） 抗體 膜型（membrane immunoglobulin, mIg） BCR (B細胞受體) B第八張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月8第二節(jié) 免疫球蛋白的分子結(jié)構(gòu)一、基本結(jié)構(gòu)“Y”字型 四肽鏈2條重鏈(heavy chain, H)2條輕鏈(light chain, L)二硫鍵連接抗體的基本功能單位第九張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月9輕鏈（L)：約210個AA殘基，分子量約為25kD； 可分為和兩型

4、 IgG （IgG 和 IgG ） IgM （IgM 和 IgM ） IgA （IgA 和 IgA ） IgE （IgE 和 IgE ） IgD （IgD 和 IgD ）-S-S-S-SS-SNCLHHLN重鏈(H)：約450-550個氨基酸殘基，分子量約50-75 kD重鏈分、和鏈第十張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月10二、可變區(qū)和恒定區(qū)可變區(qū)（variable region, V 區(qū)）：輕鏈和重鏈靠近N端的約110個氨基酸變化很大，稱為可變區(qū)，用VH和VL表示。恒定區(qū)（constant region, C 區(qū)）：免疫球蛋白輕鏈和重鏈中氨基酸序列較保守的區(qū)域。H鏈有一個VH及34個C

5、H區(qū)。 （其中IgM, IgE有CH4區(qū)）L鏈具有VL，CL兩個功能區(qū)。鉸鏈區(qū)：位于CH1與CH2之間，含有豐富的脯氨酸，易伸展彎曲，而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。第十一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月11 超變區(qū)：重鏈和輕鏈V區(qū)各有3個區(qū)域的氨基酸組成和排列順序高度可變，稱為超變區(qū)（hypervariable region, HVR）或決定簇互補決定區(qū)（complementary determining region, CDR），分別為CDR1、CDR2和CDR3。 6個CDR組成一個抗原結(jié)合部位。 骨架區(qū)：V區(qū)中，CDR以外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對不易變化，稱為骨架區(qū)（

6、framework region, FR）?？勺儏^(qū)可變區(qū)：第十二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月12超變區(qū)決定與抗原決定簇結(jié)合。骨架區(qū)主要穩(wěn)定超變區(qū)的空間構(gòu)型。第十三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月13三、免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)域功能區(qū)：由重鏈和輕鏈經(jīng)鏈內(nèi)二硫鍵連接而成的球狀結(jié)構(gòu)，不連續(xù)，每個結(jié)構(gòu)域具有各自的功能。Ag Binding抗原結(jié)合位點Complement Binding Site補體結(jié)合位點，活化補體Placental TransferIgG 胎盤轉(zhuǎn)移Binding to Fc ReceptorsFC段受體，親細胞活性同種異型抗原決定簇存在部位，遺傳標志促進可變區(qū)與抗原表

7、位結(jié)合；暴露補體結(jié)合位點，活化補體第十四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月14四、免疫球蛋白的其它成分1、連接鏈（Join Chain, J 鏈) 連接多聚體 Ig 的蛋白質(zhì)，存在于SIgA 和IgM。J 鏈SIgA（分泌型 IgA)J 鏈IgM第十五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月152、 分泌片（Secretory piece,SP） 只存在于粘膜分泌型IgA中，由上皮細胞合成，防止蛋白酶對IgA的水解。SIgASP第十六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月16五、免疫球蛋白的水解片段第十七張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月17水解酶作用位點水解片段及其功能 木瓜蛋

8、白酶鉸鏈區(qū)重鏈間二硫鍵近N端（1）兩個相同的Fab段：可與抗原結(jié)合（2）一個Fc段：激活補體、結(jié)合細胞、通過胎盤胃蛋白酶鉸鏈區(qū)重鏈間二硫鍵近C端（1）一個具有雙價活性的 F(ab)2段：可同時結(jié)合兩個抗原表位 （2）若干個小分子多肽碎片(pFc) ：無生物學作用IgG 酶解后的比較第十八張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月18第三節(jié) 抗體的生物學功能第十九張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月19（一） V區(qū)-識別并特異性結(jié)合抗原 病毒毒素二聚體（SIgA） - 4 價單體分子（IgG，IgE） - 2 價五聚體（IgM） - 5 價意義： （1）中和效應(yīng) - 中和毒素和病毒第二十張，P

9、PT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月20FabFc固定補體與Fc受體結(jié)合BFc受體Ig（2）與抗原結(jié)合 - C區(qū)變構(gòu)，激活補體，與Fc受體結(jié)合，起多種效應(yīng)。第二十一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月21 (二）激活補體 -發(fā)揮溶解細胞等多種活性Ab（IgM、IgG）+ Ag C1q 補體經(jīng)典途徑 IgG4、IgA和 IgE的凝聚物 補體旁路途徑 第二十二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月22發(fā)揮殺傷作用 稱 ADCC 激活NK細胞促進吞噬 稱調(diào)理作用 結(jié)合吞噬細胞3. 超敏反應(yīng)：結(jié)合肥大細胞及嗜堿性粒細胞。（三）與Fc受體（FcR)結(jié)合-介導免疫細胞活性 體內(nèi)多種細胞具有Fc受體，如

10、吞噬細胞、NK細胞、單核細胞、肥大細胞、粒細胞。1. ADCC(抗體依賴細胞介導的細胞毒)作用2. 調(diào)理作用：促進吞噬細胞吞噬細菌等顆粒性抗原。第二十三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月23第二十四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月24第二十五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月254、通過胎盤(IgG)和粘膜(IgA) IgG是唯一可通過胎盤的抗體，在新生兒抗感染中有重要作用。 SIgA可通過分泌片介導穿越粘膜上皮細胞，在粘膜表面抗感染中起作用重要。第二十六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月26第二十七張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月27與抗原作特異性結(jié)合激活補

11、體結(jié)合細胞 激活吞噬細胞：調(diào)理作用 激活NK細胞：ADCC作用 激活肥大細胞：超敏反應(yīng)穿過胎盤和粘膜V區(qū)活性 C區(qū)活性 抗體生物學活性總結(jié)與具有Fc受體的細胞結(jié)合第二十八張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月28第四節(jié) 五類免疫球蛋白的特性與功能第二十九張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月29第三十張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月301、IgG 1、 單體分子； 2、 四個亞類； 3、 血清中含量最高(75%Ig)； 4、 半衰期最長(2123天)；第三十一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月315、抗感染的主要抗體，具有抗菌、抗病毒、中和毒素急免疫調(diào)節(jié)作用，能激活補體。 6

12、、再次應(yīng)答的主要抗體。 7、唯一能通過胎盤的抗體（在新生兒抗感染中起重要作用）；第三十二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月322、IgM3、在免疫應(yīng)答中產(chǎn)生最早。功能：理論上十價，但由于空間位阻，結(jié)合價為五價，但仍具最強的溶菌、激活補體、免疫調(diào)理作用。2、在個體發(fā)育中最早合成。4、占血清Ig含量的510%；1、五聚體，分子量最大(900kd)，又稱巨球蛋白）5、半衰期5天第三十三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月333、IgA分兩型血清型：IgA1,單體。占血清Ig10-20%分泌型（SIgA）： IgA2，二聚體； 功能粘膜局部抗感染免疫，起中和作用，阻止病原微生物黏附；聚合 I

13、gA 激活補體替代途徑。 粘膜局部漿細胞合成；分泌片由粘膜上皮細胞合成；第三十四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月34sIgA的合成和主要作用部位在黏膜第三十五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月354、IgD2、血清中含量極少,約占血清Ig的1%。 4、B細胞成熟的表面標志。3.存在形式：分泌型 血清中，功能不清 1、單體分子 膜結(jié)合型 B細胞表面。 意義：B細胞成熟的標志。抗原受體，對B細胞活化、增殖和分化起調(diào)節(jié) 作用；成熟B細胞可同時表達SmIgD和SmIgM。不成熟B細胞只表達SmIgM。第三十六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月36未成熟B細胞 成熟B細胞 活化或記憶

14、B細胞mIgM mIgD 第三十七張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月375、IgE1、單體分子4、具親細胞性（親細胞抗體）功能：介導I型超敏反應(yīng) 2、血清中含量極微；3、呼吸道和消化道粘膜漿細胞產(chǎn)生。第三十八張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月38IgGIgMIgA/SIgAIgDIgE存在形式單體五聚體單體/二聚體單體單體相對分子質(zhì)量(1000)146970160/385184188血清中總Ig百分含量7075510152010.002半衰期235633出現(xiàn)時間 出生后三個月出生前出生后四個月晚晚五大類免疫球蛋白特性比較（1）第三十九張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月39Ig

15、GIgMIgAIgDIgE與補體結(jié)合能力中和作用調(diào)理作用ADCC參與粘膜防御能穿透胎盤與細胞結(jié)合參與超敏反應(yīng)五大類免疫球蛋白特性比較（2）第四十張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月40第五節(jié) 人工制備抗體 多克隆抗體（polyclonal antibody，PcAb） 單克隆抗體（monoclonal antibody，McAb） 基因工程抗體 （engineering antibody）第四十一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月41 利用抗原免疫動物后從血清中獲得的抗體，含有由不同B細胞克隆產(chǎn)生的針對不同抗原決定簇的多種類型抗體。（1）預(yù)防、治療感染性疾?。ㄌ禺愋圆?，可發(fā)生超敏反應(yīng)

16、） 一、多克隆抗體（polyclonal antibody）（2）臨床診斷Ag第四十二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月42抗血清（多克隆抗體）的制備第四十三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月43 1975年建立的技術(shù)，通過雜交瘤技術(shù)獲得的針對單一抗原決定簇的高特異性抗體。二、單克隆抗體（monoclonal antibody） 概念：由單一克隆B細胞產(chǎn)生的,只針對某一特定抗原決定簇的抗體。第四十四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月44第四十五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月45多克隆抗體單克隆抗體來源動物免疫血清、恢復(fù)期病人血清或免疫接種人群多為鼠源性特點來源廣泛、制備容易純度高、特異性強、效價高、少或無血清交叉反應(yīng)、制備成本低組成針對不同抗原表位的抗體的混合物針對單一表位，結(jié)構(gòu)和組成高度均一，抗原特異性及同種型一致應(yīng)用疾病的被動免疫治療廣泛用于疾病診斷、特異性抗原或蛋白的檢測和鑒定、疾病的被動免疫治療和生物導向藥物制備缺點特異性不高、易發(fā)生交叉反應(yīng)，