DB50-T 1245-2022 綠色食品 秀珍菇生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范

1、ICS 65.020.01CCS B 39DB50重慶市地方標(biāo)準(zhǔn)DB 50/T 12452022綠色食品 秀珍菇生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范2022 - 06 - 01 發(fā)布2022 - 09 - 01 實施重慶市市場監(jiān)督管理局發(fā) 布DB50/T 12452022 PAGE * ROMAN III目 次前 言II綠色食品秀珍菇生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范1范圍1規(guī)范性引用文件1術(shù)語和定義1菌種場的設(shè)置與技術(shù)要求3母種制作4原種制作5栽培種制作5液體菌種制作6菌種質(zhì)量要求6抽樣及菌種質(zhì)量檢驗6菌種的標(biāo)簽、標(biāo)志、包裝、運輸及貯存6栽培技術(shù)要求6病蟲害防治8采收與分級8附 錄 A （規(guī)范性） 秀珍菇常用原種和栽培種培養(yǎng)基及其配方1

2、0附 錄 B （規(guī)范性） 秀珍菇生產(chǎn)環(huán)境、接種器具可選用的化學(xué)消毒劑11附 錄 C （規(guī)范性） 秀珍菇常用栽培基質(zhì)及其配方12前 言本文件按照GB/T 1.1-2020標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。 本文件由重慶市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委會提出并歸口。本文件起草單位：重慶市農(nóng)業(yè)科學(xué)院、重慶市永川區(qū)食用菌行業(yè)協(xié)會。本文件主要起草人：韋靜宜、陳紅霞、龍 琦、何 葉、黃建坤、胡 瑋、黃 英、田時炳、范永前、張權(quán)利。DB50/T 12452022 PAGE 12綠色食品 秀珍菇生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范范圍本文件規(guī)定了秀珍

3、菇生產(chǎn)的術(shù)語和定義、菌種的制作、菌種場的設(shè)置與技術(shù)要求、母種制作、母種制作、栽培種制作、液體菌種制作、菌種質(zhì)量要求、抽樣及菌種質(zhì)量檢驗、菌種的標(biāo)簽、標(biāo)志、包裝、 運輸及貯存、栽培技術(shù)要求、病蟲害防治以及采收與分級技術(shù)要求。本文件適用于室內(nèi)秀珍菇鮮品的生產(chǎn)。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件， 僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB 5749-2006 生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB 19172-2003 平菇菌種GB/T 12728-2006 食用菌術(shù)語NY 5099-200

4、2 無公害食品 食用菌栽培基質(zhì)安全技術(shù)要求NY/T 391-2013 綠色食品 產(chǎn)地環(huán)境質(zhì)量NY/T 528-2010 食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程NY/T 1846-2010 食用菌菌種檢驗規(guī)程NY/T 1935-2010 食用菌栽培基質(zhì)質(zhì)量安全要求術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1秀珍菇 Pleurotus pulmonarius屬擔(dān)子菌門（Basidiomycota）、傘菌目（Agaricales）、側(cè)耳科（Pleurotaceae）、側(cè)耳屬（Pleurotus） 鳳尾菇，俗稱秀珍菇。注：其菌蓋呈扁半球至平展，倒卵形或近扇形，光滑，邊緣平滑或稍呈波狀，直徑4 cm10 cm，白色、灰

5、色至灰褐色；菌柄偏生或側(cè)生，內(nèi)實，光滑，短或無，有絨毛，后期近光滑，內(nèi)部實心至松軟，白色；菌褶延生，稍密，不等長，白色；菌肉靠近基部稍厚，白色；孢子印灰白色；孢子近圓柱形，光滑，（8.1 m10.7 m）（3 m5.1 m），無色透明。3.2母種經(jīng)選育得到的具有結(jié)實性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，以玻璃試管為培養(yǎng)容器和使用單位， 也稱一級種、試管種。來源：NY/T 528-2010，3.33.3原種由母種移植、擴大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。常以玻璃菌種瓶或塑料菌種瓶或聚丙烯塑料袋為容器。來源：NY/T 528-2010，3.43.4栽培種由原種移植、擴大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。常以玻璃菌種

6、瓶或塑料袋為容器。栽培種只能用于 栽培，不可再次擴大繁殖菌種。來源：NY/T 528-2010，3.53.5接種菌種移植到培養(yǎng)基物中的操作。來源： GB/T 12728-2006，2.4.413.6無菌操作在無菌條件下的操作過程。來源： GB/T 12728-2006，2.5.143.7液體菌種培養(yǎng)基為液體狀態(tài)的菌種。來源： GB/T 12728-2006，2.5.303.8PDA馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基。3.9培養(yǎng)平板固體培養(yǎng)基在無菌培養(yǎng)皿中冷卻凝固形成的平面培養(yǎng)基稱為培養(yǎng)平板，簡稱平板。3.10添加劑泛指培養(yǎng)料中的各種化學(xué)用品，包括化肥類、無機鹽類、植物生長調(diào)節(jié)劑、殺蟲劑、殺菌劑等。 來源：GB

7、/T 12728-2006，2.6.413.11轉(zhuǎn)潮期子實體在一定時間內(nèi)大量發(fā)生的現(xiàn)象稱為菇潮，菇潮在一個生長周期內(nèi)可以發(fā)生若干次，一個菇潮 至下一菇潮的間隔期,稱為轉(zhuǎn)潮期。菌種場的設(shè)置與技術(shù)要求選址場址應(yīng)距離禽畜場、垃圾場和醫(yī)院等污染源1000 m以上，交通方便。能源供應(yīng)場內(nèi)有穩(wěn)定的水源、電源、供熱設(shè)備。設(shè)計要求各作業(yè)室干凈整潔，布局利于無菌作業(yè)的流程，做到既相連又相隔。菌種場作業(yè)室及主要設(shè)施設(shè)備要求菌種場作業(yè)室及主要設(shè)施設(shè)備要求見表1。表 1 菌種場作業(yè)室及主要設(shè)施設(shè)備序號名稱用途設(shè)施及條件主要儀器設(shè)備1母種實驗室母種的擴繁通自來水，220 V 電源，潔凈等級為十萬級，建筑面積按實際需要確

8、定超凈工作臺、培養(yǎng)箱、普通光學(xué)顯微鏡、高壓滅菌器、玻璃器皿、電子天平、電爐、微波爐、搖床、小型發(fā)酵罐2備料室培養(yǎng)料配制、分裝通自來水，220 V 及 380 V 電源，建筑面積按實際需要確定拌料機、裝袋機3滅菌室培養(yǎng)料滅菌通自來水，220 V 及 380 V 電源，建筑面積按實際需要確定高壓滅菌器或常壓滅菌器4冷卻室滅菌后培養(yǎng)料的220 V 及 380 V 電源，建筑面積按空調(diào)系統(tǒng)、臭氧消毒機、新風(fēng)系統(tǒng)冷卻實際需要確定，潔凈等級為千級5緩沖間進入無菌操作室前的準(zhǔn)備工作220 V 電源，建筑面積按實際需要確定，潔凈等級為千級洗手臺、空調(diào)系統(tǒng)、臭氧消毒機、新風(fēng)系統(tǒng)、作業(yè)服裝專用柜6接種室接種作業(yè)2

9、20 V 及 380 V 電源，建筑面積按實際需要確定，潔凈等級為百級層流罩、接種操作臺面、空調(diào)系統(tǒng)、新風(fēng)系統(tǒng)、臭氧消毒機7菌種培養(yǎng)室培養(yǎng)菌種220 V 電源，建筑面積按實際需要確定，潔凈等級為十萬級培養(yǎng)架、空調(diào)系統(tǒng)、臭氧消毒機、新風(fēng)系統(tǒng)8菌種保存庫貯存菌種220 V 及 380 V 電源，建筑面積按實際需要確定，溫度要求：15制冷機組、保溫庫母種制作試管規(guī)格及要求宜采用18 mm180 mm的玻璃試管。試管培養(yǎng)基制作新鮮無病害馬鈴薯洗凈去皮，切成小薄片，取200 g，加自來水1000 mL，置于容器內(nèi)煮沸20 min 后過濾，取濾汁加葡萄糖20 g、蛋白胨1 g2 g、KH2PO4 0.1

10、g0.2 g、瓊脂20 g，煮溶后用水補足至 1000 mL。將培養(yǎng)基分裝至試管的2/5處，擦拭干凈沾在試管口上培養(yǎng)基，塞上試管塞，用牛皮紙或報紙包裝后滅菌，不可過夜放置。也可選用商品馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基（PDA培養(yǎng)基）。將包好的試管 （試管塞朝上）垂直放入高壓滅菌器，在0.105 MPa壓力下，121 滅菌20 min。滅菌后的試管后趁熱傾斜擺放形成斜面，斜面頂端應(yīng)距離試管塞40 mm50 mm，培養(yǎng)基未凝固前不宜再移動。接種室消毒接種前1 d應(yīng)用臭氧消毒機對接種室消毒20 min30 min，接種前60 min再消毒20 min30 min。臭氧消毒結(jié)束30 min后操作人員方可進入接種室，

11、防止臭氧中毒。接種準(zhǔn)備工作操作人員進入緩沖間，應(yīng)更換已消毒的潔凈衣帽，戴上口罩，用消毒液清潔手部。操作方法在超凈工作臺內(nèi)，按照無菌操作要求，用灼燒冷卻后的接種工具從母種管切取3 mm見方菌種塊，迅速轉(zhuǎn)接入待轉(zhuǎn)接試管的培養(yǎng)基上，用酒精燈火焰灼燒試管口和試管塞后塞緊管口。1支母種管的轉(zhuǎn)接量宜控制在30支50支。接種后應(yīng)及時貼上菌種標(biāo)簽，注明菌種名稱（代號）、接種人、接種日期。母種培養(yǎng)及保存轉(zhuǎn)接后的試管，25 1 恒溫培養(yǎng)至菌絲滿管。滿管后應(yīng)及時置于4 冰箱中，存放時間不超過180 d。原種制作培養(yǎng)料配制配方見附錄A。配制方法將配方表中的原材料混合拌勻，補足水分，使培養(yǎng)料含水量達到60%70%。裝瓶

12、（袋）消毒液或潔凈劑洗凈容器后用清水沖刷干凈。配制好的培養(yǎng)料及時裝瓶（袋）至容器肩部，750 mL 菌種瓶培養(yǎng)料填充量不超過400 g（濕重）；18 cm直徑的菌袋，裝袋高度不應(yīng)超過18 cm，填充量不超過1200 g。裝瓶（袋）完成后用干凈毛巾將容器璧擦拭干凈，容器口蓋上透氣蓋或用棉花塞緊。滅菌宜高壓蒸汽滅菌，0.105 Mpa 121 下滅菌180 min。常壓滅菌100 1 滅菌12 h。接種室消毒同6.5。原種接種操作方法在超凈工作臺或?qū)恿髡謨?nèi)，按照無菌操作要求，用接種工具將母種切取成8 mm10 mm的菌種塊后迅速轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移到原種培養(yǎng)料表面上，或放入培養(yǎng)料接種孔內(nèi)，蓋上封口物，轉(zhuǎn)接結(jié)束。

13、1支母種管轉(zhuǎn)接不超過20瓶（袋）原種。接種后應(yīng)及時貼上菌種標(biāo)簽，注明菌種名稱（代號）、接種人、接種日期。培養(yǎng)及保存原種應(yīng)在24 1 ，空氣相對濕度55%65%，CO2濃度2000 ppm50 ppm下避光培養(yǎng)。滿瓶后的原種應(yīng)盡快使用，在不超過25 、空氣相對濕度50%70%、避光室內(nèi)存放不超過14 d。4 下貯存不超過45 d。栽培種制作宜在超凈工作臺或?qū)恿髡謨?nèi)，按照無菌操作要求，用接種工具將瓶（袋）口的老化菌種塊去掉，取出2 cm見方的菌種塊迅速轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移到栽培種培養(yǎng)料上，蓋上封口物，轉(zhuǎn)接結(jié)束。依次操作剩余的菌種袋。1瓶（袋）原種的轉(zhuǎn)接量不應(yīng)超過50瓶（袋）。接種后應(yīng)及時貼上標(biāo)簽，注明菌種名稱（

14、代號）、接種人、接種日期。栽培種應(yīng)盡快使用，在溫度不超過25 、相對濕度50%70%、避光的室內(nèi)存放不超過15 d。在1 6 下貯存時，貯存期不超過45 d。液體菌種制作菌種活化取5 mm見方秀珍菇母種接種于90 mm PDA培養(yǎng)平板中央，于 25 恒溫培養(yǎng) 7d。一級液體菌種培養(yǎng)250 mL三角瓶內(nèi)分裝100 mL液體培養(yǎng)基，滅菌冷卻。取1.5 cm見方母種分割成為1 mm見方菌種塊， 通過無菌操作接種于前述三角瓶內(nèi)，于25、150 r/min200 r/min下振蕩培養(yǎng)7 d。培養(yǎng)基配方：馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨1 g2 g、KH2PO4 0.1 g0.2 g。8.2 二級

15、液體菌種培養(yǎng)按10%接種量將一級液體菌種接種于發(fā)酵罐內(nèi)，通氣量4.0 L/min，轉(zhuǎn)速 200 r/min350 r/min， 25下培養(yǎng)7 d。液體菌種宜現(xiàn)做現(xiàn)用。培養(yǎng)基配方同8.2。菌種質(zhì)量要求應(yīng)符合 GB 19172-2003 的規(guī)定。抽樣及菌種質(zhì)量檢驗各級菌種的檢驗規(guī)程按NY/T 1846-2010 的規(guī)定進行。各級菌種中雜菌及害蟲的檢驗按NY/T 1846-2010的規(guī)定進行。菌種的標(biāo)簽、標(biāo)志、包裝、運輸及貯存按GB 19172-2003 的規(guī)定進行。栽培技術(shù)要求菌種選擇宜選用種性明確，經(jīng)過兩個以上生產(chǎn)周期試驗，適合于當(dāng)?shù)貧夂驐l件的秀珍菇品種。產(chǎn)地環(huán)境秀珍菇產(chǎn)地環(huán)境場地環(huán)境應(yīng)符合NY

16、/T 391-2013的規(guī)定。生產(chǎn)用水應(yīng)符合GB 5749-2006的規(guī)定。栽培季節(jié)具有周年生產(chǎn)條件的，其栽培季節(jié)不限。不具備周年生產(chǎn)條件的，菌包制作季節(jié)宜在每年1月4 月，出菇季節(jié)為5月10月。栽培基質(zhì)栽培基質(zhì)配方參照附錄C執(zhí)行，基質(zhì)原料要求應(yīng)符合NY 5099-2002 和NY/T 1935-2010 的規(guī)定。添加劑的種類、用量和使用方法應(yīng)符合NY 5099-2002 和NY/T 1935-2010 的規(guī)定。制袋拌料先將栽培基質(zhì)各原料（干）混合均勻，再按料水比11.11：1.3充分拌料，使培養(yǎng)料的含水量為60%70%，pH值調(diào)節(jié)為7.08.0。裝袋宜選用36 cm18 cm0.005 cm

17、聚丙烯或聚乙烯塑料袋，使用裝袋機或手工填充栽培基質(zhì)，高度20 cm， 重量1500 g100 g（濕重）。裝袋完成后將菌袋外壁擦拭干凈后，用套環(huán)、無紡布過濾片和透氣蓋封口。栽培基質(zhì)應(yīng)在4 h內(nèi)完成裝袋，避免時間過長導(dǎo)致培養(yǎng)料酸化。滅菌和接種滅菌裝袋完成后應(yīng)立即滅菌。宜按以下程序進行高溫蒸汽滅菌：排氣2次后，105 30 min，115 30 min，121 120 min，燜置30 min（意思不清楚？多少溫度條件下）。若滅菌器滿負(fù)荷時，121 保壓延長至180 min。若采用常壓滅菌，溫度應(yīng)在4 h內(nèi)達到100 ，并100 保溫16 h18 h。接種接種前應(yīng)對接種室、接種箱采用藥物、紫外線或

18、臭氧進行消毒處理。藥物選用及消毒方法見附錄B。 栽培料溫度應(yīng)降到28 以下方可接種。操作按NY/T 528-2010規(guī)定進行。每瓶（袋）栽培種的轉(zhuǎn)接量不宜超過50袋。液體菌種接種量為10 mL/袋。菌絲培養(yǎng)培養(yǎng)環(huán)境培養(yǎng)室應(yīng)保持清潔、干燥、遮光、通風(fēng)，保溫性能好。培養(yǎng)方法宜采用層架式發(fā)菌。培養(yǎng)條件同7.7。接種后每5 d7 d檢查一次，污染的菌包應(yīng)及時無害化處理。菌絲滿袋后應(yīng)繼續(xù)在同等條件下后熟10 d。出菇菇房要求菇房應(yīng)清潔干凈，通風(fēng)良好，有散射光，可調(diào)節(jié)溫度和空氣濕度，1 m范圍內(nèi)不得有雜草。菇房兩側(cè)安裝出菇網(wǎng)格架，中間宜設(shè)置1 m寬主通道；在主通道垂直方向設(shè)置菇架，每排菇架前后間距宜不少于

19、1 m。出菇條件出菇房溫度宜控制在16 30 ，最適溫度22 ；CO2濃度不宜超過2000 ppm；空氣相對濕度80% 90%。宜用LED燈帶（白光）每8 h 補光1次、每次時長30 min。催蕾與出菇管理催蕾菌包后熟后，移至菇房環(huán)割開袋，采用低溫和水分刺激進行催蕾。先將菇房溫度調(diào)節(jié)至141 處理24 h后將菇房溫度調(diào)節(jié)至25 1 ，用霧狀水噴灑袋口，直至有水滴滴下。保持菇房濕度75%85%，CO2濃度1000 ppm以下，用LED（白光）每8 h補光1次、每次時長30 min。出菇管理袋口出現(xiàn)牙簽大小的菇蕾時，將CO2濃度調(diào)至2000 ppm3000 ppm。菇柄長度達到3 cm后，將CO2

20、濃度調(diào)至1000 ppm50 ppm。菌蓋達到1.5 cm時，應(yīng)霧狀補水至水滴滴下。菌蓋達到4 cm時即可采收。期間補光，方法同12.8.2。轉(zhuǎn)潮期管理待前一潮菇出菇結(jié)束后，清除菇根，霧狀補水至水滴滴下。轉(zhuǎn)潮期菌絲培養(yǎng)條件同7.7。菌包經(jīng)過10 d25 d的菌絲再培養(yǎng)后方可以進行下一菇潮的催蕾出菇，催蕾條件同12.8.3.1，出菇條件同12.8.3.2。病蟲害防治主要病蟲害常見病蟲害主要有黃枯病、木霉、毛霉、鏈孢霉和菇蠅、菇蚊。對病蟲害的防治在生產(chǎn)管理過程中，做好場地清潔消毒處理的同時，對木霉、毛霉和鏈孢霉感染菌包應(yīng)及時無害化 處理；加大菇房的通風(fēng)量和菇房內(nèi)部的空氣循環(huán)，減輕黃枯病危害；懸掛黃色粘蟲板或藍(lán)色粘蟲板誘殺 菇蠅和菇蚊。采收與分級當(dāng)菌蓋達到4 cm即可采收，按表2所列標(biāo)準(zhǔn)進行分級。表 2 秀珍菇鮮品感官要求項目指標(biāo)AA 級A 級B 級色澤菌蓋灰白色至灰褐色氣味具有秀珍菇特有的菇香，無異味形態(tài)菌蓋呈匙形至扇形，菌柄直，菌蓋厚實，邊緣稍有內(nèi)卷，不開裂菌蓋近匙形或呈扇形，菌柄稍直，菌蓋較厚實，邊緣平展，不開裂菌蓋呈扇形至半球形，菌柄稍直，菌蓋薄，邊緣稍有上翻， 有少量開裂菌蓋直徑，cm4.06.07.08.04.0，8.0菌柄長度，cm4.06.03.05.03.0碎菇，%無無5.0附著物，%無無0.5蟲傷菇，%無無2.0雜質(zhì)無附 錄 A（規(guī)范性）秀珍菇常用原種和栽培種