(發(fā)酵分析分析檢驗的基本知識)第一節(jié)-樣品采集制備處理與保存課件

1、(發(fā)酵分析分析檢驗的基本知識)第一節(jié) 樣品采集制備處理與保存一、樣品的采集 采樣 從大量的分析對象中抽取有代表性的一部分樣品作為分析材料的工作。 第一節(jié) 樣品的采集、制備、處理與保存采樣的要求（遵循原則）采集的樣品要均勻，具有代表性；采樣方法必須與分析目的保持一致；采用過程要設法保持原有的理化指標，避免預測組分發(fā)生化學變化或丟失；要防止和避免預測組分的玷污；采樣方法盡量簡單，處理裝置尺寸適當；要認真填寫采樣記錄。二、采樣步驟樣品采集過程 檢 樣原始樣品平均樣品復檢檢驗仲裁/備查由組批或貨批中所抽取的樣品將許多份檢樣綜合在一起的樣品原始樣品經(jīng)過混合平均，再抽取其中一部分作為分析檢驗的樣品檢驗、復

2、檢、備查樣品，每份0.5Kg需保留（通常一個月） 大量物料原始樣品平均樣品 三、采樣方式 1、隨機抽樣 按照隨機原則，從大批物料中抽取部分樣品，使總體中每份樣品被抽取的機率都相等的方法。 對被測樣品不大了解或 檢驗產(chǎn)品的合格率。 適 用 2、系統(tǒng)抽樣(代表性取樣) 根據(jù)樣品隨時間或空間（位置）的變化規(guī)律，采集能代表其相應部分的組 成和質(zhì)量的樣品進行采樣的方法。 已經(jīng)了解樣品 檢驗食品的保質(zhì)期 適 用 3、指定特殊性樣品 用于有某種特殊檢測重點的樣品 的采樣。 不遵循“均勻采樣”原則 四、采樣方法 1、均勻的固體樣品 有完整包裝的 采樣數(shù)量 總件數(shù)/2 過程 從被檢包裝的不同部位采樣（檢樣） （

3、隨機或系統(tǒng)方式） 檢樣合并、混勻 （原始樣） 四分法 平均樣 （平均樣） 縮分 測定樣 無包裝的散樣 劃分若干等體積層 每層的中心和四角各取少量 （檢樣） 合并、混勻 （原始樣） 四分法縮分 平均樣 雙效回轉取樣管四 分 法固體樣品取樣法 組成不均勻的固體樣品 分別取不同部位的少量樣品 （檢 樣） 混合并搗碎均勻 （原始樣品） 四分法縮分 所需數(shù)量 （分 析 樣） 原則：縱向取樣 怎么取？ 里外一樣嗎？ 橫著？豎著？取哪兒??？ 挑大個兒的？ 這個？ 2、液體樣 包裝體積不太大的 確定采樣數(shù)量 抽樣 打開包裝、混合 搖勻 分取到所需數(shù)量 大桶及散裝樣 分層虹吸法 每層 500 ml 混勻 分取到

4、所需數(shù)量 虹吸法 二、檢驗樣品的制備 粉碎：含水少或含油脂少 勻漿：含水多或含油多 預干燥：含水多，含油少 脫脂：含油多 制備方法 三、 樣品預處理 一、為什么要進行預處理 二、預處理的目的 三、預處理的要求 四、預處理方法預 處 理 方 法有 機 物 破 壞 法蒸 餾 法溶 劑 提 取 法直 接 溶 解1、有機物破壞法有機物破壞法使有機物在高溫或強氧化條件下破壞，有機物分解成氣態(tài)逸散，被測元素以簡單的無機化合物形式釋放出來。應用：測定金屬元素和某些非金屬元素（如：S、P、N等）的預處理。分類：干法灰化和濕法消化原理：將樣品放入坩堝中，置于電爐上加熱（炭化），再于高溫爐中灼燒（灰化），直至殘灰

5、為白色或淺灰色為止，所得殘渣即為無機灰分?；一瘻囟龋?00-600，灰化時間：4-6h（1）干法灰化灰化助劑：縮短灰化時間，促進灰化完全，防止有些元素的揮發(fā)損失雙氧水、硝酸：灼燒后完全消失，不增加殘灰重量氧化鎂、碳酸鹽、硝酸鹽等：使灰分增重，需做空白試驗操作條件和所用試劑均相同，但無待測試樣存在的試驗。經(jīng)多次空白試驗測得的平均值叫空白值 干法灰化的優(yōu)點優(yōu) 點基本不加或加入很少的試劑，空白值低?；曳煮w積小，可處理較多的樣品，可富集被測組分。有機物分解徹底，操作簡單。干法灰化的缺點缺 點坩堝有吸留作用，使測定結果和回收率降低。灼燒溫度高，造成易揮發(fā)元素（如：Hg、Pb）的損失。所需時間長。（2）濕

6、法消化（消解法） 原理：樣品中加入強氧化劑，并加熱消煮，使有機物質(zhì)完全分解、氧化，呈氣態(tài)揮發(fā)逸出，無機鹽和金屬離子留在消化液中。 常用的強氧化劑：濃硝酸、濃硫酸、高氯酸、高錳酸鉀、過氧化氫等。濕法消化的優(yōu)點優(yōu) 點加熱溫度較干法低，可減少金屬元素揮發(fā)逸散的損失。有機物分解速度快，所需時間短。濕法消化的缺點缺 點試劑消耗較多，必須做空白試驗。消化初期易產(chǎn)生大量泡沫外溢。 產(chǎn)生大量有毒氣體，需在通風廚中進行。 微波消解技術原理：利用微波的穿透性和激活反應能力，加熱密閉容器內(nèi)的試劑和樣品，可使制樣容器內(nèi)壓力增加，反應溫度提高，從而大大提高了反應速率。特點：縮短制備時間，控制反應條件，減少對環(huán)境的污染方

7、法：濃硝酸、H2O2共熱，直至樣品液透明。適用：任何樣品，尤其是高油樣品。2、溶劑抽提法溶劑抽提法利用混合物中各組分在某種溶劑中溶解度的不同，將各組分完全或部分分離的方法。常用的溶劑無機溶劑：水、稀酸、稀堿；有機溶劑：乙醇、乙醚、氯仿、丙酮、石油醚等應用：抽提被測物質(zhì)或除去干擾物質(zhì)。分類：浸提法和萃取法 （1）浸提法浸提法用適當?shù)娜軇┙莨腆w樣品，抽提其中的溶質(zhì)，又稱為“液固萃取法”。提取劑的選擇 提取效果：符合相似相溶原理； 溶劑沸點：4580； 溶解度：對抽提組分最大； 穩(wěn)定性好。常用提取方法：振蕩浸漬法、搗碎法、索氏提取法操作簡單，回收率低回收率高，選擇性差溶劑用量少，回收率高，但操作麻

8、煩。振蕩浸提法超聲提取法1 橡皮塞2 索氏抽提筒3 虹吸回流管4 圓底燒瓶5 冷凝管索氏提取器 例如 三聚氰胺呈弱堿性(弱陽離子化合物)，采用陽離子交換柱進行凈化可達到去除雜質(zhì)，提高檢測靈敏度、重現(xiàn)性和回收率的效果。 （2）萃取法萃取法用適當?shù)娜軇⒁后w樣品中的被測組分（或雜質(zhì)）提取出來，即“液液萃取法”。萃取劑的選擇：萃取劑與液體樣品的溶劑互不相溶且比重不同。萃取劑對被測組分的溶解度 被測組分在原溶劑中的溶解度，對其它組分溶解度很小。經(jīng)蒸餾可使萃取劑與被測組分分開。萃取方法：分液漏斗中進行，4-5次。其他提取方法超臨界流體萃取超聲波萃取微波萃取3、蒸餾法（揮發(fā)分離法）蒸餾法利用物質(zhì)的揮發(fā)性的

9、差異（即混合物中各組分揮發(fā)性不同）進行分離的方法蒸餾方法常壓蒸餾減壓蒸餾水蒸氣蒸餾 被測組分在常壓下受熱不分解或沸點不太高的物質(zhì)。常壓下受熱易分解或沸點太高的物質(zhì)直接加熱易炭化或被測組分加熱到沸點易分解的物質(zhì)。常壓蒸餾裝置減壓蒸餾裝置4、色層分離法又稱為層析分離法或色譜分離法，是一種在載體上進行物質(zhì)分離的一系列方法的總稱。經(jīng)典實驗茨威特分離植物葉綠素：玻璃管中裝CaCO3，石油醚溶解植物葉綠體倒入管內(nèi)，再用石油醚做淋洗劑，結果柱子被分成幾個不同顏色的譜帶。根據(jù)固定相狀態(tài)柱層析法紙層析法薄層層析法根據(jù)兩相狀態(tài)根據(jù)分離原理吸附色譜分配色譜離子交換色譜氣相色譜液相色譜超臨界流體色譜利用吸附劑對不同

10、組分的物理吸附性能的差異進行分離利用不同組分在兩相中的不同分配系數(shù)來進行分離利用各組分與離子交換樹脂的親和力的不同來分離5、化學分離法（1）沉淀分離法原理：在試樣中加入適當?shù)某恋韯贡粶y組分沉淀下來或將干擾組分沉淀下來，再經(jīng)過濾或離心把沉淀和母液分開。常用沉淀劑：堿性硫酸銅、堿性醋酸鉛等。舉例：測飲料中的糖精鈉測定蛋白質(zhì)氮和非蛋白質(zhì)氮（2）皂化法和磺化法目的：除去樣品中油脂或處理油脂中其它成分磺化法：濃硫酸處理，主要用于有機氯農(nóng)藥殘留物的測定。 皂化法： 原理: 酯 + 堿 -脂肪酸酸或鹽 + 醇 常用堿為NaOH或KOH （3）掩蔽法原理：向樣液中加入掩蔽劑，使干擾成分改變其存在狀態(tài)（即被掩蔽狀態(tài)：仍在溶液中，但失去了干擾作用），從而消除其對被測組分的干擾。 優(yōu)點：免去分離操作。 應用：測定食品中某些元素6、濃縮法目的：提高待測組分的濃度常壓濃縮應用：待測組分不易揮發(fā)。濃縮器皿：蒸發(fā)皿、蒸餾裝置、旋轉蒸發(fā)器等。減壓濃縮應用：易揮發(fā)、熱不穩(wěn)定性組分的濃縮。濃縮器皿：K-D濃縮器（水浴加熱+抽氣減壓），濃縮速度快，被測組分損失少。四、 樣品的保存1、保存目的：防止樣品發(fā)生受潮、揮發(fā)、風