去勢抵抗性前列腺癌生物標記物研究進展課件

1、去勢抵抗前列腺癌(CRPC)診療研究進展內(nèi)部資料，僅供醫(yī)學藥物專業(yè)人士參考，嚴禁翻印及傳播去勢抵抗前列腺癌(CRPC)診療研究進展一、藥物治療現(xiàn)狀及進展概覽二、藥物治療的生物標記物研究進展多西他賽(TAX-327)卡巴他賽(TROPIC) Sipuleucel-T(IMPACT)阿比特龍 化療后(COU-AA-301)Enzalutamide(AFFIRM)阿比特龍化療前(COU-AA-302)2010201120122013鐳-223(ALSYMPCA)201020112012 六種FDA批準藥物的適應癥標準方案推薦方案可選方案臨床實踐不推薦專家意見未轉移已轉移未經(jīng)化療接受過化療無/輕微癥狀

2、體力狀態(tài)好有癥狀體力狀態(tài)好有癥狀體力狀態(tài)差體力狀態(tài)好體力狀態(tài)差觀察一線抗雄藥物 或 酮康唑+類固醇化療免疫治療阿比特龍+潑尼松恩雜魯胺多西他賽Sipuleucel-T一線抗雄藥物酮康唑+類固醇阿比特龍+潑尼松恩雜魯胺多西他賽米托蒽醌酮康唑+類固醇放射性核素雌莫司汀Sipuleucel-T阿比特龍+潑尼松恩雜魯胺酮康唑+類固醇放射性核素Sipuleucel-T阿比特龍+潑尼松恩雜魯胺卡巴他賽酮康唑+類固醇再次多西他賽Lowrance WT et al. J Urol. 2015 Oct 20. pii: S0022-5347(15)05026-0. doi: 10.1016/j.juro.201

3、5.10.086I類患者II類患者III類患者IV類患者V類患者VI類患者2015 AUA指南對不同狀態(tài)CRPC的治療建議 多西他賽化療前阿比特龍 多西他賽Sipuleucel-T氯化鐳223EnzalutamideTrial多西他賽化療后卡巴他賽Trial阿比特龍 EnzalutamideTrial氯化鐳223Trial骨靶向治療唑來膦酸地諾單抗mCRPC藥物治療分類*一、AR信號通路抑制劑（CYP17抑制劑，雄激素受體拮抗劑）*二、化療*三、放射性同位素（Radium-223）*四、免疫治療（瘤苗；Ipilimumab）*五、骨轉移靶向（地諾單抗）*六、靶向治療*七、其他治療（如DNA修復

4、抑制劑 Olaparib奧拉帕利）免疫CYP17靶向骨轉移同位素AR拮抗化療一、孰優(yōu)孰劣已批準多種新藥，但沒有各種新藥的頭對頭研究 二、療效有限目前所有獲批的治療藥物的治療獲益有限（3-5個月）不同順序？不同組合？新藥三、哪種藥物適合哪種患者個體化用藥是個難題，臨床上仍然沒有標準寄希望于預測治療效果的生物標記物當前mCRPC 患者治療的局限性治療前預后： 與臨床結局相關 預測： 預測相關治療的敏感度和抵抗性生物標志物：預后標志物、預測標志物、應答標志物、療效標志物治療后應答標志物 治療后會改變，但對于治療獲益不是必須的療效標志物治療后會改變，和治療獲益相關腫瘤相關標志物各種蛋白和亞型：PSA、

5、AR和LDHDNA突變、缺失、CNV、易位、甲基化等RNA表達和/或改變（較大、較小、編碼和非編碼）CTC、致癌組、外來體和所有內(nèi)容物大量成像患者自身需要關注點疼痛/體能狀態(tài)堿性磷酸酶白蛋白Tc-99 MDP骨掃描免疫細胞分析 造血細胞功能：血紅蛋白、有核 RBC等甾體水平兩種類型的生物標志物：腫瘤相關標志物和患者自身PSA倍增時間短提示疾病進展快高PSA對患者不利，但是其他指標更有利于預后判斷 LDH、堿性磷酸酶、血紅蛋白等指標在CRPC中更加重要 PSA最低值很重要PSA降低的幅度可以預測PSA降低的持續(xù)時間前列腺癌的進展速度和疾病負擔可通過PSA倍增時間和PSA反映但是，還需要有更多的指

6、標來補充 疾病狀態(tài)和治療方式同樣需要考慮雖然有大量復雜的生物標志物，但PSA仍是關鍵標志物預后和預測療效的生物標志物預測治療的應答或抵抗CTC RNA測定中的AR-V7已經(jīng)支持阿比特龍和恩雜魯胺的療效DNA修復缺陷和PARP抑制應答與包括存活期的各種終點相關許多生物標記物包括PSA、堿性磷酸酶、Hgb、LDH、疾病程度、轉移部位（肝）等 預后的生物標志物預測療效的生物標志物預測療效的生物標志物AR-V7雄激素信號傳導通路雙氫睪酮睪酮Mellado B, et al. Arch. Esp. Urol. 2013; 66(5) 453-462T (DHT) AR雄激素受體復合物結合胞核DNA激活轉

7、錄過程 基因表達 雄激素受體(AR)基因: 結構和蛋白X染色體氨基末端結構域DNA結合結構域配體結合結構域Mellado B, et al. Arch. Esp. Urol. 2013; 66(5) 453-462雄激素受體(AR)基因: 結構和蛋白Mellado B, et al. Arch. Esp. Urol. 2013; 66(5) 453-462AR剪切變異的最初發(fā)現(xiàn)Dehm及同事最初于2008年發(fā)表文章首次報道了一種雄激素受體(AR)外顯子剪切變異，可以介導AR活化，在前列腺癌治療抵抗的機制中有作用。22Rv1前列腺癌細胞表達了三種異構體：一種全長復制的外顯子3和兩個缺少COOH末

8、端區(qū)(CTD)的截短基因表達的產(chǎn)物。這些AR異構體可以激活并促進內(nèi)源性AR依賴基因的表達，以及促進22Rv1細胞的配體非依賴性增殖。Dehm SM, et al. Splicing of a novel androgen receptor exon generates a constitutively active androgen receptor that mediates prostate cancer therapy resistance. Cancer Res. 2008;68(13):546977.AR短異構體顯著介導雄激素難治性22Rv1細胞的雄激素非依賴增殖22Rv1 cell

9、s were transfected with nontargeted control (CTRL) siRNA or siRNAs targeted to AR exon 1 (siAR-2) or 7 (siAR-1). A, transfected cells were cultured 72 h posttransfection, lysed, and subjected to Western blot using a polyclonal antibody targeted to the AR NTD. B, transfected cells were seeded and cul

10、tured for 24 h in medium supplemented with 5% CSS. Cells were treated with 1 nmol/LDHT or ethanol (EtOH, vehicle control). The relative number of viable cells 0 and 96 h after exposure to these compounds was determined by MTS assay. Values shown are relative to siCTRL-treated cells without androgens

11、, which was arbitrarily set to 100%. Columns, mean from two experiments performed in quadruplicate; bars, SE. C, transfected cells were seeded and treated as described in B. The relative number of proliferating cells 24 h after treatment was determined by BrdUrd incorporation. Values are relative to

12、 siCTRL-treated cells grown without androgens, which was arbitrarily set to 100%. Columns, mean from two experiments performed in quadruplicate; bars, SE.Dehm SM, et al. Splicing of a novel androgen receptor exon generates a constitutively active androgen receptor that mediates prostate cancer thera

13、py resistance. Cancer Res. 2008;68(13):546977.AR的基因結構和AR剪切變異的類型Lu C,Luo J. Decodingtheandrogen receptorsplicevariants. Transl Androl Urol.2013;2(3):178-186.有標準和隱秘外顯子拼接段的AR基因結構名稱、功能標注、外顯子組成和特定變異mRNA(顏色與A圖匹配)和肽序列(灰色)聚焦AR-V7變異AR-V7 (也稱為AR3)和 ARv567es最受關注，因為這些AR剪切變異體在前列腺癌細胞株及人體組織病理中常常被檢測到。上述AR變異在有或無AR-F

14、L活化的細胞株中過度表達時，可活化轉錄AR-FL靶基因。其他AR變異可能是條件性活化，例如針對特定細胞類型的轉錄活性。在某些條件（例如雄激素剝奪、AR-FL敲除等）下，AR-V7的表達水平顯著增加，提示AR剪切變異除了有特定細胞功能以外，還可能參與特定的疾病進展過程。如在CRPC中ARV7的表達上調(diào)20倍之多，可以參與從激素敏感到去勢抵抗的過程。Lu C,Luo J. Decodingtheandrogen receptorsplicevariants. Transl Androl Urol.2013;2(3):178-186.AR-V7的作用機制AR-V7與AR-FL受體形成同型或異型二聚體

15、化， 細胞核轉位后和識別雄激素反應元件影響下游基因表達。Maughan BL,Antonarakis ES. Clinical Relevance of Androgen Receptor Splice Variants in Castration-Resistant Prostate Cancer. Curr Treat Options Oncol.2015;16(12):57. T 睪酮，ARFL 全長雄激素受體，AR-V7雄激素剪切變異7不同階段前列腺癌組織的AR-V7表達水平CRPC患者中相比局限性前列腺癌和新診斷轉移性CRPC患者的AR-V7表達顯著增高(p 0.001)。局限性前列

16、腺癌和新診斷轉移性前列腺癌的兩組患者之間AR-V7表達無顯著性差異(p= 0.079)。Qu Y, et al. ConstitutivelyactiveAR-V7playsanessentialrolein thedevelopmentandprogressionofcastration-resistant prostatecancer. Sci Rep.2015;5:7654. AR-V7與前列腺癌進展相關 HRPC患者(n=25)相比未曾內(nèi)分泌治療前列腺癌患者(n=82)，AR-V7 mRNA水平增高20倍(P 0.0001)。在未曾激素治療的前列腺癌患者中，AR-V7表達較高可顯著預測

17、手術治療后生化學復發(fā)(p=0.02)。Hu R, et al. Ligand-independent androgen receptor variants derived from splicing of cryptic exons signify hormone-refractory prostate cancer. Cancer Res.2009;69(1):16-22. B, 124名臨床前列腺樣本的實時PCR定量結果四個臨床樣本組比較閾值分析的AR-V7正?；磉_值（指數(shù)計量）。正常組(n = 17)，RRP樣本的正常前列腺組織；未激素治療的前列腺癌組(n = 82)，RRP樣本的前列

18、腺癌樣本；激素難治的前列腺癌組HRPC (TURP) (n = 4)，TURP的HRPC樣本；HRPC(活檢)組 (n = 21)，活檢的轉移性HRPC樣本C, Kaplan-Meier 點圖比較AR-V7低于中位值組(n = 38)和AR-V7高于中位值組(n = 28)的無進展生存。TURP，經(jīng)尿道前列腺切除。HRPC，激素難治性前列腺癌。新型AR靶向治療藥物的治療抵抗可能與AR剪切變異有關有一定量的少數(shù)患者對阿比特龍或恩雜魯胺根本無反應，這種現(xiàn)象稱為原發(fā)性抵抗。 大多數(shù)對阿比特龍和恩雜魯胺有初始反應的患者以后隨時間變化會不同程度出現(xiàn)繼發(fā)性抵抗。對AR導向治療抵抗有一些推測機制，其中AR剪

19、切變異則是主要的抵抗機制。Antonarakis ES. Predictingtreatmentresponsein castration-resistantprostatecancer: couldandrogenreceptorvariant-7holdthe key? Expert Rev Anticancer Ther.2015;15(2):143-5. AR-V7與不同新型藥物治療反應的關系研究方法：前瞻性入選初始紫杉醇化療的mCRPC患者(n=37)，并與以往恩雜魯胺或阿比特龍治療患者(n=62)的資料進行比較。采用逆轉錄PCR分析CTCs中AR-V7 mRNA?；€CTCs的AR

20、-V7檢出率：紫杉醇組46%，恩雜魯胺或阿比特龍組29%中位隨訪時間：紫杉醇組7.7(0.7-19.0)月，恩雜魯胺或阿比特龍組13.0(1.4-19.8)月。研究結果：AR-V7(+)和AR-V7(-)患者的PSA反應、PSA-PFS和PFS均相當。AR-V7(+)：紫杉醇的療效優(yōu)于恩雜魯胺或阿比特龍AR-V7(-)：紫杉醇的療效與恩雜魯胺或阿比特龍相當。Antonarakis ES, et al. AndrogenReceptorSpliceVariant7andEfficacyofTaxaneChemotherapyinPatientsWithMetastaticCastration-ResistantProstateCancer. JAMA Oncol.2015;1(5):582-91.第一 第二 第三第一 第二 第三第一 第二 第三第一 第二 第一 第二 第一 第二 第三阿比特龍/恩雜魯胺治療后CTC中AR-V7 mRNA的表達Ant