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文檔簡介
1、學(xué)習(xí)好資料 歡迎下載一、名詞解釋 1、 基因:編碼蛋白質(zhì)或RNA等具有特定功能產(chǎn)物的遺傳信息基本單位,是染色體或基因組的一段DNA序列(對以 RNA作為遺傳信息載體的RNA病毒而言則是 RNA序列)。2、 基因組:是細(xì)胞或生物體中,一套完整的單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。泛指一 種生物體具有的遺傳信息的總和。3、 轉(zhuǎn)座元件( transposable element 之間移動的 DNA片段或基因。):是指能夠在 DNA分子內(nèi)部或 DNA分子4、 轉(zhuǎn)座(transposion ):轉(zhuǎn)座元件從基因組的一個部位直接轉(zhuǎn)移到另一個部位 的過程??梢鸹蚪M重排、基因突變、表型變化等。5、 假基因( Pseud
2、ogene):指與某些有功能的基因結(jié)構(gòu)相似,但不能表達(dá)基因 產(chǎn)物的基因。又稱為加工基因或非功能基因。6、 不對稱轉(zhuǎn)錄 Asymmetric transcription:DNA鏈?zhǔn)怯袠O性的, RNA以不對稱的方式與啟動子結(jié)合,使得轉(zhuǎn)錄只能沿著一個方向進(jìn)行。對一個基因而言,互補(bǔ)鏈中只有一條鏈被轉(zhuǎn)錄成 RNA. 7、 斷裂基因 (split gene) :真核生物結(jié)構(gòu)基因,由若干個編碼區(qū)和非編碼區(qū)互 相間隔開但又連續(xù)鑲嵌而成,去除非編碼區(qū)再連接后,可翻譯出由連續(xù)氨基 酸組成的完整蛋白質(zhì),這些基因稱為斷裂基因。8、 外顯子 (exon) :真核生物編碼序列中出現(xiàn)在成熟 的遺傳信息參與指定蛋白質(zhì)的氨基酸
3、排列。RNA分子中的序列,所攜帶9、 內(nèi)含子 (intron):真核生物細(xì)胞編碼序列中的間插序列。這些序列被轉(zhuǎn)錄在前體 RNA中,經(jīng)過剪接被去除,最終不存在于成熟RNA分子中。10、管家基因 (housekeeping gene):某些基因在一個個體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá),通常被稱為管家基因。11、 第二信使( second messenger):配體與受體結(jié)合后并不直接進(jìn)入靶細(xì)胞內(nèi),但間接激活細(xì)胞內(nèi)其他可擴(kuò)散、 并能調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白活性的小分子或離子,如 cAMP、ca 2+等。12、G蛋白循環(huán):G蛋白偶聯(lián)型受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的第一個信號傳遞分子是 G蛋白,其活化過程稱為 G蛋白循環(huán),存
4、在有活性和無活性兩種狀態(tài)。13、受體:細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi)能特異識別生物活性分子并與之結(jié)合,進(jìn)而引起生物學(xué)效應(yīng)的特殊蛋白質(zhì),個別是糖脂。14、信號肽 (signal peptide):是未成熟分泌性蛋白質(zhì)中可被細(xì)胞轉(zhuǎn)運系統(tǒng)識別的特征性氨基酸序列。 有堿性 N-末端區(qū),疏水核心區(qū)及加工區(qū)三個區(qū)段。15、順式作用元件 (cis-acting element):可影響自身基因表達(dá)活性的DNA序列 . 包括啟動子、增強(qiáng)子、終止子、沉默子、隔離子16、反式作用因子 (trans-acting factor):由某一基因表達(dá)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)因子,通過與另一基因的特異的順式作用元件相互作用,調(diào)節(jié)其表達(dá)。這種蛋白質(zhì)因
5、子稱為反式作用因子。17、Western blot:蛋白質(zhì)免疫印跡法,是將電泳分離后的細(xì)胞或組織總蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物NC膜或 PVDF 膜上,然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測技術(shù) . 18、PCR:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng), 是一種用于擴(kuò)增特定的 DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),利用一對特異性的引物,在耐熱 DNA聚合酶的催化下,經(jīng)過變形- 退火 -延伸,循環(huán)往復(fù)進(jìn)行,使目的基因達(dá)到指數(shù)倍增的效果學(xué)習(xí)好資料 歡迎下載19、Co-IP:免疫共沉淀, 是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)相互作用的有效方法。20、基因工程:在
6、體外對不同生物的基因進(jìn)行剪切、重組、連接,然后插入到載體分子中(細(xì)菌質(zhì)粒、病毒或噬菌體DNA),后轉(zhuǎn)入微生物、植物或動物細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行無性繁殖,并表達(dá)出基因產(chǎn)物。21、限制性內(nèi)切酶:能夠識別DNA的特異序列 , 并在識別位點或其周圍切割雙鏈 DNA的一類內(nèi)切酶。22、基因診斷:利用分子生物學(xué)技術(shù),通過檢測基因及基因表達(dá)產(chǎn)物的存在狀態(tài),對人體疾病作出診斷的方法。基因診斷檢測的目標(biāo)分子是 DNA、RNA,也可以是蛋白質(zhì)或者多肽。23、基因治療:指將目的基因通過基因轉(zhuǎn)移技術(shù)(病毒載體介導(dǎo)或者非病毒載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移技術(shù))導(dǎo)入靶細(xì)胞內(nèi),目的基因表達(dá)產(chǎn)物對疾病起治療作用。二、問答:1. 病毒基因組有哪些特點
7、?不同病毒基因組大小相差較大;由 DNA或 RNA組成;病毒基因組有連續(xù)的也有不連續(xù)的;病毒基因組的大部分是編碼序列(90%),非編碼序列通常為調(diào)控序列;絕大多數(shù)為單倍體基因組(逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組除外);基因有連續(xù)的和間斷的;功能相關(guān)的蛋白質(zhì)基因叢集;有基因重疊現(xiàn)象。2. 原核生物基因組有哪些特點?1、通常由環(huán)狀雙鏈 DNA分子組成 2、只有一個復(fù)制起始點 3、操縱子結(jié)構(gòu)普遍 4、基因密度高,編碼區(qū)在基因組中所占比例大(50%)5、基因組中重復(fù)序列很少 6、非編碼區(qū)內(nèi)主要是一些調(diào)控序列 7、存在可移動成分產(chǎn)生轉(zhuǎn)座現(xiàn)象3. 簡述乳糖操縱子的負(fù)調(diào)控機(jī)制。乳糖操縱子是由調(diào)節(jié)基因、啟動子、操縱基因和結(jié)構(gòu)
8、基因組成的。lacI編碼阻遏蛋白。阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)控: 當(dāng)培養(yǎng)基中沒有乳糖時, 阻遏蛋白結(jié)合到操縱子中的操縱基因上, 阻止了結(jié)構(gòu)基因的表達(dá); 當(dāng)培養(yǎng)基中有乳糖時, 乳糖分子和阻 遏蛋白結(jié)合, 引起阻遏蛋白構(gòu)象改變, 不能結(jié)合到操縱基因上, 使 RNA聚合酶能正常催化轉(zhuǎn)錄操縱子上的結(jié)構(gòu)基因,即操縱子被誘導(dǎo)表達(dá)。學(xué)習(xí)好資料 歡迎下載4. 簡述受體與配體結(jié)合的特點(1)有高度專一性:受體選擇性地與特定配體結(jié)合,這是由分子的幾何形狀決定的,兩者的結(jié)合通過反應(yīng)基團(tuán)的定位和分子構(gòu)象的相互契合而實現(xiàn)。(2)有高度親和力(3)可飽和性:增加配體至一定濃度,可使受體飽和。(4)可逆性:受體與配體以非共價鍵結(jié)合,
9、當(dāng)生物效應(yīng)發(fā)生后, 配體與受體解離。(5)特定的作用模式 受體在細(xì)胞內(nèi)的分布有組織特異性, 有特定的作用模式,受體與配體結(jié)合后,能引起特定的生理效應(yīng)。5. 簡述 AC-cAMP-蛋白激酶 A信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路組成:胞外因子、受體、G蛋白、 AC、cAMP、PKA 信號分子與受體結(jié)合,引起受體構(gòu)象改變,受體活化G 蛋白,活化后的 G 蛋白激活 AC,AC催化 ATP生成 cAMP,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi) cAMP濃度增高,激活 PKA,使目標(biāo) 蛋白或酶磷酸化,從而調(diào)控酶的活性或基因表達(dá),產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)。6. 簡述 PLC-IP3/DAG-PKC信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路 信號分子與受體結(jié)合, 引起受體構(gòu)象變化, 受體活化 G
10、蛋白,活化后的 G 蛋白 激活 PLC,PLC 水解 PIP2 生成 IP3 和 DG,IP3 使鈣通道打開,細(xì)胞內(nèi) Ca2+ 升高, Ca2+與 CaM 結(jié)合,激活 Ca2+-CaM 依賴的蛋白激酶,后者使目標(biāo)蛋白磷 酸化,在 Ca2+等的參與下, DG激活 PKC,使蛋白質(zhì)和酶磷酸化,產(chǎn)生生物學(xué)效 應(yīng)。7. 簡要說明五種 RNA的功能。核糖體 RNA(rRNA):負(fù)責(zé)蛋白質(zhì)的合成 信使 RNA(mRNA):蛋白合成的模版轉(zhuǎn)運 RNA(tRNA):轉(zhuǎn)運蛋白合成所需要的氨基酸、識別mRNA遺傳密碼微小 RNA( miRNA):表達(dá)具有組織特異性和階段特異性,在調(diào)控發(fā)育、疾病過程中有重要作用 小
11、干擾 RNA(siRNA):觸發(fā) RNA干擾 , 降解 mRNA,基因沉默。學(xué)習(xí)好資料 歡迎下載8、研究蛋白 - 蛋白、蛋白 DNA互作的方法有哪些?原理是什么?蛋白 - 蛋白互作:1、酵母雙雜交系統(tǒng):是將待研究的兩種蛋白質(zhì)的基因分別克隆到酵母表達(dá)質(zhì)粒的轉(zhuǎn)錄激活因子(如GAL4等)的 DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域基因和轉(zhuǎn)錄激活因子(如GAL4等)激活結(jié)構(gòu)域基因, 構(gòu)建成融合表達(dá)載體, 從表達(dá)產(chǎn)物分析兩種蛋白質(zhì)相互作用的系統(tǒng)。2、Co-IP(免疫共沉淀)免疫共沉淀,是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。用的有效方法。蛋白 -DNA互作:是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)相互作CHIP染色質(zhì)免疫共沉淀 在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)DNA復(fù)合物, 并將其隨機(jī)切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段, 然后通過免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體,特異性地富集目的蛋白結(jié)合的 DNA片段,從而獲得蛋白質(zhì)與 DNA相互作用的信息。9、簡述 PCR技術(shù)的原理及步驟,并分析PCR技術(shù)的影響因素。原理:PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一種用于擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),利用一對特異性的引物, 在耐熱 DNA聚合酶的催化下, 經(jīng)過變形 - 退火 - 延伸,循環(huán)往復(fù)進(jìn)行,使目的基因達(dá)到指數(shù)倍增的效果。步驟:PCR由變性 - 退火- 延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成
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