莪術(shù)醇的提取分離鑒定實(shí)驗(yàn)開題報(bào)告

1、目錄選題的根據(jù) TOC o 1-5 h z 文獻(xiàn)綜述5研究內(nèi)容及試驗(yàn)方法6實(shí)驗(yàn)裝置及藥品7實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)7實(shí)驗(yàn)進(jìn)度安排7主要文獻(xiàn)資料8天然藥物化學(xué)開題報(bào)告莪術(shù)醇的額提取分離及鑒定選題的根據(jù)（一）莪術(shù)的簡介姜科植物，主要用藥部位為根莖。功能：行氣破血；消積止痛。主治：血?dú)庑耐矗伙嬍撤e滯；脘腹脹痛；血滯經(jīng)閉；痛經(jīng)；痼瘕瘤痞塊；跌打 損傷。采收儲(chǔ)藏：12月中、下旬，地上部分枯萎時(shí)，挖掘根部，除去根莖上的泥土， 洗凈，置鍋里蒸或煮約15min，曬干或烘干，撞去須根即成。將根莖放入清水中 浸泡，撈起，瀝十水，潤透，切薄片，曬干或烘干。資源分布：分布于廣東、廣西、四川、云南等地。浙江、福建、湖南等地有少 量栽培

2、。主要成分為莪術(shù)揮發(fā)油，有抗癌的作用，其主要作用是莪術(shù)醇和莪術(shù)二酮。（二）莪術(shù)醇的化學(xué)式及理化性質(zhì)化學(xué)式理化性質(zhì) 莪術(shù)醇是一種在加熱條件下為棒狀，并且伴有升華現(xiàn)象的白色針狀結(jié)晶樣的化合 物。熔點(diǎn)為142147，沒有紫外吸收，因此在紫外燈下沒有熒光發(fā)生，易溶于乙 醚，氯仿，溶于乙醇，幾乎不溶于水，分類屬于倍半萜類的物質(zhì)。（三）莪術(shù)醇的藥理作用及臨床應(yīng)用雖然已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的莪術(shù)醇的臨床用途非常廣泛，但最集中的，還是抗癌，抗菌，抗 病毒的作用。在抗癌方面，最為明顯的就是對宮頸癌的治療，主要采用局部瘤體注射的方法。 因?yàn)檩g(shù)醇的抗癌機(jī)制為一直癌變細(xì)胞細(xì)胞核的生長以及增加機(jī)體特異性免疫 的能力，幾乎沒有毒副作

3、用，所以一直以來都被廣泛使用。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，表明莪術(shù)醇能抑制試管中的金黃色葡萄球菌，溶血性球菌，大腸 桿菌，傷寒桿菌，霍亂弧菌等的生長，對呼吸道荷包體病毒有直接的抑制作用。 除此之外，也能對風(fēng)濕病毒，水痘病毒等一些常見的致病病毒起到直接和間接地 抑制殺害作用。因此常常被用作抗菌抗病毒的藥物。在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的這額病毒之外， 還有人們尚且不清楚的，因此其毒力性等需要經(jīng)過進(jìn)一步的研究。（四）莪術(shù)醇的研究歷史莪術(shù)醇是傳統(tǒng)中藥姜科植物莪術(shù)揮發(fā)油成分中的主要物質(zhì)之一，同時(shí)也是中藥莪 術(shù)的有效成分，在醫(yī)藥領(lǐng)域有非常廣泛的應(yīng)用。莪術(shù)的入藥史在中國可以追溯到 唐朝，當(dāng)時(shí)最為出名的醫(yī)藥著作藥性論及李時(shí)珍的本草綱目都有

4、記載： 莪術(shù)有行氣破血、消積止痛的功效，被稱為血中之氣藥，常用于心腹脹痛、氣血 凝滯、血淤閉經(jīng)、跌打損傷等癥。近年來研究更表明，莪術(shù)具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反 應(yīng)，直接抑制和破壞癌細(xì)胞，拮抗致癌反應(yīng)的作用，并已應(yīng)用臨床抗腫瘤治療中。 此外，還具有抗早孕、抗炎、抗菌和降酶等活性。與許多化學(xué)抗腫瘤藥物相比， 莪術(shù)醇無致突變性，在臨床應(yīng)用中是安全可靠的抗腫瘤藥物。在實(shí)驗(yàn)中，通常采 取水蒸氣蒸餾法、超臨界CO2流體萃取、索氏提取3種方法提取三個(gè)不同地方 莪術(shù)揮發(fā)油，并利用GC-MS聯(lián)用儀分析比較其化學(xué)成分差異，分析各種成分的 含量，從而為最佳治療提供理論依據(jù)。并對莪術(shù)中主要有效成分揮發(fā)油的提取工 藝進(jìn)行優(yōu)選，

5、作為莪術(shù)揮發(fā)油制備的科學(xué)依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)旨在人為操作失誤很小的 因素下，驗(yàn)證現(xiàn)有提取分離辦法下實(shí)驗(yàn)室提取最大產(chǎn)率。二文獻(xiàn)綜述根據(jù)對國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)的查閱，從莪術(shù)醇的研究進(jìn)展，不同提取方法對莪術(shù)油提 取的影響，莪術(shù)醇的分離，莪術(shù)醇鑒定，莪術(shù)醇對照品的主要相關(guān)物質(zhì)及莪術(shù) 醇含量測定幾個(gè)方面進(jìn)行綜述。（一）莪術(shù)醇的研究進(jìn)展從上個(gè)世紀(jì)七十年代，莪術(shù)醇被正式運(yùn)用于宮頸癌的治療，在取得一定的療 效后，相繼開發(fā)了其抗癌抗腫瘤抗病毒的一系列用途。在人們生活水平日益上升 的今天，人們對健康的關(guān)注越來越多，這些新用途的發(fā)現(xiàn)，莪術(shù)醇的藥用價(jià)值也 吸引了越來越多的人的關(guān)注。在莪術(shù)醇的研究進(jìn)展方面主要包括了莪術(shù)醇的分 離，提

6、取，定性定量分析及藥理作用。（二）莪術(shù)醇的分離和提取莪術(shù)醇是一種在加熱條件下為棒狀，并且伴有升華現(xiàn)象的白色針狀結(jié)晶樣的化合 物。熔點(diǎn)為142147，沒有紫外吸收，因此在紫外燈下沒有熒光發(fā)生，易溶于乙 醚，氯仿，溶于乙醇，幾乎不溶于水，分類屬于倍半萜類的物質(zhì)。利用莪術(shù)醇的這些特點(diǎn)，常用方法就是以郁溫金生藥的根莖為原料，先用水蒸氣 蒸餾法從中提取出莪術(shù)油，然后用乙醚洗滌，留下微溶于石油醚的莪術(shù)醇和莪術(shù) 二酮的混合物結(jié)品，硅膠柱層析分離兩者，再用無水乙醇洗滌，可最終得到莪術(shù) 醇單一物質(zhì)的白色針狀結(jié)品。（三）定性分析在莪術(shù)醇的定性分析中，波層層析鑒定是最經(jīng)典的方法。中國藥典1995版采用 的方法是在硅

7、膠G薄層板上以石油醚一一醋酸乙酯90： 10傾斜上行展開，用1% 香草醛硫酸溶液噴霧顯色。在2000版本的中國藥典則采用了波層色譜法鑒別莪 術(shù)醇。采用以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板，分別吸取對照品和供 試品溶液按照波層色譜法的操作規(guī)則點(diǎn)樣，仍然采用石油醚（6090） 一一醋酸 乙酯90： 10為展開劑，待展開劑到前沿線取出，晾干，噴5%香草醛硫酸溶液， 用熱風(fēng)吹十到斑點(diǎn)清晰,2005版的中國藥典使用的相同的方法，只是展開劑中石 油醚的沸點(diǎn)在（3060）之間。出了上述的三種方法，還有氣相色譜結(jié)合質(zhì)譜的 方法。除此之外，還有：化學(xué)鑒定。莪術(shù)醇的化學(xué)結(jié)構(gòu)是為：其中含有的特征基團(tuán)，利用化學(xué)手段

8、加以鑒定。在很多情況下也可以采取核磁共振鑒定。標(biāo)準(zhǔn)對照品品的核磁共振圖譜如下。2 2 I核磁共拖分析見圖W圖2樣品的核磁共振翅譜JH NMR i CD) & 4 88( 2EL d 11- H), 1 55( 2EL 6- H * 2 19( 31. q 3- H ), L % 2EL in. 10- H ), I.菸79( 3EL in. I. S 8- H)h I. 48( 2Hh mh 9- H), I. 19( 1H, 12- H I. ( til. 4 IA 14- H ), (1 幻3H_ a 15- I)IK Uapgii r n Vir 早早Aa fl E r.JTF XR A

9、BH C E I i i w i.1 mw# !圖3樣品的核磁共振碳譜”匚 NM R CM；,) X I4A Si 2- C), 112 ( I I -匚)一 104 1( 4- I). Sti 9( 7- I ), 55 6i I - C)_ 5A 6(3-匚)一 3& 5( 5- C)r 37 9( 8- C), 33 8( 12- C)一 3Q 0( 10-匚)一 27. Si 6- L；), 27. 4( 9- L；), 22 2( I 3- C)_ 2(1 6( 14-匚)一 11. 5( 15- C).利用核磁共振的操作得出所得產(chǎn)品的圖譜，經(jīng)兩者相互比較，觀察特征峰的存在 與否就能

10、得出結(jié)論。（四）在莪術(shù)醇的定量分析在莪術(shù)醇的定量分析方面，最常使用的有三種方法。（1） 紫外分光光度法。該方法在520納米波長測定樣品的吸光度，以吐溫 80乙醇溶液為對照品，在相同條件下測定其吸光度。通過精密計(jì)算得出樣品中 含量。（2）氣相色譜法。氣相色譜法測定含量一般選取一定的內(nèi)標(biāo)物，利用儀器 分析的手段最終測得相關(guān)的數(shù)據(jù)。（3）毛細(xì)管色譜法。根據(jù)朱亞爾等的文獻(xiàn)，可以看到這種新的方法。采用 的色譜柱為石英毛細(xì)管柱，在控制進(jìn)樣溫度，流速，以及升溫程序，保留時(shí)間及 相關(guān)條件下，可以使莪術(shù)醇鋒和有關(guān)物質(zhì)的鋒有效分離。通過計(jì)算鋒的面積得出 最終結(jié)果。（五）莪術(shù)醇的藥理作用及臨床應(yīng)用雖然已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的莪術(shù)

11、醇的臨床用途非常廣泛，但最集中的，還是抗癌，抗菌，抗 病毒的作用。在抗癌方面，最為明顯的就是對宮頸癌的治療，主要采用局部瘤體注射的方法。 因?yàn)檩g(shù)醇的抗癌機(jī)制為一直癌變細(xì)胞細(xì)胞核的生長以及增加機(jī)體特異性免疫 的能力，幾乎沒有毒副作用，所以一直以來都被廣泛使用。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，表明莪術(shù)醇能抑制試管中的金黃色葡萄球菌，溶血性球菌，大腸 桿菌，傷寒桿菌，霍亂弧菌等的生長，對呼吸道荷包體病毒有直接的抑制作用。 除此之外，也能對風(fēng)濕病毒，水痘病毒等一些常見的致病病毒起到直接和間接地 抑制殺害作用。因此常常被用作抗菌抗病毒的藥物。在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的這額病毒之外，還有人們尚且不清楚的，因此其毒力性等需要經(jīng)過進(jìn)一步的

12、研究。三研究內(nèi)容及實(shí)驗(yàn)方法（一）流程圖莪術(shù)藥材粗粉8倍水浸泡，水蒸氣蒸餾6h莪術(shù)揮發(fā)油置冰箱中05冷藏，析晶，過濾結(jié)品物石油醚洗滌 結(jié)晶無水乙醇重結(jié)晶針狀結(jié)晶（莪術(shù)醇）石油醚液回收石油醚四莪術(shù)醇的分離提?。ㄒ唬┪鼍Вg(shù)醇的初步分離。將上一部所的揮發(fā)油靜置冷（放置在05。的溫度冰箱），待不再有結(jié)晶析出， 用布氏漏斗真空抽濾。得到的結(jié)晶為主要組成為莪術(shù)醇和莪術(shù)二酮的混合粗晶。（二）莪術(shù)醇的二次分離。將上一部所得的莪術(shù)醇和莪術(shù)二酮的粗晶用石油醚洗滌，以出去一些極性較小的 有關(guān)物質(zhì)。得到結(jié)晶和石油醚液，將結(jié)晶用無水乙醇重結(jié)晶就能得到針狀的莪術(shù) 醇白色晶體。稱量其重量。五實(shí)驗(yàn)裝置及藥品（1）水蒸氣蒸餾

13、裝置水水恭汽學(xué)人管理出戰(zhàn)導(dǎo)出管水摟酒管實(shí)驗(yàn)器材：水蒸氣發(fā)生器恒溫水浴鍋 500ml圓底燒瓶雙控橡膠塞冷凝器橡膠管尾接管錐形瓶玻璃管（2）過濾裝置及藥品實(shí)驗(yàn)儀器：布氏漏斗真空泵無灰濾紙抽濾瓶石油醚無水乙醇（3）產(chǎn)品純度檢測及定性檢測裝置及藥品薄層色譜儀器和藥品：玻璃板硅膠G石油醚醋酸乙酯香草醛硫酸溶液展開缸吹風(fēng)機(jī)紫外燈六實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)對莪術(shù)進(jìn)行提取工藝的優(yōu)化，提高發(fā)油的產(chǎn)率。分離出相對較純的莪術(shù)醇。鑒定得到的莪術(shù)醇產(chǎn)品。七 工作進(jìn)度安排查找相關(guān)的資料并選擇合適的文獻(xiàn)和書籍 2013.3.10至2013.3.15查閱資料并撰寫開題報(bào)告2013.3.15 至 2013.3.17修改并完善開題報(bào)告2013.3.17 至 2013.3.244.實(shí)驗(yàn)試劑盒實(shí)驗(yàn)器材的相關(guān)準(zhǔn)備2013.3.25 至 2013.3.265.莪術(shù)油的提取2013.3.27 至 2013.3.316.莪術(shù)醇的分離2013.4.1 至 2013.4.57.莪術(shù)醇的鑒定完善實(shí)驗(yàn)報(bào)告以及實(shí)驗(yàn)分析2013.4.6 至 2013.4.112013.4.12 至 2013.4.19八主要參考資料（一）參考書籍中藥化學(xué)成分提取分離與鑒定人民衛(wèi)生出版社 唐志書中藥鑒定學(xué)高等教育出版社 王喜春（二）參考文獻(xiàn) 不同提取方法對羲術(shù)油提取的影響王娟，劉漢清 南京中醫(yī)藥