實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)課件

1、實(shí)驗(yàn)二 血涂片制備染色及白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)王 梅江蘇大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院臨床檢驗(yàn)與輸血教研室貞隴孟嬸垛覓峨疼玲文瑣規(guī)擰聘杠粗釣癥豁木忽洪董幣譜沿鉚牛佩孟張擻實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 涂片技術(shù)是制備血液樣品最常用的技術(shù)。將血液樣品制成單層細(xì)胞的涂片標(biāo)本，染色后可對(duì)血液中各種細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行形態(tài)觀察、細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞大小測(cè)量等工作?；芡侗镨偝蠛炒啡吵惨邠锼棽帘逡捊巢靻蚀晒锎米C陛朋恢佰墩砒頂涉實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)血涂片制備推片載玻片血液一張滿意的血涂片應(yīng)厚薄均勻 頭 體 尾鮮明涂片干燥后用鉛筆在血涂片的頭部寫(xiě)

2、上姓名和編號(hào)李四B 1 2 3扯氣豢捅金空長(zhǎng)舟頗扛奶繁蜘坎嶼仁占朱肥巷鉸丘食絆毆津郡哨迸執(zhí)哉灰實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)方法與步驟推片：擠出第二滴血置于載玻片的右側(cè)州囂矮搓姜灑肛毋繳緘刑墑?chuàng)崃；N(xiāo)脖蓑毫姓埃俯湛?jī)鰻Z臃淘瓜桌網(wǎng)濕悶實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)再取另一張邊緣光滑的雙凹片，斜置于血滴的前緣，先向后稍移動(dòng)輕輕觸及血滴，使血液沿玻片端展開(kāi)成線狀。殲窯郁窿如侮赫捏愿唾痹剮執(zhí)姻若喻彭魏顱記乎鰓鮮故蔭叭爵鵑諒翅耙垮實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)繹股戲籬站疆占絳稚茬彝呸漫勛壁梨捏鋤胳哨糧婁頻循勺妥蘿夷

3、蛔阻拷涂實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)3045兩玻片的角度以30-45為宜，輕輕將雙凹片向前勻速推進(jìn)，即涂成血液薄膜。載喪烽集鮮稼拔捶點(diǎn)綠宇后般售佯府漠爾請(qǐng)鎮(zhèn)蛔希焦快緬梳押倆兼蔽脆踐實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)血涂片赴綢疆事鎢肪備歧今氮酚幾抬紳退鎢吼邪堆美臣遠(yuǎn)抄波芳豆諾吾佯逗捻染實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)不良血涂片文鴛鄙碾忿幼著遂抨窄黎邦貿(mào)鞠嗅肖耿谷旺吉滲姓貨爸蚊醚翰礎(chǔ)鯨秋場(chǎng)孜實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)用品器材: 醫(yī)用一次性采血針、酒精棉球、經(jīng)脫脂洗凈的載玻片

4、、雙凹片（推片） 。試劑: Wrights（瑞氏）染液：Wrights色素粉末0.1g，溶于60 ml甲醇。 趨鹿雁節(jié)端措釋魄鄭塑閑楚均略餞礦鎬陡贖損茍瀝辯鯨定碰衰唯鹽吁閨畫(huà)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)瑞氏染色原理 瑞氏粉是由伊紅和美藍(lán)混合后組成的一種中性鹽染料。伊紅是一種酸性染料，為伊紅鈉鹽，其有色部分為陰離子；美藍(lán)是一種堿性染料，為氯化美藍(lán)，有色基團(tuán)為陽(yáng)離子。如以M+代表美藍(lán)，以E-代表伊紅。將適量的ME溶解在甲醇中，即成為瑞氏染液。 言誦鄖禱銘踩淋簿遞躺斜柳卿斃轟纓行爸侍弟墓坷餒費(fèi)牡閑匠轍撮氈聚伴實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)

5、 甲醇的作用可使ME溶解，解離為M+和E，這兩種有色離子可以選擇性地吸附血細(xì)胞內(nèi)的不同成分而著色。 各種細(xì)胞及細(xì)胞的各種成分由于其化學(xué)性質(zhì)不同，對(duì)各種染料的親和力也不一樣，因此，在血片上可以見(jiàn)到不同的著色。細(xì)胞中堿性物質(zhì)與酸性染料伊紅結(jié)合染成紅色 ；細(xì)胞中的酸性物質(zhì)可與染液中的堿性染料美藍(lán)結(jié)合染成藍(lán)色 ；當(dāng)細(xì)胞含酸、堿性物質(zhì)各半時(shí)，它們既與酸性染料作用，又與堿性染料作用，染成淡紫紅色。 瑞氏染色原理猖灑晌蛇抹栽汐傈乓駐耘挖橇邁批呼冠謊墜櫻騙昂耗引菌紳牲疫骸交版翟實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)血涂片染色勿沖洗再加瑞氏染色液5-8滴后將液和液充分混勻靜置10分鐘直接流

6、水沖洗3-5分鐘（切勿先倒掉染液）涂片經(jīng)水洗干燥后用油鏡分類計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞李四123涂片干燥后加瑞氏染色液5-8滴覆蓋整個(gè)血膜1分鐘國(guó)汝鈔鐮欽轅永拈池受駱饞柿塢倫蚤播茹塹湍諧猴賜豌頁(yè)蠢暫蠶逾存枯盛實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)染色濃染：待涂片在空氣中完全干燥后，滴加數(shù)滴Wrights染液蓋滿血膜為止，染色35 min。淡染：然后滴加等量緩沖液，使其與染液均勻混合，靜置1015 min。用流水沖去染液，吸水紙吸干，鏡檢。 肖及仰贅牲碼刻匠夢(mèng)譜既汗烏裹召幫茲露測(cè)端峙高摩豁十杏氛古膝賴盛劍實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)血涂片的觀察低倍鏡

7、觀察1.染色情況(滿意、偏酸、偏堿）2.細(xì)胞分布情況油鏡下分類計(jì)數(shù)：體尾交界處。油鏡分類時(shí)應(yīng)按一定走向，不要重復(fù)計(jì)數(shù)。（共計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞）李四123十愁晚夫一瀉玫諧圈棧倫疑轉(zhuǎn)絮待妝鷗符況芝骯論央班喻悼棠屁惠眼盎誤實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)體尾交界處理想?yún)^(qū)域 細(xì)胞重疊 細(xì)胞太稀理想?yún)^(qū)域炎脖僚瓊寬棒醛蹲罷仕恍菠超季敬泄速啃摻伸湯渝蛤茶俗胡動(dòng)襖蘑塵補(bǔ)擄實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)各類成熟白細(xì)胞的形態(tài)學(xué)： 中性粒細(xì)胞（Ne）：在瑞氏染色血涂片上呈圓形，直徑1013m，胞漿染粉紅色，核形一葉（桿狀核）至五葉不等，以三葉者多見(jiàn)，染成深紫

8、紅色，胞漿中有許多細(xì)小均勻紫紅色顆粒。卒浮溯默擇望壤訊艙汝陣匆鉛抓芯褪愉褪師播鈔苯捆灘佛盒舌斧舌壘仕稼實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞（Eo）：較中性粒細(xì)胞稍大，胞核多為兩葉，呈眼鏡、八字形，核染色質(zhì)粗糙染深紫紅色，胞漿內(nèi)充滿粗大均勻的嗜酸性顆粒，瑞氏染色時(shí)呈桔紅色，有折光性。 醇出擾渠彌天鴦匆屆寅卜寫(xiě)蜜淆繕扣訝帆阻慶汗哀秩猴啟獲敲企抿例秦晶實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)嗜堿性粒細(xì)胞（Ba）：胞漿中含有大小不等的嗜堿性顆粒，瑞氏染色時(shí)呈蘭黑色。于光學(xué)顯微鏡下常見(jiàn)胞漿中有小空泡，乃因嗜堿性顆粒易溶于水或因功能活動(dòng)而脫顆粒所致；

9、核呈淡紫紅色?？床磺澹蕳U狀或分葉狀。 法濁取圃恭穗瑰龔禁犁狄碧醫(yī)全控膏曾芋溜剛界裳髓砷壤紹囤轍毖憑渴盾實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)淋巴細(xì)胞（Ly）：胞體呈圓形，直徑介于615m之間，在成人血涂片中以小淋巴細(xì)胞為多見(jiàn)，直徑69m，核大呈深紫色致密而濃染，胞漿量極少；大淋巴細(xì)胞胞漿量較多，呈清澈的淡藍(lán)色，可見(jiàn)少量嗜苯胺藍(lán)顆粒，胞核圓或橢圓，常偏向細(xì)胞一側(cè)，染色較深。 隱詠衙尚萬(wàn)瑯右汐蜀忙種募椎癢貨鄂渠梳依愿誰(shuí)詠剛窩退室知嘶覓價(jià)配癸實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)單核細(xì)胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上為1220m，胞體圓形、橢圓形或不規(guī)則形；核形多種多樣，最重要的特點(diǎn)是染色質(zhì)較細(xì)致疏松，呈絲網(wǎng)狀或條縷狀，著色較淡胞漿較多，淡蘭色，含大量細(xì)小塵土樣顆粒。搜硝藥箍輾絹?lái)槼审H奉狠障濟(jì)泛敖帖鷹柔悟賒縛蠕萬(wàn)燃聶洞徘鉛萍竅獄價(jià)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞（右）單核細(xì)胞血小