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1、食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)原始記錄樣品編號(hào): 檢驗(yàn)開(kāi)始時(shí)間: 年 月 日樣品名稱(chēng): 檢驗(yàn)完成時(shí)間: 年 月 日檢測(cè)項(xiàng)目: 檢測(cè)依據(jù): 一、菌落總數(shù)/霉菌酵母菌落數(shù)測(cè)定: 無(wú)菌操作稱(chēng)(量)取樣品25g或ml加入225ml的無(wú)菌生理鹽水中,均質(zhì)2分鐘,做成110樣品液。取110稀釋液1ml加入到9ml生理鹽水中,混勻,做成1100樣品均液。以上法制備10倍系列稀釋樣品均液。選擇2-3個(gè)適宜稀釋度的樣品均液,吸取1ml樣品均液于無(wú)菌平皿內(nèi),每個(gè)稀釋度做2個(gè)平皿。同時(shí),分別吸取1ml空白稀釋液加入兩個(gè)無(wú)菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照,及時(shí)將15-20ml冷至46的平板計(jì)數(shù)培養(yǎng)基傾注平皿,轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻,凝固后翻轉(zhuǎn)平
2、板,置 361 培養(yǎng) 小時(shí),計(jì)數(shù)平板上菌落數(shù)(CFU)。霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)采用孟加拉紅培養(yǎng)基,正置,281 培養(yǎng) 天,計(jì)數(shù)平板上菌落數(shù)(CFU)。稀 釋 度lO0lO-110-210-310-4 空白對(duì)照菌落總數(shù)(CFU/板)霉菌菌落數(shù)(CFU/板)酵母菌落數(shù)(CFU/板)計(jì)算及結(jié)果: 菌落總數(shù)(CFU/g,ml): 霉菌菌落數(shù)(CFU/g,ml): 酵母菌落數(shù)(CFU/g,ml): 二、大腸菌群測(cè)定(MPN計(jì)數(shù)法): 按菌落總數(shù)測(cè)定方法制備lO0、10-1、10-2、10-3、10-4稀釋液。選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品均液,每個(gè)稀釋度接種3管乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi),每管接種1ml(接種量在1mL
3、以上者,則用雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管),361培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h2h,如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣,則可報(bào)告大腸菌群陰性;如有產(chǎn)氣,將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上,置361培養(yǎng)箱培養(yǎng)18h24h,然后取出,觀察菌落形態(tài),并做革蘭氏染色和驗(yàn)證試驗(yàn)。在上述平板上,挑去12個(gè)進(jìn)行革蘭氏顏色,同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管,置361培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h2h,觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖管產(chǎn)氣、革蘭氏染色為陰性的無(wú)芽孢桿菌,即可報(bào)告為大腸菌群陽(yáng)性。接種量g,ml培養(yǎng)時(shí)間(h)培養(yǎng)溫度()空白乳糖膽鹽(MPN法)361EMB分離培養(yǎng)革蘭氏染色鏡檢/乳糖發(fā)酵管361注: eq oac(,+)產(chǎn)酸產(chǎn)氣;+產(chǎn)酸不產(chǎn)氣或有可疑菌落;
4、-不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣或無(wú)可疑菌落;G-b革蘭氏陰性桿菌;G+b革蘭氏陽(yáng)性桿菌;G+c革蘭氏陽(yáng)性球菌。結(jié)果:根據(jù)證實(shí)為大腸菌群陽(yáng)性的管數(shù),查MPN檢索表,得 MPN/100g(ml)。電子天平編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:培養(yǎng)箱編號(hào): 使用狀況 試驗(yàn)前: 試驗(yàn)后:檢測(cè)人: 校核人: 審核人:樣品編號(hào): 按菌落總數(shù)測(cè)定方法制備lO0、10-1、10-2、10-3、10-4稀釋液。選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品均液,每個(gè)稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨(LST)肉湯,每管接種1ml(接種量超過(guò)1ml,則用雙料LST肉湯),361培養(yǎng)24h2h,觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生,對(duì)于24h2h產(chǎn)氣者,用接種
5、環(huán)從產(chǎn)氣的LST肉湯中分別取培養(yǎng)物一環(huán),移種到BGLB管中,361培養(yǎng)48h2h進(jìn)行復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn),觀察產(chǎn)氣情況,產(chǎn)氣者記為大腸菌群陽(yáng)性,對(duì)于未產(chǎn)氣者,則繼續(xù)培養(yǎng)至48h2h,觀察,產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn),未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。接種量g,ml培養(yǎng)時(shí)間(h)培養(yǎng)溫度()空白LST初發(fā)酵(MPN法)361361BGLB肉湯復(fù)發(fā)酵361注: eq oac(,+)產(chǎn)氣;-不產(chǎn)氣;結(jié)果:根據(jù)證實(shí)為大腸菌群陽(yáng)性的管數(shù),查MPN檢索表,得 MPN/g(ml)。三、致病菌檢驗(yàn):檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目沙門(mén)氏菌志賀氏菌金黃色葡萄球菌(定性檢驗(yàn))型溶血性鏈球菌接 種 量25g,ml25g,ml25g,ml25g,ml前增菌培 養(yǎng) 基BPW 225ml/培養(yǎng)溫度361培養(yǎng)時(shí)間18h增菌培養(yǎng)培 養(yǎng) 基1 ml +TTB 10ml1 ml+SC 10ml志賀氏菌增菌肉湯 225ml7.5%氯化鈉肉湯225mlmTSB225ml培養(yǎng)溫度42136141.51(厭氧)361361培養(yǎng)時(shí)間24h24h20h24h24h分離培養(yǎng)培 養(yǎng) 基BSXLDXLD志賀氏菌顯色培養(yǎng)基Baird-Parker 平板血平板哥倫比亞CAN血平板培養(yǎng)溫度361361361361361361361(厭氧)培養(yǎng)時(shí)間48h24h24h24h48h24h24h結(jié) 果生 化 及 血清 學(xué) 試 驗(yàn)結(jié)果:結(jié)果:結(jié)果:結(jié)
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