PCR室內(nèi)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1、PCR室內(nèi)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)操作程序1目的：隨時(shí)了解并控制實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的精密度變化。2適用范圍：核酸擴(kuò)增熒光定量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。3負(fù)責(zé)人：1 操作人：1 1 1 4程序：41血清質(zhì)量控制品制備及操作411質(zhì)控品制備：收集本室檢測(cè)的臨床樣本，HBV DNA定量為106copies/ml的樣本混勻，并分裝于0.5ml的離心管中，每支110l，編號(hào)后（如Qb0201-n），-20保存。412 操作：每次檢測(cè)過程中將此分裝的室內(nèi)質(zhì)控品與樣本同時(shí)檢測(cè)，記錄此標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果；計(jì)算前10次檢測(cè)結(jié)果的平均值作為本批質(zhì)控品的靶值。413如果使用商品化的質(zhì)控品，按4要求執(zhí)行。42 室內(nèi)質(zhì)控圖的使用方法421 描點(diǎn)a） 圖中線

2、為靶線，2s為警告線，3s為失控線。對(duì)于同一批號(hào)的質(zhì)控血清不論使用幾個(gè)月，其空?qǐng)D均不變化。只要將圖紙上方“起止日期”項(xiàng)填入每個(gè)月的實(shí)際起止日期即可。b） 每天將該批號(hào)質(zhì)控血清按有關(guān)規(guī)定程序復(fù)融隨同病人的標(biāo)本同時(shí)檢測(cè)。將日期、檢測(cè)結(jié)果和操作者如實(shí)記錄在圖下方的相應(yīng)位置，并按前面的方法畫出圖上的對(duì)應(yīng)點(diǎn)，用直線將該點(diǎn)與前一天的點(diǎn)連接。c）月底計(jì)算當(dāng)月全部質(zhì)控血清檢測(cè)結(jié)果的、s和CV，并進(jìn)行圖形分析和小結(jié)，將質(zhì)量控制圖存入質(zhì)控資料檔案。422 圖形分析a）如果在3s線以外，則為失控，應(yīng)立即報(bào)告有關(guān)負(fù)責(zé)人，迅速查找原因。必要時(shí)復(fù)測(cè)標(biāo)本，然后方可發(fā)出報(bào)告，并將失控情況、查找過程及處理結(jié)果等詳細(xì)記錄。b）如

3、果在2s線以外，或出現(xiàn)連續(xù)6點(diǎn)以上在一側(cè)等規(guī)律變化，均應(yīng)即使向有關(guān)負(fù)責(zé)人反映，并積極查找原因。但當(dāng)天的檢驗(yàn)結(jié)果一般可以發(fā)出。423 通過觀察圖形的規(guī)律性變化進(jìn)行誤差分析，消除誤差來(lái)源a）曲線漂移：提示有系統(tǒng)誤差，準(zhǔn)確度發(fā)生了一次性的向上或向下改變。這種變化往往是由于一個(gè)新的情況引起的。如更換不同批號(hào)試劑，啟用新批號(hào)的質(zhì)控血清、操作人員的變換等。在找原因時(shí)，應(yīng)重點(diǎn)注意“漂移”前后發(fā)生了那些變動(dòng)的因素。b）趨勢(shì)性變化：向下或向上的趨勢(shì)性變化表明檢測(cè)的準(zhǔn)確度發(fā)生了漸漸地變化。這種變化往往是由于一個(gè)逐漸改變的因素造成的。如質(zhì)控血清的降解，試劑效價(jià)的降低等。c）連續(xù)多點(diǎn)分布在靶值一側(cè)：目前，一般認(rèn)為質(zhì)控

4、血清的檢測(cè)結(jié)果連續(xù)6天以上出現(xiàn)在靶值同一側(cè)，則應(yīng)迅速查找原因，爭(zhēng)取盡快使之回復(fù)圍繞在靶值隨機(jī)分布的狀態(tài)。因?yàn)榘凑战y(tǒng)計(jì)學(xué)原理，由純隨機(jī)誤差造成的這種情況的可能性很小。連續(xù)6天以上出現(xiàn)在靶值同一側(cè)可能性小于1.5。因此凡出現(xiàn)連續(xù)6天以上出現(xiàn)在靶值同一側(cè)者均有可能存在非隨機(jī)誤差因素。如結(jié)果與靶值偏離并不太大，不會(huì)給臨床使用帶來(lái)太大影響時(shí)，一般檢驗(yàn)報(bào)告可以照常填發(fā)。d）其他規(guī)律變化：（周期性等）424 通過圖形的資料對(duì)比進(jìn)行誤差分析，消除誤差來(lái)源a）每個(gè)月的月底將該月的全部質(zhì)控血清檢測(cè)結(jié)果的和s與該批測(cè)定的和s進(jìn)行比較。如果發(fā)生了變化，說明準(zhǔn)確度發(fā)生了變化提示有非隨機(jī)誤差存在。如果當(dāng)月s不同則表明檢測(cè)的精密度發(fā)生了變化。b）將使用同一批號(hào)質(zhì)控血清的CT值的和s按月份列出。如果逐月上升， 應(yīng)考慮保存不當(dāng)造成的試劑效價(jià)降低或質(zhì)控血清本身出現(xiàn)降解。如果各月份基本一致而s逐月加大，則主要提示常規(guī)工作的精密度下降，應(yīng)重點(diǎn)從操作、管理上找原因。c