化合物結(jié)構(gòu)鑒定和表征

1、關(guān)于化合物的結(jié)構(gòu)鑒定與表征第一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月第一章：概述 經(jīng)典有機(jī)定性分析方法 是運(yùn)用化學(xué)降解方法把化合物切成各種片段，再按化學(xué)原理邏輯地推斷結(jié)構(gòu)，最后經(jīng)合成方法證明。 研究方法： 化學(xué)降解反應(yīng)、有機(jī)元素分析、物理常數(shù)測定（熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、旋光等）、官能團(tuán)的特征顯色反應(yīng)、合成。缺點(diǎn)：操作煩瑣、費(fèi)時、消耗試劑量大、不易準(zhǔn)確甚至不能測定如：1、微量化合物 2、大分子化合物 3、不穩(wěn)定中間產(chǎn)物第二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月二. 發(fā)展歷程：上世紀(jì)中期后，儀器分析方法得到迅速發(fā)展分離方法：各種色譜分離方法分析方法：UV、IR、NMR、MS 等及各種聯(lián)機(jī)技術(shù)。嗎啡（18

2、04純品，1847分子式1925化學(xué)結(jié)構(gòu)）第三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月三. 有機(jī)波譜分析方法：紫外光譜法（UV）：Ultraviolet Absorption Spectrometry2. 紅外光譜法（IR）：Infrared Absorption Spectrometry3. 核磁共振波譜法（NMR）：Nuclear Magnetic Resonance Spectrometry4. 質(zhì)譜法（MS）：Mass Spectrometry 本課程重點(diǎn)介紹四譜的譜學(xué)特點(diǎn)、特定功能、圖譜提供的信息及其與化合物結(jié)構(gòu)的關(guān)系。核心是四譜綜合運(yùn)用，即“解譜”。第四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2

3、022年6月四譜比較：靈敏度：MSUVIR NMR2. 儀器的價格高低及維持費(fèi)：MS NMR IRUV 3. 測定技能：NMR MSIRUV 4.獲取信息的多寡：NMR MSIRUV 5. 所需的理論背景：NMR MSIRUV 第五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月1、紫外光譜睪丸酮(1,)和異丙叉丙酮（2，CH3COC=C（CH3）2）的紫外光譜第六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月1 R1 = Me, R2 = H 4 R1 = H, R2 = Me 化合物1的UV，紅線、蘭線為不同濃度的樣品吸收，綠色線為已加AlCl3/HCl，與樣品對照最大吸收峰及A值無變化。例：Mingh

4、ui Yang，Zhongtao Ding，et al，CCL，2010, 21: 325-328 第七張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月在某些情況下，如香豆素類、黃酮類化合物，它們的UV光譜在加入某些診斷試劑后可因分子結(jié)構(gòu)中取代基的類型、數(shù)目及位置的不同而發(fā)生改變，故還可以應(yīng)用UV譜推斷該類化合物的精細(xì)結(jié)構(gòu)。例如: 蘆丁的甲醇溶液及加入各種診斷試劑后的UV譜如下：試劑max譜帶II譜帶I甲醇259359甲醇鈉272410三氯化鋁275433乙酸鈉271393從上表UV數(shù)據(jù)可見:甲醇鈉是強(qiáng)堿,可以使所有的羥基解離,故蘆丁的譜帶I和II均發(fā)生明顯紅移.三氯化鋁可分別與B環(huán)的鄰二酚羥基、C環(huán)

5、的羰基和A環(huán)的5位羥基形成配合物，故亦引起蘆丁的譜帶I和II的明顯紅移。乙酸鈉為弱堿，僅能使酸性較強(qiáng)的A環(huán)7位羥基和B環(huán)4位羥基解離，所以譜帶I和II所發(fā)生的明顯紅移，表明蘆丁分子結(jié)構(gòu)中存在4位羥基和7位羥基。 由此可見，UV譜不但可用于推斷不飽和結(jié)構(gòu)骨架，而且有助于闡明在共軛系統(tǒng)中取代基的位置、種類和數(shù)目。III第八張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月定量分析與加合原則 一個分子中的兩個生色團(tuán)被一個或更多個隔離原子(如)分開,這個分子的紫外吸收光譜近似于這兩個生色團(tuán)紫外吸收光譜之和.即一個化合物的紫外吸收光譜為該分子中幾個互相不共軛部分的結(jié)構(gòu)單元的紫外吸收的加合.例：紫外光譜法同時測定厚

6、撲酚與和厚樸酚的含量 （保志娟，丁中濤等，天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2004，16（5）：435）pH=8.93第九張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月2、紅外光譜譜圖分析三要素 第十張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)聯(lián)峰出現(xiàn)(增加判斷可靠性)如 苯環(huán): 3100 - 3000 cm-1 芳環(huán)上 C-H 伸縮振動 1600 - 1450 cm-1 C=C 骨架振動(常弱) 880 - 680 cm-1 C-H 面外彎曲振動,定位! 1660-2000 cm-1 泛頻峰 第十一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月例.一個化合物的紅外光譜如圖1,推測其結(jié)構(gòu)是或HOCNCNH2O40003

7、0002500200017001300圖11001500T%cm-1解：是II因?yàn)閳D中沒有CO(19001650cm-1),所以排除I。24002100cm-1區(qū)域內(nèi)的吸收峰是CN。第十二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月例:青霉素結(jié)構(gòu)的確定已知其分子式為C16H18N2SO4(IR: 1700, 1770cm-1) 水解得的產(chǎn)物C16H20N2SO5(結(jié)構(gòu)如下B)模型化合物:1800cm-1 1740cm-1 1770cm-1第十三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月3、質(zhì)譜例 正庚酮有三種異構(gòu)體，某正庚酮的質(zhì)譜如圖所示。試確定羰基的位置： 第十四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022

8、年6月解: 酮易發(fā)生裂解，生成離子，穩(wěn)定，強(qiáng)度很大，是鑒別羰基位置的有力證據(jù)。三種庚酮異構(gòu)體的裂解比較：圖上，m/z57為基峰，而且有m/z85峰，而無99及71峰。圖上雖有m/z43峰，但太弱，不是CH3-C+O離子而是由裂解產(chǎn)生的C3H7+離子。因此證明該化合物是庚酮-3。第十五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月例試解釋鬼臼毒素類化合物的質(zhì)譜峰m/z 414，396，312，297，269的產(chǎn)生機(jī)理。第十六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月4、核磁共振氫譜1. 圖譜提供的信息第十七張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月一張譜圖可以向我們提供關(guān)于有機(jī)分子結(jié)構(gòu)的如下信息 1. 由

9、吸收峰的組數(shù)，可以判斷有幾種不同類型的H核； 2. 由峰的強(qiáng)度（峰面積或積分曲線高度），可以判斷各類H的相對數(shù)目； 3.由峰的裂分?jǐn)?shù)目，可以判斷相鄰H核的數(shù)目； 4. 由峰的化學(xué)位移（值），可以判斷各類型H所處的化學(xué)環(huán)境； 5. 由裂分峰的外形或偶合常數(shù)，可以判斷哪種類型H是相鄰的。 第十八張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月環(huán)己烷上3J偶合:Jaa=10Hz左右Jae=2-4Hz左右Jee=1-3Hz左右第十九張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月例、某化合物的結(jié)構(gòu)右圖所示。其核磁共振氫譜中H-3的在3.5-4.0ppm，峰寬為17Hz, 由此推斷H-4處在a鍵還是e鍵上？ 第二十張，

10、PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 4、13C NMR特點(diǎn) （1） 化學(xué)位移范圍寬 0-220 ppm（正碳離子可達(dá)330ppm，而CI4約為292ppm), 約是1HNMR的20倍。分辨率更高。（2） 13C NMR給出不與氫相連的碳的共振吸收峰 季碳、CO、CC、CN、CC等基團(tuán)中的碳不與氫直接相連，在1H NMR譜中能直接觀測，只能靠分子式及其對相鄰基團(tuán)值的影響來判斷。而在13C NMR譜中，均能給出各自的特征吸收峰。 （3） 13C NMR靈敏度低，偶合復(fù)雜 第二十一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月DEPT譜中，CH3顯正峰，CH2顯負(fù)峰，CH顯正峰。通過譜圖編輯，我們可以很

11、容易辨認(rèn)碳的級數(shù)。 第二十二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月表: 不同類型碳核化學(xué)位移的大致范圍類型（ppm）SP3雜化碳（飽和碳）-CH3-CH2-CH-C-O-CHn(n=0-3) -N-CHn(n=0-3) 8-3015-5520-6035-70在上列數(shù)據(jù)基礎(chǔ)之上+15-30 在上列數(shù)據(jù)基礎(chǔ)之上+10-25 SP雜化碳（炔碳）CH65-85SP2雜化碳烯碳芳環(huán)及芳雜環(huán)碳羰基碳=CHC6H6C=O100-150110-160160-210第二十三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月5、二維核磁共振譜1二維J分解譜（2D J-resolved Spectroscopy, 2DJ）

12、2二維化學(xué)位移相關(guān)譜（Two-Dimesional Chemical Shift Correlation Spectroscopy） 1H,1H化學(xué)位移相關(guān)譜（1H,1H COSY） Heteronuclear multiple-quantum correlation (HMQC) Heteronuclear multibond correlations: HMBC 2D NMR homonuclear through space correlations: ROESY, NOESY第二十四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月1H-1H COSY譜： 是最常用的同核位移相關(guān)譜。一般反映的是

13、鄰碳?xì)涞呐己详P(guān)系，從而可知同一自旋體系里質(zhì)子之間的偶合關(guān)系，是歸屬譜線、推導(dǎo)結(jié)構(gòu)強(qiáng)有力的工具。以乙酸乙酯的1H-1H相關(guān)譜（1H-1HCOSY）為例，橫軸及縱軸均為該化合物的1H NMR譜。同一1H核信號將在對角線上相交，交點(diǎn)稱對角峰（diagonal peak）。圖上對角線兩側(cè)呈對稱分布的兩個點(diǎn)叫相關(guān)峰 （cross peak,或correlation peak）。相互偶合的兩個/組1H核信號將在相關(guān)峰上相交。 第二十五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月(2) 13C-1H COSY譜和COLOC譜 常規(guī)的13C-1H COSY譜是反映直

14、接鍵連的CH間的偶合關(guān)系，對于信號的指定非常有效。一般譜圖的一軸為化合物的1H NMR譜，另一軸為13C NMR譜。直接鍵連的13C和1H信號會在圖中出現(xiàn)相關(guān)點(diǎn)。 COLOC譜，即遠(yuǎn)程偶合的異核位移相關(guān)譜。它顯示2JCH、3JCH以上的13C-1H相關(guān)，從功能來看，其與遠(yuǎn)程偶合13C-1H COSY譜相近，但效果更好。第二十七張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十八張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月(3) HMQC譜和HMBC譜： 屬檢測1H 的異核位移相關(guān)譜。HMQC把1H 核和與其直接相連的13C核關(guān)聯(lián)起來，所提供的信息及譜圖與13C-1H COSY譜完全相同。HMBC可高靈

15、敏地檢測13C-1H遠(yuǎn)程偶合，由此可以得到有關(guān)季碳的結(jié)構(gòu)信息及因雜原子存在而被切斷的1H偶合系統(tǒng)之間的結(jié)構(gòu)信息。它同HMQC一樣也是通過測定靈敏度高的1H核來檢測13C-1H之間的遠(yuǎn)程偶合相關(guān)信息，靈敏度比傳統(tǒng)的遠(yuǎn)程偶合13C-1H COSY高得多。第二十九張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月(4) NOESY譜和ROESY譜： 屬NOE類的二維核磁共振譜。NOE主要用來確定兩個質(zhì)子在分子立體空間結(jié)構(gòu)中是否距離相近，若存在NOE則表示兩者接近，NOE值越大，則兩者在空間的距離就越近。NOE對確定有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)、構(gòu)型和構(gòu)象具有重要作用。NOESY譜采用二維方式檢測NOE，顯示1H核之間的N

16、OE相關(guān)。ROESY是旋轉(zhuǎn)坐標(biāo)系中的NOESY。第三十張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月四. 結(jié)構(gòu)研究的程序 1、化合物純度的測定和判斷： 植物化學(xué)成分結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)確鑒定必須建立在該成分已經(jīng)分離純化的基礎(chǔ)之上。樣品的純度是能否獲得準(zhǔn)確信息的關(guān)鍵，否則可能得到混亂甚至錯誤的結(jié)論。 純度的檢查可以通過檢查其有無均勻一致的晶形、有無明確的熔點(diǎn)、熔程是否合理（一般應(yīng)小于2）、色澤是否均勻等來判斷，但在研究和實(shí)踐中，最常用的還是薄層層析或紙層析方法。一般要求至少選擇在三種溶劑系統(tǒng)中展開，先在可見光或紫外光下觀察，然后噴以適當(dāng)?shù)娘@色劑（如10%的硫酸溶液）或在碘缸中顯色，要求樣品呈單一斑點(diǎn)，方可判斷其為

17、純化合物。對于個別情況，有時需要用正、反相層析加以確認(rèn)。在條件允許的情況下，也可利用氣相色譜或高效液相色譜來證實(shí)。第三十一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月2、化合物類型的初步判斷： 百余年來，對大量植物化學(xué)成分的研究已為我們提供了豐富的化合物結(jié)構(gòu)類型，如今分離得到的新成分絕大多數(shù)是在已有骨架類型上的變化?？赏ㄟ^對同科屬（種）植物研究信息的調(diào)研，考察樣品在提取分離過程中的行為、一般理化常數(shù)和性質(zhì)（如酸堿行為、溶解行為、層析行為）及一些特殊的顯色反應(yīng)等來對化合物的類型作初步判斷。如碘化鉍鉀（Dragendorff） 試劑可用于生物堿等含氮化合物的檢測。第三十二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于20

18、22年6月3、已知化合物的結(jié)構(gòu)推斷 在實(shí)際工作中，并不需要測定完一個化合物的所有波譜數(shù)據(jù)才能判斷化合物的結(jié)構(gòu)，有些化合物特別是已知化合物，在化合物結(jié)構(gòu)類型初步判斷的基礎(chǔ)之上，結(jié)合文獻(xiàn)調(diào)研，通過與標(biāo)準(zhǔn)品的理化常數(shù)、性質(zhì)及薄層對照檢查或一些簡單的波譜（如紅外光譜、紫外光譜數(shù)據(jù)）對照比較，即可作出判斷。若為新化合物，則需提供更翔實(shí)證據(jù)，進(jìn)一步對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究。第三十三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月4、對于未知的植物化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)分析： 對于未知的植物化學(xué)成分，則需通過譜圖的綜合解析，有時也需配合適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)、生物方法（如降解）來進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究。 一般地，要判定一個化合物的準(zhǔn)確結(jié)構(gòu)，往往需要通過

19、其多種波譜數(shù)據(jù)及理化常數(shù)相互映證。 第三十四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月一般可從以下幾個方面入手：分子量、分子式的確定 利用元素分析、質(zhì)譜的分子離子峰（M）或其同位素峰（M+1）、（M+2）的相對強(qiáng)度可得出最可能的分子量、分子式。由分子式可計(jì)算不飽和度，進(jìn)而推測化合物的大致類型，如是否芳香化合物，有否含有雙鍵等。對于一些高極性或熱不穩(wěn)定的化合物，需用軟電離方式，才有可能得到其質(zhì)譜的分子離子峰。 高分辨質(zhì)譜測定分子的準(zhǔn)確分子量, 進(jìn)而推測分子的組成(分子式)第三十五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月(2) 推斷分子中可能含有的官能團(tuán)、結(jié)構(gòu)碎片或基本骨架 紫外光譜可以顯示化合物分

20、子中有無共軛體系和芳香結(jié)構(gòu)； 紅外光譜能提供許多官能團(tuán)的特征吸收； 質(zhì)譜的碎片離子也能提供分子結(jié)構(gòu)中可能存在的分子片斷和可能失去的分子片斷； 核磁共振譜能提供較大的信息量，能反映出組成分子的碳、氫骨架信息。 另外，某些官能團(tuán)還具有一些特征的化學(xué)反應(yīng)。第三十六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月(3) 測定分子的平面結(jié)構(gòu) 綜合光譜解析及官能團(tuán)定性、定量分析的結(jié)果，結(jié)合文獻(xiàn)調(diào)研，利用已確定的結(jié)構(gòu)單元，推斷分子的平面結(jié)構(gòu)。由此得到的化合物結(jié)構(gòu)可能不止一種，此時，應(yīng)注意與已知的、結(jié)構(gòu)類似的化合物的波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，觀察各波譜數(shù)據(jù)間是否有矛盾或不合理的地方，一定要做到波譜數(shù)據(jù)間的相互映證，最終選擇出

21、最可能的結(jié)構(gòu)。 有時還需做化學(xué)降解、衍生物制備或人工合成等化學(xué)溝通工作加以證實(shí)。第三十七張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月(4) 推斷并確定分子包括構(gòu)型、構(gòu)象在內(nèi)的主體結(jié)構(gòu) 主要通過測定NOE譜、二維和三維核磁共振譜、CD譜及ORD譜等進(jìn)行研究。對于結(jié)晶化合物還可以用X-射線衍射分析確定晶體結(jié)構(gòu)，最后還可通過人工全合成加以確認(rèn)。綜合所有研究信息，驗(yàn)證所推測結(jié)構(gòu)是否合理。 在推導(dǎo)分子結(jié)構(gòu)時，應(yīng)當(dāng)把各種波譜信息綜合起來，彼此佐證，同時要相當(dāng)重視前人已有的研究成果，熟悉有關(guān)植物化學(xué)成分研究的中、外文文獻(xiàn)并熟練掌握文獻(xiàn)調(diào)研的方法，以利于結(jié)構(gòu)研究的順利進(jìn)行并得到可靠、正確的研究結(jié)果。 有時還需應(yīng)用

22、有機(jī)反應(yīng)的知識，通過化學(xué)降解、化學(xué)溝通、化學(xué)鑒定、化學(xué)合成等手段進(jìn)行判斷。 總之，要想成為準(zhǔn)確判斷分子結(jié)構(gòu)的能手，必須經(jīng)過相當(dāng)多的親身實(shí)踐，熟悉各類化合物波譜數(shù)據(jù)的特征及其特殊的性質(zhì)和行為，不斷總結(jié)和積累研究經(jīng)驗(yàn)，熟能生巧，從而形成一套適合自己的研究程序。第三十八張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月例: 環(huán)肽的結(jié)構(gòu)鑒定第三十九張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月第四十張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月GlyAlaSerPhe1Phe2Ile第四十一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月第四十二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月第四十三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6

23、月1 環(huán)肽的氨基酸組成化合物I為白色粉末狀固體，易溶于甲醇、吡啶。對茚三酮試劑不顯色。采用應(yīng)用茚三酮試劑顯色的薄層原位化學(xué)反應(yīng)方法，即用鹽酸（6N）水解（120，1小時）后，對茚三酮呈現(xiàn)陽性反應(yīng)（紅色），這一現(xiàn)象提示該化合物為一環(huán)肽。其高分辨質(zhì)譜（HR ESI-MS）顯示M+Na+在m/z 645.3079（計(jì)算值645.3007）,表明化合物的分子式為C32H42N6O7，提示分子中有15個不飽和度。1H NMR譜中，在8.510.0間示有6個酰胺質(zhì)子，表明化合物可能為環(huán)六肽。在7.2-7.5間有10個苯環(huán)質(zhì)子信號；在3.95.0之間示有氨基酸的a-H信號；在0.61.5間示有3個CH3信號

24、, 它們分別呈現(xiàn)為2個二重峰和1個三重峰。13C NMR及DEPT譜中，在172175間，示有6個羰基信號，證實(shí)化合物為環(huán)六肽；在129-141，有12個碳信號，其中有2個季碳，10個次甲基信號，表明有2個單取代苯環(huán)結(jié)構(gòu)存在；在64.58的CH2信號, 表明有-CH2OH的存在; 在5361有5個CH信號，它們可能是氨基酸的a-C；在46.36的CH2信號, 表明可能有-CH2NH的存在; 高場區(qū)（10-40）示有3個甲基C信號。HMQC譜可將碳?xì)湫盘栆灰粚?yīng)。第四十四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 由1H-1H COSY相關(guān)譜中的氨基H、每一個氨基酸的a-H或甲基信號入手，可以找出

25、同一自旋體系中相互偶合質(zhì)子，從而確定組成環(huán)肽的氨基酸殘基。經(jīng)過認(rèn)真分析，證明組成環(huán)肽的氨基酸殘基有一個甘氨酸、一個丙氨酸、一個絲氨酸、一個異亮氨酸、兩個苯丙氨酸。2 環(huán)肽序列的確定由HMBC相關(guān)譜的a-H找出與其相關(guān)的羰基碳（通常觀察到的是每個氨基酸的a-H與其自身的羰基的相關(guān)），從而羰基信號可歸屬于相應(yīng)的氨基酸殘基；然后由HMBC相關(guān)譜中的不同氨基酸殘基的酰胺質(zhì)子與其相鄰氨基酸殘基的羰基碳的相關(guān)性（通常觀察到的是酰胺質(zhì)子與其相鄰氨基酸中的羰基碳的相關(guān)），將一個個氨基酸殘基連起來。第四十五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月在本化合物的HMBC譜中，我們觀察到以下相關(guān)點(diǎn)：AlaCO -Gl

26、yNHGlyCO -SerNH SerCO -IleNH IleCO -Phe1NHPhe1CO -Phe2NH 由此推斷該化合物為環(huán)（丙甘絲異亮苯丙1苯丙2）. 其結(jié)構(gòu)如下圖所示。 第四十六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月Ala HN 9.44（br,s,1H） -H CH 4.60（br,s,1H） -H CH3 1.56 (d,J=6.8Hz,3H)Gly HN 9.99（br,s,1H） -H CH2 4.83(dd,J=16.2Hz,1H); 3.91(br,d,J=12.6Hz,1H)Ser HN 9.34(d,J=8.1Hz,1H) -H CH 5.22（br,s,1H） -H CH2 4.42(br,d,J=8.1Hz,1H); 4.09(t,J=7.4Hz,1H)Ile HN 8.52（br,s,1H） -H CH 4.69(m,1H) -H CH 2.03（br,s,1H）-H CH2 1.13(m,1H); 1.43(m,1H) CH3 0.77(d,J=6.50,3H)