微生物自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)

1、 常用香辛料的抑菌效果探究【摘要】本實(shí)驗(yàn)對(duì)日常生活中常見的香辛料大蒜、生姜和辣椒的抑菌性進(jìn)行了探究，得出了三種物質(zhì)對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌的不同抑菌效果，其中生姜和辣椒對(duì)三種菌的抑菌效果不明顯，大蒜對(duì)三種菌的抑菌效果都比較明顯，且濃度越高效果越強(qiáng)，加熱后抑菌效果有所下降。Inthisstudy,theantimicrobialactivityonthedailylifeofcommonspicesgarlic,gingerandchilliinquiry,obtainedthreesubstancesinhibitoryeffectonE.coli,Staphylococcus

2、aureusandBacillussubtilis,inwhichthegingerandchilliobviousinhibitoryeffectofthethreebacteria,garlicantibacterialeffectsofthethreebacteriaaremoreobvious,andthehighertheconcentrationthestrongertheinhibitoryeffectdeclinedafterheating.實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹客ㄟ^(guò)所學(xué)的微生物實(shí)驗(yàn)技能，簡(jiǎn)單探討、檢測(cè)幾種常見香辛料的抑菌、殺菌效果實(shí)驗(yàn)材料及儀器設(shè)備】菌種：大腸桿菌（Escherichia

3、coli），金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus），枯草芽抱桿菌（Bacillussubtilis）。培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（300mL）。3種常用的香辛料：大蒜、生姜、辣椒。儀器、試劑及用具：電子秤、燒杯、電磁爐、三角瓶、無(wú)菌水、涂布器、研缽、過(guò)濾器、無(wú)菌培養(yǎng)皿（36個(gè)）、酒精燈、移液槍、槍頭、圓濾紙片、鑷子、37C恒溫培養(yǎng)箱等?！緦?shí)驗(yàn)步驟】（一）實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備：制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（300mL），在三角瓶中加入牛肉膏0.9g、蛋白胨3g、NaCl1.5g、水200mL,用玻棒攪拌溶解，之后加入瓊脂2.5g后加熱溶解，分裝兩個(gè)三角瓶。滅菌牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基

4、36個(gè)培養(yǎng)皿若干圓濾紙片（放在一個(gè)培養(yǎng)皿中）54mL蒸餾水（分裝于12支試管中）試管10支槍頭若干取以上用品進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。（二）抑菌效果的測(cè)定：稱取大蒜、生姜、辣椒三種香辛料各50g，分別用研缽搗碎，先用紗布過(guò)濾，再分裝到兩支試管中。分別將三組中的一支試管放到大燒杯中，沸水浴加熱3min，然后將6支試管中的物質(zhì)分別用過(guò)濾器過(guò)濾出原液置于6支試管中。無(wú)菌操作，用12支含4.5ml無(wú)菌水的試管分別對(duì)六種原液進(jìn)行50%和25%的稀釋，共得到18種不同濃度的提取液。無(wú)菌操作，將18種不同濃度的提取液分別倒入18個(gè)培養(yǎng)皿中，各自放入10個(gè)濾紙片，浸泡備用。無(wú)菌操作，將牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基加熱溶解后

5、倒18個(gè)平板，待凝固后分別用大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌接種到其中的6個(gè)平板（用移液槍取0.2mL菌液置于相應(yīng)平板中，進(jìn)行涂布），并做好標(biāo)記。將接種好的平板靜置5min，按照如下布局，將事先準(zhǔn)備好的浸泡在提取液中的濾紙片放置于平板中相應(yīng)的區(qū)域內(nèi)（每種菌分別對(duì)應(yīng)三種香辛料各兩份，一份作為重復(fù)），放置5min后，轉(zhuǎn)移到37C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。辟ElOtffcA用渣100%（三）結(jié)果觀察與記錄：測(cè)量抑菌圈的大小并做記錄。實(shí)驗(yàn)結(jié)果】細(xì)菌培養(yǎng)的抑菌圈觀測(cè)結(jié)果如下：菌種抑菌圈大小香辛料種類原液50%25%培養(yǎng)基a培養(yǎng)基b培養(yǎng)基a培養(yǎng)基b培養(yǎng)基a培養(yǎng)基b大腸桿菌大蒜2.482.511.85

6、1.931.421.43大蒜（加熱）1.922.031.671.690.941.1生姜000000生姜（加熱）000000辣椒000000辣椒（加熱）000000金黃色匍萄球菌大蒜2.412.371.231.291.170大蒜（加熱）1.321.141.1200.870生姜000000生姜（加熱）000000辣椒000000辣椒（加熱）000000枯草芽抱桿菌大蒜2.532.472.131.061.240.97大蒜（加熱）1.231.190.920.9700生姜000000生姜（加熱）000000辣椒000000辣椒（加熱）000000【分析討論】通過(guò)實(shí)驗(yàn)所得抑菌圈大小的數(shù)據(jù)可以看出三種香辛料

7、對(duì)于三種菌的抑菌效果。生姜和辣椒的提取液經(jīng)不同的實(shí)驗(yàn)條件處理后，均不能使三種培養(yǎng)基產(chǎn)生抑菌圈，所以本實(shí)驗(yàn)推測(cè)生姜和辣椒對(duì)于大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的抑菌效果不明顯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，大蒜的提取液經(jīng)不同的實(shí)驗(yàn)條件處理后，一般都能產(chǎn)生較為明顯的抑菌圈，表明大蒜對(duì)于大腸桿菌、金黃色葡萄球菌以及枯草芽孢桿菌都有較為明顯的抑菌效果。下面就大蒜對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌以及枯草芽孢桿菌的抑菌效果，做深入的分析。對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行處理，得到大蒜對(duì)三種菌的抑菌效果數(shù)據(jù)，如下：菌種處理?xiàng)l件抑菌圈大小平均值25%50%原液大腸桿菌未加熱1.4251.892.495加熱1.021.681.975金黃色葡萄球菌未

8、加熱0.5851.262.39加熱0.4350.561.23枯草芽抱桿菌未加熱1.1051.5952.5加熱00.9451.21通過(guò)以上數(shù)據(jù)，可以看出大蒜的提取液的原液以及分別稀釋到25%和50%后都能使大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)基形成抑菌圈，對(duì)三種菌的抑菌效果比較明顯，將三種香辛料的提取液分別加熱后，對(duì)三種菌仍然具有較強(qiáng)的抑菌性，只是較加熱前有一定的下降。對(duì)比三種菌培養(yǎng)基的抑菌圈大小，在大腸桿菌的培養(yǎng)基中形成的抑菌圈最大，在金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基中形成的抑菌圈次之，在枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)基中形成的抑菌圈最小由此可以看出，大蒜對(duì)三種菌中大腸桿菌的抑制性最強(qiáng)，對(duì)枯草芽孢桿菌的抑制

9、性次之，對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制性最小。分別將大蒜對(duì)三種菌的抑制性進(jìn)行分析，三種抑菌效果圖如下：大蒜對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌效果未加熱加熱大蒜對(duì)枯草芽抱桿菌的抑菌效果未加熟加熱通過(guò)以上各圖，可以直觀的看出大蒜的提取液抑菌效果與濃度相關(guān)，濃度越大，抑菌效果越強(qiáng)，而且經(jīng)過(guò)加熱的提取液相比于同等濃度的未經(jīng)加熱的提取液的抑菌效果有所下降，但在三種菌中的下降表現(xiàn)程度略有不同，對(duì)大腸桿菌的下降最明顯，對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌的下降較為明顯。大蒜的提取液對(duì)三種菌的抑菌效果隨濃度的變化也有一定的差異，大腸桿菌的抑制性影響最小，對(duì)枯草芽孢桿菌的抑制性影響次之，對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制性最大，剛好與對(duì)三種菌的抑制性強(qiáng)度相反。加熱后的提取液相比于同濃度的未經(jīng)加熱的提取液的抑菌效果下降，原因可能是對(duì)提取液進(jìn)行沸水浴加熱導(dǎo)致提取液中的部分抑菌物質(zhì)被分解破壞，從而抑菌效果下降。本實(shí)驗(yàn)中，由于操作不當(dāng)或?qū)嶒?yàn)方案的問(wèn)題，可能導(dǎo)致部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果與實(shí)際不符，但由于本實(shí)驗(yàn)設(shè)置了重復(fù)，所以保證了總體的實(shí)驗(yàn)結(jié)論的正確性。由于大蒜對(duì)于常見的菌類具有較好的抑菌性，所以，在使用或使用過(guò)程中對(duì)此加以有效利用?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1李靜，吳衛(wèi)東大蒜、生姜水浸液對(duì)體外細(xì)菌抑制的對(duì)比研究J.中國(guó)調(diào)味品，