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1、 概念:將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。 用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物核移植(難度高)受體細(xì)胞:M期的卵母細(xì)胞二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物胚胎細(xì)胞核移植:體細(xì)胞核移植:細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性容易第1頁(yè),共18頁(yè)。卵細(xì)胞母綿羊母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植早期胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠多莉羊的培育過(guò)程融合后的卵細(xì)胞第2頁(yè),共18頁(yè)。、動(dòng)物的克隆與植物克隆一樣嗎?、用動(dòng)物體細(xì)胞進(jìn)行克隆的過(guò)程,其實(shí)際操作過(guò)程是什么?動(dòng)物克隆過(guò)程的實(shí)際是細(xì)胞核移植不思考題第3頁(yè),共18頁(yè)
2、。體細(xì)胞核移植的過(guò)程卵母細(xì)胞去核體細(xì)胞取核電刺激使兩細(xì)胞融合重組細(xì)胞重組胚胎新個(gè)體第4頁(yè),共18頁(yè)。、在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核?為使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞。、用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,為什么?10代以內(nèi)的細(xì)胞一般保持正常二倍體的核型,未發(fā)生突變思考題第5頁(yè),共18頁(yè)。3、體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎?為什么?不是,克隆動(dòng)物絕大部分DNA來(lái)自供體細(xì)胞核,但核外還有少部分DNA(如線粒體DNA)來(lái)自受體卵母細(xì)胞思考題第6頁(yè),共18頁(yè)。第7頁(yè),共18頁(yè)。
3、第8頁(yè),共18頁(yè)。胚胎移植技術(shù)試管動(dòng)物(嬰兒)培養(yǎng)過(guò)程卵細(xì)胞精子體外受精受精卵胚胎新個(gè)體母體子宮內(nèi)孕育、產(chǎn)出第9頁(yè),共18頁(yè)。體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景 1、加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育2、保護(hù)瀕危物種,增加存活數(shù)量3、克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)醫(yī)用蛋白4、可以作為異種移植的供體,可以用于組織器官的移植第10頁(yè),共18頁(yè)。體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題:許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷,如體型過(guò)大,異常肥胖,發(fā)育困難,臟器缺陷,免疫失調(diào)等。第11頁(yè),共18頁(yè)。1、細(xì)胞的衰老與動(dòng)物機(jī)體的衰老有著密切的關(guān)系,細(xì)胞的增殖能力與供體的年齡有關(guān),幼齡動(dòng)物細(xì)胞增殖能力強(qiáng),有絲分裂旺盛,老齡動(dòng)物則相
4、反。所以,一般來(lái)說(shuō)幼年動(dòng)物的組織細(xì)胞比老年動(dòng)物的組織細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣,組織細(xì)胞的分化程度越低,則增殖能力越強(qiáng),所以更容易培養(yǎng)。第12頁(yè),共18頁(yè)。2、脫分化又稱去分化,是指分化細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能變?yōu)榫哂形捶只?xì)胞特性的過(guò)程。植物的任何一部分,甚至單個(gè)細(xì)胞都具有長(zhǎng)成完整植株的能力。但要發(fā)育成完整植株,必須先脫分化,脫分化的細(xì)胞具有發(fā)育成任何組織的能力,然后進(jìn)行再分化,形成完整植株。植物細(xì)胞培養(yǎng)主要用于農(nóng)林生產(chǎn)中的作物、苗木育種,快速繁育種苗、培育無(wú)病毒植株等,這就要求植物的組織或細(xì)胞先進(jìn)行脫分化。第13頁(yè),共18頁(yè)。動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)有各種用途,一般而言,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程。因高
5、度分化的動(dòng)物細(xì)胞發(fā)育潛能變窄,失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力,所以,動(dòng)物細(xì)胞也就沒(méi)有類似植物組織或細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的脫分化過(guò)程了。要想使培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞定向分化,通常采用定向誘導(dǎo)動(dòng)物干細(xì)胞,使其分化成所需要的組織或器官。第14頁(yè),共18頁(yè)。3(1)可以用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)。盧辛達(dá)的產(chǎn)奶量很高,說(shuō)明它有高產(chǎn)奶的遺傳基礎(chǔ),利用盧辛達(dá)的體細(xì)胞克隆的奶牛其遺傳物質(zhì)基本上全部來(lái)自該奶牛,其克隆牛具有高產(chǎn)的遺傳基礎(chǔ),如果精心培育和飼養(yǎng),有可能在世界范圍內(nèi)推廣,克隆牛再與高產(chǎn)的公牛自然繁殖,可得到很多高產(chǎn)的后代,從而加快奶牛改良進(jìn)程。第15頁(yè),共18頁(yè)。但同時(shí)需注意,該克隆牛不能無(wú)限制地推廣,其數(shù)量不宜過(guò)多,尤其是在小范圍內(nèi)不能無(wú)限的繁殖,以避免奶牛群出現(xiàn)近親繁殖而引起種質(zhì)衰退。第16頁(yè),共18頁(yè)。3(2)首先從盧辛達(dá)耳朵(也可用別的組織、器官,耳朵在活體上容易?。┥霞羧∫恍K組織,在體外培養(yǎng)獲得該組織(如軟骨組織)的細(xì)胞。從屠宰場(chǎng)取廢棄的牛卵巢,抽取卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟。用顯微針去除卵母細(xì)胞的核,再將耳細(xì)胞注入卵母細(xì)胞,用電刺激方法使卵母細(xì)胞與體細(xì)胞融合,這時(shí)供體核就進(jìn)入了受體卵母細(xì)胞,再用電刺激或化學(xué)物質(zhì)激活注入了體細(xì)胞核的卵母細(xì)胞,使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育過(guò)程。核移植胚胎在體外短時(shí)間培養(yǎng)后,挑選正常卵裂的胚胎植入經(jīng)同期發(fā)情處理的受體母牛體內(nèi)。第17頁(yè),共18頁(yè)。4在研究方面,克隆動(dòng)物基
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