細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用課件

1、細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和工程學(xué)的原理，研究、開(kāi)發(fā)修復(fù)和改善損傷組織結(jié)構(gòu)和功能的生物替代物 。組織工程（Tissue Engineering）：J. VacantiR. Langer組織工程基本要素 種子細(xì)胞生物支架材料微環(huán)境（生長(zhǎng)因子等） (Protein data bank)組織工程的基本原理種子細(xì)胞體外擴(kuò)增，與生物材料按一定的比例混合，將細(xì)胞-材料復(fù)合物植入機(jī)體的組織或器官的病損部位，以達(dá)到修復(fù)創(chuàng)傷和重建功能的目的常用的支架材料是合成的可生物降解的高分子聚合物如：聚乳酸（PLA）、聚乙醇酸（PGA）、聚乳酸和聚乙醇酸復(fù)合物（PLGA）等口腔組織特有的干細(xì)胞牙髓干細(xì)胞牙

2、周膜干細(xì)胞脫落乳牙牙髓干細(xì)胞根尖牙乳頭干細(xì)胞唾液腺干細(xì)胞 干細(xì)胞（stem cell）定義：干細(xì)胞是來(lái)自胚胎、胎兒或成人的具有持久或終身自我更新能力的細(xì)胞，它能產(chǎn)生特異的細(xì)胞類(lèi)型，形成人體組織和器官。（http:/wiki/Stem_cell)牙髓干細(xì)胞比骨髓基質(zhì)干細(xì)胞具有更強(qiáng)的增殖率、克隆形成率和倍增率可被誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞、神經(jīng)樣細(xì)胞Stroo-1和CD146等干細(xì)胞表面標(biāo)記陽(yáng)性體內(nèi)誘導(dǎo)可形成類(lèi)似牙本質(zhì)-牙髓復(fù)合體樣的結(jié)構(gòu)脫落乳牙牙髓干細(xì)胞比骨髓基質(zhì)干細(xì)胞具有更強(qiáng)的增殖率、克隆形成率和倍增率Stroo-1和CD146等干細(xì)胞表面標(biāo)記陽(yáng)性可誘導(dǎo)分化為神經(jīng)細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞體外可形成

3、鈣化結(jié)節(jié)體內(nèi)可在免疫缺陷小鼠皮下成骨和產(chǎn)生牙本質(zhì)樣物質(zhì)牙周膜干細(xì)胞Stro-1和MUC18及腱特異性標(biāo)記SCX表達(dá)陽(yáng)性可被誘導(dǎo)分化為牙髓母細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、牙骨質(zhì)細(xì)胞和成骨細(xì)胞體外可形成礦化結(jié)節(jié)，表達(dá)堿性磷酸酶或骨唾液蛋白體內(nèi)試驗(yàn)牙周膜干細(xì)胞能產(chǎn)生沿牙周膜結(jié)締組織方向走行的牙骨質(zhì)樣結(jié)構(gòu)再生醫(yī)學(xué)技術(shù)在口腔醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用在頜面重建中的作用在引導(dǎo)口腔組織再生中的作用組織工程化黏膜在口腔醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用 人造唾液腺牙再生：組織工程方法-種子細(xì)胞+支架材料 發(fā)育生物學(xué)-模擬牙齒發(fā)育的過(guò)程口腔生物學(xué)其他研究方法基因芯片、蛋白芯片 和組織芯片蛋白質(zhì)組學(xué)生物信息學(xué)模式生物學(xué)系統(tǒng)生物學(xué)基因芯片技術(shù)基因芯片技

4、術(shù)，又稱(chēng)DNA微陣列技術(shù)，是將cDNA文庫(kù)中已知和未知的全長(zhǎng)序列或寡核苷酸序列固定于玻片上，同時(shí)檢測(cè)比較生物樣品中多個(gè)已知或未知序列的表達(dá)狀況基本原理與經(jīng)典的核酸分子雜交方法一致高效地大規(guī)模獲取相關(guān)生物信息基因芯片技術(shù)的主要技術(shù)流程芯片的設(shè)計(jì)與制備靶基因的標(biāo)記芯片雜交與雜交信號(hào)檢測(cè)AAATCGCAAGCTTTAGGAAATTC基因芯片技術(shù)存在的問(wèn)題設(shè)備昂貴探針有錯(cuò)誤，有雜交背景，降低特異性蛋白芯片技術(shù)蛋白芯片是以蛋白質(zhì)代替DNA作為檢測(cè)對(duì)象，直接在蛋白水平上檢測(cè)表達(dá)模式蛋白芯片技術(shù)主要技術(shù)流程Chip membraneHybridizationLabeled protein sampleAdd

5、 StreptavidinStreptavidinFluorescent labelingStreptavidin AbFluorescent detect存在的問(wèn)題固定于載體上的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)單一，無(wú)法反應(yīng)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的多樣性固定于載體上的蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性造價(jià)比較昂貴影響結(jié)果特異性的因素較多組織芯片技術(shù)組織芯片技術(shù)是基因芯片技術(shù)的發(fā)展和延伸將大量臨床組織標(biāo)本排列在一張載體進(jìn)行分析研究最大限度地利用組織資源所需樣品少，高通量、多樣本的分析工具結(jié)果可靠，便于實(shí)驗(yàn)對(duì)照。(http:/tissue-arrays/口腔Oral_Cavity/OR601)蛋白質(zhì)組（proteome）定義：蛋白質(zhì)組是特定的時(shí)間和

6、特定的空一個(gè)完整的生物體（或細(xì)胞）所表達(dá)的全體蛋白質(zhì)的特征。包括蛋白質(zhì)的表達(dá)水平，翻譯后的修飾，蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用等，在蛋白質(zhì)水平上獲得對(duì)于有關(guān)生物體生理、病理等過(guò)程的全面認(rèn)識(shí)。蛋白質(zhì)鑒定（Western雜交）翻譯后修飾蛋白質(zhì)功能確定未磷酸化蛋白磷酸化蛋白蛋白質(zhì)組學(xué)的研究?jī)?nèi)容Actin蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法組成性蛋白質(zhì)組學(xué)研究（compositional proteomics） 采用高通量的蛋白質(zhì)組研究技術(shù)分析盡可能多乃至接近所有的蛋白質(zhì)比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究（comparative proteomics） 發(fā)現(xiàn)與重要生命過(guò)程或人類(lèi)重大疾病相關(guān)的差異表達(dá)蛋白蛋白質(zhì)組研究中主要應(yīng)用的技術(shù)：雙相電泳（2-DE）質(zhì)譜（MS）技術(shù)數(shù)據(jù)庫(kù)設(shè)置與檢索系統(tǒng)等2D gelimage生物信息學(xué)（Bioinformatics）生物信息學(xué)是對(duì)實(shí)驗(yàn)生物學(xué)資料進(jìn)行的再加工整理，同時(shí)又通過(guò)檢索等手段對(duì)進(jìn)一步的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行理論預(yù)測(cè)與指導(dǎo)的一門(mén)科學(xué)模式生物學(xué)揭示基因功能的最有效方法之一。是定向改變生物的某個(gè)基因從而觀察其引起的表型。小鼠、果蠅、線蟲(chóng)是最常見(jiàn)最有效的實(shí)行大規(guī)?；虿僮鞯哪Ｊ缴镛D(zhuǎn)綠色熒光蛋白基因系統(tǒng)生物學(xué)系統(tǒng)生物學(xué)（systems biology）是在細(xì)胞、組織、器官和生物體整體水平研究結(jié)構(gòu)和功能各異的各種分子及其相互作用，并通過(guò)計(jì)算生物學(xué)來(lái)定量