2017年主管檢驗技師考試臨床免疫學和免疫檢驗練習題第九章酶免疫技術

1、第 頁共9頁2017第九章酶免疫技術一、Al1、HRP與TMB反應后，加HSO終止反應前呈24A、藍色B、橙黃色C、棕黃色D、黃色E、紫色2、HRP與底物OPD反應后的測定波長為TOC o 1-5 h zA、278nmB、450nmC、403nmD、495nmE、492nm3、HRP與底物TMB反應后的測定波長為 HYPERLINK l bookmark4 A、278nmB、450nmC、403nmD、495nmE、492nm4、用于標記的HRP的RZ值應大于 HYPERLINK l bookmark8 A、2.4B、3.0C、l.5D、3.5E、5.05、酶免疫技術中酶的要求A、酶的活性要強

2、，催化反應的轉化率高，純度高B、易與抗體或抗原偶聯(lián)，標記后酶活性保持穩(wěn)定C、作用專一性強，酶活性不受樣品中其他成分的影響D、酶催化底物后產生的產物易于判斷或測量，方法簡單易行、敏感和重復性好E、以上都是6、酶免疫測定根據(jù)抗原抗體反應后是否需要分離結合的與游離的酶標記物而分為下述哪幾種類型A、均相異相B、同相均相C、異相固相D、固相均相E、固相異相7、酶增強免疫測定技術（EMIT）是一種（）。A、非均相酶免疫測定技術B、均相酶免疫測定技術C、酶免疫組織化學技術D、酶免疫測定與電泳相結合的技術E、電泳技術8、均相酶免疫測定不具有的特點是（）。A、常用于半抗原和小分子的檢測B、操作簡便，易于自動化C

3、、不易受樣品中的內源性酶的干擾D、酶與抗原結合后仍保留酶和抗原的活性E、靈敏度不及異相酶免測定9、ELISA檢測中鉤狀效應”（hookeffect）是指（）。A、鉤狀效應即HOOK效應，是指由于抗原抗體比例不合適而導致假陰性的現(xiàn)象,其中抗原過量叫做前帶效應B、雙抗體夾心一步法檢測抗原時抗原過量C、雙抗體夾心法檢測抗原時RF的干擾D、檢測的假陽性反應E、競爭法檢測抗體時特異性問題10、ELISA試驗以HRP為標記酶時，常用的供氫底物為（）。A、OPDB、OTC、YMBD、ABTSE、PNP11、制備抗體酶結合物的方法通常采用（）。A、戊二醛交聯(lián)法B、糖原染色法C、免疫印跡法D、酶耦聯(lián)測定法E、捕

4、獲競爭法12、斑點免疫層析試驗最常用的載體材料是（）。A、乙酸纖維素膜B、尼龍膜C、濾紙D、硝酸纖維素膜E、玻璃纖維膜13、有關化學發(fā)光錯誤的說法是A、化學發(fā)光是指伴隨著化學反應過程所產生的光的發(fā)射現(xiàn)象B、化學發(fā)光與熒光形成激發(fā)態(tài)分子的激發(fā)能相同C、化學發(fā)光是吸收了化學能使分子激發(fā)而發(fā)射的光D、大多數(shù)化學發(fā)光反應為氧化還原反應E、化學發(fā)光必須提供足夠的化學能14、鉤狀效應是指用ELISA一步法測定標本中待測抗原時，抗原濃度過（），實測值偏（）的現(xiàn)象，極易造成假陰性A、低，咼B、咼，咼C、咼，低D、低，低E、咼，不變15、酶增強免疫測定技術是最早取得實際應用的（）。A、均相酶免疫測定B、異相酶免

5、疫測定C、固相酶免疫測定D、液相酶免疫測定E、固相-液相酶免疫測定16、利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體的方法，通常稱為（）。A、雙抗體夾心法B、雙位點一步法C、間接法D、競爭法E、捕獲法17、可用免疫滲濾試驗和免疫層析試驗檢測的項目沒有（）。A、抗HCVB、HIVC、HCGD、HBsAgE、HAV18、下列不屬于ELISA測定方法中所必需的試劑（）。A、固相的抗原或抗體B、酶標記的抗原或抗體C、酶作用的底物D、戊二醛交聯(lián)劑E、稀釋的血清19、影響發(fā)光劑標記的因素有A、被標記蛋白的性質B、原料比C、標記率D、溫度E、以上都是20、ELISA試驗中最常用的標記酶是（）。A、ASTB

6、、HRPC、ACPD、LDHE、ALT21、ELISA中最常用的固相載體是（）。A、聚氯乙烯B、聚苯乙烯C、三聚氧胺D、瓊脂糖E、尼龍膜22、ELISA板包被后，最常用的封閉物質是（）。A、人白蛋白B、人球蛋白C、牛血清白蛋白D、牛血清球蛋白E、鼠白蛋白23、下圖所示的為哪一種ELISA技術的反應原理示意圖（）。A、雙抗原夾心法B、雙位點一步法C、間接法測抗體D、競爭法E、捕獲法24、用ELISA抗體夾心法檢測抗原A時，固相載體的包被物是（）。A、酶標記A抗體B、未標記的抗A抗體C、未標記抗原AD、酶標抗球蛋白抗體E、酶標記的A抗原二、B1、A.免疫印跡法ELISA（雙抗體夾心法）自身紅細胞凝

7、集試驗ELISA（間接法）免疫組織化學技術、可用于HIV抗體、HBsAg的檢測的方法是（）。ABCDE2、測定HIV抗體確診HIV感染常用的方法是（）。ABCDE3、對相應的抗原進行定性、定位和定量測定常用的方法是（）ABCDE4、檢測抗原最常用的方法是（）。ABCDE答案部分一、A11、【正確答案】A【答案解析】TMB是一種優(yōu)于OPD的新型HRP色原底物。TMB經HRP作用后變?yōu)樗{色，加入硫酸終止反應后變?yōu)辄S色，最大吸收峰波長為450nm?！敬鹨删幪?00916712,點擊提問】2、【正確答案】E【答案解析】OPD被認為是HRP最為敏感的色原底物之一。OPD在HRP的作用下顯橙黃色，加強酸如

8、硫酸或鹽酸終止反應后呈棕黃色，最大吸收峰在492nm波長?！敬鹨删幪?00916711,點擊提問】3、【正確答案】B【答案解析】TMB是一種優(yōu)于OPD的新型HRP色原底物。TMB經HRP作用后變?yōu)樗{色，加入硫酸終止反應后變?yōu)辄S色，最大吸收峰波長為450nm?！敬鹨删幪?00916710,點擊提問】4、【正確答案】B【答案解析】用于酶免疫技術的HRP,其RZ值應大于3.0?！敬鹨删幪?00916709,點擊提問】5、【正確答案】E【答案解析】1.酶的活性要強，催化反應的轉化率高，純度高。易與抗體或抗原偶聯(lián)，標記后酶活性保持穩(wěn)定，且不影響標記抗原與抗體的免疫反應性。作用專一性強，酶活性不受樣品中其

9、他成分的影響，受檢組織或體液中不存在與標記酶相同的內源性酶或抑制物。用于均相酶免疫測定的酶還要求當抗體與酶標抗原結合后，酶活性可出現(xiàn)抑制或激活。酶催化底物后產生的產物易于判斷或測量，方法簡單易行、敏感和重復性好?！敬鹨删幪?00809891,點擊提問】6、【正確答案】A【答案解析】酶免疫測定根據(jù)抗原抗體反應后是否需要分離結合的與游離的酶標記物而分為均相和異相這兩類?！敬鹨删幪?00809890,點擊提問】7、【正確答案】B【答案解析】酶增強免疫測定技術（EMIT）是均相酶免疫測定技術。EMIT的基本原理：半抗原與酶結合成酶標半抗原，保留半抗原和酶的活性，當酶標半抗原與抗體結合后，所標的酶與抗體

10、密切接觸，使酶的活性中心受到影響而活性被抑制，反應后酶活力大小與標本中的半抗原量呈一定的比例，從酶活力的測定結果可推算出標本中半抗原的量?！敬鹨删幪?00809889,點擊提問】8、【正確答案】C【答案解析】均相酶免疫測定是將半抗原或小分子抗原如藥物、激素、毒品、興奮劑等與酶結合制成酶標記物，酶與抗原（半抗原）結合后仍保留酶和抗原（半抗原）的活性。均相酶免疫測定操作簡便、快速、適合于自動化，應用廣泛，不僅可檢測藥物、激素、毒品、興奮劑等半抗原或小分子抗原，也可測定大分子蛋白質、病毒及細胞性抗原成分。最大缺點是易受樣品中非特異的內源性酶、酶抑制藥及交叉反應物的干擾，而且由于采用競爭性結合分析原理

11、，靈敏度不及異相酶免測定?！敬鹨删幪?00809888,點擊提問】9、【正確答案】B【答案解析】在雙位點一步法測定中，應注意鉤狀效應，類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現(xiàn)象。當標本中待測抗原濃度相當高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合，而不再形成夾心復合物，所得結果將低于實際含量。鉤狀效應嚴重時甚至可出現(xiàn)假陰性結果。【答疑編號100809887,點擊提問】10、【正確答案】A【答案解析】許多化合物可作為HRP的供氧體，在ELISA中常用的供氫體底物為鄰苯二胺（OPD）、四甲基聯(lián)苯胺（FMB）和ABTS。OPD為在ELISA中應用最多的底物，靈敏度高，比色方便?！敬鹨删幪?00809886,點

12、擊提問】11、【正確答案】A【答案解析】制備抗體酶結合物的方法通常有戊二醛交聯(lián)法、過碘酸鹽氧化法和標記抗體鑒定法?！敬鹨删幪?00809885,點擊提問】12、【正確答案】D【答案解析】斑點免疫層析試驗以硝酸纖維素為載體，利用微孔濾膜的毛細管作用，滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移，猶如層析一般?！敬鹨删幪?00809884,點擊提問】13、【正確答案】B【答案解析】化學發(fā)光是吸收了化學能使分子激發(fā)而發(fā)射的光，而熒光是吸收了光能使分子激發(fā)而發(fā)射的光?！敬鹨删幪?00809883,點擊提問】14、【正確答案】C【答案解析】鉤狀效應即HOOK效應，是指由于抗原抗體比例不合適而導致假陰性的現(xiàn)象，其

13、中抗體過量叫做前帶效應；抗原過量叫做后帶效應。在等價帶前后分別為抗體、抗原過剩則影響沉淀物的形成，這種現(xiàn)象稱為帶現(xiàn)象。帶現(xiàn)象在臨床檢驗中經常出現(xiàn)，特別是ELISA反應中。出現(xiàn)在抗體過量時，稱為前帶，出現(xiàn)在抗原過剩時，稱為后帶。所以在臨床工作中一定要注意前帶和后帶現(xiàn)象，以免出現(xiàn)假陰性結果，尤其以前帶效應明顯，這種情況可以通過進一步稀釋樣本進行解決。【答疑編號100809877，點擊提問】15、【正確答案】A【答案解析】均相酶免疫測定方法有酶增強免疫測定技術（EMIT）和克隆酶供體免疫分析方法。其中，酶增強免疫測定技術是最早取得實際應用的酶免疫測定方法。【答疑編號100809876，點擊提問】16

14、、【正確答案】C【答案解析】間接法是檢測抗體最常用的方法，其原理是利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體，只要更換不同的固相抗原，就可以用一種酶標抗體檢測各種與抗原相應的抗體。【答疑編號100809875，點擊提問】17、【正確答案】E【答案解析】免疫滲濾試驗和免疫層析試驗具有簡便、快速、單份測定、可立等結果等優(yōu)點，無需任何儀器設備，試劑穩(wěn)定，因此多用于急診檢驗。這類試驗不能準確定量，所以主要限于檢測正常體液中不存在的物質以及正常含量極低而在特殊情況下異常升高的物質。目前臨床檢驗中已開展的項目有HCG、抗HCV和抗HIV、HBsAg等，新項目正在不斷發(fā)展中?！敬鹨删幪?00809874

15、，點擊提問】18、【正確答案】D【答案解析】ELISA是在固相載體上包被抗原或抗體后，通過抗原抗體反應使酶標抗體（或酶標抗原）結合到載體上，經洗滌使結合的酶標抗體和游離的酶標抗體分離，洗去游離的酶標抗體（或酶標抗原）。在這種測定方法中有3種必要的試劑：固相的抗原或抗體。酶標記的抗原或抗體。酶作用的底物。間接法和捕獲法還使用稀釋的血清標本做試劑。戊二醛是一種雙功能團試劑，可以使酶與蛋白質或其他抗原的氨基通過它而耦聯(lián)。與ELISA的方法相反?！敬鹨删幪?00809873，點擊提問】19、【正確答案】E【答案解析】影響發(fā)光劑標記的因素有被標記蛋白的性質、原料比、標記率、溫度?！敬鹨删幪?008098

16、72，點擊提問】20、【正確答案】B【答案解析】在ELISA中，常用的酶為辣根過氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（AP）。應用AP系統(tǒng)，其敏感性一般高于應用HRP系統(tǒng)，空白值也較低。但由于AP較難得到高純度制劑，穩(wěn)定性較HRP低，價格較HRP高，制備酶結合物時得率較HRP低等原因，國內在ELISA中一般均采用HRP?！敬鹨删幪?00809871,點擊提問】21、【正確答案】B【答案解析】酶免疫技術的主要試劑為固相的抗原或抗體、酶標記的抗原或抗體和與標記酶直接關聯(lián)的酶反應底物。最常用的固相載體物質是聚苯乙烯?！敬鹨删幪?00809870,點擊提問】22、【正確答案】C【答案解析】將抗原或抗體固相化

17、的過程稱為包被。由于載體的不同，包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板為載體，通常將抗原或抗體溶于緩沖液（最常用的為pH9.6的碳酸緩沖液）中，加于ELISA板孔中在4C過夜，經清洗后即可應用。如果包被液中的蛋白質濃度過低，固相載體表面有能被此蛋白質完全覆蓋，其后加入的血清標本和酶結合物中的蛋白質也會部分地吸附于固相載體表面，最后產生非特異性顯色而導致本底偏高。在這種情況下，如在包被后再用1%5%牛血清白蛋白包被一次，可以消除這種干擾。這一過程稱為封閉。包被好的ELISA板在低溫可放置一段時間而不失去其免疫活性。【答疑編號100809869,點擊提問】23、【正確答案】B【答案解析】酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）的位點一步法是在雙抗體夾心法測定抗原時，如應用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體，則可如圖中所示，在測定時可使標本的加入和酶標抗體的加入兩步并作一步。此法不但簡化了操作，縮短了反應時間，如應用高親和力的單克隆抗體，測定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應用使測定抗原的ELISA提高到新水平。【答疑編號100809868,點擊提問】24、【正確答案】B【答案解析】ELISA抗體夾心法檢測抗原A時，固相載體的包被物是未標記的抗A抗體?！敬鹨删幪?00809867,點擊提問】二、B1、【