組織胚胎學(xué)緒論 人衛(wèi)7版

1、組織胚胎學(xué)緒論 人衛(wèi)7版一、組織學(xué)的研究內(nèi)容 組織學(xué)（histology）：研究機體微細結(jié)構(gòu)及其 相關(guān)功能的科學(xué)。組織上皮組織結(jié)締組織肌肉組織神經(jīng)組織細胞細胞間質(zhì)器官和系統(tǒng)（細胞外基質(zhì)）2細胞：是機體形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能的基本單位。組織：由細胞和細胞間質(zhì)(又稱細胞外基質(zhì)) 組成的群體結(jié)構(gòu)，是構(gòu)成機體器官的 基本成分。 器官：具有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu)，并執(zhí)行特定的 生理功能。系統(tǒng)：由一些結(jié)構(gòu)連續(xù)、功能相關(guān)的器官組合而 成，完成連續(xù)的生理活動。 細胞-組織-器官-系統(tǒng)3人體器官分類組織學(xué)特征實質(zhì)性器官中空性中央：大空腔表面：被模如：消化腺、淋巴器官 、 內(nèi)分泌腺、腎臟等。如：心血管、消化管、呼吸道等內(nèi)部：實質(zhì)

2、行使功能管壁：分34層4組織學(xué)結(jié)構(gòu)觀察組織學(xué) 結(jié)構(gòu)光鏡結(jié)構(gòu)用光學(xué)顯微鏡觀察的結(jié)構(gòu)（LM）(light microscope ,LM 簡稱光鏡)電鏡結(jié)構(gòu)電子顯微鏡下觀察的結(jié)構(gòu)（EM）(electron microscope, EM簡稱電鏡） 又稱超微結(jié)構(gòu)(ultrastructure) 5二、組織學(xué)的研究方法和常用技術(shù) (一)光學(xué)顯微鏡技術(shù) 1、常用組織切片標本制備技術(shù) 石蠟切片術(shù) 取材和固定; 脫水和包埋; 切片和染色; 封片。 其他；火棉膠包埋, 冰凍切片, 涂片,鋪片,磨片等 6 蘇木精 伊紅 堿性染料酸性染料 染成紅色 （嗜酸性）細胞核中的染色質(zhì)、細胞質(zhì)中的核糖體 細胞質(zhì)細胞間質(zhì)成份 染

3、成藍色（嗜堿性）常用染色方法：HE染色（Hematoxylin）（Eosin）HE染色7嗜堿性：可使細胞核內(nèi)的染色質(zhì) 及細胞質(zhì)內(nèi)的核糖體等 結(jié)構(gòu)染成藍紫色。嗜酸性：可使多數(shù)細胞的細胞質(zhì) 染成粉紅色。 中性： 與兩種染液親合力都不強。組織結(jié)構(gòu)的嗜色性嗜堿性嗜酸性8 A 嗜銀性 B 嗜鉻性 C 異染性其它染色方法9普通光學(xué)顯微鏡是觀察組織細胞微細結(jié)構(gòu)最常用的工具，分為光學(xué)部分機械部分起放大作用光鏡的分辨率約為可放大1500倍左右（light microscope ，LM ）10幾種特殊顯微鏡術(shù) （1）相差顯微鏡 (phase contrast microscope)用于觀察生活細胞和末經(jīng)染色細胞的

4、形態(tài)結(jié)構(gòu)。 神經(jīng)干細胞培養(yǎng)11(2) 熒光顯微鏡 (fluorescence micrscope) 是用以觀察 細胞、組織內(nèi) 熒光物質(zhì)的分布。 神經(jīng)球12 (二) 共焦激光掃描顯微鏡 共焦激光掃描顯微鏡 (confocal laser scanning microscope，CLSM) 由激光光源、共焦成像掃描 系統(tǒng)、電子光學(xué)系統(tǒng)和微機 圖象分析系統(tǒng)四部份構(gòu)成。 可對樣品進行斷層掃描重建 三維圖像，進行體視學(xué)分析； 測定細胞內(nèi)pH、鈣濃度等； 更精確地檢測、識別， 組織細胞的微細結(jié)構(gòu)及其變 化。CLSM又稱細胞CT。CLSM13CLSM 圖像Human neuronal precursor c

5、ellsCLSM海馬MR、GR共存14 (三)電子顯微鏡技術(shù) （electron microscope, EM） 透射電鏡 (transmission electron microscope,TEM) 觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu) 分辨率為0.1-0.2nm,可放大幾萬幾十萬倍 掃描電鏡（scanning electron microscope,SEM) 觀察組織或細胞表面的立體結(jié)構(gòu) 冰凍蝕刻（freeze etching method） 觀察細胞斷裂表面形態(tài)結(jié)構(gòu) 分析電鏡 X射線顯微分析術(shù)（Xray microanalysis） 研究細胞、組織內(nèi)元素種類分布和含量15透射電鏡與照片TEM淋巴細胞16掃描

6、電鏡與照片SEMSEM 1.纖毛 2.微絨毛17冰凍蝕刻細胞 冷凍斷裂腎小球右下線粒體 冰凍蝕刻照片18分析電鏡X線微區(qū)分析圖片分析電鏡X線微區(qū)分析19糖類顯示法PAS反應(yīng)： 過碘酸希夫反應(yīng)(periodic acid Schiff reaction，PAS)： 檢測組織或細胞中有無多糖存在。 原理：多糖PA氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀(四)組織化學(xué)和細胞化學(xué)技術(shù) PAS反應(yīng)陽性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在 PAS陽性小腸上皮20組織細胞化學(xué)染色圖片酶細胞化學(xué)神經(jīng)元ACP酶陽性 脂類顯示法蘇丹 脂類顯示法蘇丹 鋨酸髓鞘染色 核酸顯示法21 利用抗原（antigen, Ag），抗體（ant

7、ibody）特異結(jié)合的原理，用已知抗體檢測未知抗原的一種方法。免疫細胞化學(xué)原理22免疫細胞化學(xué)標記物23免疫細胞化學(xué)PAP法24免疫細胞化學(xué)ABC法25(五)免疫組織化學(xué)與細胞化學(xué)技術(shù)免疫組織化學(xué)術(shù)(immunohistochemistry) 是將免疫學(xué)原理與組織化學(xué)技術(shù)相結(jié)合建立的新技術(shù)，根據(jù)抗原與抗體特異性結(jié)合的特點，檢測組織細胞內(nèi)某種多肽、蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的存在與分布。 人鼻粘膜上皮棘細胞細胞間橋TM陽性26(六)原位雜交術(shù)原位雜交(in situ hybridization)是一種敏感性高、特異性強的，能在組織細胞原位進行的核酸分子雜交技術(shù)。常用的標記物有兩種：1、放射性同位素， 如

8、3H、14C、 32P、35S、125I，2、為非放射性物質(zhì)， 如地高辛等。 非放射性原位雜交 海馬GAP43 mRNA27(七)放射自顯影術(shù)放射自顯影術(shù)(autoradiograph)旨在追蹤某些物質(zhì)在體內(nèi)、組織或細胞中的分布與代謝徑路。 放射自顯影甲狀腺125I同位素注入取材制標本涂核乳膠暗室曝光顯影、定影染色LM觀察28(八)組織培養(yǎng)和組織工程組織工程基本方法示意圖A獲取組織 B分離、培養(yǎng)種子細胞C制備三維支架D將種子細胞種植于支架 E將細胞-支架復(fù)合物植入組織缺損處細胞培養(yǎng)神經(jīng)干細胞培養(yǎng)29 (九)組織細胞定量術(shù)1顯微分光光度術(shù) 應(yīng)用顯微分光光度計(microspectrophotometer)對組織和細胞內(nèi)化學(xué)成分進行定量分析。 2形態(tài)計量術(shù) 運用數(shù)學(xué)和統(tǒng)計學(xué)原理對組織細胞內(nèi)各種成分的數(shù)