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1、腦脊液常規(guī)檢查及注意事項(xiàng)王永春,畢經(jīng)麗(山東省濰坊市腦科醫(yī)院檢驗(yàn)科 261021【關(guān)鍵詞】腦脊液;蛋白定性;細(xì)胞計(jì)數(shù)DOI:lO.3969/j.issn.16729455.2010.21.080中圈分類號(hào):R446.14文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B文章編號(hào):16729455(2010212428-02腦脊液常規(guī)檢查包括一般性狀檢查、蛋白定性、細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞分類、蛋白質(zhì)定量、葡萄糖定量測(cè)定、氯化物定量測(cè)定、微 生物學(xué)檢查、細(xì)胞學(xué)檢查等1。 腦脊液常規(guī)檢查是多種中樞神 經(jīng)系統(tǒng)疾病診斷、治療、病情衍變等方面不可缺少 的監(jiān)測(cè)項(xiàng)目,且其采集方法有一定困難,操作繁瑣,易受主觀因素影響。做 好腦脊液 檢壹的質(zhì)量控制,提高
2、實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性、可靠性、精密度具有重要意義,現(xiàn)總結(jié)如下。1標(biāo)本收集和處理用帶蓋無菌管收集3管腦脊液,第1管做細(xì)菌培養(yǎng),第2管做化學(xué)檢查和免疫學(xué) 檢查,第3管做一般性狀檢查和細(xì)胞學(xué) 檢查。標(biāo)本采集后要立即送檢,一般不超過 1ho放置過久,性質(zhì)發(fā)生改變,影響檢驗(yàn)結(jié)果。2一般性狀檢查標(biāo)本為血性常由于穿刺損傷(新鮮出血或蛛網(wǎng)膜下腔 出血(陳舊性出血引起, 二者鑒別結(jié)果見表1。表1穿刺損傷和蛛網(wǎng)膜下腔出血鑒別蛛網(wǎng)膜下腔的陳舊性出血紅細(xì)胞破壞、溶解,出血4 8h即出現(xiàn)紅色。蛛網(wǎng) 膜下腔梗阻由于腦脊液長(zhǎng)期滯留,當(dāng)?shù)鞍缀砍^去1.5g/L時(shí),顏色變黃,其黃色程 度與蛋白含量 成正比。當(dāng)?shù)鞍缀窟_(dá)到3050g/
3、L時(shí),腦脊液可自凝而呈 黃色膠凍 狀。腦脊液膽紅素濃度超過8.5/tmol/L時(shí)即可被黃 染。穿刺出血 腦脊液中有紅細(xì)胞,可引起微濁。白細(xì)胞數(shù) 如超過300X06/1,可 變?yōu)闇啙?。?jì)數(shù)、分類因穿刺損傷血管引起血性腦脊液,白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果必須 校正。其校正方 法:(1可以以紅細(xì)胞和自細(xì)胞之比(700:1的關(guān)系估計(jì)自細(xì)胞;(2通過外周血紅細(xì)胞及 自細(xì)胞和腦脊液中 紅細(xì)胞數(shù)計(jì)算出從血液中帶人腦脊液中的白細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)注意新型隱球菌與白細(xì)胞、紅細(xì)胞區(qū)別,新型隱球菌不溶于乙酸 加優(yōu)質(zhì)墨汁后可見不著色莢膜。白細(xì)胞也不溶于乙酸,加酸后白細(xì)胞核和胞質(zhì)更加 明顯-紅細(xì)胞加乙酸溶解。白細(xì)胞計(jì)數(shù)試管或吸管中的冰
4、乙酸要盡量去盡,否則結(jié)果偏低。若標(biāo)本陳舊。細(xì)胞變形時(shí),白細(xì)胞直接分類法誤差太大,推薦用涂片染色分 類計(jì)數(shù)法,收集細(xì)胞時(shí)離心速度不能太快,否則細(xì)胞形態(tài)受影響,涂片固定時(shí)間不能太 長(zhǎng),更不能高溫固 定,以免細(xì)胞皺縮。利用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定腦脊液細(xì)胞敦時(shí),因全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定 的對(duì)象主要是全血,其最適測(cè)定范圍是全 血細(xì)胞數(shù)量的范圍,腦脊液中細(xì)胞數(shù)量一般 會(huì)少于血液,因此會(huì)產(chǎn)生一定的誤差。具備了對(duì)微量標(biāo)本測(cè)定的全自動(dòng)m細(xì)胞分析儀,具有測(cè)定全血的功能,極大地拓寬了線性范圍,利用此功能對(duì)腦脊液進(jìn)行測(cè)定后除 以其稀釋倍數(shù),從而得到腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類較準(zhǔn)確的結(jié)果。4細(xì)胞學(xué)檢查腦脊液細(xì)胞學(xué)發(fā)現(xiàn)瘤細(xì)胞通
5、常有確診價(jià)值,其中中樞神 經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)月中瘤較 少,80%左右為腦和腦膜的白血病浸潤(rùn)或其 他癌、瘤轉(zhuǎn)移口 。自血病細(xì)胞和其他月中 瘤細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞總數(shù)增多,胞體形態(tài)與大小不一,胞核增大,核仁大而增多,核漿比 例失調(diào),細(xì)胞分裂像增多等。腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查可為中樞神經(jīng)系統(tǒng)月中瘤的診斷、療效評(píng)估和復(fù)發(fā)預(yù)報(bào)等提供可靠的形態(tài)學(xué)依據(jù)。細(xì)菌性腦膜炎和腦炎的病理過程大致分為相繼的滲出、增殖、修復(fù)和變性4個(gè)期。腦脊液白細(xì)胞的數(shù)量及種類隨病變過程可有不同變化,在摻出期增高的細(xì) 胞常以嗜中性粒細(xì)胞為主(可達(dá)90%或更高,如炎性反應(yīng)繼續(xù)發(fā)展,進(jìn)而演變成膿細(xì) 胞;在炎性反應(yīng)增殖期,經(jīng)抗生素的有效治療后,細(xì)胞總數(shù)特別是嗜中性
6、粒細(xì)胞下降, 此時(shí)單核細(xì)胞明顯增多,并常見巨噬細(xì) 胞;病情進(jìn)入修復(fù)期時(shí)。嗜中性粒細(xì)胞漸趨消 失;巨噬細(xì)胞明顯 減少,而淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞相對(duì)增多。病毒性、結(jié)核性或真菌 性 腦膜炎和腦炎的腦脊液多數(shù)自細(xì)胞總數(shù)沒有明顯增高趨勢(shì),細(xì)胞學(xué)特點(diǎn)多以淋巴細(xì)胞增多為主,少數(shù)隨病情變化或并發(fā)癥出現(xiàn)而白細(xì)胞可呈現(xiàn)不同種類的增多。5微生物學(xué)檢查腦脊液中找到結(jié)核桿菌是診斷結(jié)核性腦膜炎(tbm的直接依據(jù)。各種文獻(xiàn)報(bào)道 差異較大,一般認(rèn)為涂片陽性率小于10%,培養(yǎng)陽性率為10%40%。Jordan jimenez 等3報(bào)道zhielnielsen涂片陽性率為3.5%,培養(yǎng)陽性率為32.o%。取 足量腦脊液高 速離心后取沉
7、渣以及腦脊液靜置 24h后取纖維 蛋白膜涂片可提高檢出率。張茉莉 等”報(bào)道采用離心集菌甩涂片法檢測(cè)tbm患者腦脊液抗酸桿菌的敏感性可達(dá) 66.4%, 特異性為100.o oAo真菌性腦膜炎以新型隱球菌感染最常見,經(jīng)優(yōu)質(zhì)墨汁染色???發(fā)現(xiàn)大小不、芽抱狀的圓形新型隱。球菌。6化學(xué)檢查潘氏試驗(yàn)所需標(biāo)本量少,靈敏度高,試劑易得,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果易于觀察,其沉淀 多少與蛋白質(zhì)含量成正比,部分正常腦 脊液亦可出現(xiàn)極弱陽性結(jié)果,當(dāng)?shù)鞍锥繛?250mg/L對(duì)即出現(xiàn)一個(gè)(+(醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)。苯酚試劑不純可引起假陽性,室溫萬方數(shù)據(jù)鱉醫(yī)學(xué)與臨床2010年11月第!查箜;!塑!,ab Med Clin,November
8、2010,!叢! 墮!:型? 2429?低于10c苯酚飽和度降低可引起假陰性。尿分析儀法檢測(cè)蛋白質(zhì)其靈敏度為300mg/L,且只對(duì)清蛋白敏感,對(duì)球蛋白不敏 感j o在腦脊7檢測(cè)中,球蛋白檢測(cè)意義 更大,因?yàn)楫?dāng)有腦組 織和腦膜疾病時(shí),大多伴有球蛋白增高,且尿分析儀并不能客 觀 地反映出來,而且尿分析儀結(jié)果的級(jí)差范圍較大,與潘氏試 驗(yàn)判定結(jié)果的分級(jí)也不能 完全吻合。因此認(rèn)為腦脊液蛋白質(zhì) 的檢測(cè)不宣使用尿分析儀。腦脊液中蛋白含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于血清蛋白含量,正常值為0.1t0.45g/L,且既有清蛋 白又有球蛋白?!比詣?dòng)生化分 析儀測(cè)定總蛋白方法股為雙縮月尿法,敏感度不夠, 最適測(cè)定 范圍為10120g/
9、L,因此不能用來對(duì)腦脊液蛋白進(jìn)行定量測(cè) 定,可選用針對(duì) 腦脊液和尿液低蛋白測(cè)定的專用試劑盒。腦脊液葡萄糖含量低于血清正常值,為5.0mmol/L,相當(dāng)于 血清的60%,在全自動(dòng)生化分析儀葡萄糖測(cè)定線性范圍內(nèi),可 對(duì)其準(zhǔn)確測(cè)定。但在病理狀態(tài)特別是中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)菌性感染時(shí),腦脊液中葡萄糖含量明顯降低,儀器測(cè)定結(jié)果重復(fù)性差,此時(shí)需根據(jù)腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)、蛋白測(cè)定結(jié)果 和臨床診斷對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證。用于化學(xué)法測(cè)定只能在(一(+之間診斷能力較差。氯 離子含量約為血清含量的1.21.3倍,正常范圍在110130mmol/L之間,測(cè)定時(shí)腦脊 液的基質(zhì)效應(yīng)與血清差異較大,要獲取準(zhǔn)確測(cè)定結(jié)果,可用去離子水對(duì)腦脊液一定倍
10、數(shù)(1.5倍左右稀釋進(jìn)行測(cè)定。7結(jié)果可靠性檢查及分析腦脊液常規(guī)檢查各項(xiàng)結(jié)果之間有一定相關(guān)性,每一種疾病造成腦脊液改變都不 是某個(gè)單一指標(biāo)的改變,而是系統(tǒng)的全局 變化。當(dāng)細(xì)胞分類以單個(gè)核細(xì)胞為主時(shí),多 為病毒性感染或慢性感染,細(xì)胞計(jì)數(shù)一般較高,外觀正?;蛏晕啙?,葡萄糖降低不 明顯,蛋白增高不顯著61*細(xì)胞分類以多核細(xì)胞為主時(shí),多為細(xì)菌性感染,細(xì)胞計(jì)數(shù) 明顯增高,外觀渾濁,葡萄糖降低明 顯,蛋白增高明顯等。腦脊液的測(cè)定結(jié)果不能前后 矛盾,要與患者的臨床表現(xiàn)相結(jié)合,是符合疾病的病理過程的?有價(jià)值的,可以進(jìn)行 合理解釋的結(jié)果。參考文獻(xiàn)13羅春麗.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)I-M.2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,200
11、3:188-198.2粟秀初,孔凡元.實(shí)用腦脊液細(xì)胞學(xué)圖譜M.2版.北京:人民軍醫(yī)出版 社,1996:81-88.3Jordan jimenez A,tagarro gareia A,Baquero artigao F,et al.tuberculous meningitis:a review of 27yearsJ.An Pediatr,2005,62(3:215-220.4張茉莉,韋小民,薛承巖.離心集菌甩片法提高腦脊液抗 酸桿菌的檢出率口 .檢 驗(yàn)醫(yī)學(xué),2006,21(2:175-177. 5張顯達(dá),趙玉德.自動(dòng)分析儀檢測(cè)腦脊液常規(guī)的評(píng)價(jià)J. 中華現(xiàn)代內(nèi)科學(xué)雜志,2006,3(I:81.
12、6李琳周炳華,劉志華利用全自動(dòng)分析僅測(cè)定腦脊液常 規(guī)的注意事項(xiàng)J.中國(guó) 誤診學(xué)雜志,2008,8(28:6894- 6895.(收稿日期:2010-06-08AVE - 763C型尿液沉渣分析儀的維護(hù)及常見故障排除袁先武,崔進(jìn),冉奕何仕飲,譙兆剛,田洪淑,楊鳳娟,黎小琴(貴州省沿河縣人民醫(yī) 院檢驗(yàn)科565300【關(guān)鍵詞】AVE-763C型尿液沉渣分析儀;常見故障;維護(hù)DOI:10.3969/j.issn.1672 9455.2010.21.081中圖分類號(hào):R446文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B文章編號(hào):16729455(2010212429 021隨著全自動(dòng)尿液分析儀在臨床尿液檢驗(yàn)中的普遍應(yīng)用,不僅提高了檢
13、驗(yàn)科的工作效率,減輕了工作人員的勞動(dòng)強(qiáng)度,而且使檢驗(yàn)結(jié)果快速化、報(bào)告更加標(biāo)準(zhǔn)化。 AVE-763C型尿液沉渣分析儀是湖南愛威公司生產(chǎn)的,具有強(qiáng)大的軟件功能系統(tǒng),其 分析原理為機(jī)器視覺(自動(dòng)顯微鏡和數(shù)碼圖像采集配合,采用計(jì)算機(jī)和圖片處理識(shí)別 軟件,能自動(dòng)跟蹤、識(shí)別和分類尿液中的有形成分1。操作簡(jiǎn)便,可對(duì)標(biāo)本進(jìn)行多次重復(fù)檢測(cè),其重復(fù)性和穩(wěn)定性較好,是檢驗(yàn)科的好幫手。在實(shí)際工作中,儀器的日常 維護(hù)保養(yǎng)、故障排除及確保儀器正常運(yùn)行也是工作中的重要環(huán)節(jié),否則給檢驗(yàn)工作帶來諸多不便2?,F(xiàn)就本科室使 用AVE-763C型尿液沉渣分析儀談?wù)勂淙粘2?作中維護(hù)保養(yǎng)和常見故障排出的體會(huì)。1儀器安裝環(huán)境AVE-76
14、3C型尿液沉渣分析儀通常與尿液千化學(xué)分析儀聯(lián)機(jī)形成一套完整的 分析系統(tǒng)。適合于安裝在清潔無塵的固定工作臺(tái)上,室內(nèi)環(huán)境溫度可在540C,相對(duì)濕度在30% 70%的環(huán)境,并配備不問斷電源以隨時(shí)確保穩(wěn)定電源。為了儀 器正 常使用,不受干擾及人身安全,儀器應(yīng)線路專用,并連接有效地線,遠(yuǎn)離強(qiáng)電磁場(chǎng)、震 動(dòng)干擾源,避免陽光直接照射。2加強(qiáng)尿液沉渣分析儀的管理建立儀器操作崩前培訓(xùn)檔案儀器安裝好后,由工程師對(duì)操作人員進(jìn)行崗前知 識(shí)培訓(xùn)和儀器操作培訓(xùn),并掌握儀器常規(guī)操作程序和一些簡(jiǎn)單的故障排除,并記錄檔 案。非培訓(xùn)人員 不得進(jìn)行儀器操作。儀器專管科室指定1名業(yè)務(wù)素質(zhì)亮、責(zé)任心強(qiáng)能對(duì)儀器結(jié)構(gòu)和工作原理熟 悉的專業(yè)人員負(fù)責(zé)儀器管理和維護(hù),以便工作中發(fā)現(xiàn)儀器故障時(shí)能盡早解決。試劑配套該儀器試劑專用,不能隨意購(gòu)買其他廠家的試劑,否則儀器不予認(rèn) 可,造成些不必要的麻煩而影響實(shí)驗(yàn) 室的正常工作。建立儀器操作規(guī)程和維護(hù)手冊(cè)工作人員嚴(yán)格按操作規(guī)程處理標(biāo)本,遇到問題立即請(qǐng)示專管人員,記錄請(qǐng)示事由和故障原因,
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