選修3專題1基因工程11DNA重組技術(shù)的基本工具ppt課件

1、1.1DNA重組技術(shù)的根本工具專題1 基因工程太原市外國語學(xué)校趙成藝基因工程基因工程的別名操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程結(jié)果 基因工程是指按照人們的愿望，進(jìn)展嚴(yán)厲的設(shè)計(jì)，經(jīng)過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，發(fā)明出更符合人們需求的新的生物類型和生物產(chǎn)品?；蚱唇蛹夹g(shù)或DNA重組技術(shù)生物體外基因DNA分子程度剪切拼接導(dǎo)入表達(dá)人類需求的基因產(chǎn)物基因工程產(chǎn)品延熟保鮮轉(zhuǎn)基因西紅柿 研討者發(fā)現(xiàn)，控制植物衰老激素乙烯合成的酶基因，是導(dǎo)致植物衰老的重要基因，假設(shè)可以利用基因工程的方法抑制這個(gè)基因的表達(dá)，番茄就不會容易變軟和腐爛了。 抗蟲的基因來自蘇云金桿菌。蘇云金桿菌構(gòu)成的伴胞晶體是一

2、種毒性很強(qiáng)的蛋白晶體，能使棉鈴蟲等鱗翅口害蟲癱瘓致死?？茖W(xué)家將編碼這個(gè)蛋白質(zhì)的基因?qū)胱魑?，使作物本身具有抵御蟲害的才干。抗蟲棉 轉(zhuǎn)基因鮭魚轉(zhuǎn)基因超級鼠 日本三得利公司2021年10月20日宣布，將于11月3日出賣世界上初次培育勝利的藍(lán)玫瑰。玫瑰的基因不能編碼合成藍(lán)色色素，三得利公司經(jīng)過把三色紫羅蘭的基因植入玫瑰，培育出含藍(lán)色素的玫瑰，售價(jià)在2000日元至3000日元。 藍(lán)色妖姬根底實(shí)際和技術(shù)的開展催生了基因工程 DNA是遺傳物質(zhì)的證明DNA雙螺旋構(gòu)造和中心法那么確實(shí)立遺傳密碼的破譯基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn)工具酶的發(fā)明DNA合成和測序技術(shù)的發(fā)明DNA體外重組的實(shí)現(xiàn)重組DNA表達(dá)實(shí)驗(yàn)的勝利第一例轉(zhuǎn)基因

3、動物問世PCR技術(shù)的發(fā)明根底實(shí)際技術(shù)發(fā)明DNA重組技術(shù)的根本工具 “分子手術(shù)刀限制性核酸內(nèi)切酶DNA銜接酶基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體“分子縫合針“分子運(yùn)輸車“分子手術(shù)刀切點(diǎn)：主要在原核生物中分布：特點(diǎn)：磷酸二酯鍵特異性，一種限制酶只能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。EcoR限制酶只識別GAATTC，并在GA間切割Sma限制酶只識別CCCGGG，并在GC間切割。例如：限制性核酸內(nèi)切酶(簡稱限制酶)CT TCATGAATTCCGTACCCGGGCCTAA GAAGTACTTAAGGCATGGGCCCGGATT EcoR限制酶酶切位點(diǎn)GGCATGGGAATTCCG

4、TACCC黏性末端CTTCATG GAAGTACTTAA平末端Sma限制酶酶切位點(diǎn) GGGCCTAA CCCGGATT 原核生物容易遭到自然界外源DNA的入侵，限制酶是一種防御工具，當(dāng)外源DNA侵入時(shí)，會利用限制酶將外源DNA切割掉，使之失效，保證本身的平安。 由于含有某種限制酶的細(xì)胞，其DNA分子中或不具備這種限制酶的識別序列，或經(jīng)過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到所識別序列的堿基上，使限制酶不能將其切開。限制酶在原核生物中的作用是什么嗎？為什么細(xì)菌中限制酶不剪切細(xì)菌本身的DNA？屬名種名菌株(品系)大腸桿菌R型菌株分別出的第一個(gè)限制酶EscherichiacoliREcoR種名前兩字母(小寫、斜體)菌

5、株 (品系)羅馬數(shù)字區(qū)分同一菌株分別出的不同酶例：流感嗜血桿菌(Haemophilus influenzae)d株系中第二種限制酶的命名：Hind II 粘質(zhì)沙雷氏菌( Serratia marcescens sb)中第一種限制酶的命名：Sma限制酶的命名屬名首字母(大寫、斜體) DNA銜接酶銜接的是兩個(gè)脫氧核苷酸分子的什么部位？“分子縫合針DNA銜接酶CTTAAGAATTCG磷酸二酯鍵DNA銜接酶與DNA聚合酶一樣嗎？為什么？ 答：不一樣。DNA銜接酶和DNA聚合酶都是構(gòu)成磷酸二酯鍵, 二者的差別主要表如今：1DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核酸片段的3末端的羥基上，構(gòu)成磷酸二酯鍵；而

6、DNA銜接酶是在兩個(gè)DNA片段之間構(gòu)成磷酸二酯鍵，不是在單個(gè)核苷酸與DNA片段之間構(gòu)成磷酸二酯鍵。2DNA聚合酶是以一條DNA鏈為模板，將單個(gè)核苷酸經(jīng)過磷酸二酯鍵構(gòu)成一條與模板鏈互補(bǔ)的DNA鏈；而DNA銜接酶是將DNA雙鏈上的兩個(gè)缺口同時(shí)銜接起來。因此DNA銜接酶不需求模板。 此外，二者雖然都是由蛋白質(zhì)構(gòu)成的酶，但組成和性質(zhì)各不一樣。DNA銜接酶與DNA聚合酶一樣嗎？為什么？ “分子縫合針DNA銜接酶種類EcoliDNA連接酶T4DNA連接酶來源連接末端類型共性T4噬菌體大腸桿菌只能銜接黏性末端既可銜接黏性末端，又可銜接平末端。這兩種銜接酶催化反響根本一樣，都是銜接雙鏈DNA的缺口，而不能銜接單鏈DNA。基因的載體質(zhì)粒，噬菌體的衍生物，動植物病毒等。“分子運(yùn)輸車載體必需具備的條件：3、具有某些標(biāo)志基因，便于進(jìn)展挑選。如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反響的基因等2、具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因銜接；1、可以在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保管；4、對受體細(xì)胞無害。載體的作用：1、將外源基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中去。2、利用載體在受體細(xì)胞內(nèi)對外源基因進(jìn)展大量復(fù)制。常用的載體有：質(zhì)粒 質(zhì)粒是基