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1、生物實(shí)驗(yàn)室 注意事項(xiàng)使用離心機(jī)應(yīng)注意什么? 首先應(yīng)該根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的離心機(jī)和轉(zhuǎn)子以及離心管,使用離心機(jī)時(shí)的工作轉(zhuǎn)速不應(yīng)該超過(guò)離心機(jī)、轉(zhuǎn)子以及離心管的最大允許轉(zhuǎn)速。離心前注意嚴(yán)格 平衡樣品。安裝轉(zhuǎn)子和轉(zhuǎn)子蓋要規(guī)范、準(zhǔn)確。離心時(shí)要留人看守,發(fā)現(xiàn)離心機(jī)異常應(yīng)立即關(guān)閉離心機(jī)。離心結(jié)束后要安放好轉(zhuǎn)子。14.分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有哪些? 高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、化學(xué)藥劑消毒、過(guò)濾除菌15.使用移液器有哪些注意事項(xiàng)? 垂直吸液、慢吸慢放;選擇合適的量程范圍,不能超過(guò)量程使用;選擇與移液器匹配的槍頭,安裝槍頭時(shí)不要用力太猛;移液器每日用完后,應(yīng)旋到最大刻度。分子生物學(xué)操作中會(huì)涉及一系列儀
2、器,使用不當(dāng)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗、減少儀器使用壽命或損壞儀器。因此在進(jìn)行操作前細(xì)致地了解各種儀器的使用方法及注意事項(xiàng),是使后繼實(shí)驗(yàn)事半功倍的一個(gè)必要準(zhǔn)備。 1.冷凍離心機(jī)低溫分離技術(shù)是分子生物學(xué)研究中必不可少的手段?;蚱蔚姆蛛x、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物樣品的分離制備實(shí)驗(yàn)中,都離不開(kāi)低溫離心技術(shù),因此低溫冷凍離心機(jī)已成為分子生物學(xué)研究中必需的重要工具。使用方法:1.離心機(jī)應(yīng)放置在水平堅(jiān)固的地板或平臺(tái)上,并力求使機(jī)器處于水平位置以免離心時(shí)造成機(jī)器震動(dòng)。 2.打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),按要求裝上所需的轉(zhuǎn)頭,將預(yù)先以托盤(pán)天平平衡好的樣品放置于轉(zhuǎn)頭樣品架上(離心筒須與樣品同時(shí)平衡),關(guān)閉機(jī)蓋。 3.按功能選擇鍵,
3、設(shè)置各項(xiàng)要求:溫度、速度、時(shí)間、加速度及減速度,帶電腦控制的機(jī)器還需按儲(chǔ)存鍵,以便記憶輸入的各項(xiàng)信息。 4.按啟動(dòng)鍵,離心機(jī)將執(zhí)行上述參數(shù)進(jìn)行運(yùn)作,到預(yù)定時(shí)間自動(dòng)關(guān)機(jī)。 5.待離心機(jī)完全停止轉(zhuǎn)動(dòng)后打開(kāi)機(jī)蓋,取出離心樣品,用柔軟干凈的布擦凈轉(zhuǎn)頭和機(jī)腔內(nèi)壁,待離心機(jī)腔內(nèi)溫度與室溫平衡后方可蓋上機(jī)蓋。注意事項(xiàng):1.機(jī)體應(yīng)始終處于水平位置,外接電源系統(tǒng)的電壓要匹配,并要求有良好的接地線(xiàn)。2.開(kāi)機(jī)前應(yīng)檢查轉(zhuǎn)頭安裝是否牢固,機(jī)腔有無(wú)異物掉入。3.樣品應(yīng)預(yù)先平衡,使用離心筒離心時(shí)離心筒與樣品應(yīng)同時(shí)平衡。4.揮發(fā)性或腐蝕性液體離心時(shí),應(yīng)使用帶蓋的離心管,并確保液體不外漏,以免腐蝕機(jī)腔或造成事故。5.擦拭離心機(jī)
4、腔時(shí)動(dòng)作要輕,以免損壞機(jī)腔內(nèi)溫度感應(yīng)器。6.每次操作完畢應(yīng)作好使用情況記錄,并定期對(duì)機(jī)器各項(xiàng)性能進(jìn)行檢修。7.離心過(guò)程中若發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,應(yīng)立即關(guān)閉電源,報(bào)請(qǐng)有關(guān)技術(shù)人員檢修。 2.數(shù)字式酸度計(jì): 一、 準(zhǔn)備工作 1.儀器應(yīng)平放在符合使用環(huán)境的工作臺(tái)上,依視覺(jué)角度支起支架。3.pH值的定位測(cè)量法:(一)二點(diǎn)定位法(高精度測(cè)量方法)(1)連接好電極線(xiàn)路,將參比電極及活化滿(mǎn)24h以上清潔的PH電極移入第一標(biāo)準(zhǔn)緩沖液pH1中(例pH1=4.00),待儀器響應(yīng)穩(wěn)定后,調(diào)節(jié)定位旋鈕至儀器顯示為“0.00”;(2)將電級(jí)系統(tǒng)從第1種標(biāo)準(zhǔn)液中取出,用去離子水沖洗干凈后以濾紙吸干電級(jí)表面水份,移入第2種標(biāo)準(zhǔn)液(
5、例pH2=9.18)中,儀器響應(yīng)穩(wěn)定后,調(diào)節(jié)斜率旋鈕,使儀器顯示為(pH=pH1-pH2=9.18-4.00=5.18)此后斜率旋鈕不可再動(dòng),除非更換電極系統(tǒng);(3) 斜率調(diào)節(jié)完成后,重新調(diào)節(jié)定位旋鈕,使儀器顯示第2種標(biāo)準(zhǔn)液的實(shí)際pH值(9.18),至此2點(diǎn)定位結(jié)束;(4) 將電極從第2種標(biāo)準(zhǔn)液中取出沖洗、吸干后移入待測(cè)溶液中,儀器響應(yīng)穩(wěn)定后顯示的數(shù)值即為待測(cè)溶液的pH值。(二)一點(diǎn)定位法(粗略測(cè)量法)(1) 將溫度補(bǔ)償旋鈕調(diào)至溶液溫度值;(2) 向左將斜率補(bǔ)償旋鈕旋轉(zhuǎn)至頭;(3) 將電級(jí)系統(tǒng)移入標(biāo)準(zhǔn)液中(一點(diǎn)法僅用一種標(biāo)準(zhǔn)液,如pH=4.00時(shí)),調(diào)節(jié)定位旋鈕使儀器顯示“4.00”;(4)
6、取出電級(jí)沖洗吸干水分后移至待測(cè)溶液中,儀器響應(yīng)穩(wěn)定后顯示的數(shù)值即為待測(cè)溶液的pH值。三、溫度的測(cè)量1.將功能選擇撥至溫度檔。2.將溫度探頭插入插孔,并將溫度探頭置于環(huán)境條件或溶液中,儀器響應(yīng)穩(wěn)定后儀器顯示值即為環(huán)境條件或溶液溫度值。 注意事項(xiàng)1.認(rèn)真做好儀器使用前準(zhǔn)備工作。2.儀器通電后或測(cè)量過(guò)程中出現(xiàn)顯示不穩(wěn)或亂跳現(xiàn)象,應(yīng)切斷電源進(jìn)行檢查,如電壓、預(yù)熱時(shí)間及電極系統(tǒng)等是否正常。3.使用不同電極應(yīng)注意排除離子的干擾,選擇好鹽橋,必要時(shí)應(yīng)使用離子強(qiáng)度固定劑。4.電極系統(tǒng)從第1種溶液取出移入第2種溶液之前,須用去離子水或雙蒸水清洗干凈,再用濾紙吸干表面水分,以免影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。5. 儀器應(yīng)存
7、放于干燥、清潔無(wú)腐蝕的場(chǎng)所,每次測(cè)量結(jié)束后應(yīng)關(guān)閉電源,退出電極及溫度探頭妥善保存。玻璃電極清洗后可浸于去離子水待用(注意水面不得低于玻璃球泡),甘汞電極清潔后套上橡皮帽置于配套盒中保存,當(dāng)甘汞電極內(nèi)充液泄漏或不飽和及鹽橋中斷時(shí),應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充飽和內(nèi)充液。6.該類(lèi)儀器均采用大規(guī)模集成電路,輸入阻值較高,在對(duì)儀器內(nèi)部進(jìn)行任何零部件修理焊接時(shí),應(yīng)使用45W以下有良好地線(xiàn)的烙鐵,無(wú)接地線(xiàn)烙鐵應(yīng)撥下電源插頭焊接。 分光光度計(jì)不同物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)入射光的吸收程度各不相同,從而形成特征性的吸收光譜。分光光度法不僅適應(yīng)于可見(jiàn)光區(qū),同時(shí)還可擴(kuò)展至紫外光區(qū)及紅外光區(qū),因此給科研實(shí)驗(yàn)帶來(lái)了極大方便。下面重點(diǎn)介紹分光光度計(jì)
8、的使用及注意事項(xiàng)。 使用規(guī)則1.接通穩(wěn)壓器電源,待穩(wěn)壓器輸出電壓穩(wěn)定至200V后打開(kāi)光度計(jì)電源,儀器自動(dòng)進(jìn)入初始化。2.初始化約需時(shí)10 min,內(nèi)容包括:尋找零級(jí)光;建立基線(xiàn);最后當(dāng)顯示器指示nm時(shí),表明儀器完成初始化程序,可進(jìn)入檢測(cè)狀態(tài)。3.按要求輸入各項(xiàng)參數(shù),選擇相應(yīng)比色杯(玻璃或石英),將空白管、標(biāo)準(zhǔn)管及待測(cè)管依次放入比色皿架內(nèi),關(guān)上比色池蓋。4.以空白管自動(dòng)調(diào)零。5.試樣槽依次移至樣品位置,待數(shù)據(jù)顯示穩(wěn)定后按“START/STOP”鍵,打印機(jī)自動(dòng)打印所測(cè)數(shù)據(jù),重復(fù)上述步驟,直到所有樣品檢測(cè)完畢。6.檢測(cè)結(jié)束后應(yīng)及時(shí)取出比色杯,并清洗干凈放回原處,同時(shí)關(guān)上儀器電源開(kāi)關(guān)及穩(wěn)壓器電源開(kāi)關(guān),
9、做好使用情況登記。 注意事項(xiàng)1.儀器初次使用或使用較長(zhǎng)時(shí)間(一般為一年),需檢查波長(zhǎng)準(zhǔn)確度,以確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性。2.由于長(zhǎng)途運(yùn)輸或室內(nèi)搬運(yùn)可能造成光源位置偏移,導(dǎo)致亮電流漂移增大。此時(shí)對(duì)光源位置進(jìn)行調(diào)整,直至達(dá)到有關(guān)技術(shù)指標(biāo)為止。若經(jīng)調(diào)整校正后波長(zhǎng)準(zhǔn)確度、暗電源漂移及亮電流漂移三項(xiàng)關(guān)鍵指標(biāo)仍未符合要求,則應(yīng)停止使用,并及時(shí)通知有關(guān)技術(shù)人員檢修。3.每次檢測(cè)結(jié)束后應(yīng)檢查比色池內(nèi)有否溶液溢出,若有溢出應(yīng)隨時(shí)用濾紙吸干,以免引起測(cè)量誤差或影響儀器使用壽命。4.儀器每次使用完畢,應(yīng)于燈室內(nèi)放置數(shù)袋硅膠(或其它干燥劑),以免反射鏡受潮霉變或沾污,影響儀器使用,同時(shí)蓋好防塵罩。5.儀器室應(yīng)通常保持潔凈
10、干燥,室溫以5-35為宜,相對(duì)溫度不得超過(guò)85%。有條件者應(yīng)于室內(nèi)配備空調(diào)機(jī)及除濕機(jī),以確保儀器性能穩(wěn)定。6.儀器室不得存放酸、堿、揮發(fā)性或腐蝕性等物質(zhì),以免損壞儀器。7.儀器長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí),應(yīng)定時(shí)通電預(yù)熱,每周1次,每次30min,以保證儀器處于良好使用狀態(tài)。電泳儀:電泳技術(shù)是分子生物學(xué)研究不可缺少的重要分析手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳兩大類(lèi),自由界面電泳不需支持物,如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類(lèi)電泳目前已很少使用。而區(qū)帶電泳則需用各種類(lèi)型的物質(zhì)作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠-G薄層等,分子生物學(xué)領(lǐng)域中最常
11、用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳,是指帶電粒子在電場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng),不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場(chǎng)中運(yùn)動(dòng)速度不同,根據(jù)這一特征,應(yīng)用電泳法便可以對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組份分析或單個(gè)組份提取制備,這在臨床檢驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)研究中具有極其重要的意義。電泳儀正是基于上述原理設(shè)計(jì)制造的。下面簡(jiǎn)單介紹其使用方法及注意事項(xiàng)。 使用方法1.首先用導(dǎo)線(xiàn)將電泳槽的兩個(gè)電極與電泳儀的直流輸出端聯(lián)接,注意極性不要接反。2.電泳儀電源開(kāi)關(guān)調(diào)至關(guān)的位置,電壓旋鈕轉(zhuǎn)到最小,根據(jù)工作需要選擇穩(wěn)壓穩(wěn)流方式及電壓電流范圍。3.接通電源,緩緩旋轉(zhuǎn)電壓調(diào)節(jié)鈕直到達(dá)到的所需電壓為止,設(shè)定電泳終止時(shí)間,此時(shí)電
12、泳即開(kāi)始進(jìn)行。4.工作完畢后,應(yīng)將各旋鈕、開(kāi)關(guān)旋至零位或關(guān)閉狀態(tài),并撥出電泳插頭。 注意事項(xiàng)1.電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應(yīng)先斷電,以免觸電。同時(shí)要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。2.儀器通電后,不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線(xiàn)插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。3.由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,電泳時(shí)所通過(guò)的電流量也不同,其泳動(dòng)速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。4.在總電流不超過(guò)儀器額定電流時(shí)(最大電流范圍),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,
13、但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。5.某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時(shí),允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開(kāi)機(jī),但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開(kāi)機(jī),否則電壓表指針將大幅度跳動(dòng),容易造成不必要的人為機(jī)器損壞。6.使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)異常現(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,以免發(fā)生意外事故。 分析天平:分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要儀器,充分了解儀器性能及熟練掌握其使用方法,是獲得可靠分析結(jié)果的保證。分析天平的種類(lèi)很多,有普通分析天平、半自動(dòng)/全自動(dòng)加碼電光投影阻尼分析天平及電子分析天平等。下面就電子分析天平的使用方法及注意事項(xiàng)做一介紹。操作方法1.檢查并調(diào)整天平至水平位置
14、。2.事先檢查電源電壓是否匹配(必要時(shí)配置穩(wěn)壓器),按儀器要求通電預(yù)熱至所需時(shí)間。3.預(yù)熱足夠時(shí)間后打開(kāi)天平開(kāi)關(guān),天平則自動(dòng)進(jìn)行靈敏度及零點(diǎn)調(diào)節(jié)。待穩(wěn)定標(biāo)志顯示后,可進(jìn)行正式稱(chēng)量。4.稱(chēng)量時(shí)將潔凈稱(chēng)量瓶或稱(chēng)量紙置于稱(chēng)盤(pán)上,關(guān)上側(cè)門(mén),輕按一下去皮鍵,天平將自動(dòng)校對(duì)零點(diǎn),然后逐漸加入待稱(chēng)物質(zhì),直到所需重量為止。5.被稱(chēng)物質(zhì)的重量是顯示屏左下角出現(xiàn)“”標(biāo)志時(shí),顯示屏所顯示的實(shí)際數(shù)值。6.稱(chēng)量結(jié)束應(yīng)及時(shí)除去稱(chēng)量瓶(紙),關(guān)上側(cè)門(mén),切斷電源,并做好使用情況登記。注意事項(xiàng)1.天平應(yīng)放置在牢固平穩(wěn)水泥臺(tái)或木臺(tái)上,室內(nèi)要求清潔、干燥及較恒定的溫度,同時(shí)應(yīng)避免光線(xiàn)直接照射到天平上。2.稱(chēng)量時(shí)應(yīng)從側(cè)門(mén)取放物質(zhì),讀數(shù)時(shí)應(yīng)關(guān)閉箱門(mén)以免空氣流動(dòng)引起天平擺動(dòng)。前門(mén)僅在檢修或清除殘留物質(zhì)時(shí)使用。3.電子分析天平若長(zhǎng)時(shí)間不使用,則應(yīng)定時(shí)通電預(yù)熱,每周一次,每次預(yù)熱2h,以確保儀器始終處于良好使用狀態(tài)。4.天平箱內(nèi)應(yīng)放置吸潮劑(如硅膠),當(dāng)吸潮劑吸水變色,應(yīng)立即高溫烘烤更換,以確保吸濕性能。5.揮發(fā)性、腐蝕性、強(qiáng)酸強(qiáng)堿類(lèi)物質(zhì)應(yīng)盛于帶蓋稱(chēng)量瓶?jī)?nèi)稱(chēng)量,防止腐蝕天平。2.通電前應(yīng)按工作電源要求檢查電壓是否符合要求,若電源波動(dòng)太大,應(yīng)經(jīng)交流穩(wěn)壓后再送接儀器。3.
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