實驗室管理與安全操作要點課件

1、實驗室管理和安全操作要點2019年7月16日1TBPCC實驗室分級 I 級：用于教學和培訓，沒有危害，開放II 級：用于臨床診斷、教學 ，中度危險， 有安全設(shè)備， 緩沖間III級：有緩沖通道和緩沖間，負壓氣流，生 物安全臺，個人防護，污物處理IV級：用于高致病性微生物實驗2019年7月16日2TBPCC原則在不同等級的實驗室，建立統(tǒng)一的實驗室操作規(guī)程和生物安全要求標準根據(jù)不同的生物安全級別，實驗室裝備必要的實驗與防護設(shè)備有可靠的防護效果和安全的菌種資源庫實驗室實行嚴格的科學化管理 2019年7月16日3TBPCC2019年7月16日4TBPCC2019年7月16日5TBPCC2019年7月16

2、日6TBPCC人 員檢驗人員需經(jīng)過專業(yè)技術(shù)培訓和崗位考核，經(jīng)核準后上崗操作。非專業(yè)技術(shù)人員、無專業(yè)技術(shù)職稱者不得從事檢驗的技術(shù)工作。制訂技術(shù)人員培養(yǎng)和業(yè)務(wù)進修計劃，通過多渠道、多形式對各級技術(shù)人員培訓和考核，注重對業(yè)務(wù)技術(shù)骨干和學科帶頭人的培養(yǎng)2019年7月16日7TBPCC質(zhì)量保證體系質(zhì)量保證體系中應有明確的分級責任制度，以確保檢驗的工作質(zhì)量，保證檢驗、復核、科研結(jié)果等各項報告的準確可靠性設(shè)立質(zhì)量保證監(jiān)督檢查員質(zhì)保督查工作應制訂年度計劃；定期或不定期檢查有關(guān)部門各項質(zhì)量保證制度的執(zhí)行情況；寫出檢查記錄，包括日期、目的、內(nèi)容、執(zhí)行情況、建議和意見、檢查者姓名等。發(fā)現(xiàn)重大問題及時報告2019年7

3、月16日8TBPCC實驗室設(shè)施實驗室條件應滿足工作任務(wù)的要求，有完善的實驗設(shè)施實驗室的環(huán)境應清潔、衛(wèi)生、安靜、無污染實驗室內(nèi)的管線設(shè)置應整齊，要有安全管理措施和報警、應急及急救設(shè)施用于放射性藥品及毒菌種、疫苗檢驗的實驗室，應有相應的安全保護設(shè)施2019年7月16日9TBPCC實驗室建筑實驗室建筑面積（包括實驗用房、輔助用房）應與其職能要求相適應實驗室應與辦公室分開具有與檢品要求相適應的專用或兼用的采樣間2019年7月16日10TBPCC物質(zhì)儀器易燃、劇毒和有腐蝕性的物質(zhì)，應按規(guī)定存放、使用各類壓力容器的存放、使用，應有安全隔離設(shè)施儀器放置的場所應符合要求，便于儀器操作、清潔和維修，要有適當?shù)姆?/p>

4、塵、防震、通風及專用的排氣等設(shè)施；對溫度或濕度變化敏感易影響檢測結(jié)果的儀器，應備有恒溫或除濕裝置。儀器所用電源應保證電壓恒定，有足夠容量，并有良好的專用地線2019年7月16日11TBPCC操作間無菌檢查、微生物檢查實驗室分無菌操作間和緩沖間。無菌操作間應具備相應的空調(diào)凈化設(shè)施和環(huán)境，其環(huán)境應符合萬級潔凈度要求。進入無菌操作間應有人凈和物凈的設(shè)施。無菌操作間應根據(jù)檢驗品種的需要，保持對鄰室的相對正壓或相對負壓，并定期檢測潔凈度。無菌操作間內(nèi)禁放雜物，并應制定地面、門窗、墻壁、設(shè)施等的定期清潔、滅菌規(guī)程。操作間設(shè)有紫外線燈；操作臺宜穩(wěn)固，并保持水平。實驗室內(nèi)應光線明亮，并有控制溫度、濕度的設(shè)備。

5、2019年7月16日12TBPCC動物實驗室實驗動物和動物實驗設(shè)施應符合國家實驗動物主管部門的有關(guān)規(guī)定。實驗動物房的面積要滿足工作的要求。實驗動物應具有質(zhì)量合格證明，并確實達到合格證規(guī)定的質(zhì)量標準。動物實驗設(shè)施及條件（含建筑設(shè)施、環(huán)境條件、飼料等）應達到相應的國家標準。從事實驗動物工作的人員應具有相應的專業(yè)知識并進行定期培訓。實驗動物設(shè)施必須具有洗刷消毒設(shè)備，定期對籠器進行消毒。2019年7月16日13TBPCC儀器設(shè)備 儀器設(shè)備的種類、數(shù)量、各種參數(shù)，應能滿足所承擔的檢驗、復核、仲裁等的需要，有必要的備品、備件和附件。 儀器的量程、精度與分辨率等能覆蓋被測物品標準技術(shù)指標的要求。2019年7

6、月16日14TBPCC儀器應有專人管理，定期校驗檢定，對不合格、待修、待檢的儀器，要有明顯的狀態(tài)標志，并應及時進行相應的處理。儀器使用人應經(jīng)考核合格后方可操作儀器。2019年7月16日15TBPCC凡精密儀器設(shè)備應建立管理檔案，其內(nèi)容包括品名、型號、制造廠名、到貨、驗收及使用的日期、出廠合格證和檢定合格證、操作維修說明書、使用情況、維修記錄、附件情況等，進口儀器設(shè)備的主要使用說明部分應附有中文譯文。精密儀器的使用應有使用登記制度。2019年7月16日16TBPCC操作規(guī)程為提高檢驗工作質(zhì)量，確保檢驗數(shù)據(jù)的可靠性，應制訂各項檢驗的標準操作規(guī)程（SOP）。SOP應寫明操作程序，其內(nèi)容應明確、詳細。

7、SOP的制定和修訂，應按規(guī)定的程序進行，經(jīng)領(lǐng)導批準后實施；制定內(nèi)容及修訂原因，應保存原始制定和修訂記錄并存檔。2019年7月16日17TBPCC需制定SOP的項目有：（一）儀器與設(shè)備的使用（二）通用的檢驗技術(shù)與方法（三）專用的檢驗技術(shù)與方法（四）動物及動物室的管理（五）試劑及試藥溶液的配制與管理（六）其它2019年7月16日18TBPCC實驗室管理制度為保證實驗室工作的有序進行，必須制訂一系列的各項實驗室管理制度，主要包括下列內(nèi)容2019年7月16日19TBPCC實驗室管理制度（一）實驗室工作制度（二）實驗室安全制度（三）檢品的收檢、檢驗、留樣制度（四）科研工作管理制度（五）標本管理與使用制度

8、（六）菌、毒種及細胞系保管制度（七）物質(zhì)管理制度（八）計量管理制度（九）精密儀器管理制度（十）保密制度（十一）差錯事故管理制度（十二）技術(shù)人員培訓進修制度（十三）計算機管理制度2019年7月16日20TBPCC檢驗記錄與檢驗報告書檢驗記錄是出具檢驗報告書的原始依據(jù)。為保證藥品檢驗工作的科學性和規(guī)范化，檢驗原始記錄必須用藍黑墨水或碳素筆書寫，做到記錄原始、數(shù)據(jù)真實、字跡清晰、資料完整。2019年7月16日21TBPCC原始檢驗記錄應按頁編號，按規(guī)定歸檔保存。檢驗報告應長期保存。檢驗人員應本著嚴肅負責、實事求是的態(tài)度認真書寫檢驗卡、檢驗報告書，做到數(shù)據(jù)完整、字跡清晰、用語規(guī)范、結(jié)論明確。檢驗報告書

9、應按統(tǒng)一的規(guī)范格式書寫打印。2019年7月16日22TBPCC檔案資料管理檔案資料實行集中統(tǒng)一管理。規(guī)定檔案資料的歸檔范圍，定期立卷、歸檔。應根據(jù)檔案法及有關(guān)規(guī)定建立檔案資料管理制度，制定管理規(guī)范和分類方案；編制檔案資料檢索工具，便于對檔案資料的利用；配置必要的設(shè)施，確保檔案資料的安全。2019年7月16日23TBPCC實驗室安全基本原則: 1.在實驗檯上不可放置任何非實驗必須的物件或私人用品 2.每次工作開始及終止時，必須清理並用殺菌液擦拭實驗檯面 (殺菌液最常用的為 70% 酒精水溶液)2019年7月16日24TBPCC3.在操作過程中絕不可抽煙、吃東西或使用化妝品 4.在操作過程中必須穿

10、清潔的實驗衣，若蓄長髮須將長髮束好，在實驗室中任何時候皆應有整齊的裝束 5.實驗室內(nèi)的各種培養(yǎng)基、儀器，尤其是各種實驗的樣品及微生物培養(yǎng)，皆不可任意移至實驗室外 2019年7月16日25TBPCC6.實驗室內(nèi)任何一種微生物樣品，在處理時均須遵守下列事項： 絕不可用口吸取任何一種微生物樣品。 如果微生物樣品打翻，必須以吸滿殺菌液之衛(wèi)生紙加以覆蓋 15 分鐘後，衛(wèi)生紙才可移除，並依照一般微生物實驗室的廢棄物加以處理。 任何微生物樣品在室內(nèi)搬移時都必須加蓋。 7.在任何操作過程的開始前及終止後，雙手都必須以清潔劑清洗。 8. 微生物實驗內(nèi)，任何微生物的樣品、廢棄物 都必須高溫高壓滅菌後，才能按一般垃

11、圾處理。 2019年7月16日26TBPCC操作時之注意事項 1.機器運轉(zhuǎn)中如有不正?，F(xiàn)象，應立即報告上級，若時間急迫，可先切斷電源。 2.發(fā)現(xiàn)儀器故障者，應在機器上清楚標示，盡到告知義務(wù)，以免發(fā)生危險。 3.任何藥品使用前需詳知其性質(zhì)及使用方法，配製或使用有毒物品需戴手套口罩等操作，揮發(fā)性溶劑則需於通風櫃內(nèi)使用，並應隨時加蓋，以免發(fā)生危險。 2019年7月16日27TBPCC4.揮發(fā)性溶劑如酒精丙酮苯醚等均易燃燒，故切勿靠近火焰。不溶於水之有機溶劑著火時，切勿以水滅火，以免更助長火勢蔓延。 5.不得將紙屑玻璃碎片等流入排水管。 6.當加熱試管內(nèi)物質(zhì)時，為避免燒破試管或致使試管內(nèi)物質(zhì)噴出，宜常

12、旋轉(zhuǎn)試管或避免僅加熱一處，且勿將試管口對著自己或別人，以免試管內(nèi)物質(zhì)噴出濺及自身或其他人。 7.稀釋濃硫酸或其他強酸時應徐徐將濃硫酸加入水中，並輕輕搖晃混和，切勿加水於酸中，以免因稀釋時產(chǎn)生大量的熱，致硫酸因沸騰而濺出。 2019年7月16日28TBPCC 微生物實驗中，不論是何種操作過程或樣品、廢棄物的處理，都應以無菌操作技術(shù)為最基本的工作原則。 只有當所有的操作步驟及處理方法均 符合無菌操作技術(shù)的要求時，才能使工作者及其工作環(huán)境可能受到的污染程度降至最低，使其工作的安全性提至最高。 2019年7月16日29TBPCCXX實驗室生物安全與技術(shù)規(guī)范2019年7月16日30TBPCC實驗室結(jié)構(gòu)及

13、要求XX實驗室是專用實驗室。日前，在XX防制工作中由于所承擔的任務(wù)及對安全要求的不同，我國的XX實驗室可劃分成4種類型 2019年7月16日31TBPCC簡易XX實驗室 簡易XX實驗室是在疫源地調(diào)查中，或監(jiān)測現(xiàn)場使用的臨時性實驗室。實驗室主要是獨立的房屋，帳篷或其他結(jié)構(gòu)，距離生活區(qū)或居民區(qū)50米以上（野外還應注意風向并遠離水源）。室內(nèi)經(jīng)處理后達到相對密閉和潔凈。實驗室的進口處應進行簡單的隔斷，以供廠作人員更衣和放置消毒物品。門窗須加固，防動物竄入。實驗室內(nèi)有必需的裝備，以及供消毒用的藥品和器械。 承擔監(jiān)測或調(diào)查中分離XX苗的任務(wù)，顯微鏡檢查、細菌的分離培養(yǎng)，噬菌體裂解試驗和以分離細菌為目的的動

14、物試驗。本等級實驗室無長期保存細菌株的任務(wù)，所獲得的細菌株必須在60日內(nèi)，全數(shù)送交上級實驗室鑒定。在接到鑒定報告后7日內(nèi)銷毀全部原始細菌株。2019年7月16日32TBPCC普通XX強毒實驗室 普通強毒實驗室可供對XX菌的鑒定及進一步的研究工作。由潔凈區(qū)、普通實驗室、緩沖區(qū)和強毒操作區(qū)組成。實驗室應以獨立的建筑物為宜，結(jié)構(gòu)相對密閉，安裝紫外線消毒系統(tǒng)和帶有除菌濾器的通風排氣系統(tǒng)，污水必須通過處理才能進入公共污水系統(tǒng)，防止動物或昆蟲竄入室內(nèi)，并嚴防實驗動物逃逸。 強毒操作區(qū)內(nèi)，設(shè)細菌培養(yǎng)室、動物解剖室、實驗動物接種及飼養(yǎng)室，如有條件可增設(shè)疑似材料接檢室。工作室互相聯(lián)系成為一個系統(tǒng)。在實驗室的強毒

15、區(qū)和其他輔助區(qū)域之間，設(shè)雙重緩沖間、消毒間和出入實驗室的更衣間。 2019年7月16日33TBPCC 在強毒區(qū)域之外，應根據(jù)需要設(shè)置普通實驗室，如培養(yǎng)基制備、顯微鏡檢查、血清學實驗、高壓消毒、洗滌以及健康動物飼養(yǎng)間等以提供技術(shù)支持。 本等級實驗室承擔XX監(jiān)測或調(diào)查中分離菌株的復判任務(wù)，重復基層實驗室的檢查項目以保證結(jié)果正確，附加的檢驗任務(wù)包括XX菌生化特性檢查、毒力因子檢查、質(zhì)粒檢查，為確定毒力所需的動物感受性試驗，以及提取DNA供進一步研究。 本等級實驗室設(shè)有長期保管XX菌株的責任，基層報送的XX菌株，必須在60日內(nèi)鑒定完畢，并將代表菌株報送國家菌種庫。應報送的數(shù)量為：每一流行過程（指在互相

16、連接的地域內(nèi)，一個流行季節(jié)中）分離的菌株不超過5株時，全部報送，超過5株時，選送5殊。收到國家菌庫接受細菌株的回執(zhí)后7日內(nèi)，銷毀本實驗室收到的全部菌株。2019年7月16日34TBPCC生物安全II級實驗室 在普通XX強毒實驗室內(nèi)配備II級生物安全柜，即為生物安全II級實驗室。進入生物安全II級實驗室內(nèi)工作，可以簡化著裝要求。生物安全柜上的除菌濾膜要定期更換。 本等級實驗室可以使用XX菌株，進行各種類型的研究工作。如需長期保存和使用XX菌株，除實驗室必須達到本等級際準外，還需要：安裝與公安機關(guān)相連接的安全報警系統(tǒng)；具備保存細菌株所需，能夠牢固鎖閉的地下室或獨立房間和保存菌種的專用設(shè)備，菌種的使

17、用按衛(wèi)生部（1985）中國醫(yī)學微生物菌種保藏管理辦法規(guī)定執(zhí)行。2019年7月16日35TBPCC生物安全III級實驗室在生物安全II級的基礎(chǔ)上，實驗室維持恒定的25至一30帕的負壓，保證進出實驗室時生氣流向為由外向內(nèi)，壓力差1015帕以上；保證實驗室內(nèi)空氣流向自上而下，無橫向氣流和紊流，并維持萬級或以上的潔凈度，即達到生物安全III級標準。 本等級實驗室可用于特別危險，容易產(chǎn)生氣溶膠的實驗操作，并具備較強的抗御事故能力， 疫源省省會及中國疾病預防控制中心的XX實驗室應達到這一水平。本等級實驗室保存與使用XX菌株的權(quán)限，與生物安全II級相同。2019年7月16日36TBPCC實驗室工作制度 1.

18、 非實驗室工作人員一律禁止進入強毒實驗區(qū)。2. 實驗室內(nèi)禁止飲食、吸煙、接待訪客和喧嘩。3. 進行強毒操作時，需有兩名工作人員同時進入實驗室。4. 從事強毒工作的人員須經(jīng)培訓后方能參加操作，并嚴格按照操作規(guī)則和其它國家標準進行各項實驗，準確記錄實驗結(jié)果。培訓標準由各等級的實驗室根據(jù)國家標準和規(guī)定自行制訂，通過考核后，還須與有資格的工作人員一同工作3個月，才能獲得操作資格。5. 實驗菌庫由專人管理，并按照衛(wèi)生部（ 1985）中國醫(yī)學微生物菌種保藏管理辦法規(guī)定執(zhí)行。6. 建立工作人員基礎(chǔ)醫(yī)學檢測卡片。7. 工作人員如有皮膚損傷、發(fā)熱、感冒和妊娠六個月以上者，不能進入強造實驗室。8. 工作完畢，檢查

19、各實驗室水、電、防火設(shè)備，打開防盜報警裝置。9. 從事與強毒菌有關(guān)的工作后，7日內(nèi)不可離開實驗室所在城市。如出現(xiàn)身體不適現(xiàn)象，應在實驗室所在地進行醫(yī)學觀察。因工作原因必須離開時，用口服抗菌藥物預防 。2019年7月16日37TBPCC試驗操作時的防護服裝 在不同等級的實驗室進行強毒操作時，應按不同的著裝要求1.簡易實驗室和普通強毒實驗室：按下列順序穿著防護服裝：內(nèi)隔離衣褲穿工作襪及長筒膠靴戴白帽和小口罩（兩鼻翼與口罩問用適量脫脂棉填充) 扎三角頭巾穿后開口隔離服（偏衫）戴2024層的紗布大口罩或濾材口罩戴醫(yī)用手術(shù)手套，必要時外面套細線手套進行已知毒苗動物接種、解剖或菌種開封等應戴有機玻璃面罩或

20、防護眼鏡，以防操作時細菌濺入眼內(nèi)或臉部裸露皮膚。2. 在配備生物安全柜的生物安全II級和III級實驗室內(nèi)，著裝可簡省至外科手術(shù)著裝水平，即帶一次性口罩、帽于、穿后開口隔離服、戴醫(yī)用手術(shù)手套、普通套鞋；也可使用一次性服裝，用后高壓滅菌；耐用服裝經(jīng)高壓滅菌后可重復使用。2019年7月16日38TBPCC生物安全操作規(guī)程 開始工作之前，工作間用紫外線照射消毒20分鐘，簡易強毒實驗室在操作前后均應進行空氣和體表消毒。1.進入強毒試驗操作間后，勿用手觸及身體的任何部位。2.進行菌種開封、細菌分離培養(yǎng)或其它操作，生物安全II級或III級實驗室應在生物安全柜中進行，普通實驗室應在無菌罩中進行。3.工作之前，

21、生物安全柜的臺面用70酒精消毒，無菌罩的臺面用消毒液消毒。4. 進行細菌操作時，接種環(huán)應在工作燈的內(nèi)焰中燃燒，以避免菌液或菌塊飛濺。5. 稀釋菌液時，將吸管插入試管或燒瓶底部，用吸球緩慢打擊菌液，避免產(chǎn)生氣泡或氣溶膠。2019年7月16日39TBPCC6. 隨時用消毒液浸泡手套，如有操作區(qū)域污染，立即用消毒液清洗處理。如有防護服污染和手套破裂，立即置消毒液中浸泡510分鐘后更換。7. 進行動物試驗時，勿用手直接對接或拔開注射器和針頭，以免劃破皮膚或無意接種。8. 接種動物時，應在乳膠手套外加戴線手套，以免動物咬傷或劃破皮膚，己接種的動物放入動物籠具中，關(guān)閉門或蓋，以防動物逃逸。9. 接種過的實驗動