探究酵母菌種群數(shù)量變化實(shí)驗(yàn)

1、關(guān)于探究酵母菌種群數(shù)量的變化實(shí)驗(yàn)第一張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月探究：培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化目的要求1、學(xué)習(xí)利用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)的方法2、實(shí)驗(yàn)探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化3、注意樣方法的應(yīng)用4、體會(huì)影響種群數(shù)量變化的因素第二張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1、酵母菌的繁殖方式主要是:2、酵母菌的呼吸方式是:兼性厭氧(可進(jìn)行有氧呼吸和無(wú)氧呼吸)回顧思考:出芽生殖3、酵母菌的培養(yǎng)條件要注意那些問(wèn)題? 比如要用適宜的溫度培養(yǎng),調(diào)節(jié)好PH值,溶氧量的控制等。 釀酒和做面包都需要酵母菌。這些酵母菌可以用液體培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）來(lái)培養(yǎng)。培養(yǎng)液中酵母菌種群的增長(zhǎng)情況，與

2、發(fā)酵食品的制作有密切關(guān)系。第三張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量開(kāi)始一段時(shí)間是“J”型增長(zhǎng)，由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗，有害代謝產(chǎn)物的積累，PH值的改變，種群數(shù)量呈“S”型增長(zhǎng)。探究：培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化問(wèn)題：培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的？溫度會(huì)影響酵母菌的生長(zhǎng)嗎？營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)影響酵母菌的生長(zhǎng)嗎？ 作出假設(shè) 根據(jù)前面所學(xué)的知識(shí)，針對(duì)這一問(wèn)題作出假設(shè)：討論探究思路 探究所需要的菌種和無(wú)菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液、試管、血球計(jì)數(shù)板（2mm2mm方格）、滴管、顯微鏡等，都由老師提供。 在制訂計(jì)劃前，你需要思考以下問(wèn)題，并與同學(xué)討論。第四張，PPT共二十一頁(yè)，

3、創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)將9支試管分成ABC三組，每組3支。A組為實(shí)驗(yàn)組，裝培養(yǎng)液10 mL，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度28。B組裝培養(yǎng)液10 mL，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度5，與A組形成溫度條件對(duì)照。C組不裝培養(yǎng)液，只裝無(wú)菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度28，與A組形成營(yíng)養(yǎng)條件對(duì)照。 第五張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)操作：(1)、配制無(wú)菌馬鈴薯培養(yǎng)液和酵母菌母液；(2)、預(yù)先設(shè)計(jì)分裝。先每次用10mL刻度吸管吸取10mL培養(yǎng)液到A組和B組試管，用另一支10mL刻度吸管吸取10mL無(wú)菌水到C組試管。待分裝完畢，每支試管加塞后把試管扎成捆后，然后用記號(hào)

4、筆注明培養(yǎng)基的名稱、組別、日期。(3)、用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌；(4)、接種菌種：用滅菌干凈的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液，往每支試管中加入。（注意滴加量不要太多，避免初始菌數(shù)過(guò)多。）(5)、培養(yǎng)：將 A、C試管置于 28的恒溫箱中培養(yǎng)。將 B試管置于5的恒溫箱中培養(yǎng)。（5的恒溫箱可由某些型號(hào)冰箱保溫室設(shè)定5時(shí)代替。）(6)、計(jì)數(shù)和記錄：每天取樣時(shí)間大體一致，每次每組按序號(hào)取一支試管。計(jì)數(shù)過(guò)程中一定要遵守?zé)o菌操作規(guī)范，取樣的吸管要干凈且分開(kāi)使用，每次取樣前要試管振蕩搖勻。顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)后，立即將數(shù)據(jù)填到記錄表格中。第六張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 分析結(jié)果，得出

5、結(jié)論 將所得數(shù)值用曲線圖表示出來(lái)，分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否支持你所做的假設(shè)。 酵母菌的種群數(shù)量在營(yíng)養(yǎng)條件有限的情況下是呈 “S”型增長(zhǎng)，但之后會(huì)下降。溫度、營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)影響酵母菌種群數(shù)量的變化。探究的結(jié)論：第七張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、怎樣進(jìn)行酵母菌的計(jì)數(shù)？ 提示：對(duì)一支試管中的培養(yǎng)液(可定為10ml)中的酵母菌逐個(gè)計(jì)數(shù)是非常困難的，可以采用抽樣檢測(cè)的方法：先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，稍待片刻，待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù) 量，再以此為根據(jù)，估算試管中的酵母

6、菌總數(shù)。第八張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 介紹:血球計(jì)數(shù)板的構(gòu)造1、血球計(jì)數(shù)板：是顯微鏡上的外掛物件，可用來(lái)測(cè)量細(xì)胞，細(xì)菌等一些微小物體的長(zhǎng)度，還有就是測(cè)量數(shù)量，如單位體積細(xì)胞的數(shù)量。血球計(jì)數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)，中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面,刻有一個(gè)方格網(wǎng)。第九張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月化放大后的方格網(wǎng)計(jì)數(shù)室 I H G F E D C B A251616252、方格網(wǎng)的構(gòu)成：方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格，其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室，計(jì)數(shù)室通常有兩種規(guī)格：一種是大方格內(nèi)分為16中格

7、，每一中格又分為25小格；另一種是大方格內(nèi)分為25中格，每一中格又分為16小格。但是不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造，它們都有一個(gè)共同的特點(diǎn)，即每一大方格都是由1625=2516=400個(gè)小方格組成。第十張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、使用方法: 將血球計(jì)數(shù)板用擦鏡紙擦凈，在中央的計(jì)數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片，將稀釋后的酵母菌懸液，用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣，使菌液緩緩滲入，多余的菌液用吸水紙吸取，稍待片刻，使酵母菌全部沉降到血球計(jì)數(shù)室內(nèi)，加蓋蓋玻片。第十一張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5、單位換算: 以1mm1mm為例，大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm，深度為0.1mm，其體積為0.

8、1mm3。換算為1mL：1000/0.1= 104即1mL是104 個(gè)0.1mm3 。 4、計(jì)數(shù)室的規(guī)格：計(jì)數(shù)室長(zhǎng)寬有：1mm1mm, 2mm2mm,3mm3mm等深度均為0.1mm。第十二張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 如果使用規(guī)格為16格25格的計(jì)數(shù)室，要按對(duì)角方位，取左上、右上、左下、右下4個(gè)中格(即100個(gè)小格)的酵母菌數(shù)。 如果使用規(guī)格為25格16格的計(jì)數(shù)室，除了取其4個(gè)對(duì)角方位外，還需再數(shù)中央的一個(gè)中格(即80個(gè)小方格)的酵母菌數(shù)（五點(diǎn)取樣法）。 出芽的酵母菌，芽體達(dá)到母細(xì)胞大小一半時(shí)，即可作為兩個(gè)菌體計(jì)算。 6、如何計(jì)數(shù)呢？第十三張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年

9、6月規(guī)格為25格16格的計(jì)數(shù)室，五點(diǎn)取樣法第十四張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月7、蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm，請(qǐng)推算出將一個(gè)小方格范圍內(nèi)的酵母菌數(shù)，換算成10ml培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)的公式。 每1ml菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)計(jì)算公式 （以1mm1mm為例）： （1）16格25格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式 酵母細(xì)胞數(shù)/ml=(100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/100)400 104 稀釋倍數(shù) 即：一小方格內(nèi)酵母菌個(gè)數(shù) 4 106稀釋倍數(shù) （2）25格x16格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式 酵母細(xì)胞數(shù)/ml=(80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/80)400 104 稀釋倍數(shù)即：一小方格內(nèi)酵母菌個(gè)數(shù) 4 106稀釋倍數(shù)

10、第十五張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 課本中大方格的長(zhǎng)和寬各為2mm，深度為0.1mm，其體積為0.4mm3。換算為1mL：1000/0.4 = 2.5103 ，即1mL是 2.5103個(gè) 0.4mm3。 則：每1ml菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)計(jì)算公式（2mm 2mm ） ：（1）16格25格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式 酵母細(xì)胞數(shù)/ml=(100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/100)400 2.5103稀釋倍數(shù)即：一小方格內(nèi)酵母菌個(gè)數(shù)106稀釋倍數(shù)（2）25格x16格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式: 酵母細(xì)胞數(shù)/ml=(80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/80)400 2.5103 稀釋倍數(shù) 即：一小方格內(nèi)酵母菌個(gè)數(shù)106

11、稀釋倍數(shù)第十六張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月使酵母菌混合均勻。不需要，因不同時(shí)間取樣已形成對(duì)照。 需要。盡量減少誤差。對(duì)每個(gè)樣品計(jì)數(shù)三次,取其平均值。二、從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，建議你將試管輕輕振蕩幾次。這是為什么？ 三、本探究需要設(shè)置對(duì)照嗎？如果需要,請(qǐng)討論對(duì)照組應(yīng)怎樣設(shè)計(jì)和操作，如果不需要，請(qǐng)說(shuō)明理由。 四、需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎？第十七張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月五、怎樣記錄結(jié)果？記錄表怎樣設(shè)計(jì)？ 第十八張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月. 只計(jì)數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母細(xì)胞數(shù) 稀釋培養(yǎng)液。稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計(jì)數(shù)，以每小方格內(nèi)含有4-5個(gè)酵母細(xì)胞為宜，一般稀釋10倍即可。八、血球計(jì)數(shù)板的清潔 血球計(jì)數(shù)板使用后，用自來(lái)水沖洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干，或用95%的乙醇、無(wú)水乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑脫水使其干燥。通過(guò)鏡檢觀察每小格內(nèi)是否殘留菌體或其他沉淀物，若不干凈，則必須重復(fù)清洗直到干凈為止。六、如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)采取怎樣的措施？ 七、對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)？ 第十九張，PPT共二十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月表達(dá)和交流 1、向全班匯報(bào)本小組7天的數(shù)