ELISA方法的基本原理和操作步驟

1、ELISA方法的基本原理和操作步驟自己收集整理的錯(cuò)誤在所難免僅供參考交流如有錯(cuò)誤請指正！謝謝ELISA方法的基本原理和操作步驟基本原理1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定(enzymelinkedimmunosorbentassayELISA)用于IgG定量測定的文章使得1966年開始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測定方法這一方法的基本原理是：使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面并保持其免疫活性使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性又保留酶的活性在測定時(shí)把受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同

2、的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例加入酶反應(yīng)的底物后底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析由于酶的催化頻率很高故可極大地地放大反應(yīng)效果從而使測定方法達(dá)到很高的敏感度方法類型和操作步驟ELISA可用于測定抗原也可用于測定抗體在這種測定方法中有3種必要的試劑：固相的抗原或抗體酶標(biāo)記的抗原或抗體酶作用的底物根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法（一）雙抗體夾心法雙抗體夾心法是檢測抗原最

3、常用的方法操作步驟如下：（1）將特異性抗體與固相載體連接形成固相抗體：洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)（2）加受檢標(biāo)本：使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)間讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合形成固相抗原復(fù)合物洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)（3）加酶標(biāo)抗體：使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)（4）加底物：夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量根據(jù)同樣原理將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物即可用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中的抗體（二）雙位點(diǎn)一步法在雙抗體夾心法測定抗原時(shí)如應(yīng)用針對抗原分子上兩個(gè)

4、不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體則在測定時(shí)可使標(biāo)本的加入和酶標(biāo)抗體的加入兩步并作一步（圖15-5）這種雙位點(diǎn)一步不但簡化了操作縮短了反應(yīng)時(shí)間如應(yīng)用高親和力的單克隆抗體測定的敏感性和特異性也顯著提高單克隆抗體的應(yīng)用使測定抗原的ELIS在一步法測定中應(yīng)注意鉤狀效應(yīng)（hookeffect）類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象當(dāng)標(biāo)本中待測抗原濃度相當(dāng)高時(shí)過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合而不再形成夾心復(fù)合物所得結(jié)果將低于實(shí)際含量鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)甚至可出現(xiàn)假陰性結(jié)果（三）間接法測抗體間接法是檢測抗體最常用的方法其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體故稱為間接法操作步驟如

5、下：（1）將特異性抗原與固相載體連接形成固相抗原：洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)（2）加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結(jié)合形成固相抗原抗體復(fù)合物經(jīng)洗滌后固相載體上只留下特異性抗體其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合在洗滌過程中被洗去（3）加酶標(biāo)抗抗體：與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合從而使該抗體間接地標(biāo)記上酶洗滌后固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量例如欲測人對某種疾病的抗體可用酶標(biāo)羊抗人IgG抗體（4）加底物顯色：顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體的量本法只要更換不同的固相抗原可以用一種酶標(biāo)抗抗體檢測各種與抗原相應(yīng)的抗體（四）競爭法競爭法可用于測定抗原也可用于測定抗體以測定抗原為例受檢抗原和

6、酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量呈反比操作步驟如下：（1）將特異抗體與固相載體連接形成固相抗體洗滌（2）待測管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液使之與固相抗體反應(yīng)如受檢標(biāo)本中無抗原則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合如受檢標(biāo)本中含有抗原則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會(huì)與固相抗體結(jié)合競爭性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機(jī)會(huì)使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少參考管中只加酶標(biāo)抗原保溫后酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)最充分的量洗滌加底物顯色：參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原最多故顏色最深參考管顏色深度與待測管顏色深度之差代表受檢標(biāo)本抗原的量待測管顏色越淡表示標(biāo)本中抗原含量越多捕獲法測

7、IgM抗體血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時(shí)存在后者會(huì)干擾IgM抗體的測定因此測定IgM抗本多用捕獲法先將所有血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上在去除IgG后再測定特異性IgM操作步驟如下：將抗人IgM抗體連接在固相載體上形成固相抗人IgM洗滌加入稀釋的血清標(biāo)本：保溫反應(yīng)后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分加入特異性抗原試劑：它只與固相上的特異性IgM結(jié)合洗滌加入針對特異性的酶標(biāo)抗體：使之與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)結(jié)合洗滌（5）加底物顯色：如有顏色顯示則表示血清標(biāo)本中的特異性IgM抗體存在是為陽性反應(yīng)（六）應(yīng)用親和素和

8、生物素的ELISA親和素是一種糖蛋白可由蛋清中提取分子量60kD每個(gè)分子由4個(gè)亞基組成可以和4個(gè)生物素分子親密結(jié)合現(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉和素（strepavidin）生物素（biotin）又稱維生素H分子量244.31存在于蛋黃中用化學(xué)方法制成的衍生物生物素一羥基琥珀亞胺酯（biotin-hydroxysuccinimideBNHS）可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物親和素與生物素的結(jié)合雖不屬免疫反應(yīng)但特異性強(qiáng)親和力大兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定由于1個(gè)親和素分子有4個(gè)生物素分子的結(jié)合位置可以連接更多的生物素化的分子形成一種類似晶格的復(fù)合體因此把親和素和生物素與

9、ELIS偶聯(lián)起來就可大提高ELISA的敏感度親和素一生物素系統(tǒng)在ELISA中的應(yīng)用有多種形式可用于間接包被亦可用于終反應(yīng)放大可以在固相上先預(yù)包被親和素原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結(jié)合通過親和素生物素反應(yīng)而使生物素化的抗體或抗在相化這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量而且使其結(jié)合點(diǎn)充分暴露另外在常規(guī)ELISA中的酶標(biāo)抗體也可用生物素化的抗體替代然后連接親和素酶結(jié)合物以放大反應(yīng)信號ELISA普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗(yàn).在這種方法中,通常標(biāo)準(zhǔn)配體是固定的,通過加入溶液相受體或蛋白質(zhì)來使之成鍵.通過加入與受體特異性反應(yīng)的抗體來定量成鍵的受體,而且最初抗體的量以加入第二種能顯色的抗體測

10、量.第二種抗體能識(shí)別抗體的末端,在其末端的堿性磷酸酯或過氧化物酶等與酶發(fā)生反應(yīng),從而使溶液顯色一、ELISA的原理ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性又保留酶的活性在測定時(shí)受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例加入酶反應(yīng)的底物后底物被酶催化成為有色產(chǎn)物產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)故可根據(jù)呈色的深

11、淺進(jìn)行定性或定量分析由于酶的催化效率很高間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果使測定方法達(dá)到很高的敏感度二、ELISA的類型ELISA可用于測定抗原也可用于測定抗體在這種測定方法中有三個(gè)必要的試劑：（1）固相的抗原或抗體即免疫吸附劑（immunosorbent）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體稱為酶聯(lián)物、結(jié)合物（conjugate）（3）酶反應(yīng)的底物根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法用于臨床檢驗(yàn)的ELISA主要有以下幾種類型：（一）雙抗體夾心法測抗原雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法操作步驟如下：（1）將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)形成固相抗體洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)（2）

12、加受檢標(biāo)本保溫反應(yīng)標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合形成固相抗原抗體復(fù)合物洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)（3）加酶標(biāo)抗體保溫反應(yīng)固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)（4）加底物顯色固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物通過比色測知標(biāo)本中抗原的量在臨床檢驗(yàn)中此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等只要獲得針對受檢抗原的異性抗體就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法如抗體的來源為抗血清包被和酶標(biāo)用的抗體最好分別取自不同種屬的動(dòng)物如應(yīng)用單克隆抗體一般選擇兩個(gè)針對抗原上不同決定簇的單抗分別用于包被固相載體和制

13、備酶結(jié)合物這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng)作一步法檢測在一步法測定中當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時(shí)過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合而不再形成夾心復(fù)合物類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象此時(shí)反應(yīng)后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標(biāo)準(zhǔn)曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同如按常法測讀所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)（hookeffect）因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果因此在使用一步法試劑測定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）時(shí)應(yīng)注意可測范圍的最高

14、值用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)假使在被測分子的不同位點(diǎn)上含有多個(gè)相同的決定簇例如HBsAg的a決定簇也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物但在HBsAg的檢測中應(yīng)注意亞型問題HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個(gè)亞型顯然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)性這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問題雙抗體夾心法測抗原的另一注意點(diǎn)是類風(fēng)濕因子（RF）的干擾RF是一種自身抗體多為IgM型能和多種動(dòng)物IgG的Fc段結(jié)合用作雙抗體夾心法檢測的血清標(biāo)本中如含有RF它可充當(dāng)抗原成份同時(shí)與固相抗體和酶標(biāo)抗體結(jié)合表現(xiàn)出假陽性反應(yīng)采用F（ab）或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑由于去除了F

15、c段從而可消除RF的干擾雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響已被列為這類試劑的一項(xiàng)考核指標(biāo)（參見6.2）雙抗體夾心法適用于測定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原但不適用于測定半抗原及小分子單價(jià)抗原因其不能形成兩位點(diǎn)夾心（二）雙抗原夾心法測抗體反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物以檢測相應(yīng)的抗體與間接法測抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體此法中受檢標(biāo)本不需稀釋可直接用于測定因此其敏感度相對高于間接法乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測常采用本法本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同尋找合適的標(biāo)記方法（三）間接法測抗體（我公司分裝TORCH及傳染病試劑盒大多采用本法）間接

16、法是檢測抗體常用的方法其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體（抗人免疫球蛋白抗體）以檢測與固相抗原結(jié)合的受檢抗體故稱為間接法（見圖2-3）操作步驟如下：（1）將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié)形成固相抗原洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)（2）加稀釋的受檢血清保溫反應(yīng)血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合形成固相抗原抗體復(fù)合物經(jīng)洗滌后固相載體上只留下特異性抗體血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去（3）加酶標(biāo)抗抗體可用酶標(biāo)抗人Ig以檢測總抗體但一般多用酶標(biāo)抗人IgG檢測IgG抗體固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗體抗體結(jié)合從而間接地標(biāo)記上酶洗滌后固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢抗體的量正相關(guān)（4）加底物顯色本法主要用于對病原體抗體的檢測而進(jìn)

17、行傳染病的診斷間接法的優(yōu)點(diǎn)是只要變換包被抗原就可利用同一酶標(biāo)抗抗體建立檢測相應(yīng)抗體的方法間接法成功的關(guān)鍵在于抗原的純度雖然有時(shí)用粗提抗原包被也能取得實(shí)際有效的結(jié)果但應(yīng)盡可能予以純化以提高試驗(yàn)的特異性特別應(yīng)注意除去能與一般健康人血清發(fā)生反應(yīng)的雜質(zhì)例如以E.Coli為工程酶的重組抗原如其中含有E.Coli成份很可能與受過E.Coli感染者血清中的抗E.Coli抗體發(fā)生反應(yīng)抗原中也不能含有與酶標(biāo)抗人Ig反應(yīng)的物質(zhì)例如來自人血漿或人體組織的抗原如不將其中的Ig去除試驗(yàn)中也發(fā)生假陽性反應(yīng)另外如抗原中含有無關(guān)蛋白也會(huì)因竟?fàn)幬蕉绊懓恍Чg接法中另一種干擾因素為正常血清中所含的高濃度的非特異性抗體病人血

18、清中受檢的特異性IgG只占總IgG中的一小部分IgG的吸附性很強(qiáng)非特異IgG可直接吸附到固相載體上有時(shí)也可吸附到包被抗原的表面因此在間接法中抗原包被后一般用無關(guān)蛋白質(zhì)（例如牛血清蛋白）再包被一次以封閉（blocking）固相上的空余間隙另外在檢測過程中標(biāo)本須先行稀釋（1:401:200）以避免過高的陰性本底影響結(jié)果的判斷（四）競爭法測抗體當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去或不易得到足夠的純化抗原時(shí)可用此法檢測特異性抗體其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合標(biāo)本中抗體量越多結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少因此陽性反應(yīng)呈色淺于陰性反應(yīng)如抗原為高純度的可直接包被固相如抗原中會(huì)有干擾物質(zhì)直接包

19、被不易成功可采用捕獲包被法即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體然后加入抗原形成固相抗原洗滌除去抗原中的雜質(zhì)然后再加標(biāo)本和酶標(biāo)抗體進(jìn)行競爭結(jié)合反應(yīng)競爭法測抗體有多種模式可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體與固相抗原競爭結(jié)合抗HBcELISA一般采用此法另一種模式為將標(biāo)本與抗原一起加入到固相抗體中進(jìn)行競爭結(jié)合洗滌后再加入酶標(biāo)抗體與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)抗HBe的檢測一般采用此法（五）競爭法測抗原小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn)因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定可以采用競爭法模式其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合標(biāo)本中抗原量含量愈多結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少最后的顯色也愈淺小分子激素、藥物

20、等ELISA測定多用此法（六）捕獲包被法測抗體（經(jīng)典方法）IgM抗體的檢測用于傳染病的早期診斷中間接法ELISA一般僅適用于檢測總抗體或IgG抗體如用抗原包被的間接法直接測定IgM抗體因標(biāo)本中一般同時(shí)存在較高濃度的IgG抗體后者將競爭結(jié)合固相抗原而使一部份IgM抗體不能結(jié)合到固相上因此如用抗人IgM作為二接測定IgM抗體必須先將標(biāo)本用A蛋白或抗IgG抗體處理以除去IgG的干擾在臨床檢驗(yàn)中測定抗體IgM時(shí)多采用捕獲包被法先用抗人IgM抗體包被固相以捕獲血清標(biāo)本中的IgM（其中包括針對抗原的特異性IgM抗體和非特異性的IgM）然后加入抗原此抗原僅與特異性IgM相結(jié)合繼而加酶標(biāo)記針對抗原的特異性抗體

21、再與底物作用呈色即與標(biāo)本中的IgM成正相關(guān)此法常用于病毒性感染的早期診斷甲型肝炎病毒（HAV）抗體的檢測模式見圖2-7.類風(fēng)濕因子（RF）同樣能干擾捕獲包被法測定IgM抗體導(dǎo)致假陽性反應(yīng)因此中和IgG的間接法近來頗受青睞用這類試劑檢測抗CMVIgGM和抗弓形蟲IgM抗體已獲成功（七）ABS-ELISA法ABS為親和素（avidin）生物素（biotin）系統(tǒng)（system）的略語親和素是一種糖蛋白分子量60000每個(gè)分子由4個(gè)能和生物素結(jié)合的亞基組成生物素為小分子化合物分子量244.用化學(xué)方法制成的衍生物素-羥基琥珀酰亞胺酯可與蛋白質(zhì)和糖等多種類型的大小分子形成生物素標(biāo)記產(chǎn)物標(biāo)記方法頗為簡便生

22、物素與親和素的結(jié)合具有很強(qiáng)的特異性其親和力較抗原抗體反應(yīng)大得多兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定由于一個(gè)親和素可與4個(gè)生物素分子結(jié)合因此如把ABS與ELISA法可分為酶標(biāo)記親和素-生物素（LAB）法和橋聯(lián)親和素-生物素（ABC）法兩種類型兩者均以生物素標(biāo)記的抗體（或抗原）代替原ELISA系統(tǒng)中的酶標(biāo)抗體（抗原）在LAB中固相生物素先與不標(biāo)記的親和素反應(yīng)然后再加酶標(biāo)記的生物素以進(jìn)一步提高敏感度在早期親和素從蛋清中提取這種卵親和素為堿性糖蛋白與聚苯乙烯載體的吸附性很強(qiáng)用于ELISA中可使本底增高從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素則無此缺點(diǎn)在ELISA應(yīng)用中有替代前者的趨勢由于ABS-ELISA較普通ELISA多用了兩

23、種試劑增加了操作步驟在臨床檢驗(yàn)中ABS-ELISA應(yīng)用不多科研項(xiàng)目中檢測微量的成分如細(xì)胞因子常采用本法ELISA試劑的臨床質(zhì)量評價(jià)點(diǎn)擊次數(shù)：48發(fā)表于：2008-08-0413:25轉(zhuǎn)載請注明來自丁香園來源：丁香園ELISA試劑的評價(jià)(evaluation)分兩個(gè)方面：一是試劑本身的質(zhì)量評價(jià)符合一定要求后才能生產(chǎn)供應(yīng)；一是在臨床應(yīng)用中效果的評價(jià)以肝炎ELISA診斷試劑為例首先必須通過中國藥品生物制品檢定以得到生產(chǎn)的許可檢定內(nèi)容除包裝、標(biāo)簽、說明書等外對試劑的性能如特異性、靈敏度、精密度和線性等均需逐項(xiàng)檢定通過對一系列參比品的檢測結(jié)果符合要求者才為合格ELISA試劑的臨床質(zhì)量評價(jià)是用該試劑對臨床樣本進(jìn)行檢測以觀察其實(shí)際應(yīng)用價(jià)值部臨檢中心對乙肝ELISA診斷試劑在這方面進(jìn)行了工作通過質(zhì)量評價(jià)促進(jìn)了試劑質(zhì)量的提高一、診斷試劑臨床質(zhì)量評價(jià)要點(diǎn)從臨床應(yīng)用角度考核檢驗(yàn)試劑的可靠性是以其能否區(qū)分健康與疾病的能力作為依據(jù)的目前還很難找到100%可靠的試驗(yàn)任何試驗(yàn)都會(huì)出現(xiàn)假陽性或假陰性判斷試驗(yàn)的可靠性常以其靈敏度及特異性作為考核標(biāo)準(zhǔn)臨床應(yīng)用的靈敏度用疾病患者試驗(yàn)陽性的百分率表示特異性以無病者試驗(yàn)陰性的