藥理學(xué)研究的科學(xué)訓(xùn)練

1、藥理學(xué)研究的科學(xué)訓(xùn)練科研全過程訓(xùn)練概況專業(yè)課程、專業(yè)外語、統(tǒng)計(jì)學(xué)、文獻(xiàn)檢索、常用軟件應(yīng)用（Word, Excel, PowerPoint,圖表制作軟件，Photoshop, SPSS, etc）閱讀文獻(xiàn)，確定課題（查閱文獻(xiàn)能力）設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)研究（取得初步結(jié)果，可以申請(qǐng)基金）統(tǒng)計(jì)分析資料；撰寫論文答辯、會(huì)議報(bào)告（Chinese, English）2022/8/12一、藥理學(xué)研究的類型根據(jù)研究目的分類基礎(chǔ)研究：受體、遞質(zhì)、蛋白質(zhì)、神經(jīng)通路、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因開發(fā)研究：圍繞新藥研發(fā)的藥理學(xué)研究應(yīng)用研究：提高治療效果、減少不良反應(yīng)的臨床藥理學(xué)2022/8/13一、藥理學(xué)研究的類型根據(jù)研究?jī)?nèi)容分類藥效及作用

2、機(jī)制研究藥動(dòng)學(xué)研究根據(jù)研究方法分類實(shí)驗(yàn)研究整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)離體器官、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)臨床研究2022/8/14二、對(duì)科研素養(yǎng)的要求獨(dú)立研究工作的基本能力掌握信息, 復(fù)習(xí)文獻(xiàn)的能力科學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力科學(xué)實(shí)驗(yàn)操作能力科學(xué)論文撰寫發(fā)表能力科學(xué)基金申請(qǐng)能力良好的素質(zhì)，杜絕造假、剽竊文章的可信率、實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)率2022/8/15 掌握信息, 復(fù)習(xí)文獻(xiàn)的能力如何針對(duì)課題復(fù)習(xí)文獻(xiàn)2022/8/161.站在巨人肩上看世界知識(shí)爆炸時(shí)代: 廣博、交叉學(xué)科知識(shí)廣博與深入、專業(yè)化間的矛盾開卷有益？2022/8/172.按科研需要來復(fù)習(xí)文獻(xiàn)充分占有文獻(xiàn) 方向 專業(yè)人員水平領(lǐng)域 專家水平課題 No.1 專家水平2022/8/182.按

3、科研需要來復(fù)習(xí)文獻(xiàn)文獻(xiàn)分類書教科書: 相關(guān), 交叉學(xué)科的基礎(chǔ)知識(shí)專著編著 ( 資料性 )著作 ( 文獻(xiàn)性 )( 方向 ) ( 領(lǐng)域 )綜述資料性 ( 方向 ) ( 領(lǐng)域 )文獻(xiàn)性 ( 領(lǐng)域 , 課題 )Original paper 課題 領(lǐng)域 ( 個(gè)別 )Data paper快報(bào) 摘要會(huì)議匯編自己定位不要變, 別被文獻(xiàn)牽著走2022/8/193.如何收集文獻(xiàn)檢索重要文獻(xiàn); 實(shí)驗(yàn)室或?qū)W者追蹤; 確定本學(xué)科的重要( 核心 )期刊分層次收集資料課題有關(guān)文獻(xiàn);盡可能收集原著/快報(bào);要新,全本領(lǐng)域非課題文獻(xiàn);新綜述,影響大的原著本方向非本領(lǐng)域文獻(xiàn):經(jīng)典專著/綜述不同方向相關(guān)知識(shí):專著,教科書2022/8

4、/1104.如何看文獻(xiàn)精讀與瀏覽看懂:問題的提出( Background ) 目的 設(shè)計(jì)思想與依據(jù) 研究對(duì)象與方法 重要結(jié)果 結(jié)論與啟示 熟悉程度方向: 一般涉及;基礎(chǔ)知識(shí);學(xué)科水準(zhǔn);當(dāng)前重大進(jìn)展與趨勢(shì) 領(lǐng)域: 了解焦點(diǎn)與熱點(diǎn);已/正/將進(jìn)行的課題 課題: (全面) 歷史 現(xiàn)狀 展望；主要方法、手段2022/8/1115.文獻(xiàn)整理運(yùn)用自己專業(yè)知識(shí)按照文獻(xiàn)的熱點(diǎn)與焦點(diǎn)參照相關(guān)綜述模式例 TGF在腎纖維化中的意義 (作用) 背景知識(shí) 腎纖維化 TGF的理化特征 TGF的生成與代謝、組織分布等 腎纖維化病程中TGF的變化 血漿的和腎組織的，蛋白與基因表達(dá) 病程中的動(dòng)態(tài)變化與臨床病理生理表現(xiàn) 的（相關(guān)

5、）關(guān)系2022/8/1125.文獻(xiàn)整理參照相關(guān)綜述模式 TGF的生物學(xué)（腎）效應(yīng)：整體，器官，細(xì)胞及分子效應(yīng) 外源或刺激內(nèi)源TGF的效應(yīng)（在正常和疾病條件） 拮抗或促失活的效應(yīng) TGF效應(yīng)的機(jī)理 受體及細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理 TGF的基因表達(dá)和細(xì)胞表型改變的機(jī)理 腎臟疾病的TGF高/低表達(dá)的機(jī)理 TGF與其他已知腎纖維化因子間的關(guān)系（包括遺傳易感因素）2022/8/1135.文獻(xiàn)整理 TGF參與腎纖維化發(fā)病的臨床意義： 診斷，治療，預(yù)防策略此外，常用方法學(xué)和技術(shù)的整理 腎纖維化整體活離體模型； 相關(guān)細(xì)胞的培養(yǎng)； 細(xì)胞增殖表型轉(zhuǎn)變； 膠元測(cè)定； TGF受體表達(dá)與活性檢測(cè)2022/8/1146.如何撰

6、寫文獻(xiàn)綜述目的 學(xué)科帶頭人與學(xué)科骨干寫科研工作人員開題前寫科學(xué)情報(bào)人員寫研究生畢業(yè)論文(?)基層人員為寫而寫文獻(xiàn)性與資料性,大綜述與小專論2022/8/1156.如何撰寫文獻(xiàn)綜述小專論內(nèi)容審定好內(nèi)容與題目 (如上述例子)要有思路，有觀點(diǎn)，提煉科學(xué)問題，要告訴讀者什么？ 概述 問題的提出-研究的歷史與背景-本問題(課題)的意義背景知識(shí)及相關(guān)基本知識(shí) （不要寫成教科書或講義）本專論要論述的主要內(nèi)容,注意從課題與背景聯(lián)系的學(xué)科高度分析小結(jié) 存在的問題與今后的方向2022/8/1166.如何撰寫文獻(xiàn)綜述資料處理 按專業(yè)知識(shí)列好提綱; 文獻(xiàn) (作的摘要)編號(hào)后按提綱歸類背景材料,基礎(chǔ)知識(shí),立論依據(jù);權(quán)威

7、甚或經(jīng)典;“教科書式或講義式”語言不同意見,學(xué)術(shù)觀點(diǎn)與資料如何處理資料的準(zhǔn)確性,尤其是翻譯,講不清楚不如不講老課題文獻(xiàn)多,新課題文獻(xiàn)太少2022/8/1176.如何撰寫文獻(xiàn)綜述如何表達(dá)自己的學(xué)術(shù)觀點(diǎn): 評(píng)述? 自引? 邏輯分析內(nèi)容集中,目標(biāo)明確,不要廣證博引(與研 究生論文不同)參考文獻(xiàn): 新(5年內(nèi)2/3); 背景材料,立論依據(jù);權(quán)威經(jīng)典;專論內(nèi)容: 新,反映進(jìn)展,可引會(huì)議,摘要及個(gè)人咨詢,準(zhǔn)確發(fā)表: 刊登進(jìn)展/綜述的專業(yè)雜志(如“進(jìn) 展”“國(guó)外醫(yī)學(xué)”); 專業(yè)論文雜志;查閱國(guó)內(nèi)類似綜述有無,避免重復(fù). 按雜志稿約修改(留底)2022/8/118科學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力2022/8/1191.實(shí)驗(yàn)設(shè)

8、計(jì)的三個(gè)基本原則隨機(jī)原則排除實(shí)驗(yàn)者的主觀性，使每個(gè)實(shí)驗(yàn)單位都有同等機(jī)會(huì)被分配到實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。重復(fù)原則實(shí)驗(yàn)的取樣例數(shù)或?qū)嶒?yàn)次數(shù)2022/8/120對(duì)照原則并行對(duì)照配對(duì)對(duì)照自身對(duì)照前后對(duì)照2022/8/1212.研究元素要準(zhǔn)確處理因素（自變量）試驗(yàn)對(duì)象（人、動(dòng)物；器官、組織、細(xì)胞、分子）試驗(yàn)效應(yīng)（因變量）藥物、方法和模型的關(guān)系2022/8/1223.課題目標(biāo)要明確原則: 目標(biāo)明確;構(gòu)思新穎;立論依據(jù)充分;實(shí)驗(yàn)方法恰當(dāng)選題 (科研目標(biāo),目的)目標(biāo)具體:用實(shí)驗(yàn)手段解決科學(xué)問題,問題是什么,攻關(guān)，攀科學(xué)高峰，“關(guān)”、“高峰”是什么,在哪里? (目的與手段,工具的關(guān)系)射箭中的,忌打哪兒指哪兒，看看有什

9、么變化，研究甚少，填補(bǔ)空白等?！叭ā被A(chǔ)上明確該課題的學(xué)科地位(與原創(chuàng)新關(guān)系);注意工作的積累和發(fā)展;可參考文獻(xiàn)整理中發(fā)現(xiàn)的和未解決的問題；將確定的目標(biāo)逐字推敲寫下來。2022/8/123方法恰當(dāng)(不是越新越好) 方法選擇：目的決定方法選擇；實(shí)驗(yàn)條件選方法；工作者熟練程度選方法；假設(shè)全部順利，所得結(jié)果能否達(dá)到設(shè)計(jì)目標(biāo)？動(dòng)物的選擇：注意種屬、品系、性別差異給藥方法：試藥的溶解性、給藥途徑實(shí)驗(yàn)水平：整體必做！正常動(dòng)物與模型動(dòng)物經(jīng)典與新建；是否需與人一致或接近；可行性；模型與分組適合研究目的為原則預(yù)防與治療實(shí)驗(yàn)：盡可能做治療實(shí)驗(yàn)2022/8/124比較實(shí)驗(yàn)：選陽(yáng)性藥做量-效關(guān)系，證實(shí)方法和模型可靠

10、。藥效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)量-效關(guān)系：量反應(yīng)、質(zhì)反應(yīng)、時(shí)反應(yīng)（潛伏期、持續(xù)時(shí)間）時(shí)-效關(guān)系：藥效難測(cè)時(shí)可用時(shí)-量代替藥-靶關(guān)系：藥-配體、受體動(dòng)力學(xué)、酶-底物、藥-蛋白相互作用觀察指標(biāo)多（廣）或少（精）好？明確每個(gè)指標(biāo)的原理和意義背景指標(biāo)如證實(shí)疾病模型復(fù)制成功的指標(biāo)；反映質(zhì)控的指標(biāo)；反映陰性或陽(yáng)性的對(duì)照指標(biāo)等必須是肯定的結(jié)果 探索性指標(biāo)前瞻性指標(biāo)2022/8/125藥物效果生物差異實(shí)驗(yàn)技術(shù)統(tǒng)計(jì)處理兩組例數(shù)相等;計(jì)量資料與計(jì)數(shù)資料；同體、配對(duì)、前后對(duì)比實(shí)驗(yàn)；特殊設(shè)計(jì)：拉丁方、正交、交叉設(shè)計(jì)樣本數(shù)估計(jì)的原理2022/8/126最佳劑量的探索安全劑量的探索由已知藥物的效價(jià)比值來推算。由劑量折算系數(shù)法計(jì)算出最大耐

11、受量的等效劑量劑量遞增方案2022/8/127劑量遞增方案2022/8/128多劑量實(shí)驗(yàn)中劑量間距的確定整體動(dòng)物：1：3：9/1：2：4：8離體實(shí)驗(yàn)：1：10：100：10001：3：10：30：100計(jì)算LD50或ED50的實(shí)驗(yàn)0%及100%之間有36個(gè)劑量2022/8/129劑量換算不同種屬動(dòng)物的劑量換算2022/8/130建立操作程序落實(shí)每個(gè)方法預(yù)試成熟，建立程序設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)記錄與觀察內(nèi)容實(shí)驗(yàn)記錄表；單項(xiàng)歸納表；匯總表2022/8/131 預(yù)期結(jié)果陰性或陽(yáng)性的解釋與再證實(shí)；審定設(shè)計(jì)能否達(dá)到目標(biāo)預(yù)期結(jié)果追蹤深入研究的方向和可行性預(yù)期結(jié)果圖表設(shè)計(jì)（發(fā)表是否單?。╊A(yù)期結(jié)果的學(xué)術(shù)價(jià)值和地位 （寫論文

12、的Introduction, M & M ）2022/8/1322022/8/133怎樣寫好實(shí)驗(yàn)記錄2022/8/134一般要求記錄本應(yīng)事先印有頁(yè)碼，不得撕掉或挪作他用，即使寫錯(cuò)了亦應(yīng)如此。封面或首頁(yè)應(yīng)寫明科研課題名稱，開始工作年、月、日，工作者姓名，每本記錄前12頁(yè)應(yīng)留作寫實(shí)驗(yàn)?zāi)夸浖绊?yè)次之用，便于查閱。所有數(shù)據(jù)，必須立即用不掉色的筆直接清晰地記錄在記錄本上，嚴(yán)禁用鉛筆記錄，因?yàn)槿菀淄松捅煌扛摹Ｈ缬袑戝e(cuò)不得涂改擦抹，必須改正時(shí)，可在錯(cuò)誤處畫道線或打，然后寫上正確數(shù)據(jù)，并由課題負(fù)責(zé)人簽字，防止弄虛做假。電腦測(cè)得的數(shù)據(jù)應(yīng)輸入電腦，自動(dòng)打印，貯存，最好拷貝一份，以防丟失或損壞。2022/8/135

13、2.認(rèn)真、客觀、全面認(rèn)真、客觀、全面的記錄。格式和內(nèi)容實(shí)驗(yàn)方法試劑稱量配制時(shí)間氣候儀器設(shè)備動(dòng)物結(jié)果2022/8/1363.立即、直接、清晰寫記錄的要求立即不能先記在心上，實(shí)驗(yàn)后補(bǔ)寫記錄，因?yàn)橛洃浻袝r(shí)不可靠。直接要直接寫在記錄本上，不能先寫在紙條上，然后重抄，因?yàn)橹爻袝r(shí)抄錯(cuò)，有時(shí)甚至把紙條丟掉。清晰字體清楚，不要潦草，不要詞不達(dá)意，自己能看懂，別人也看得清楚，今天清楚，日后也看得懂。自動(dòng)儀器打印的數(shù)據(jù)、結(jié)果、圖譜等必須將原件依順序貼在記錄本上，有條件的還可輸入電腦保存。2022/8/137記錄的內(nèi)容年、月、日。有的實(shí)驗(yàn)還應(yīng)注明室溫實(shí)驗(yàn)名稱目的材料實(shí)驗(yàn)方法，應(yīng)注明引用參考文獻(xiàn)；結(jié)果：包括原始數(shù)據(jù)

14、，圖，表，統(tǒng)計(jì)方法討論或小結(jié) 2022/8/138藥物效應(yīng)的測(cè)量2022/8/1391.藥物-受體相互作用的測(cè)定生化結(jié)合研究（全部受體）功能研究（部分受體）real time measurementstop time measurement2022/8/140 1種配體與3種不同受體群的相互作用配體與受體結(jié)合的特異性是相對(duì)的，與藥物濃度有關(guān) 2022/8/1412.放射受體結(jié)合研究20世紀(jì)60年代，125I-ACTH、125I -血管緊張素; 基本原理：配基與受體特異性結(jié)合，以放射性強(qiáng)弱表示結(jié)合容量。與放免分析相似（1955年發(fā)明，Yalow）2022/8/142 放射配基結(jié)合過程圖解 202

15、2/8/143已知藥物濃度，可得到受體結(jié)合劑量-反應(yīng)曲線加入大劑量非標(biāo)記配基，封閉受體，得到非特異性結(jié)合相應(yīng)公式計(jì)算非特異性結(jié)合、總結(jié)合固定配基濃度，改變受體量符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)：隨時(shí)間增加，結(jié)合達(dá)最大值；能被無藥物介質(zhì)逆轉(zhuǎn)2022/8/144受體結(jié)合研究時(shí)的平衡情形 2022/8/145 放射性配基結(jié)合實(shí)驗(yàn)中不同水平的特異性結(jié)合 2022/8/146特別注意點(diǎn)去除非特異性結(jié)合在一定濃度的敏感“窗”內(nèi)進(jìn)行2022/8/1473.功能性研究測(cè)定功能性反應(yīng)方法多樣經(jīng)典生理反應(yīng)酶活性第二信使水平反應(yīng)、表達(dá)產(chǎn)物測(cè)定報(bào)告物質(zhì)（酶、基因等）2022/8/148要求：大的信-噪比：機(jī)體、儀器基礎(chǔ)狀態(tài)穩(wěn)定 辦法：

16、找出衰減規(guī)律設(shè)對(duì)照（不常用）也必須在穩(wěn)定的“窗”內(nèi)進(jìn)行2022/8/149 生物制備的穩(wěn)定窗 2022/8/150不同受體制備進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的前提敏感性和反應(yīng)性不變（實(shí)際不可能）糾正系統(tǒng)不穩(wěn)定性平衡周期達(dá)穩(wěn)態(tài)對(duì)照2022/8/151 移動(dòng)基線對(duì)劑量-反應(yīng)曲線的影響 2022/8/152激動(dòng)劑作用后指數(shù)性細(xì)胞死亡對(duì)劑量反應(yīng)曲線的影響 2022/8/153組織失去敏感性后，最大反應(yīng)也丟失一個(gè)系統(tǒng)不太可能充當(dāng)不同組織間基礎(chǔ)反應(yīng)變化的良好對(duì)照數(shù)據(jù)必須在穩(wěn)定的“窗”內(nèi)進(jìn)行，避免繼發(fā)作用靠一個(gè)劑量得到的反應(yīng)不能下結(jié)論2022/8/154生物制備反應(yīng)窗 2022/8/155劑量反應(yīng)曲線形狀的改變顯示繼發(fā)反應(yīng) 20

17、22/8/156生物放大的基本原則具有終端器官反應(yīng)的細(xì)胞體系具有很大價(jià)值2022/8/157細(xì)胞代謝指示物氫離子從細(xì)胞釋放調(diào)控示意圖 2022/8/1584.藥物反應(yīng)的表述基礎(chǔ)與給藥狀態(tài)的差值原發(fā)反應(yīng)變異性較大利用差值較好有多種轉(zhuǎn)換方法2022/8/159兩種描述藥物反應(yīng)的方法 2022/8/160生物制備劑量反應(yīng)曲線誤差范圍 2022/8/161實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的不同處理直接反應(yīng)以對(duì)數(shù)濃度作圖有較高精確性藥物反應(yīng)減去基礎(chǔ)值降低反應(yīng)測(cè)量誤差反應(yīng)值以基礎(chǔ)水平的百分?jǐn)?shù)表示變異大以最大反應(yīng)值的百分?jǐn)?shù)表示較好；需要較少的實(shí)驗(yàn)次數(shù)2022/8/162直接反應(yīng)以對(duì)數(shù)濃度作圖 2022/8/163從上圖顯示的數(shù)據(jù)所

18、計(jì)算的delta反應(yīng) 2022/8/164反應(yīng)以基礎(chǔ)值的百分率表示 2022/8/165Delta反應(yīng)以最大delta反應(yīng)的百分?jǐn)?shù)計(jì)算 2022/8/166連續(xù)累積劑量反應(yīng)曲線 2022/8/167研究結(jié)果的表達(dá)2022/8/168一、研究文章的撰寫確定投哪本雜志文章的質(zhì)量與雜志的檔次要相稱發(fā)表周期2022/8/169論文撰寫基本格式與要求 Bacon: Writing makes an exact man.2022/8/170二、基本要求值得研究數(shù)據(jù)真實(shí)、經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)處理按照國(guó)際科學(xué)界公認(rèn)的格式編排文體要好，含義確切、合乎邏輯2022/8/1711978年1月美、加、英醫(yī)學(xué)期刊編輯：溫哥華宣言

19、1991年 國(guó)際醫(yī)學(xué)期刊編輯委員會(huì)修改Br Med J 1991; 302:338-3411995年 人民軍醫(yī)出版社醫(yī)學(xué)生物學(xué)文獻(xiàn)方法學(xué)2022/8/172題目（title）作者姓名（authors name）作者單位地址（address）摘要（abstract）關(guān)鍵詞（key words）引言（introduction） Nature 例外材料與方法（materials and methods）結(jié)果（results）討論（discussion）總結(jié)或結(jié)論（conclusion or summary）致謝（acknowledgement）參考文獻(xiàn)（reference） 2022/8/173題目

20、（title）： 短！具體；簡(jiǎn)潔：通常不超過20個(gè)字確切；通常在論文寫完后確定“甲氨蝶呤加四物湯治療白血病46例”避免“關(guān)于 的研究、調(diào)查、分析、觀察”作者姓名（authors name）： 第一作者correspondence; contributed equally 作者單位地址（address）2022/8/174摘要（abstract）目的、方法、結(jié)果、結(jié)論。150250個(gè)字符，或不超過1000個(gè)英文字母。關(guān)鍵詞（key words）：37個(gè)。引言（introduction）：背景、本項(xiàng)研究的理論基礎(chǔ)、為什么要進(jìn)行此研究或提出假說。全部論文的1/10左右篇幅。引言的最后一句：目的。20

21、22/8/175材料與方法（materials and methods）動(dòng)物：種類、數(shù)量、來源、性別、年齡、體重、飼養(yǎng)條件微生物、細(xì)胞：種、型、株、系、培養(yǎng)條件技術(shù)、方法的步驟、條件控制儀器設(shè)備名稱、產(chǎn)地、型號(hào)、精度藥品試劑來源、規(guī)格、純度、配制、存放條件計(jì)算機(jī)軟、硬件來源; 采用的統(tǒng)計(jì)學(xué)手段2022/8/176正確、恰當(dāng)?shù)乇磉_(dá)結(jié)果文字?jǐn)⑹觥D、表、照片、數(shù)據(jù)文字圖表互不重復(fù)注意圖、表的格式、各種單位的應(yīng)用連續(xù)性數(shù)據(jù)用線圖，非連續(xù)性數(shù)據(jù)用條圖圖注、表注，自明用標(biāo)準(zhǔn)差SD有效數(shù)字是標(biāo)準(zhǔn)差的1/3。進(jìn)位：四舍六入，五進(jìn)單。4045；200 g 15 g；不用mg%，而用molL-1。2022/8/177結(jié)果（results）文字?jǐn)⑹觥D、表、照片、數(shù)據(jù)文字圖表互不重復(fù)注意圖、表的格式、各種單位的應(yīng)用連續(xù)性數(shù)據(jù)用線圖，非連續(xù)性數(shù)據(jù)用條圖圖注、表注，自明用標(biāo)準(zhǔn)差SD 有效數(shù)字是標(biāo)準(zhǔn)差的1/3。進(jìn)位：四舍六入，五進(jìn)單。4045；200