艾滋病以及HIV檢測培訓

1、關(guān)于艾滋病及HIV的檢測培訓第一張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月一、HIV的基本生物學特性屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科慢病毒屬。HIV在病毒分類中的定位是慢病毒屬中的人類免疫缺陷病毒組HIV分為HIV-1和HIV-2二個型別。HIV-1共有M組（主要亞型組）、O亞型組和N亞型組。M組又分為A、B、C、D、F1、F2、G、H、J、K共11個非重組亞型，另外近年來發(fā)現(xiàn)多個流行重組型（circulating recombinant form,CRFs），包括CRF01- CRF14。第二張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月HIV 的 分 群和亞型A （ A1 A 2）BCDF1F2GHJKCRF

2、CRF01-AECRF02-AGCRF03-ABCRF04-CPXCRF05-DFCRF06-CPXCRF07-BCCRF08-BCCRF09-CPXCRF10-CDCRF11-CPXCRF12-BFCRF13-CPXCRF14-BGABCDEFGHIV-1 M組N組O組（O1-O3）HIV-2 第三張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月HIV病毒體呈球形，直徑約100120nm。電鏡下成熟的HIV-1呈現(xiàn)一致密的圓柱狀核心和一個病毒包膜。病毒核心由病毒RNA、核心結(jié)構(gòu)蛋白和病毒復制所必須的酶類組成。HIV的RNA為兩條相同拷貝（完全同源）的正股RNA鏈。第四張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2

3、022年6月HIV對環(huán)境中物理因素和化學因素抵抗力均較弱，比HBV的抵抗力低得多。對HBV有效的消毒和滅活方法均適用于HIV。HIV對熱很敏感，對低溫耐受性強于高溫。因此，可以用高溫滅活病毒，在低溫條件下保存病毒。在室溫（2227）液體環(huán)境下HIV可存活15天以上；經(jīng)56處理30min可使HIV在體外對人的T淋巴細胞失去感染性，但不能完全滅活血清中的HIV；經(jīng)過60 3小時或80 30min作用后不能檢出感染性病毒。第五張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月HIV耐堿不耐酸HIV對化學因素很敏感室溫中0.5%次氯酸鈉或75%酒精只需1min即不能檢出RT酶活性；0.2%次氯酸鈉、0.1%家

4、用漂白粉、0.1%戊二醛等5min即可滅活HIV；30%酒精溶液5min、20%酒精溶液10min可滅活HIV。對紫外線不敏感，離開人體可存活數(shù)小時至數(shù)天。第六張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月二、艾滋病的傳播途徑 艾滋病毒存在于艾滋病感染者和艾滋病人的血液、精液、陰道宮頸分泌物、乳汁、唾液、淚液、尿液、腦脊液、汗液、糞便、耳分泌液、支氣管分泌液等人體的分泌液中，其中以血液、精液、陰道宮頸分泌液艾滋病毒的含量最高，筑成了艾滋病傳染性很強的物質(zhì)基礎(chǔ)。艾滋病流行至今二十多年的科學研究證明，艾滋病在人群中的傳播只有三條路：性途徑、血液途徑和母嬰傳播。第七張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年

5、6月母親是怎樣將艾滋病病毒傳給自己的孩子的？ 母嬰傳播一般指感染艾滋病毒的母親傳給其胎兒或嬰兒的傳播方式。這種傳播可能發(fā)生在懷孕、分娩和哺乳期。研究報告指出，HIV感染母親所產(chǎn)的新生兒有1160可能發(fā)生感染。母嬰傳播有以下幾個階段：（1）宮內(nèi)感染：是胎兒生前在母親子宮中通過損傷胎盤進入胎兒體內(nèi)，母親的胎盤、羊水中存在大量的艾滋病病毒，可直接從胎兒嬌嫩的、未發(fā)育完全的皮膚中進入胎兒體內(nèi)。第八張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）生產(chǎn)過程中感染 生產(chǎn)過程中由于胎兒通過產(chǎn)道受到反復撞擊和擠壓，血液和羊水等分泌物可被胎兒吸入體內(nèi)，也可通過皮膚損傷進入體內(nèi)。研究發(fā)現(xiàn)，可在剛出生胎兒胃引流物中查

6、出艾滋病病毒。所有這些發(fā)現(xiàn)表明，母嬰傳播可能有高達50的新生兒在出生時通過與母親生殖器官分泌液或血液接觸而發(fā)生感染。（3）哺乳期感染： 科學家研究了100多例非洲感染HIV的哺乳女性，發(fā)現(xiàn)有58的乳汁樣品中可檢測HIV，有時乳汁中感染性病毒數(shù)量很高，乳汁中病毒可通過嬰兒免疫不健全或損傷的口腔粘膜、消化道進入體內(nèi)。 母嬰傳播中有30是在哺乳期感染的。 對感染HIV懷孕母親用抗艾滋病毒預(yù)防服藥治療能降低母嬰傳播的感染率已得到肯定。第九張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月三、HIV感染在體內(nèi)的動態(tài)分期病毒進入體內(nèi)在2天內(nèi)到達局部淋巴結(jié)，5天內(nèi)進入血液循環(huán)。其結(jié)果是導致全身性播散，到達腦部和淋巴

7、組織。從暴露于HIV到出現(xiàn)癥狀的時間一般是2-4周在急性感染的數(shù)天內(nèi)，出現(xiàn)高水平的病毒復制，血漿中可檢出107 /ml個病毒RNA分子。CD8+細胞數(shù)上升，伴有短暫的CD4+細胞計數(shù)下降。HIV抗體出現(xiàn)后，病毒血癥減輕，血漿中HIV RNA 的滴度下降，急性HIV感染的癥狀消失. 1、原發(fā)HIV感染期第十張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月通常4-12周發(fā)生HIV抗體陽轉(zhuǎn)。從HIV感染到產(chǎn)生抗體（或血請抗體陽轉(zhuǎn)）稱為“窗口期”，95%的HIV感染都發(fā)生在感染后的 5.8 個月內(nèi)，故一般認為窗口期為3個月；高度懷疑者可追蹤至6個月。“ HIV感染早期”定義：血清抗體陽轉(zhuǎn)和HIV感染6個月之

8、間的階段。6個月時病毒載量達到一個“固定值”，早期抗病毒治療可降至很低，如果不進行抗病毒治療，幾年內(nèi)不會有很大變化。此固定值和預(yù)后有很大關(guān)系。早期治療的目標之一是重新設(shè)定固定值，使固定值保持較低水平。第十一張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月病人無臨床癥狀，體檢時無異常，少數(shù)可查到“持續(xù)性全身性淋巴腺病”（PGL），腫大的淋巴結(jié)至少發(fā)生在兩處,且不是腹股溝淋巴結(jié)。細胞內(nèi)的病毒大部分處于潛伏狀態(tài)，所以淋巴結(jié)中病毒濃度很高。淋巴組織是病毒的主要藏身處，外周血中的病毒載量相對不高。2、無癥狀感染期(潛伏期)第十二張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月3、艾滋病前期（“ARC”或“B期”）

9、艾滋病前期癥狀包括被HIV感染后更常見更嚴重的癥狀（包括鵝口瘡、口腔毛狀黏膜白斑病、發(fā)熱、體重減輕等），但還不是艾滋病的典型癥狀。4、艾滋病期 當患者出現(xiàn)典型癥狀時，CD4+細胞計數(shù)通常降至200/ul以下，血和淋巴結(jié)中的HIV又上升到相當高的水平，同時抗病毒CD8+細胞反應(yīng)減弱。在艾滋病期病人血液中的HIV群體又一次變得相當均一，通常是細胞融合（S1）表型為主，與T細胞嗜性有關(guān)。第十三張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月四、HIV感染的三種臨床結(jié)局和長期存活 的相關(guān)因素： 1.典型進展者在感染早期，其免疫功能未受損害，但在810年內(nèi)免疫控制能力逐漸下降，最后發(fā)展成艾滋病。2.快速進展者

10、病程快速進展，CD4+細胞計數(shù)在2-5年內(nèi)迅速下降,抗HIV的抗體水平很低，而且該抗體中和HIV的能力也較差?？焖龠M展者最顯著的特征：HIV感染后一直維持較高的病毒載量，而且分離的HIV有均一性。第十四張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月3.長期存活者（又稱長期不進展者）這些感染者能維持健康狀態(tài)12年以上，并且CD4+細胞計數(shù)維持正常。長期存活者在感染者中的比例一般在810%，目前最長已達20多年。第十五張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月3、尿液HIV抗體檢測標本：除血液外還可用唾液檢測HIV（Orasure，如Salivacard），尿液檢測HIV 。1996年美國FDA首次批

11、準HIV-1尿檢EIA試劑，我國也正在研制。主要適用于靜脈注射毒品（IDUs）人群和其它高危人群的大面積流行病學調(diào)查。陽性標本仍需采血做確認試驗才能確定HIV抗體陽性。另外還有家庭用HIV檢測（Home Access System）。 第十六張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月樣品篩查檢測選用篩查試劑陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)復 測陰性報告原有試劑+另一種篩查試劑一陰一陽均陰性反應(yīng)均陽性反應(yīng)送確認陰性報告4、HIV抗體篩查的流程圖第十七張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月1、免疫印跡式驗（WB）： WB是將HIV病毒蛋白用SDS電泳，把分子量大小不等的蛋白帶分離開來，然后再把這些已經(jīng)分離的不

12、同蛋白帶電轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上。將此膜切割成條裝，每一條硝酸纖維膜上均含有經(jīng)電泳分離過的HIV病毒抗原。 待檢血清樣品1：100稀釋，加到放置硝酸纖維膜的槽內(nèi)，恒溫震蕩，充分接觸反應(yīng)。血清中抗-HIV抗體，與膜條上的抗原帶相結(jié)合。加入抗人-IgG酶結(jié)合物和底物后，即可使抗原-抗體結(jié)合帶呈現(xiàn)紫褐色。根據(jù)出現(xiàn)條帶情況判定結(jié)果。（二）HIV抗體確認試驗第十八張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 表3 不同國際組織HIV抗體免疫印跡（WB）試驗陽性結(jié)果判斷標準國際組織對HIV-1對HIV-2美國CDCgp41、gp120或gp160和P24中的任何兩條帶無美國FDAP24和P31，再加gp41或

13、gp120/gp160之中任意一條無世界衛(wèi)生組織（WHO）要有兩條Env帶，無論有無Gag或Pol帶（也可能存在）要有兩條Env帶，無論有無Gag帶或Pol帶逆轉(zhuǎn)錄病毒血清學標準委員會P24或P31中的一條，并有一條Env帶無美國紅十字會Gag、Pol和Env帶各有一條無德國Paul Ehrlich研究院有兩條帶，其中一條必須是Env帶無第十九張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月我國判定標準：（1）HIV-1抗體陽性（+）有下列任何一項者，即可確認：至少有二條env帶（gp41和gp160或gp120）出現(xiàn)，gp41和gp160，或gp41和gp120，或gp41和gp160/gp120

14、。至少有一條env帶和p24帶同時出現(xiàn)。（2）HIV-2抗體血清學陽性反應(yīng)（+） 符合WHO標準（有二條env帶，有或無gag帶），符合試劑盒標準，方可判為血清學陽性反應(yīng)。（3）HIV抗體陰性（-）無HIV抗體特異帶出現(xiàn)，或僅有p17。（4）HIV抗體不確定（）：出現(xiàn)HIV特異性抗體帶，但帶型不足以確認陽性者。 第二十張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月2、免疫熒光試驗（IFA） 將HIV感染的淋巴細胞涂于玻片上，經(jīng)固定后即為試驗用抗原片。待檢血清中的抗-HIV抗體與抗原結(jié)合后再與熒光素標記的抗人免疫球蛋白結(jié)合，在熒光顯微鏡下可見到含草綠色熒光的細胞和多核巨細胞（胞漿熒光）。目前國內(nèi)尚無

15、商品化產(chǎn)品，僅在少數(shù)有條件的實驗室使用。第二十一張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）孕期 孕期產(chǎn)前檢查：應(yīng)在知情同意的情況下常規(guī)做HIV抗體篩查試驗。最好選擇ELISA方法（無條件地區(qū)可用快速檢測）篩查。二、HIV檢測方法的選擇第二十二張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月圖3 孕產(chǎn)期保健服務(wù)流程（適用于有充分的時間進行復測和確認試驗者） 對產(chǎn)前檢查的孕婦進行預(yù)防艾滋病母嬰傳播咨詢，獲得知情同意，采集樣本HIV抗體篩查試驗第1種篩查試劑（高敏感性）陽性 陰性第2種篩查試劑（高特異性）陽性 陰性第3種篩查試劑（高特異性）不確定 陽性 陰性提供疑似陽性咨詢，建議做確認試驗確認試驗提

16、供咨詢隨訪，建議3個月后再次做確認試驗出具“HIV抗體陽性”報告提供咨詢、指導、隨訪出具“HIV抗體陰性”報告提供咨詢、指導、常規(guī)孕期保健第二十三張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）產(chǎn)時 孕期未接受HIV抗體檢測的產(chǎn)婦： 首先應(yīng)進行咨詢，取得知情同意以后，可同時用兩種不同的快速檢測試劑進行HIV抗體篩查試驗。 根據(jù)檢測結(jié)果給予不同的咨詢和干預(yù)。若產(chǎn)婦已臨產(chǎn)，且只能用一種快速檢測試劑檢測，結(jié)果陽性，即視為HIV抗體陽性處理。第二十四張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月圖4 產(chǎn)時保健服務(wù)流程（適用于沒有充分的時間進行復測和確認試驗者）對產(chǎn)前未接受HIV抗體檢測的即將/或臨產(chǎn)產(chǎn)婦進

17、行預(yù)防艾滋病母嬰傳播咨詢，獲得知情同意，采集樣本同時用兩種不同的快速檢測試劑進行HIV抗體篩查試驗若產(chǎn)婦已臨產(chǎn)，且只能用一種快速試劑檢測，結(jié)果陽性，即視為HIV抗體陽性處理檢測后咨詢，解釋結(jié)果檢測后咨詢，知情同意選擇干預(yù)措施正常分娩正常分娩產(chǎn)后進行HIV確認試驗產(chǎn)后暫時無法進行確認試驗時第二十五張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）產(chǎn)后 篩查試驗陽性的產(chǎn)婦在產(chǎn)后要進行HIV確認試驗。根據(jù)檢測結(jié)果再進行咨詢和干預(yù)。（四）嬰兒檢測 嬰兒應(yīng)于12個月進行HIV抗體檢測，結(jié)果陰性則排除感染，納入正常兒童保??；陽性者繼續(xù)追蹤隨訪，至18個月再次進行HIV抗體檢測，結(jié)果陰性排除感染，納入正常兒童

18、保?。魂栃詪雰恨D(zhuǎn)入當?shù)匕滩【C合防治系統(tǒng)。 為配合治療，嬰兒HIV感染的早期診斷也可以采用核酸檢測。目前以2次核酸檢測結(jié)果作為診斷的依據(jù)，2次不同時間的樣本核酸檢測均為陰性診斷未感染，2次不同時間的樣本核酸檢測均為陽性診斷為HIV感染。至18個月仍要進行HIV抗體檢測加以確認。 第二十六張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月圖5 嬰兒檢測和隨訪服務(wù)流程如下：對艾滋病病毒感染的產(chǎn)婦進行預(yù)防艾滋病母嬰傳播咨詢，指導喂養(yǎng)，常規(guī)兒童保健嬰兒12個月進行HIV抗體篩查*試驗 陰性 陽性用另一種篩查*試劑再次檢測 陰性 陽性排除兒童感染常規(guī)兒童保健18個月時再進行HIV抗體篩查*試驗 用另一種篩查*試劑再次檢測 確認試驗 陰性 陰性 陰性 陰性 陽性 第二十七張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月從事快速HIV檢測單位必須遵守有關(guān)部門批準購買有效的試劑從事檢測人員經(jīng)過培訓，有上崗證按規(guī)定對象檢測嚴格按廠家說明書操作滿足質(zhì)量保證要求做好檢測前后咨詢第二十八張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）實驗室 1.艾滋病檢測工作必須在經(jīng)批準的艾滋病實驗室內(nèi)進行。未設(shè)置艾滋病實驗室的機構(gòu)或單位及未經(jīng)備