MTT法檢測(cè)復(fù)習(xí)課程

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。MTT法檢測(cè)-（1）單細(xì)胞懸液接種于96孔培養(yǎng)板；103-104細(xì)胞/孔，每孔培養(yǎng)基總量200微升（96孔培養(yǎng)板每孔容積370微升），37、5CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間（根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康臎Q定培養(yǎng)時(shí)間）（2）加入2毫克毫升的MTT液（50微升孔）；繼續(xù)培養(yǎng)3小時(shí)。（3）吸出孔內(nèi)培養(yǎng)液后，加入DMSO液（150微升孔），將培養(yǎng)板置于微孔板扳蕩器上振蕩10分鐘，使結(jié)晶物溶解。（4）酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔OD值（檢測(cè)波長(zhǎng)570納米）。記錄結(jié)果，繪制MTT法-什么是MTT法?又稱MTT比色法，是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。

2、其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。它的特點(diǎn)是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)。MTT法-缺點(diǎn)：由于MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物不溶于水，需被溶解后才能檢測(cè)。這不僅使工作量增加，也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響，而且溶解甲瓚的有機(jī)溶劑對(duì)實(shí)驗(yàn)者

3、也有損害。MTT法-MTT溶液的配制方法通常，此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此，可以稱取MTT0.5克，溶于100ml的磷酸緩沖液（PBS）或無(wú)酚紅的培養(yǎng)基中，用0.22m濾膜過(guò)濾以除去溶液里的細(xì)菌，放4避光保存即可。在配制和保存的過(guò)程中，容器最好用鋁箔紙包住。MTT法-注意事項(xiàng)MTT法只能用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞相對(duì)數(shù)和相對(duì)活力，但不能測(cè)定細(xì)胞絕對(duì)數(shù)。在用酶標(biāo)儀檢測(cè)結(jié)果的時(shí)候，為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的線性，MTT吸光度最好在0-0.7范圍內(nèi)。MTT一般最好現(xiàn)用現(xiàn)配，過(guò)濾后4C避光保存兩周內(nèi)有效，或配制成5mg/ml保存在-20度長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融，最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免

4、分解。我一般都把MTT粉分裝在EP管里，用的時(shí)候現(xiàn)配，直接往培養(yǎng)板中加，沒(méi)必要一下子配那么多,尤其當(dāng)MTT變?yōu)榛揖G色時(shí)就絕對(duì)不能再用了。MTT有致癌性，用的時(shí)候小心,有條件最好帶那種透明的簿膜手套.配成的MTT需要無(wú)菌，MTT對(duì)菌很敏感；往96孔板加時(shí)不避光也沒(méi)有關(guān)系，畢竟時(shí)間較短，或者你不放心的時(shí)候可以把操作臺(tái)上的照明燈關(guān)掉.配制MTT時(shí)用用PBS溶解,也有人用生理鹽水配，60水浴助溶。PBS配方：Nacl8gKcl0.2gNa2HPO41.44gKH2PO40.24g調(diào)pH7.4定容1LMTT法-MTT法實(shí)驗(yàn)步驟貼壁細(xì)胞：1、收集對(duì)數(shù)期細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞懸液濃度，每孔加入100ul,鋪板使待測(cè)

5、細(xì)胞調(diào)密度至1000-10000孔，（邊緣孔用無(wú)菌PBS填充）。2.、5%CO2，37孵育，至細(xì)胞單層鋪滿孔底（96孔平底板）,加入濃度梯度的藥物,原則上，細(xì)胞貼壁后即可加藥，或兩小時(shí)，或半天時(shí)間，但我們常在前一天下午鋪板，次日上午加藥.一般5-7個(gè)梯度,每孔100ul,設(shè)3-5個(gè)復(fù)孔.建議設(shè)5個(gè)，否則難以反應(yīng)真實(shí)情況3.、5%CO2，37孵育16-48小時(shí)，倒置顯微鏡下觀察。4、每孔加入20ulMTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），繼續(xù)培養(yǎng)4h。若藥物與MTT能夠反應(yīng)，可先離心后棄去培養(yǎng)液，小心用PBS沖2-3遍后，再加入含MTT的培養(yǎng)液。5、終止培養(yǎng)，小心吸去孔內(nèi)培養(yǎng)液。6、每孔加

6、入150ul二甲基亞砜，置搖床上低速振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀OD490nm處測(cè)量各孔的吸光值。7、同時(shí)設(shè)置調(diào)零孔（培養(yǎng)基、MTT、二甲基亞砜），對(duì)照孔（細(xì)胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、二甲基亞砜）懸浮細(xì)胞：(儲(chǔ)存液1001640）。g/ml，需預(yù)試尋找最佳稀釋度，1:10-1:20)；需檢測(cè)物10ul；細(xì)胞懸液50ul（即5104cell/孔），共100ul加入到96孔板（邊緣孔用無(wú)菌水填充）。每板設(shè)對(duì)照（加1001、收集對(duì)數(shù)期細(xì)胞，調(diào)節(jié)細(xì)胞懸液濃度1106/ml，按次序?qū)⒀a(bǔ)足的1640（無(wú)血清）培養(yǎng)基40ul；加ActinomycinD（有毒性）10u

7、l用培養(yǎng)液稀釋l2、置37，5%CO2孵育16-48小時(shí)，倒置顯微鏡下觀察。3、每孔加入10ulMTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），繼續(xù)培養(yǎng)4h。（懸浮細(xì)胞推薦使用WST-1，培養(yǎng)4h后可跳過(guò)步驟4），直接酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀OD570nm（630nm校準(zhǔn)）測(cè)量各孔的吸光值）4、離心（1000轉(zhuǎn)x10min），小心吸掉上清，每孔加入100ul二甲基亞砜，置搖床上低速振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀OD570nm（630nm校準(zhǔn)）測(cè)量各孔的吸光值。5、同時(shí)設(shè)置調(diào)零孔（培養(yǎng)基、MTT、二甲基亞砜），對(duì)照孔（細(xì)胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、二甲基亞砜），每組設(shè)定3

8、復(fù)孔。MTT法-參考資料：1.HYPERLINK/zyuan/blog/item/1fcaebf8e71f900fd9f9fd87.htmlt_blank/zyuan/blog/item/1fcaebf8e71f900fd9f9fd87.html2.HYPERLINK/yrj_1979/blog/static/4243082520083240334707/t_blank/yrj_1979/blog/static/4243082520083240334707/贊同0|評(píng)論2011-9-2023:19HYPERLINK/?business&aid=6&un=%A1%E2%C6%F0%CB%BE%C

9、3%A8%C3%A8%A1%E2l2t_blank起司貓貓|二級(jí)按說(shuō)是不會(huì)出現(xiàn)這種問(wèn)題的，你是融了以后放置又有結(jié)晶出來(lái)了么，如果是這樣的話是沒(méi)關(guān)系的，加MTT之前震蕩幾下就溶解了，MTT的終濃度是5ug/ml贊同0|評(píng)論2011-9-2309:11HYPERLINK/?business&aid=6&un=beaulah1216l2t_blankbeaulah1216|二級(jí)你好，我曾經(jīng)也配過(guò)不溶的MTT溶液，后來(lái)發(fā)現(xiàn)是MTT粉質(zhì)量不行的緣故，后來(lái)?yè)Q了一瓶就可以了，一般溶了以后稍微震蕩一下就可以看出來(lái)到底能不能溶解了，能溶的馬上出現(xiàn)黃色澄清液體了，我們配的不是5ug/ml，是5mg/ml.希望對(duì)樓

10、主有用贊同0|評(píng)論相關(guān)內(nèi)容2011-4-28HYPERLINK/question/256954891.html?fr=qrl&cid=985&index=1&fr2=queryt_blank做MTT實(shí)驗(yàn)時(shí)將藥物溶解到DMSO中，然后加入PBS緩沖液，可是不知道為什么.2011-10-10HYPERLINK/question/265830522.html?fr=qrl&cid=985&index=2&fr2=queryt_blankMTT液配制中用的PBS怎么配2011-4-16HYPERLINK/question/246856664.html?fr=qrl&cid=985&index=3&fr

11、2=queryt_blankMTT比色法細(xì)胞活力檢測(cè)染色后，96孔板中的上清棄去后是否要用PBS洗一下.2010-1-6HYPERLINK/question/130578294.html?fr=qrl&cid=985&index=4&fr2=queryt_blank為什么MTT法檢測(cè)藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用時(shí)，氧化性的藥物要先用PBS洗.22011-8-26HYPERLINK/question/311382518.html?fr=qrl&cid=985&index=5&fr2=queryt_blank請(qǐng)幫忙我要配置母液：121g的七水硫酸鋅需要加入到多少ml的水中，使得溶.HYPERLINK/

12、q?word=%C8%E7%BA%CE%C5%E4MTT&ct=17&pn=0&tn=ikaslist&rn=10&fr=qrl&cid=985t_blank更多關(guān)于如何配MTT的問(wèn)題等待您來(lái)回答0回答HYPERLINK/question/337497388.html?push=qlo化學(xué)題速求t_blank化學(xué)題速求0回答5HYPERLINK/question/337497270.html?push=qlo基本能力中的化學(xué)知識(shí)怎么考？t_blank基本能力中的化學(xué)知識(shí)怎么考？0回答20HYPERLINK/question/337496963.html?push=qlo(3/3)A的平均反應(yīng)速

13、率（2）x的值及t度時(shí)，上述反應(yīng)的平衡常數(shù)K.t_blank(3/3)A的平均反應(yīng)速率（2）x的值及t度時(shí)，上述反應(yīng)的平衡常數(shù)K.cell0回答40HYPERLINK/question/337496936.html?push=qlo(2/3)量小于0，在2分鐘時(shí)反應(yīng)達(dá)到平衡狀態(tài)，此時(shí)容器中剩余06摩爾B,并測(cè)得C的濃度為06摩爾負(fù)一次方.t_blank(2/3)量小于0，在2分鐘時(shí)反應(yīng)達(dá)到平衡狀態(tài)，此時(shí)容器中剩余06摩爾B,.cell0回答40HYPERLINK/question/337496916.html?push=qlo(1/3)t度時(shí)將2摩爾的A氣體和1摩爾的B氣體充入體積為2升的恒溫

14、恒容密閉容器中，發(fā)生如下反應(yīng)：2A（g）+B.t_blank(1/3)t度時(shí)將2摩爾的A氣體和1摩爾的B氣體充入體積為2升的恒溫恒容密閉.cell0回答15HYPERLINK/question/337496912.html?push=qlo你好，大俠請(qǐng)教一下醋酸乙烯和苯乙烯兩個(gè)區(qū)別在那里，我對(duì)化工一點(diǎn)也不懂，t_blank你好，大俠請(qǐng)教一下醋酸乙烯和苯乙烯兩個(gè)區(qū)別在那里，我對(duì)化工一點(diǎn)也.0回答HYPERLINK/question/337496747.html?push=qlo2-溴乙胺氫溴酸鹽與.氫氧化鈉的反應(yīng)方程式.產(chǎn)物是（二乙烯亞胺+?.）.(求速度解答.后天要用).十分感謝t_blank

15、2-溴乙胺氫溴酸鹽與.氫氧化鈉的反應(yīng)方程式.產(chǎn)物是（二乙烯亞胺+?.）.0回答HYPERLINK/question/337496387.html?push=qlo工業(yè)上用天然氣作為原材料制取甲醇，常用工藝的主要操作步驟是什么？t_blank工業(yè)上用天然氣作為原材料制取甲醇，常用工藝的主要操作步驟是什么？HYPERLINK/browse/985?lm=8&push=qlt_blank更多等待您來(lái)回答的問(wèn)題轉(zhuǎn)發(fā)到：HYPERLINK/question/320798744.htmll#o分享到itiebat_blank推廣鏈接HYPERLINK/baidu.php?url=reRK00j2UFfQE

16、PXxIxZPjdHtz54NfdHi1uE4ZIWC3lnHCLvYKCf6utmSq7wqnlQBG1sivbTQxMuwXWtZZoHAITNopqEqFzApx-Ej6NeqmjmFjX5cwQzFWB5pHIaF.7Y_aPQnYPNeLRspgHF134XSFWFkol3tH7xyZDkbz2gq_H8j-9k1QjPakbtIv1TC.U1Yk0ZDq8lOwGsKY5ydYI0KGUHYzn160I1Y0u1d3uZC0Iybq0ZKGujYknsKWpyfqn10Y0AdY5H00pvbqn0K-pyfqn0KVpyfqn0KWThnqnW0snWmt_blankmtt專業(yè)生

17、產(chǎn)商HYPERLINK/baidu.php?url=reRK00j2UFfQEPXxIxZPjdHtz54NfdHi1uE4ZIWC3lnHCLvYKCf6utmSq7wqnlQBG1sivbTQxMuwXWtZZoHAITNopqEqFzApx-Ej6NeqmjmFjX5cwQzFWB5pHIaF.7Y_aPQnYPNeLRspgHF134XSFWFkol3tH7xyZDkbz2gq_H8j-9k1QjPakbtIv1TC.U1Yk0ZDq8lOwGsKY5ydYI0KGUHYzn160I1Y0u1d3uZC0Iybq0ZKGujYknsKWpyfqn10Y0AdY5H00pvbqn0K-p

18、yfqn0KVpyfqn0KWThnqnW0snWmt_blank南京探求專業(yè)生產(chǎn)mtt.長(zhǎng)期供貨給歐美的生物制藥,科研等用戶專業(yè),高效的銷售團(tuán)隊(duì),周.HYPERLINK/baidu.php?url=reRK00aMR-3gmCTVAjeW7HaYOto4tAZNCmPAZgzHFClRUAXrKj9sbo7gDwHAFwgFGrjIDkXnZC68nHTBC_JZSTfH_ptE8wePqjdoqK7DWhPQK5I52vcC8EQuS6v3.7D_KMZWClPimJm7QSvFLKzs34-9h9mlXzEWER0.U1Yz0ZDq8lOwGsKY5ydYI0KGUHYzn160I1Y0

19、u1d3uZC0Iybq0ZKGujYknsKWpyfqn10Y0AdY5H00pvbqn0K-pyfqn0KVpyfqn0KWThnqn161nHRt_blankmttHYPERLINK/baidu.php?url=reRK00aMR-3gmCTVAjeW7HaYOto4tAZNCmPAZgzHFClRUAXrKj9sbo7gDwHAFwgFGrjIDkXnZC68nHTBC_JZSTfH_ptE8wePqjdoqK7DWhPQK5I52vcC8EQuS6v3.7D_KMZWClPimJm7QSvFLKzs34-9h9mlXzEWER0.U1Yz0ZDq8lOwGsKY5ydYI0KGUHY

20、zn160I1Y0u1d3uZC0Iybq0ZKGujYknsKWpyfqn10Y0AdY5H00pvbqn0K-pyfqn0KVpyfqn0KWThnqn161nHRt_blank北京普利萊基因技術(shù)有限公司,生物試劑,實(shí)驗(yàn)材料HYPERLINK/baidu.php?url=reRK00ajWYxekoVfwRgtMVqf13auyUq9QyM48-UUiCMA2z-6OwSWVnj_siFjrFd_L92_MqFrzDcmA8Lc4oAylh2d-HuXbOMtVEuJenDXqHTgRi6QfMSPyzLgBVkY.DY_jy17XlqeCpblgs_YmlmQMk34bk32PargEo

21、knXrS1o6hC_f3h2OOOS1OOO_k_lb_u7QSvFLKzs34-9h9mer1Wk3J0.U1Y10ZDq8lOwGsKY5ydYI0KGUHYzn160I1Y0u1d3uZC0Iybq0ZKGujYknsKWpyfqn10Y0AdY5H00pvbqn0K-pyfqn0KVpyfqn0KWThnqnWmvP1mt_blankmtt(效果同CCK-8)試劑盒HYPERLINK/baidu.php?url=reRK00ajWYxekoVfwRgtMVqf13auyUq9QyM48-UUiCMA2z-6OwSWVnj_siFjrFd_L92_MqFrzDcmA8Lc4oAylh2

22、d-HuXbOMtVEuJenDXqHTgRi6QfMSPyzLgBVkY.DY_jy17XlqeCpblgs_YmlmQMk34bk32PargEoknXrS1o6hC_f3h2OOOS1OOO_k_lb_u7QSvFLKzs34-9h9mer1Wk3J0.U1Y10ZDq8lOwGsKY5ydYI0KGUHYzn160I1Y0u1d3uZC0Iybq0ZKGujYknsKWpyfqn10Y0AdY5H00pvbqn0K-pyfqn0KVpyfqn0KWThnqnWmvP1mt_blank細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性快速高靈敏度檢測(cè)試劑010-88114289CCK用途:藥

23、物.7945125HYPERLINK/search/zhidao_help.htmll如何選擇頭銜o采納率：0t_blank一級(jí)HYPERLINK/q?ct=24&cm=16&tn=ucframeworklaskt_blank我的提問(wèn)HYPERLINK/q?ct=24&cm=16&tn=ucframeworklanswert_blank我的回答HYPERLINK/shopt_blank積分商城（0）條消息等待處理今天你做任務(wù)了沒(méi)？HYPERLINK/q?ct=24&cm=16&tn=ucframeworkltaskt_blank全部任務(wù)HYPERLINK/q?ct=24&cm=16&tn=uc

24、framework&showstatus=2&showtask=40ltask-2t_blank知道學(xué)院+990HYPERLINK/q?ct=24&cm=16&tn=ucframework&showstatus=2&showtask=11ltask-3t_blank新秀集訓(xùn)+10HYPERLINK/q?ct=24&cm=16&tn=ucframework&showstatus=2&showtask=12ltask-3t_blank茁壯成長(zhǎng)+100HYPERLINK/q?ct=24&cm=16&tn=ucframework&showstatus=2&showtask=9ltask-3t_blan

25、k持之以恒HYPERLINK/question/320798744.htmll#進(jìn)入個(gè)人中心HYPERLINK/baidu.php?url=reRK000amDSUNIgJXHLSa0dueOF9wBLTAm81XJ0q3gzFLWGG1IVVFGPq0nz6xmFhcEKRjxmyg2QF1hofcAuO9WR6U7XODw1OG70bfAPARiadZZJZQmbivRl8vQvI.7Y_aPQnYPNeLRspgHF134XSFWFkol3tH7xyZDkbz2gq_H8j-9k1QjPakbtIv1TC.U1Yk0ZDq8lOwGsKY5ydYI0KGUHYznjT0I1Y0u1d3u

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27、Yk0ZDq8lOwGsKY5ydYI0KGUHYznjT0I1Y0u1d3uZC0Iybq0ZKGujYknsKWpyfqn10Y0AdY5H00pvbqn0K-pyfqn0KVpyfqn0KWThnqnHRLPHft_blank南京探求專業(yè)生產(chǎn)mtt.長(zhǎng)期供貨給歐美的生物制藥,科研等用戶專業(yè),高效的銷售團(tuán)隊(duì),周.HYPERLINK/baidu.php?url=reRK00aA5FaLMqrH_Wu2QdvoZBX2eFFw7K4lNBiSGHZezdnb5uSSFvtBjoyFh7wA9tElmxQxlvPXB3a1d_-IMwkCi7HCeIjk9m0ZaB7xgwVK1Gn0ewGsj

28、Q-ZAon_.7D_KMZWClPimJm7QSvFLKzs34-9h9mlXzEWER0.U1Yz0ZDq8lOwGsKY5ydYI0KGUHYznjT0I1Y0u1d3uZC0Iybq0ZKGujYknsKWpyfqn10Y0AdY5H00pvbqn0K-pyfqn0KVpyfqn0KWThnqPH64njTt_blankmttHYPERLINK/baidu.php?url=reRK00aA5FaLMqrH_Wu2QdvoZBX2eFFw7K4lNBiSGHZezdnb5uSSFvtBjoyFh7wA9tElmxQxlvPXB3a1d_-IMwkCi7HCeIjk9m0ZaB7xgwVK

29、1Gn0ewGsjQ-ZAon_.7D_KMZWClPimJm7QSvFLKzs34-9h9mlXzEWER0.U1Yz0ZDq8lOwGsKY5ydYI0KGUHYznjT0I1Y0u1d3uZC0Iybq0ZKGujYknsKWpyfqn10Y0AdY5H00pvbqn0K-pyfqn0KVpyfqn0KWThnqPH64njTt_blank北京普利萊基因技術(shù)有限公司,生物試劑,實(shí)驗(yàn)材料HYPERLINK/baidu.php?url=reRK00Kq42aS5DnDXAKlx00pTaO-zkyOXbxQtnStqqjWYAYn6nT8MRdpYgkUJUNdBkeylqat2Hs2DAa

30、FnriCOh9ZgBixGas-sClTFVptGxVYpbzUWsMxpYohZM6D.DY_jy17XlqeCpblgs_YmlmQMk34bk32PargEoknXrS1o6hC_f3h2OOOS1OOO_k_lb_u7QSvFLKzs34-9h9mer1Wk3J0.U1Y10ZDq8lOwGsKY5ydYI0KGUHYznjT0I1Y0u1d3uZC0Iybq0ZKGujYknsKWpyfqn10Y0AdY5H00pvbqn0K-pyfqn0KVpyfqn0KWThnqP10YP0t_blankmtt(效果同CCK-8)試劑盒HYPERLINK/baidu.php?url=reRK0

31、0Kq42aS5DnDXAKlx00pTaO-zkyOXbxQtnStqqjWYAYn6nT8MRdpYgkUJUNdBkeylqat2Hs2DAaFnriCOh9ZgBixGas-sClTFVptGxVYpbzUWsMxpYohZM6D.DY_jy17XlqeCpblgs_YmlmQMk34bk32PargEoknXrS1o6hC_f3h2OOOS1OOO_k_lb_u7QSvFLKzs34-9h9mer1Wk3J0.U1Y10ZDq8lOwGsKY5ydYI0KGUHYznjT0I1Y0u1d3uZC0Iybq0ZKGujYknsKWpyfqn10Y0AdY5H00pvbqn0K-pyfq

32、n0KVpyfqn0KWThnqP10YP0t_blank細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性快速高靈敏度檢測(cè)試劑010-88114289CCK用途:藥物.HYPERLINK/adrc.php?t=000k00000fiVX0m0Kgfy0jNfAsKYnoFr00000000000X0000LTj8a0.THveoqAM0A3qmh7GuZNGpv4EIdqWTZc0T1Y4rycsnjF-mWPBuW0sPjR40ZRqPRRsnHf1nWFKfW0zfWuKf1KDnYDkn1DsnYmznHbsPYD0mHdbXWKVmLCsPRqgigIPwDG_yyGrpNGJfgIrw

33、7RdihYkph7gRH-Pp-RsHMGFXRqDwyduNjK3yZGKUywZnj-2U-uYR7PpIhPVp1-PfdGlu7I2IhPVp1-2UbF4mNfsnDGVwhVWnYGJR7wKFHPD0ARqpZwYTjCEQv-1pAqsQhF9pywdQhPEUfKWThnqPHmdPjft_blankHYPERLINK/t_blank來(lái)百度推廣化學(xué)2011BaiduHYPERLINK/duty/t_blank使用百度前必讀HYPERLINK/search/zhidao_help.htmll知道協(xié)議t_blank知道協(xié)議任務(wù)提醒xMTT法又稱MTT比色法，是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和

34、生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。它的特點(diǎn)是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)。目錄HYPERLINK/view/1537697.html1#1MTT法介紹HYPERLINK/view/1537697.html2#2缺點(diǎn)HYPE

35、RLINK/view/1537697.html3#3MTT溶液的配制方法HYPERLINK/view/1537697.html4#4注意事項(xiàng)HYPERLINK/view/1537697.html5#5MTT法實(shí)驗(yàn)步驟HYPERLINK/view/1537697.html5_1#5_1貼壁細(xì)胞HYPERLINK/view/1537697.html5_2#5_2懸浮細(xì)胞HYPERLINK/view/1537697.html1MTT法介紹HYPERLINK/view/1537697.html2缺點(diǎn)HYPERLINK/view/1537697.html3MTT溶液的配制方法HYPERLINK/view

36、/1537697.html4注意事項(xiàng)HYPERLINK/view/1537697.html5MTT法實(shí)驗(yàn)步驟HYPERLINK/view/1537697.html5_1貼壁細(xì)胞HYPERLINK/view/1537697.html5_2懸浮細(xì)胞展開HYPERLINK/view/1537697.htm編輯本段MTT法介紹又稱MTT比色法，是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中HYPERLINK/albums/1537697/1537697.htmll0$7ac88051a82b256943a75b42o查看圖片t_blankMTT法的HYPERLINK/view/247647

37、5.htmt_blank琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色HYPERLINK/view/148817.htmt_blank結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。HYPERLINK/view/43063.htmt_blank二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及HYPERLINK/view/10179.htmt_blank腫瘤放射敏感性測(cè)定等。它

38、的特點(diǎn)是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)。HYPERLINK/view/1537697.htm編輯本段缺點(diǎn)由于MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物不溶于水，需被HYPERLINK/view/127111.htmt_blank溶解后才能檢測(cè)。這不僅使工作量增加，也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響，而且溶解甲瓚的有機(jī)溶劑對(duì)實(shí)驗(yàn)者也有損害。HYPERLINK/view/1537697.htm編輯本段MTT溶液的配制方法通常，此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此，可以稱取MTT0.5克，溶于100ml的磷酸緩沖液（PBS）或無(wú)酚紅的HYPERLINK/view/72787.htmt_blank培養(yǎng)基中，用0.22m濾膜過(guò)濾以除去溶液里的HYPERLINK/view/19168.htmt_blank細(xì)菌，放4避光保存即可。在配制和保存的過(guò)程中，容器最好用鋁箔紙包住。HYPERL