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文檔簡(jiǎn)介
1、香草扁桃酸測(cè)定試劑盒(均相酶免疫法)Vanilmandelic acid (VMA )Assay kit (Homogeneous Enzyme Immunoassay)CONTENTS123兒茶酚胺及VMA簡(jiǎn)介VMA市場(chǎng)介紹蘇州博源首家自動(dòng)化VMA試劑4結(jié)語1兒茶酚胺及VMA簡(jiǎn)介兒茶酚胺 兒茶酚胺:一種含有兒茶酚和胺基的神經(jīng)類物質(zhì)。 兒茶酚胺:甲腎上腺素(NE)、腎上腺素(E)、多巴胺(DA)。 兒茶酚胺合成:通過交感神經(jīng)節(jié)和腎上腺髓質(zhì)上的L-酪氨酸酶化轉(zhuǎn)變而來。兒茶酚胺的合成代謝路線酪氨酸酪氨酸羥化酶多巴多巴脫羧酶多巴胺(DA)多巴胺羥化酶去甲腎上腺素(NE)苯乙胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶腎上腺素
2、(E)單胺氧化酶香草扁桃醛單胺氧化酶香草扁桃酸(VMA)高香草酸(HVA)N-甲基腎上腺素N-乙酰去甲腎上腺素60%轉(zhuǎn)化兒茶酚胺正常人血漿中:去甲腎上腺素的濃度約為0.2ng/100ml多巴胺濃度0.2ng/100ml腎上腺素的濃度約為0.05ng/100ml兒茶酚胺尿中的代謝物(主要通過從尿中排泄)香草扁桃酸(VMA)91%腎上腺素+去加腎上腺素1.1%變腎上腺素+去甲變腎上腺素7.6%高香草酸少量VMA兒茶酚胺主要代謝物-VMA 香草扁桃酸(VMA)經(jīng)代謝由尿排出,是腎上腺素與去甲腎上腺素的主要代謝產(chǎn)物 參考范圍:12mg/24h尿(見VMA試劑說明書) 臨床意義:VMA增高:嗜鉻細(xì)胞瘤、
3、交感神經(jīng)母細(xì)胞瘤、原發(fā)性高血壓和甲狀腺功能減退VMA降低:甲狀腺功能亢進(jìn)、原發(fā)性慢性腎上腺皮質(zhì)功能減退等神經(jīng)母細(xì)胞瘤 神經(jīng)母細(xì)胞瘤(Neuroblastoma,NB),又叫神經(jīng)細(xì)胞瘤, 在小于5歲兒童常見的腫瘤中居第三位 ,約75%的NB患者在5歲以下。 大約65%的腫瘤起源于腹部,15%20%起源于胸部,其余15%起源于不同的部位例如頸部, 骨盆等(主要癥狀包塊,易被誤診) NB產(chǎn)生兒茶酚胺,可測(cè)得患兒尿中兒茶酚胺分解產(chǎn)物(VMA)濃度升高小兒神經(jīng)母細(xì)胞瘤篩查:日本、美國、印度廣泛使用早篩查早治愈VMA檢測(cè)1神經(jīng)母細(xì)胞瘤 NB生存率低(30%左右)及早發(fā)現(xiàn)可治愈 北京兒童醫(yī)院-參考美國NB篩
4、查方案+兒童臨床數(shù)據(jù)醫(yī)院NB篩查方案: 提出唯一檢測(cè)項(xiàng)目:尿VMA/HVA 檢查參考文獻(xiàn):李斯慧等.神經(jīng)細(xì)胞瘤高危兒童篩查及其方案研究進(jìn)展.中國小兒血液與腫瘤雜志J:2016,21(1):47-49VMA檢測(cè)1嗜鉻細(xì)胞癌 嗜鉻細(xì)胞瘤來源于腎上腺髓質(zhì)及交感神經(jīng)系統(tǒng)的嗜鉻細(xì)胞所形成的腫瘤。 惡性嗜鉻細(xì)胞瘤的發(fā)生率不足10%,瘤體常巨大,并可發(fā)生轉(zhuǎn)移 成人嗜鉻細(xì)胞瘤的篩查癥狀:血壓高、心跳快、頭痛、呼吸困難,虛汗。 嚴(yán)重病例發(fā)作時(shí)可導(dǎo)致死亡。 如能及時(shí)、早期獲得診斷和治療,又是一種可治愈的繼發(fā)性高血壓病。參考文獻(xiàn):甘志彪等.尿液中香草杏仁酸測(cè)定的應(yīng)用探討.臨床試驗(yàn)雜志J.2013,17(7):166
5、4-1265研究發(fā)現(xiàn):尿VMA 檢測(cè)具有操作簡(jiǎn)便、陽性率高(達(dá)99%)等優(yōu)點(diǎn)VMA檢測(cè)2參考文獻(xiàn):劉俊宏等.兒童嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷與治療(附6例分析及文獻(xiàn)復(fù)習(xí)).重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)J.2014,39(8):1069-10712嗜鉻細(xì)胞癌VMA檢測(cè)26例患者,4例陽性,臨床癥狀不明顯,VMA檢測(cè)輔助確診2VMA市場(chǎng)介紹1VMA市場(chǎng)情況 收費(fèi)目錄:VMA各地都有收費(fèi); 每個(gè)測(cè)試在 30-80 元; 目前主要為檢驗(yàn)科自己用手工做(用化學(xué)法); CFDA:尿VMA 1家進(jìn)口注冊(cè)(西班牙)注冊(cè)號(hào)國械注進(jìn)20142405473生產(chǎn)廠商名稱(英文)Costa Brava 30,08030 Barcelona S
6、pain生產(chǎn)國或地區(qū)(中文)西班牙產(chǎn)品名稱(中文)香草扁桃酸分析試劑盒(色譜-分光光度法)產(chǎn)品名稱(英文)VANILMANDELIC ACID規(guī)格型號(hào)貨號(hào):COD11003 人份:20tests產(chǎn)品性能結(jié)構(gòu)及組成試劑1:0.6mol/L的磷酸鈉緩沖溶液;試劑2:0.2mol/L乙酸鈉緩沖溶液,pH約6.1;試劑3:2mol/L氯化鈉溶液;試劑A:3mol/L碳酸鉀;試劑B:0.12mol/L重構(gòu)化焦亞硫酸-高碘酸鈉粉;試劑C:0.67mol/L重構(gòu)化焦亞硫酸鈉粉;香草扁桃酸標(biāo)品:20mg/L香草扁桃酸溶液;微柱:陰離子交換樹脂。產(chǎn)品適用范圍用于測(cè)定人體尿液中香草扁桃酸濃度。注冊(cè)代理重慶圣利安醫(yī)
7、療設(shè)備有限公司批準(zhǔn)日期2014.11.27有效期截止日2019.11.263蘇州博源首家自動(dòng)化VMA試劑產(chǎn)品特點(diǎn)博源VMA測(cè)定試劑盒(均相酶免疫法) 全國首家,國內(nèi)獨(dú)家均相酶免疫平臺(tái) 自產(chǎn)原材料原材料和試劑自主研發(fā),質(zhì)量可靠 試驗(yàn)驗(yàn)證檢測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、可靠、重復(fù)性好、靈敏度高 操作方便相較于手工法可自動(dòng)化操作,提高臨床檢測(cè)量檢驗(yàn)原理博源VMA測(cè)定試劑盒(均相酶免疫法)均相酶免疫法測(cè)定VMA活性檢驗(yàn)原理340nm有吸收峰340nm有吸收峰NAD+NADHNAD+ + + 較強(qiáng)信號(hào)強(qiáng)度VMA抗體H+VMA+NADH+G6PDH激活態(tài)HHH G6PDH 抑制態(tài)G6PDH激活態(tài)Hc 實(shí)際測(cè)定時(shí)VMA濃度與
8、NADH成正比,通過吸光度測(cè)定VMA含量G6PDH:葡萄糖-6-磷酸脫氫酶; G6P:葡萄糖-6-磷酸; 6PG:6磷酸葡萄糖酸; H:小分子半抗原 整個(gè)反應(yīng)發(fā)生在一個(gè)液相均相體系中,樣本中游離的VMA與G6PDH-VMA競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合抗VMA特異性抗體位點(diǎn)。樣本中游離的VMA越多,競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的抗體位點(diǎn)越多,抗體釋放出的酶標(biāo)偶聯(lián)物就越多。游離出來的VMA酶標(biāo)偶聯(lián)物催化-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型(NAD+)轉(zhuǎn)化為NADH,樣本中的VMA濃度與NADH的生成量成正比,通過340 nm吸光值的變化即可計(jì)算出VMA的含量。博源VMA測(cè)定試劑盒(均相酶免疫法)性能指標(biāo)特點(diǎn)劑型液體雙試劑參考區(qū)間24h尿液:1
9、2mg/24h分析靈敏度0.01-0.30線性范圍2.0-200.0 mg/L精密度日內(nèi)CV5%,日間CV10%準(zhǔn)確度質(zhì)控相對(duì)偏差12個(gè)月;開瓶上機(jī)穩(wěn)定期30天試劑性能參數(shù)博源VMA測(cè)定試劑盒(均相酶免疫法)1、定標(biāo)曲線【AU480】試驗(yàn)數(shù)據(jù)博源VMA測(cè)定試劑盒(均相酶免疫法)2、重復(fù)性:測(cè)試低值和高值質(zhì)控,批內(nèi)精密度CV5%試驗(yàn)數(shù)據(jù)測(cè)試次數(shù)濃度1 (g/ml)濃度2 (g/ml)15.97 23.72 25.84 24.19 36.31 24.05 46.15 25.58 56.00 23.93 65.87 23.28 76.22 24.03 85.62 24.28 96.12 23.23
10、105.64 24.35 Mean5.9724.06SD0.230.66CV3.91%2.73%博源VMA測(cè)定試劑盒(均相酶免疫法)3、穩(wěn)定性:不定標(biāo)穩(wěn)定性14天,日間CV4%試驗(yàn)數(shù)據(jù)Days濃度1 (g/ml)濃度2 (g/ml)16.30 25.02 36.21 25.15 56.54 24.59 76.26 25.38 96.30 24.19 116.16 24.42 136.04 23.44 155.86 23.61 Mean6.2124.48SD0.200.71CV3.23%2.88%博源VMA測(cè)定試劑盒(均相酶免疫法)4、24h尿液標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定試驗(yàn)數(shù)據(jù)標(biāo)本編號(hào)VMA (g/ml)VMA
11、(mg/24h尿)標(biāo)本編號(hào)VMA (g/ml)VMA(mg/24h尿)標(biāo)本編號(hào)VMA (g/ml)VMA(mg/24h尿)標(biāo)本編號(hào)VMA (g/ml)VMA(mg/24h尿)SP 12.52 3.78 SP 173.18 4.77 SP 333.95 5.93 SP 494.70 7.05 SP 22.44 3.66 SP 183.53 5.30 SP 342.03 3.05 SP 502.49 3.74 SP 34.48 6.72 SP 191.60 2.40 SP 351.27 1.91 SP 516.02 9.03 SP 43.23 4.85 SP 201.03 1.55 SP 362.
12、03 3.05 SP 523.54 5.31 SP 56.88 10.32 SP 210.39 0.59 SP 375.33 8.00 SP 531.68 2.52 SP 62.99 4.49 SP 222.49 3.74 SP 382.80 4.20 SP 541.63 2.45 SP 74.54 6.81 SP 232.05 3.08 SP 3911.93 17.90 SP 552.70 4.05 SP 83.93 5.90 SP 243.64 5.46 SP 403.26 4.89 SP 563.20 4.80 SP 94.34 6.51 SP 252.09 3.14 SP 419.68
13、 14.52 SP 574.79 7.19 SP 101.53 2.30 SP 264.01 6.02 SP 422.11 3.17 SP 583.58 5.37 SP 112.00 3.00 SP 272.15 3.23 SP 432.74 4.11 SP 591.72 2.58 SP 124.18 6.27 SP 284.81 7.22 SP 442.32 3.48 SP 603.13 4.70 SP 139.76 14.64 SP 292.52 3.78 SP 454.67 7.01 SP 612.61 3.92 SP 142.64 3.96 SP 302.12 3.18 SP 462.
14、09 3.14 SP 621.87 2.81 SP 152.57 3.86 SP 313.97 5.96 SP 473.87 5.81 SP 637.37 11.06 SP 162.03 3.05 SP 326.02 9.03 SP 481.39 2.09 SP 642.95 4.43 VMA Reference range:12mg/24h尿標(biāo)本總例數(shù)陽性例數(shù)陰性例數(shù)64361注:24h尿計(jì)算以每人每天尿體積1.5L計(jì)算。測(cè)定結(jié)果與臨床癥狀診斷結(jié)果基本一致VMA包裝規(guī)格-見說明書包裝組分20 mLR1: 16 mL、R2: 4 mL50 mLR1: 40 mL、R2: 10 mL75 mLR1: 60 mL、R2:15 mL75 mLR1: 543 mL、R2: 513 mL150 mLR1: 260 mL、R2: 215 mL300 mLR1: 460 mL、R2: 415 mL600 mLR1: 860 mL、R2: 815 mL400 mLR1: 320 mL、R2: 80 mL校準(zhǔn)品1.0 ml;2.0 m
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