質(zhì)粒DNA的提取與純化實(shí)驗(yàn)教案

1、學(xué)習(xí)必備歡迎下載1、質(zhì)粒DNA的提取與純化實(shí)驗(yàn)教案授課題目：質(zhì)粒DNA的提取與純化授課對(duì)象：四年制生物技術(shù)本科生授課時(shí)間：2007年3月20/27日13：00至2007年3月20/27日18：00授課教師：劉清岱教學(xué)目標(biāo)及基本要求1、通過本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)和掌握堿裂解法提取質(zhì)粒DNA。2、初步了解DNA純化的原理。教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配1、質(zhì)粒DNA的概念及其在分子生物學(xué)的應(yīng)用。30分鐘2、堿裂解法提取質(zhì)粒DNA的原理。20分鐘3、DNA純化與保存的方法。20分鐘4、分子生物學(xué)儀器的使用方法。30分鐘5、實(shí)驗(yàn)條件及步驟。30分鐘6、質(zhì)粒DNA的提取。60分鐘7、質(zhì)粒DNA的純化。60分鐘8、質(zhì)粒DNA

2、的保存。30分鐘9、總結(jié)20分鐘教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn)1、堿裂解法提取、純化質(zhì)粒DNA的實(shí)驗(yàn)方法。2、質(zhì)粒DNA的性質(zhì)與應(yīng)用。3、分子生物學(xué)基本操作。教學(xué)方法：結(jié)合理論實(shí)際，抽象知識(shí)內(nèi)容用多媒體表示，實(shí)驗(yàn)操作過程給于示教。教學(xué)手段：觀看堿裂解法提取質(zhì)粒DNA的教學(xué)錄相，同時(shí)采用畫圖，示范教學(xué)的方法。使用的教材及參考資料：生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和技術(shù)，袁道強(qiáng)，黃建華等編著，中國輕工業(yè)出版社，2006分子克隆實(shí)驗(yàn)指南第三版（上、下冊(cè)），原著：美J.薩姆布魯克D.W.拉塞爾，科學(xué)出版社，2002精編分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指南，F(xiàn).M.奧斯伯等編著，科學(xué)出版社，2005教研室主任意見：年月日本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果

3、、存在的問題、改進(jìn)措施等）：1、具體實(shí)驗(yàn)操作步驟較多，應(yīng)讓學(xué)生提前預(yù)習(xí)，并書寫預(yù)習(xí)報(bào)告。2、觀看堿裂解法提取質(zhì)粒DNA的教學(xué)錄相更加直觀了解實(shí)驗(yàn)原理和方法。3、應(yīng)該強(qiáng)化學(xué)生分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作基本技術(shù)。4、著重強(qiáng)調(diào)堿法提取質(zhì)粒DNA操作過程中應(yīng)注意的一些問題。學(xué)習(xí)必備歡迎下載2、質(zhì)粒DNA的酶切與電泳檢測實(shí)驗(yàn)教案授課題目：質(zhì)粒DNA的酶切與電泳檢測授課對(duì)象：四年制生物技術(shù)本科生授課時(shí)間：2007年4月3/10日13：00至2007年4月3/10日18：00授課教師：劉清岱教學(xué)目標(biāo)及基本要求1、通過本部分實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)質(zhì)粒DNA的限制性內(nèi)切酶酶切分析。2、初步了解如何建立雙酶切的實(shí)驗(yàn)體系。3、掌握電泳儀

4、、凝膠成像系統(tǒng)等設(shè)備的使用。教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配1、限制性內(nèi)切酶的概述及其在分子生物學(xué)的應(yīng)用。30分鐘2、瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA的原理。10分鐘3、不同質(zhì)粒DNA電泳現(xiàn)象20分鐘4、實(shí)驗(yàn)條件及步驟。30分鐘5、瓊脂糖電泳相關(guān)儀器的使用方法。30分鐘6、質(zhì)粒DNA的酶切。60分鐘7、瓊脂糖凝膠電泳與染色。90分鐘8、凝膠成像系統(tǒng)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。30分鐘教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn)1、限制性內(nèi)切酶的性質(zhì)和雙酶切體系的建立。2、應(yīng)用瓊脂糖凝膠電泳分析質(zhì)粒DNA的電泳行為。教學(xué)方法：討論式教學(xué)，充分發(fā)揮學(xué)生的主體作用，引導(dǎo)學(xué)生去思考、去探索、去發(fā)現(xiàn)，要鼓勵(lì)學(xué)生大膽提出問題。教學(xué)手段：通過質(zhì)粒DNA酶切的電泳圖片，

5、板書限制性內(nèi)切酶的識(shí)別序列，同時(shí)采用示范教學(xué)的方法。使用的教材及參考資料：生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和技術(shù)，袁道強(qiáng)，黃建華等編著，中國輕工業(yè)出版社，2006分子生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)，徐克前等編著，人民衛(wèi)生出版社，2003精編分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指南，F(xiàn).M.奧斯伯等編著，科學(xué)出版社，2005教研室主任意見：年月日本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在的問題、改進(jìn)措施等）：1、介紹分子生物學(xué)工具酶在基因工程中的應(yīng)用，增加學(xué)生興趣。2、對(duì)于凝膠成像系統(tǒng)等設(shè)備應(yīng)該讓學(xué)生們多接觸，使其能夠獨(dú)立操作，并對(duì)其結(jié)果進(jìn)行分析。學(xué)習(xí)必備歡迎下載3、植物基因組DNA的提取和純度鑒定實(shí)驗(yàn)教案授課題目：植物基因組DNA的提取和純度鑒定授課

6、對(duì)象：四年制生物技術(shù)本科生授課時(shí)間：2007年4月17/24日13：00至2007年4月17/24日18：00授課教師：劉常金教學(xué)目標(biāo)及基本要求1、掌握提取真核細(xì)胞基因組DNA的一種基本方法。2、學(xué)習(xí)使用紫外線分光法計(jì)算DNA的含量和純度。教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配1、真核細(xì)胞基因組DNA提取的原理。30分鐘2、紫外線分光法測定DNA的含量和純度。30分鐘3、紫外線分光光度計(jì)的使用方法。20分鐘5、實(shí)驗(yàn)條件及步驟。30分鐘6、植物材料丙酮粉的制備。60分鐘7、基因組DNA的提取。60分鐘8、產(chǎn)品濃度及純度測定。30分鐘9、總結(jié)30分鐘教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn)1、真核細(xì)胞基因組DNA提取的實(shí)驗(yàn)方法。2、DNA

7、濃度及純度的計(jì)算方法。教學(xué)方法：結(jié)合理論實(shí)際，深入淺出。實(shí)驗(yàn)操作過程給于示教。教學(xué)手段：采用畫圖，示范教學(xué)的方法。使用的教材及參考資料：生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和技術(shù)，袁道強(qiáng)，黃建華等編著，中國輕工業(yè)出版社，2006分子克隆實(shí)驗(yàn)指南第三版（上、下冊(cè)），原著：美J.薩姆布魯克D.W.拉塞爾，科學(xué)出版社，2002精編分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指南，F(xiàn).M.奧斯伯等編著，科學(xué)出版社，2005教研室主任意見：年月日本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在的問題、改進(jìn)措施等）：1、真核細(xì)胞基因組DNA提取步驟較多，應(yīng)讓學(xué)生提前預(yù)習(xí)并書寫預(yù)習(xí)報(bào)告。2、使用紫外線分光光度計(jì)，正確計(jì)算DNA的濃度和純度對(duì)于分子生物學(xué)非常關(guān)鍵。學(xué)習(xí)

8、必備歡迎下載4、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)教案授課題目：大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化授課對(duì)象：四年制生物技術(shù)本科生授課時(shí)間：2007年5月8/15日13：00至2007年5月8/15日18：00授課教師：李靜教學(xué)目標(biāo)及基本要求1、通過本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)PCR反應(yīng)的基本原理與實(shí)驗(yàn)技術(shù)。2、初步了解PCR引物的設(shè)計(jì)與相關(guān)軟件的使用。教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配1、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）的原理。20分鐘2、PCR在分子生物學(xué)與醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用。30分鐘3、如何建立一個(gè)PCR反應(yīng)體系。30分鐘4、PCR引物的設(shè)計(jì)與相關(guān)軟件的使用。30分鐘5、基因擴(kuò)增儀的使用方法。30分鐘6、PCR實(shí)驗(yàn)操作。90分鐘7

9、、PCR結(jié)果的電泳檢測。90分鐘8、總結(jié)10分鐘教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn)1、PCR反應(yīng)體系的原理與優(yōu)化。1、PCR引物設(shè)計(jì)的原則與PCR相關(guān)軟件的使用。教學(xué)方法：推演性教學(xué)，介紹簡單的模式。抽象知識(shí)內(nèi)容多媒體表示，具體實(shí)驗(yàn)操作過程給于示教。教學(xué)手段：觀看聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的課件，同時(shí)采用電腦示范Primer5.0軟件來設(shè)計(jì)PCR引物。使用的教材及參考資料：生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和技術(shù)，袁道強(qiáng)，黃建華等編著，中國輕工業(yè)出版社，2006PCR技術(shù)實(shí)驗(yàn)指南，迪芬巴赫，德弗克斯勒等編著，化工出版社，2006PCR最新技術(shù)原理、方法及應(yīng)用，黃留玉等編著，化工出版社，2005教研室主任意見：年月日本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、

10、效果、存在的問題、改進(jìn)措施等）：1、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容結(jié)合理論內(nèi)容進(jìn)行講述，效果較好。2、分子生物學(xué)軟件的使用應(yīng)該詳細(xì)講解，使學(xué)生能夠使用來初步設(shè)計(jì)、分析PCR引物。學(xué)習(xí)必備歡迎下載5、DNA體外重組實(shí)驗(yàn)教案授課題目：DNA體外重組授課對(duì)象：四年制生物技術(shù)本科生授課時(shí)間：2007年5月22/29日13：00至2007年5月22/29日18：00授課教師：劉常金教學(xué)目標(biāo)及基本要求1、通過本部分實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)重組質(zhì)粒的連接、轉(zhuǎn)化及篩選的原理與方法。2、初步了解外源DNA片段和質(zhì)粒載體的連接反應(yīng)策略。教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配1、概述質(zhì)粒的連接、轉(zhuǎn)化及篩選的原理。30分鐘2、幾種連接反應(yīng)策略。40分鐘3、實(shí)驗(yàn)條件及步驟

11、。30分鐘4、質(zhì)粒DNA的制備。60分鐘5、外源DNA的制備。60分鐘6、DNA的體外重組。60分鐘7、總結(jié)20分鐘教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn)質(zhì)粒的連接、轉(zhuǎn)化及篩選的原理。教學(xué)方法：討論式教學(xué)，抽象知識(shí)內(nèi)容多媒體表示，實(shí)驗(yàn)操作過程給于示教。教學(xué)手段：觀看基因克隆的教學(xué)課件，同時(shí)采用畫圖，示范教學(xué)的方法。使用的教材及參考資料：生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和技術(shù)，袁道強(qiáng)，黃建華等編著，中國輕工業(yè)出版社，2006分子克隆實(shí)驗(yàn)指南第三版（上、下冊(cè)），原著：美J.薩姆布魯克D.W.拉塞爾，科學(xué)出版社，2002精編分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指南，F(xiàn).M.奧斯伯等編著，科學(xué)出版社，2005教研室主任意見：年月日本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果

12、、存在的問題、改進(jìn)措施等）：1、本實(shí)驗(yàn)較抽象，多媒體教學(xué)尤為重要。2、應(yīng)該介紹前后的實(shí)驗(yàn)之間的聯(lián)系，使幾個(gè)實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí)成為一個(gè)整體。3、強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)基本操作規(guī)范，讓學(xué)生養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，具有扎實(shí)的實(shí)驗(yàn)技能。學(xué)習(xí)必備歡迎下載6、大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)教案授課題目：大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化授課對(duì)象：四年制生物技術(shù)本科生授課時(shí)間：2007年6月4/11日13：00至2007年6月4/11日18：00授課教師：劉常金教學(xué)目標(biāo)及基本要求1、學(xué)習(xí)和掌握大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備技術(shù)。2、能夠計(jì)算轉(zhuǎn)化率。3、了解其他的轉(zhuǎn)化方法與篩選體系。教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配1、大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞制備的原理。30分鐘2、計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，影響轉(zhuǎn)化效率的因素。30分鐘3、介紹轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選。20分鐘4、-70冰箱等儀器的使用方法。30分鐘5、實(shí)驗(yàn)條件及步驟。30分鐘6、大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備。60分鐘7、質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至大腸桿菌。60分鐘8、轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選。30分鐘9、總結(jié)10分鐘教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn)1、CaCl2法制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的原理。2、如何正確計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，如何提高轉(zhuǎn)化效率。教學(xué)方法：推演性教學(xué)，介紹簡單的計(jì)算模式。實(shí)驗(yàn)操作過程給于示教。教學(xué)手段：采用板書計(jì)算轉(zhuǎn)化效率的方法，同時(shí)結(jié)合課件進(jìn)行講述。使用的教材及參考資料：生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和技術(shù)，袁道強(qiáng)，黃建華等編著，中國