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文檔簡介
1、三、膠乳凝集試驗【實驗原理】類風濕因子(rheumatoid factor,RF)是一組抗變性IgG的自身抗體,它能與人或動物的變性IgG結(jié)合,而不與正常人IgG發(fā)生凝集反應(yīng)。根據(jù)這一特點,將處理過的人IgG與羧化聚苯乙烯膠乳共價交聯(lián),使其吸附于膠乳顆粒載體上,成為致敏的膠乳顆粒。當待檢血清中有RF時,則致敏的膠乳顆粒上的變性IgG與相對應(yīng)的抗體(RF)發(fā)生反應(yīng),出現(xiàn)凝集現(xiàn)象?!局饕噭┡c器材】1.人IgG免疫膠乳試劑。2.生理鹽水(或pH8.2甘氨酸緩沖鹽水)。3.待檢血清、陽性血清、陰性血清。4.微量加樣器、黑色方格反應(yīng)板等?!静僮鞣椒ā?.在黑色方格反應(yīng)板上三個格分別做好標記,用微量加樣
2、器各加待檢血清、陽性血清、陰性血清1滴(約50l),然后分別加免疫膠乳試劑1滴。2.用牙簽充分混勻后,23min,觀察結(jié)果?!窘Y(jié)果判斷】加入免疫膠乳試劑后,充分混勻,在室內(nèi)的光線下23min出現(xiàn)清晰凝集顆粒,且液體澄清者為陽性,即RF陽性。若需做定量測定,可將血清做倍比稀釋,重復(fù)上述測定,以出現(xiàn)凝集的血清最高稀釋度為RF滴度。【注意事項】1.試劑應(yīng)置4保存嚴禁凍結(jié),用時搖勻。2.所有試驗器皿和反應(yīng)板均應(yīng)洗凈干燥。3.若陰性對照出現(xiàn)凝集,則表示免疫膠乳試劑有質(zhì)量問題,不能使用?!緫?yīng)用與評價】類風濕性關(guān)節(jié)炎(RA)患者體內(nèi)都存在有產(chǎn)生RF的B細胞克隆,在變性IgG(與抗原結(jié)合的IgG)作用下,可大量合成RF。類風濕性關(guān)節(jié)炎(RA)患者RF陽性檢出率為75%,RF陽性支持RA的傾向性診斷,如為青年女性,應(yīng)進一步做RA和風濕熱的鑒別診斷;除RA外,還有多種疾病可檢出高效價RF,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、心內(nèi)膜炎、結(jié)核、梅毒、病毒感染、腎移植等;不超過5%的
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