動物源性食品中四環(huán)素類藥物檢測的固相萃取方法(共4頁)

1、動物源性食品(shpn)中四環(huán)素類藥物檢測的固相萃取方法一、實驗(shyn)目的本實驗利用固相萃取法作為樣品的前處理方法(fngf)，LC-MS/MS法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機溶劑用量。二、實驗目標物四環(huán)素(CAS:60-54-8)，金霉素(CAS:57-62-5)，強力霉素(CAS:564-25-0)。三、應用范圍本方法適用于動物源性食品中四環(huán)素類藥物的LC-MS/MS檢測及確證。四、參考文獻 推薦性國家標準GB/T 21317-2007 動物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測方法 液相色譜-質譜/質譜法與高效液相色譜法。五、實驗材料 Biocomma Siliba

2、se C8/SCX固相萃取柱200mg/6mL。六、實驗(shyn)方法 1、樣品(yngpn)提取 將樣品混勻、均質，有結晶的樣品于60以下水浴融化混勻、迅速冷卻；在50 mL帶螺蓋的離心管中精確稱取約6g(精確到0.01g)均質后的樣品；加入25 mLEDTA-Mcllvaine緩沖溶液迅速混勻1min，冰浴超聲20 min；3000 r/min離心10 min，取上清液，過快速(kui s)濾紙，收集濾液，待凈化。 2、SPE柱純化 (1)活化：將固相萃取真空裝置與真空泵連接好，裝上C8/SCX柱，依次以5mL甲醇和10 mL純水預處理。 (2)上樣和洗脫：取樣品提取液中上清液10mL過

3、柱，流速控制在約每秒1滴；依次以5mL水+5mL甲醇/水（1:19,體積比）溶液淋洗柱子；淋洗液完全通過小柱后，抽真空20min；以10 mL甲醇+乙酸乙酯（1+9）洗脫，收集洗脫液。 (3)濃縮定容：將洗脫液氮吹吹干，用2mL甲醇定容，過0.22m有機濾膜，用于LC-MS/MS分析。 5、LC-MS/MS條件 液相色譜(s p)-質譜/質譜儀 色譜(s p)柱：C18柱：150mm2.1mm，2.0m，或相當者 流動(lidng)相：甲醇-10mM草酸七、實驗結果添加回收結果 向樣品中加入不同水平的四環(huán)素類藥物，回收率結果如下：（見表1）表1 動物組織中四環(huán)素類藥物添加回收結果樣品名稱化合物名稱添加水平（ng/mL）回收率（%）豬肉四環(huán)素5097.3810092.94強力霉素5080.4310081.87金霉素5095.7210094.632、 空白樣品添加農藥殘留物色譜圖圖1 四環(huán)素標準色譜圖 圖2金霉素標準色譜圖 圖3強力霉素標準(biozhn)色譜圖內容總結（1）動物源性食品中四環(huán)素類藥物檢測的固相萃取方法一、實驗目的本實驗利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，LC-MS/MS法作為檢測手段（2）3000 r/min離心10 min，取上清液，過快速濾紙，收集濾液，待凈化（3）淋洗液完全通過小柱后