藥物鑒別實驗

1、關(guān)于藥物的鑒別實驗第一張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月一、概述 依據(jù)藥典進行的藥物分析主要有三大項： 鑒別、檢查和含量測定藥典所收載的藥物項下的鑒別試驗方法，僅適用于貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物，用以證實是否為其所標(biāo)示的藥物。 這些試驗方法不能賴以鑒別未知物 第二張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）性狀：反映了藥物特有的物理性質(zhì)，一般包括外觀、嗅、味、溶解度以及物理常數(shù)(mp.bp. 等)。（二）一般鑒別試驗（general identification test）：證實其是某一類藥物，而不能證實是哪一種藥物。僅供確認(rèn)單一的化學(xué)藥物，如為數(shù)種化學(xué)藥物的混合物或有干擾物質(zhì)存在時

2、，除另有規(guī)定外，應(yīng)不適用。 無機藥物 陰離子和陽離子的特殊反應(yīng) 有機藥物 典型的官能團反應(yīng) 第三張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）專屬鑒別試驗（specific identification test）：根據(jù)每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)特性的不同,選用某些特有的靈敏定性反應(yīng)，來鑒別藥物真?zhèn)蔚?。證實其是某一種藥物 。例如，經(jīng)一般鑒別反應(yīng)的鈉鹽試驗，證實某一藥物為鈉鹽，但不能辨認(rèn)是氯化鈉、苯甲酸鈉或者是其它某一種鈉鹽藥物。要想最后證實被鑒別的物質(zhì)到底是哪一種藥物，必須在一般鑒別試驗的基礎(chǔ)上，再進行專屬鑒別試驗，方可確認(rèn)。第四張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月二

3、、鑒別反應(yīng)的條件（一）溶液的濃度 （二）溶液的酸堿度 （三）溶液的溫度 （四）共存物質(zhì)干擾 （五）反應(yīng)介質(zhì) （六）試驗時間 第五張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月三、鑒別試驗的靈敏度（一）反應(yīng)靈敏度和空白試驗1.反應(yīng)靈敏度（sensitivity） *最低檢出量（minimum detectable quantity）（又稱檢出限量）：以m表示，就是應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定的條件下，能夠觀測出的供試品的最小量，其單位通常用微克（ g）表示。 第六張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月*最低檢出濃度（minimum detectable concentration）：以1:G或1:V表示

4、，是應(yīng)用于某一反應(yīng)，在一定條件下，能夠觀測出供試品的最低濃度。 兩者間滿足以下關(guān)系： m=(v106)/V第七張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 2. 空白試驗（blank test）:就是在與供試品鑒別試驗完全相同的條件下，除不加供試品外，其它試劑同樣加入進行的試驗。 （二）提高靈敏度的方法1.加入與水不相溶的有機溶劑 2.改進觀測方法 第八張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月四、鑒別方法 （一）物理鑒別法物理常數(shù)如沸點、熔點、相對密度、比旋度等均可作為鑒別藥物的依據(jù)，常用于純度較高的原料藥的鑒別。如、可可堿、氨茶堿、磷酸可待因等，測定熔點是一種簡便、專屬的鑒別方法。對于某些熔

5、點過高、對熱不穩(wěn)定、熔點不敏銳的藥物，可通過加入試劑，使藥物與試劑反應(yīng)生成衍生物再測定熔點的方法預(yù)于測定制備衍生物測定熔點法。 第九張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1.干法 焰色試驗 加熱分解 取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，使火焰顯出特殊的顏色。在適當(dāng)?shù)臏囟葪l件下，加熱使供試品分解，生成有特殊氣味的氣體。 （二）化學(xué)鑒別法第十張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2.濕法 呈色或褪色反應(yīng) 沉淀生成反應(yīng) 熒光反應(yīng) 氣體生成反應(yīng) 第十一張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月三氯化鐵呈色反應(yīng)-酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基異羥肟酸鐵反應(yīng)-多為芳酸及其酯類、酰胺類 茚

6、三酮呈色反應(yīng)-脂肪氨基 重氮化-偶合顯色反應(yīng)-芳伯氨基或能產(chǎn)生芳伯氨基氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng) 常見的呈色反應(yīng)第十二張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月與重金屬離子的沉淀反應(yīng)-如巴比妥類藥物與銅鹽、鈷鹽、銀鹽生成沉淀的反應(yīng)； 與硫氰化鉻銨（雷氏鹽）的沉淀反應(yīng)-多為生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機堿及其鹽； 其它沉淀反應(yīng)。 常見的呈色反應(yīng)有：第十三張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月藥物本身可在可見光下發(fā)射熒光；藥物溶液加硫酸使呈酸性后，在可見光下發(fā)射熒光；藥物和溴反應(yīng)后，于可見光下發(fā)射出熒光；藥物和間苯二酚反應(yīng)后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其它反應(yīng)后，發(fā)射熒光。常見的熒光發(fā)射形式有以下

7、類型第十四張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強堿處理后，加熱，產(chǎn)生氨（胺）氣化學(xué)結(jié)構(gòu)中含硫的藥物，可經(jīng)強酸處理后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體 含碘有機藥物經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生乙酸乙酯的香味。 常有氣體生成的藥物第十五張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）光譜鑒別法1紫外光譜鑒別法 核對max和min； 規(guī)定一定濃度的供試液在max處的吸收度； 規(guī)定吸收波長和吸收系數(shù)法； 規(guī)定吸收波長和吸收度比值法； 經(jīng)化學(xué)處理后，測定其反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特性。第十六張，PPT共三十三

8、頁，創(chuàng)作于2022年6月 2.紅外光譜 鑒別法標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照法：中國藥典（2005年版)BP (2005年版)對照品法： USP (29)。 （一種專屬性很強、 應(yīng)用較廣）第十七張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（四）色譜鑒別法 1.薄層色譜鑒別法 采用對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）比較法，要求二者的Rf值一致 ；2.高效液相色譜鑒別法 要求供試品和對照品色譜峰的保留時間應(yīng)一致含量測定方法為內(nèi)標(biāo)法 ； 3.氣相色譜鑒別法 4.紙色譜鑒別法 逐漸被薄層色譜法所取代 5.高效毛細管電泳第十八張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（五）生物學(xué)方法 對于某些有特殊生物效應(yīng)的藥物，可根據(jù)藥物的特殊生理活性

9、將藥物通過各種途徑給予微生物、動物或動物的離體器官，觀察藥理作用以鑒別藥物，多用抗生素及生化藥物的鑒別。1.儀器方法的數(shù)量大大增加，尤其是IR和HPLC；2.制劑廣泛采用IR法鑒別；（六）藥物鑒別方法的新動向第十九張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月二、鑒別試驗與原理（一）、有機氟化物取供試品約7mg，照氧瓶燃燒法（附錄VIIC）進行有機破壞,用水20ml與0.01mol/L氫氧化鈉溶液6.5ml為吸收液，待燃燒完全后，充分振搖；取吸收液2ml，加茜素氟藍試液0.5ml，再加12%醋酸鈉的稀醋酸溶液0.2ml，用水稀釋至4 ml，加硝酸亞鈰試液0.5ml，即顯藍紫色；同時做空白對照試驗。

10、 反應(yīng)式見p16 第二十張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）、有機酸鹽1、水楊酸鹽 加三氯化鐵試液1滴，即顯紫色;加稀鹽酸，即析出白色水楊酸沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液中溶解。 2、醋酸鹽 加硫酸和乙醇后，加熱，即分解發(fā)生醋酸乙酯的香氣；取供試品的中性溶液，加三氯化鐵試液1滴，溶液呈深紅色,加稀無機酸，紅色即退去。第二十一張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3.苯甲酸鹽 取供試品的中性溶液，加三氯化鐵試液，即生成赭色沉淀；加稀鹽酸，變?yōu)榘咨恋?；取供試品，置干燥試管中，加硫酸后，加熱，不炭化，但析出苯甲酸，在試管?nèi)壁凝結(jié)成白色升華物。 4.枸櫞酸鹽 加稀硫酸數(shù)滴, 加熱至沸，

11、加高錳酸鉀試液數(shù)滴振搖，紫色即消失；溶液分成兩份，1份中加硫酸汞試液1滴,另1份中逐滴加入溴試液，均生成白色沉淀；第二十二張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月取供試品的中性溶液，置潔凈的試管中，加氨制硝酸銀試液數(shù)滴，置水浴中加熱，銀即游離并附在管的內(nèi)壁成銀鏡。取供試品溶液，加醋酸成酸性后，加硫酸亞鐵試液1滴和過氧化氫試液1滴，待溶液退色后，用氫氧化鈉試液堿化，溶液即顯紫色。5.酒石酸鹽 第二十三張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（四）托烷生物堿類 取供試品約10mg，加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘渣，放冷，加乙醇23滴濕潤，加固體氫氧化鉀一小顆，即顯深紫色。（三）芳香第

12、一胺類 取供試品約50mg，加稀鹽酸1ml,必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。第二十四張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（五）常見無機離子的鑒別1.鈉鹽焰色反應(yīng) 火焰顯黃色 取供試品的中性溶液，加醋酸氧鈾鋅試液，即生成黃色沉淀。 第二十五張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2.鉀鹽焰色反應(yīng)：焰色反應(yīng)顯紫色，但有少量鈉鹽混存時，須隔藍色玻璃透視 ；取供試品，加熱熾灼，除去可能含有的銨鹽，放冷后，加水溶解，再加0.1%四苯硼鈉溶液與醋酸，即生成白色沉淀。第二十六張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于202

13、2年6月3.鈣鹽燃燒火焰顯磚紅色 取供試品溶液（120），加甲基紅指示液2滴，用氨試液中和，再滴加鹽酸至呈酸性，加草酸銨試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀不溶于醋酸，但可溶于鹽酸。白色焰色反應(yīng)第二十七張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月焰色反應(yīng)：鋇的火焰光譜在可見光區(qū)有533.56、513、488 nm幾條主要譜線，其中以533.56 nm波長的譜線最強, 故鋇鹽的燃燒火焰顯黃綠色，用綠色玻璃透視火焰顯藍色。取供試品溶液，加稀硫酸，即生成白色沉淀；分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。4.鋇鹽 白色 Ba2+SO42- BaSO4 第二十八張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月5.銨鹽取供試品，加過量氫氧化鈉試液后，加熱，即分解，發(fā)生氨臭；遇濕潤的紅色石蕊試紙，能使之變藍，并能使硝酸亞汞試液濕潤的濾紙顯黑色。 黑色 第二十九張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月取供試品溶液，加堿性碘化汞鉀試液1滴，即生成紅棕色沉淀。 紅棕色 第三十張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（六）無機酸根1.氯化物 1) 取供試液品溶液，加硝酸使成酸性后,加硝酸銀試液,即生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加硝酸，沉淀復(fù)生成。如供試品為生物堿或其他有機堿的鹽酸鹽，須先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，取