制劑車間微生物知識培訓

1、制劑車間微生物知識培訓2010年9月1.GMP要求藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范中明確規(guī)定：潔凈室區(qū)內(nèi)的人員數(shù)量應嚴格控制。其工作人員（包括維修、輔助人員）應定期進行衛(wèi)生和微生物學基礎(chǔ)知識、潔凈作業(yè)等方面的培訓及考核；對進入潔凈室區(qū)的臨時外來人員應進行指導和監(jiān)督。2.GMP要求醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）必須以塵粒和微生物為環(huán)境控制對象。 二者相比，微生物更難以控制，其基本特點為：1、存在范圍廣。2、生長速度快。3、生存能力強。3.微生物是什么？一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物。形體微小、單細胞或個體結(jié)構(gòu)簡單的多細胞、甚或無細胞結(jié)構(gòu)的低等生物。是生物的一大類，形體微小、構(gòu)造簡單、繁殖迅速，廣泛分布在自然界中，

2、是一群在化學顯微鏡或電子顯微鏡下放大幾千倍，甚至上萬倍才能看得到的微小生物。4. 常見微生物的種類 微生物細胞結(jié)構(gòu)5.微生物的種類微生物按其結(jié)構(gòu)、化學組成及生活習性等差異可分成三大類 真核細胞型原核細胞型非細胞型如 酵母菌、霉菌等如：細菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌 如病毒 6.真核微生物7. 細胞較大 細胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體 ，胞質(zhì)內(nèi)有完整的細胞器 可自身進行新陳代謝、繁殖相關(guān)活動真核微生物特點8.真核單細胞酵母菌9.真核多細胞青霉黑曲霉10.細菌11.細菌結(jié)構(gòu)真菌結(jié)構(gòu)12.細菌的分類革蘭氏陽性菌 革蘭氏陰性菌 外毒素 內(nèi)毒素 13.細菌的特殊結(jié)構(gòu)莢膜 莢膜

3、是細菌細胞壁外面膠狀的黏液層 。 莢膜的厚度因細菌的種類而不同。除掉莢膜對細菌的生活沒有什么影響，但莢膜具有抗吞噬作用和抗干燥作用。這也就解釋了為什么我們在消毒時需要用75%的酒精，就是因為這個濃度的酒精可以更好的透過莢膜實現(xiàn)殺菌作用14.細菌的特殊結(jié)構(gòu)芽孢芽孢15. 在溫度逐漸降低或營養(yǎng)缺乏,某些細菌能在菌體內(nèi)形成一個折光性很強的不易著色小體，稱為芽胞。芽胞是處于休眠狀態(tài)的細菌，當環(huán)境適宜時，可恢復生長繁殖。 芽胞在自然界分布廣泛，芽胞的抵抗力強，對熱力、干燥、輻射、化學消毒劑等理化因素均有強大的抵抗力，用一般的方法不易將其殺死。殺滅芽胞最可靠的方法是高壓蒸汽滅菌。16.病毒T4噬菌體 蝌蚪

4、形病毒17.病毒流感冒病毒 絲狀有被膜的病毒18.病毒蛋白質(zhì)外殼DNA19.病毒細胞內(nèi)寄生生20.注意： 革蘭氏陰性菌因有內(nèi)毒素鑲嵌在細胞表面，當菌體破裂時會將毒素釋放出來，這一部分是可以通過0.22m的過濾器的，除去此類毒素的可靠方法為活性炭吸附21.體積小，面積大；吸收多，轉(zhuǎn)化快（2000倍體重/h）；生長旺，繁殖快（20min分裂一次）；易變異，適應強；分布廣，種類多（10萬種以上） 微生物具有以下特點22.微生物詳細分類真菌：蘑菇、霉菌、酵母菌、念珠菌（濕疹）細菌：肺炎球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌放線菌：支原體：肺炎支原體衣原體：沙眼立克次體：斑疹傷寒螺旋體：梅毒病毒：甲、乙肝病毒，麻疹病

5、毒，狂犬病毒，流感病毒。23.微生物五大共性體積小，面積大；吸收多，轉(zhuǎn)化快；生長旺，繁殖快；適應強，易變異；分布廣，種類多。24.常見污染藥物制劑的微生物1.葡萄球菌：可引起局部感染2.大腸桿菌：膽道及尿道感染3.綠膿桿菌：化膿性感染、中耳炎、肺炎4.枯草桿菌：結(jié)膜炎5.酵母菌：使糖分解，藥液產(chǎn)生有機酸6.霉菌：使制劑霉壞、酸敗變質(zhì)25.潔凈車間內(nèi)微生物在哪里？空氣 水人員器具26.1. 空氣中的微生物灰塵“微生物的飛行器”。 微生物不是憑空存在的，99%的微生物都附在顆粒上。控制空氣中的微粒數(shù)，就是控制了微生物數(shù)量?；覊m、微粒具有沉降和粘附的趨勢，所以同一區(qū)域內(nèi)，地面是微粒相對集中的地方，也

6、是微生物相對較多的地方，墻壁也容易粘附灰塵。27.98版GMP潔凈度級別塵粒最大允許數(shù)/立方米微生物最大允許數(shù)0.5m5m浮游菌/立方米沉降菌/皿100級3,50005110,000級350,0002,0001003100,000級3,500,00020,00050010300,000級10,500,00060,0001,0001528.Air lock兩扇門不能同時打開Air Lock倉庫or外包間潔凈區(qū)走廊Or DISP高效過濾器高效過濾器氣流29.Air lock（緩沖間）的作用： 控制空氣對流，減少外界臟空氣中的微粒、灰塵進入車間。 必須保持緩沖間門的關(guān)閉，不得同時開啟。30.空氣自凈

7、和微粒的沉降與粘附空氣自凈有死角頂送頂回（潔凈走廊），地面頂送側(cè)回（清洗間，操作間），對面的墻角，頂棚。微粒沉降和粘附不能用腳踏在墊倉板和料桶上。不得跑跳、大聲喧嘩。不靠在墻上或其他物體上。31.2 水 水是生命之源，有水的地方就有生命水微生物的樂園水體是微生物廣泛分布的第二個天然環(huán)境。 水中的細菌來自土壤、塵埃、污水、人畜排泄物及垃圾等。32.水藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范第四章設(shè)備第三十四條中明確規(guī)定：純化水、注射用水的制備、儲存和分配應能防止微生物的滋生和污染。儲罐和輸送管道所用材料應無毒、耐腐蝕。管道的設(shè)計和安裝應避免死角、盲管。儲罐和管道要規(guī)定清洗、滅菌周期。33.制藥工業(yè)對水質(zhì)的要求藥廠的

8、水源：城市自來水、井水等達到飲用水標準的水源?？诜苿浩瑒㈩w粒劑、糖漿容器清洗：飲用水容器最終淋洗：純化水小容量注射劑：15ml配制容器清洗：純化水容器最終淋洗：注射用水 34. 混合器內(nèi)部最后淋洗： 直接接觸物料的部件最后淋洗：純水35.純水管的放置純水由于去除了水中的余氯，有機物，特別容易滋長微生物。必須放在干凈處保存。純水管中不能有積水。否則再使用時，微生物會污染整根管道。36. 3 人潔凈室中最大的微生物污染源1、人在代謝過程中會釋放和分泌污染物。 2、人體表面、衣服能沾染、攜帶污染物。3、人在潔凈室內(nèi)的各種動作也會產(chǎn)生微粒和微生物。37.人體內(nèi)外微生物的分布1、皮膚：表皮葡萄球菌

9、、白色葡萄球菌、八疊球菌屬細菌、類白喉棒桿菌、金黃色葡萄球菌等2、口腔：唾液鏈球菌、溶血鏈球菌、乳酸桿菌、流感桿菌、類白喉棒桿菌等3、上呼吸道：包括喉、鼻道和鼻咽。甲型鏈球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感桿菌、乙型鏈球菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等。4、下呼吸道：包括氣管、支氣管和肺 。健康人的下呼吸道是無菌的。 5、胃腸道：大腸埃希氏菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌、糞產(chǎn)堿桿菌、糞鏈球菌、梭桿菌屬、螺旋體屬、乳桿菌屬、梭菌屬、擬桿菌屬中的一些種6、泌尿生殖道：常見的有嗜酸乳桿菌、類白喉棒桿菌、葡萄球菌、鏈球菌和大腸桿菌38.如何阻斷人體污染源藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范中明確規(guī)定：進入潔凈室（區(qū)）的

10、人員不得化妝和佩帶飾物，不得裸手直接接觸藥品。藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范中明確規(guī)定：無菌工作服必須包蓋全部頭發(fā)、胡須及腳部，并能阻留人體脫落物。 39.我們的更衣流程一次更鞋：阻斷外界粘在鞋底的垃圾、顆粒及微生物。相對而言，腳底是最臟的部分。脫去外套：阻斷外界沉降在外套上的顆粒和微生物。一更洗手：規(guī)范的洗手能消除手部皮膚的污垢和大部分的微生物。洗手一定要用洗手液和充足的流水。二更二次更鞋：阻斷一更、二更內(nèi)沉降在地板上的顆粒和微生物。潔凈區(qū)工作鞋不能穿出二更的鞋箱外。帶口罩：阻斷鼻腔、呼吸道的微生物發(fā)散，潔凈區(qū)內(nèi)不能脫下口罩帶發(fā)套：阻斷頭發(fā)、頭皮表面的微生物發(fā)散。保證發(fā)套完整的包裹頭發(fā)。穿潔凈服：阻斷

11、體表皮膚的微生物發(fā)散。潔凈區(qū)內(nèi)不能解開潔凈服。手消毒：再次消除手部的細菌和微生物。75%的酒精能殺滅99%的微生物。40.平時的衛(wèi)生習慣勤洗澡、洗頭，勤換內(nèi)衣去除皮屑、頭屑等人體脫落物，保持體表潔凈。勤剪頭發(fā)工作時，頭皮不容易出汗，易被帽子全部包裹。勤剪手指甲指甲內(nèi)能夠藏污納垢，有很多的致病微生物。勤換鞋準備兩雙鞋經(jīng)常交替穿著，保證鞋內(nèi)干燥無異味。41.4.器具清洗：最后淋洗用水，純水。清洗后按要求包裝并有清潔標簽，注明清潔日期、有效期至和清洗人儲存有效期，部件，包括不銹鋼桶、Bar、篩網(wǎng)等，1天42.滅菌與消毒 滅菌：有物理或化學方法，殺死物體上的所有微生物，包括致病的或非致病的微生物以及細

12、菌的芽胞，稱為滅菌。滅菌后的物品即為無菌狀態(tài)。消毒：用化學或物理方法殺滅物體上的病原微生物，稱為消毒。防腐：阻止微生物生長繁殖以防止物品的腐敗，亦稱抑菌。無菌：不含活菌。43. 滅菌與消毒的方法 物理因素：溫度、輻射、干燥、聲波、滲透壓和過濾等。 （1）熱力滅菌法:分為干熱滅菌法和濕熱滅菌法 干熱滅菌法:利用烘箱中的熱空氣滅菌，通常在160持續(xù)12小時，可殺死細菌芽胞。此法只適用于玻璃器皿、磁器、小金屬用具等耐熱物品的滅菌。 濕熱滅菌法 a 煮沸法：在100沸水中煮沸5分鐘，可殺死細菌營養(yǎng)型，但殺不死細菌的芽胞。煮沸法常用于外科器械如刀、剪、鑷子、注射器等的消毒44.濕熱滅菌法c 流通蒸汽滅菌

13、法：流通蒸汽的溫度通常不超過100，加熱1530分鐘，可殺死細菌營養(yǎng)型，殺不死芽胞。 d 間歇滅菌法：利用反復多次的蒸汽滅菌，適用于不耐高溫的某些培養(yǎng)基的滅菌。 e 高壓蒸汽滅菌法：利用密閉的高壓蒸鍋，在加壓下產(chǎn)生的高溫短時間殺菌的方法。滅菌效果好，是實驗室和生產(chǎn)中最常用的滅菌法。一般采用1kg/cm2(或15磅/時2)121.3，1530分鐘可達到滅菌目的，含糖培養(yǎng)基或注射液可用0.56kg/cm2(或8磅/時2)113，2030分鐘滅菌。45. 滅菌與消毒的方法 紫外線 紫外線中波長200300nm者具有殺菌作用，波長265266nm殺菌力最強。紫外線殺菌力強而穩(wěn)定，但穿透力差，即使是薄玻

14、璃也能濾掉大部分，所以紫外線只適用于室內(nèi)及物體表面消毒。（3） 過濾除菌 過濾除菌是利用濾器機械地除去液體或空氣中細菌的方法。不耐熱的物品如毒素、抗毒素、病毒、酶溶液、維生素、抗生素等均采用過濾除菌法，達到除去液體中細菌的目的。 細菌濾器有貝克菲濾器、蔡氏濾器、玻璃濾器（G5和G6濾孔最小，能阻止細菌通過）及膜濾器（0.220.45m濾膜能除掉細菌）。46. 滅菌與消毒的方法 化學方法 消毒劑：具無選擇性毒性，即消毒劑不但能殺死病原菌，同時對人體組織細胞也有損害作用，只能外用。常用的消毒劑如下：（1）重金屬鹽類：紅汞、硫柳汞、苯汞等。（2）氧化劑：0.1%高錳酸鉀、3%過氧化氫、過氧乙酸（3）

15、酚類：35%來蘇爾消毒地面、家具、器具表面；12%來蘇兒消毒手和體表；0.5%酚作為生物制品的防腐劑。47. 滅菌與消毒的方法 （4）醇類：7075%乙醇、苯氧乙醇（5）醛類：3740%的甲醛溶液（福爾馬林）、戊二醛（6）環(huán)氧乙烷：氣體滅菌劑（7）表面活性劑： 0.1%新潔爾滅48. 微生物與產(chǎn)品變質(zhì)微生物廣泛存在于自然界，因而液體制劑中可能有微生物污染。這些微生物若遇到適宜的條件，就能生長繁殖，一方面可造成料液變質(zhì)，失去療效；另一方面對病人可引起不良反應，甚至引起繼發(fā)感染或危及生命。為了防止由微生物引起的藥物變質(zhì)，生產(chǎn)環(huán)境、條件、操作等應符合GMP要求，保證液體制劑的衛(wèi)生學標準。49.微生物與藥物變質(zhì)根據(jù)藥物不同的劑型，如出現(xiàn)下列情況之一，即可