《工業(yè)微生物學(xué)》試題（含答案）

1、 微 生 物 學(xué) 學(xué)期考試題 1(參考答案附后)一、 填空題 (每題 2.5 分，共 25 分)微生物是指的一群最低等生物。微生物主要包括等五大類,其主要特性是(l)(2)(3)(4)。細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分是，它是由聚合而成的大分子化合物,其構(gòu)造是由構(gòu)成骨架,接在上，相鄰的短肽穿插相聯(lián)而形成。原核生物的細(xì)胞核比較原始簡(jiǎn)潔， 沒(méi)有包住，不具，故稱擬核,它實(shí)際上是一條很長(zhǎng)的環(huán)狀構(gòu)造,其功能是。噬菌體是病毒，它是一種大分子微生物,其生長(zhǎng)生殖過(guò)程可分為五個(gè)步驟。微生物的四大養(yǎng)分類型是。微生物的養(yǎng)分五要素是。從自然界中分別篩選菌種一般可分為四個(gè)步驟。養(yǎng)分缺陷型的選育過(guò)程一般可分為等等六個(gè)步驟。稱為根本培

2、育基。稱為完全培育基。化學(xué)誘變劑按其作用方式可分為等四大類。紫外線(uv)是誘變劑, 它引起 DNA 構(gòu)造轉(zhuǎn)變的形式主要有常用的六種菌種保藏方法是。二、 名詞解釋 (每題分，共 18 分).革蘭氏染色法2.巴斯德消毒法3.養(yǎng)分缺陷型4. 溶源性細(xì)菌5.活性污泥6.生物傳感器三、問(wèn)題解答 (共 57 分)l.何謂大腸菌群? 簡(jiǎn)述食品中大腸菌群數(shù)的測(cè)定方法。(6 分)現(xiàn)有一培育基配方如下: 可溶性淀粉 5%、 蛋白胨 1.5%、磷酸二氫鉀 0.5%、硫酸鎂 0.1%、瓊脂 2%, pH5.0,試答復(fù)以下問(wèn)題: (l)按養(yǎng)分物質(zhì)來(lái)源分類, 屬何種類型培育基? 為什么?(2)此培育基適于培育哪類微生物

3、?為什么?(3)簡(jiǎn)述配制 200ml 該斜面培育基的操作過(guò)程。 (7 分)現(xiàn)擬從自然界中分別篩選出-淀粉酶產(chǎn)量較高的枯草芽抱桿菌,試答復(fù)以下問(wèn)題: (l)你認(rèn)為應(yīng)當(dāng)?shù)绞裁吹胤讲杉司臉悠份^為適宜?(2)進(jìn)展純種分別時(shí),為提高效率,依據(jù)該菌的何種特性可承受哪些相應(yīng)的措施?(3)可承受哪些純種分別方法?(4)在進(jìn)展性能測(cè)定時(shí), 可承受何種簡(jiǎn)化的初篩方法? (7 分)對(duì)于分支合成途徑, 怎樣才能積存大量的末端產(chǎn)物?試以簡(jiǎn)圖表示并說(shuō)明之。(4 分)什么是活菌計(jì)數(shù)法?現(xiàn)有一細(xì)菌菌液,其中的活菌數(shù)約為104105 個(gè)/ml,如何計(jì)算出其準(zhǔn)確活菌數(shù)?試用簡(jiǎn)圖表示并說(shuō)明之。(7 分)在進(jìn)展誘變育種時(shí),對(duì)菌

4、懸液的制備有什么要求?經(jīng)誘變處理后的菌液為什么要進(jìn)展中間增殖培育?(6 分)簡(jiǎn)述高壓蒸汽滅菌和干熱滅菌的方法及其操作要點(diǎn)或留意事項(xiàng)。(5 分)畫(huà)出曲霉和根霉的形態(tài)簡(jiǎn)圖并標(biāo)明各局部的名稱。(5 分)什么是細(xì)菌生長(zhǎng)曲線？可分為哪幾個(gè)階段？各有什么特點(diǎn)？(5 分)什么是基因工程？簡(jiǎn)述基因工程的主要操作步驟。(5 分) 微 生 物 學(xué) 學(xué)期考試題 1參 考 答 案一、填空題 (每題 2.5 分，共 25 分)微生物是指 全部形體微小，單細(xì)胞 或 構(gòu)造簡(jiǎn)潔的多細(xì)胞，或沒(méi)有細(xì)胞構(gòu)造的一群最低等生物。工業(yè)微生物主要包括 細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌、噬菌體 等五大類, 其主要特性是(l) 種類多 (2) 分布

5、廣(3) 生殖快(4) 代謝強(qiáng)(5) 易變異 。細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分是 肽聚糖，它是由很多肽聚糖單體聚合而成的大分子化合物,其構(gòu)造是由N乙酰葡萄糖胺 與N乙酰胞壁酸 重復(fù)交替連接 構(gòu)成骨架,短肽 接在N乙酰胞壁酸 上，相鄰的短肽穿插相聯(lián)而形成致密的多層網(wǎng)狀構(gòu)造 。原核生物的細(xì)胞核比較原始簡(jiǎn)潔， 沒(méi)有 核膜包住，不具 核仁和典型染色體 ，故稱擬核,它實(shí)際上是一條很長(zhǎng)的環(huán)狀 雙鏈DNA 與少量類組蛋白及RNA 結(jié)合, 經(jīng)有組織地高度壓縮纏繞而成的一團(tuán)絲狀 構(gòu)造, 其功能是起貯存遺傳信息 和 傳遞遺傳性狀的作用。噬菌體是侵染原核生物(細(xì)菌、放線菌和藍(lán)細(xì)菌)的 病毒，它是一種 超顯微的，沒(méi)有細(xì)胞構(gòu)造的

6、，專性活細(xì)胞寄生的 大分子微生物, 其生長(zhǎng)生殖過(guò)程可分為 吸附、侵入、增殖、成熟、裂解五個(gè)階段。微生物的四大養(yǎng)分類型是 光能自養(yǎng)型、光能異養(yǎng)型、化能自養(yǎng)型、化能異養(yǎng)型。微生物的養(yǎng)分五要素是水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子。從自然界中分別篩選菌種一般可分為樣品采集、增殖培育、純種分別、性能測(cè)定 等四個(gè)步驟。養(yǎng)分缺陷型的選育過(guò)程一般可分為誘變、中間培育、淘汰野生型、養(yǎng)分缺陷型檢出、養(yǎng)分缺陷型鑒定、變異株的篩選 等六個(gè)步驟。能夠滿足野生型菌株生長(zhǎng)要求的最低成分合成培育基 稱為根本培育基。 能夠滿足各種養(yǎng)分缺陷型菌株生長(zhǎng)要求的培育基 稱為完全培育基?；瘜W(xué)誘變劑按其作用方式可分為 自然堿基類似物、烷基化

7、劑、移碼誘變劑、亞硝酸 等四大類。 紫外線(uv)是 物理 誘變劑,它引起 DNA 構(gòu)造轉(zhuǎn)變的形式主要有 氫鍵斷裂、DNA 鏈斷裂、水合作用、T 二聚體形成。常用的六種菌種保藏方法是 斜面冰箱保藏法、石蠟油封藏法、麩曲保藏法、砂土管保藏法、甘油低溫保藏法、凍干法。二、名詞解釋 (每題分，共 18 分).革蘭氏染色法一種重要的細(xì)菌鑒別染色法。該染色法的步驟是：1先用結(jié)晶紫液初染；2再用碘液媒染與結(jié)晶紫形成不溶于水的復(fù)合物；3接著用 95%乙醇進(jìn)展脫色；4最終再用番紅沙黃液復(fù)染。經(jīng)過(guò)這種染色方法可以將全部細(xì)菌根本上區(qū)分為兩大類：革氏陽(yáng)性細(xì)菌被染上紫色，革氏陰性細(xì)菌被染上紅色。巴斯德消毒法一種低溫消

8、毒法，具體的處理溫度和時(shí)間各有不同，一般在 6085下處理 15s 至 30min。用于牛奶、啤酒、果酒和醬油等不宜進(jìn)展高溫滅菌的液體的消毒方法，主要目的是殺死其中無(wú)芽孢的病原菌，而又不影響它們的風(fēng)味。養(yǎng)分缺陷型 是指在某些養(yǎng)分物質(zhì)(如氨基酸、核苷酸、維生素等)的合成力量上消滅缺陷，必需在培育基中外加這些養(yǎng)分成分才能正常生長(zhǎng)的變異菌株。溶源性細(xì)菌受到溫存噬菌體侵染而帶有原噬菌體卻又沒(méi)有形態(tài)上可見(jiàn)到的噬菌體粒子的宿主菌，稱為溶源性細(xì)菌，簡(jiǎn)稱溶源菌。活性污泥是由污水中生殖的好氣性微生物群體組成的絮狀污泥，具有很強(qiáng)的吸咐、分散和氧化分解污水中有機(jī)物質(zhì)和其它物質(zhì)的力量。生物傳感器生物傳感器是一種利用生

9、物活性物質(zhì)的分子識(shí)別力量, 選擇性地識(shí)別和測(cè)定各種生物化學(xué)物質(zhì)的傳感器。它是分析生物學(xué)與傳感器技術(shù)穿插的產(chǎn)物。三、問(wèn)題解答 (共 57 分)l.何謂大腸菌群? 簡(jiǎn)述食品中大腸菌群數(shù)的測(cè)定方法。(6 分)大腸菌群是指一群在 37、24 小時(shí)內(nèi)能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧或兼性需氧, 革蘭氏陰性、無(wú)芽孢的桿狀細(xì)菌。主要包括大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌和一些中間類型的桿菌。檢測(cè)大腸菌群的方法有多管發(fā)酵法與濾膜法兩種:多管發(fā)酵法又稱水的標(biāo)準(zhǔn)分析方法,大多數(shù)衛(wèi)生單位與水廠均普遍承受此法。多管發(fā)酵法檢測(cè)食品中大腸菌群數(shù)的操作過(guò)程為：(l) 培育基的制備, (2) 食品檢樣稀釋, (3) 乳糖初發(fā)酵試驗(yàn), (4) 平板

10、分別培育, (5) 證明試驗(yàn), (6) 報(bào)告MPN (大腸菌群的最可能數(shù))。濾膜法是一種快速的測(cè)定方法 , 其結(jié)果重復(fù)性較好, 又能測(cè)定較大體積的水樣, 目前巳有很多供水公司承受此法。其檢測(cè)程序?yàn)椋?濾膜洗滌滅菌 濾膜過(guò)濾器安裝 加水樣抽濾 移濾膜貼于培育基上 培育與計(jì)數(shù)?，F(xiàn)有一培育基配方如下:可溶性淀粉 5%、蛋白胨 1.5%、磷酸二氫鉀 0.5%、硫酸鎂 0.1%、瓊脂 2%, pH5.0,試答復(fù)以下問(wèn)題: (l)按養(yǎng)分物質(zhì)來(lái)源分類, 屬何種類型培育基? 為什么?(2)此培育基適于培育哪類微生物?為什么?(3)簡(jiǎn)述配制 200ml 該斜面培育基的操作過(guò)程。 (7 分)屬半合成培育基。 因培

11、育基中，一局部承受自然材料，另一局部用的化學(xué)藥品組成。此培育基適于培育霉菌。因 pH5.0 適于培育霉菌和酵母菌, 但酵母菌不能直接利用可溶性淀粉為碳源。操作過(guò)程：準(zhǔn)確稱量可溶性淀粉 10g、蛋白胨 3g、 磷酸二氫鉀 1g、硫酸鎂 0.2g、瓊脂 4g 于 500ml 燒杯中 參加 200ml 水溶解 調(diào)整 pH5.0 加熱融解 補(bǔ)足水分 分裝試管 滅菌 擺斜面?，F(xiàn)擬從自然界中分別篩選出-淀粉酶產(chǎn)量較高的枯草芽抱桿菌,試答復(fù)以下問(wèn)題: (l)你認(rèn)為應(yīng)當(dāng)?shù)绞裁吹胤讲杉司臉悠份^為適宜?(2)進(jìn)展純種分別時(shí),為提高效率,依據(jù)該菌的何種特性可承受哪些相應(yīng)的措施?(3)可承受哪些純種分別方法?(

12、4)在進(jìn)展性能測(cè)定時(shí), 可承受何種簡(jiǎn)化的初篩方法? (7 分)(l) 應(yīng)當(dāng)?shù)礁缓矸圪|(zhì)的地方采集含此菌的樣品。依據(jù)該菌的耐熱特性可承受將含菌樣品加熱80 處理10min 后，殺死不耐熱雜菌, 再進(jìn)展純種分別的相應(yīng)措施?？沙惺軇澗€分別、稀釋分別、刮棒連續(xù)涂布等純種分別方法?？沙惺芷矫蟮矸弁噶寥ΨㄟM(jìn)展初篩。對(duì)于分支合成途徑, 怎樣才能積存大量的末端產(chǎn)物?試以簡(jiǎn)圖表示并說(shuō)明之。(4 分)對(duì)于分支合成途徑, 為了獲得大量某末端產(chǎn)物, 可選育抗該末端產(chǎn)物類似物的養(yǎng)分缺陷型突變菌株。如以下圖分支途徑，假設(shè)要獲得高產(chǎn)的 G，可選育：缺失酶C 的D 養(yǎng)分缺陷型(匯流)；抗G 的構(gòu)造類似物G,的突變株(消退反響

13、調(diào)控)。什么是活菌計(jì)數(shù)法?現(xiàn)有一細(xì)菌菌液,其中的活菌數(shù)約為104105 個(gè)/ml,如何計(jì)算出其準(zhǔn)確活菌數(shù)?試用簡(jiǎn)圖表示并說(shuō)明之。(7 分)將待測(cè)含菌樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋 , 使其中的微生物充分分散成單個(gè)細(xì)胞, 然后取肯定量的稀釋樣品液, 接種到平板上。經(jīng)過(guò)肯定時(shí)間培育后, 由每個(gè)單細(xì)胞生長(zhǎng)生殖而形成肉眼可見(jiàn)的單菌落, 即一個(gè)單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個(gè)活菌。最終統(tǒng)計(jì)菌落數(shù), 依據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣量, 換算出單位樣品中所含的活菌數(shù)。要計(jì)算出活菌數(shù)約為 104105 個(gè)/ml 細(xì)菌菌液的準(zhǔn)確活菌數(shù), 可參照以下圖自行圖示。在進(jìn)展誘變育種時(shí), 對(duì)菌懸液的制備有什么要求?經(jīng)誘變處理后的菌液為什么要進(jìn)展中間增殖

14、培育?(6 分)誘變育種要求所處理的細(xì)胞必需是處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期同步生長(zhǎng)的細(xì)胞，并且是均勻分散狀態(tài)的單細(xì)胞懸液。首先是細(xì)胞的生理狀態(tài)對(duì)誘變處理也會(huì)產(chǎn)生很大的影響，如細(xì)菌在對(duì)數(shù)期誘變處理效果較好； 霉菌或放線菌的分生孢子一般都處于休眠狀態(tài)，所以培育時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)孢子影響不大，但稍加萌發(fā)后的孢子則可提高誘變效率。 其次是分散狀態(tài)的細(xì)胞可以均勻地接觸誘變劑，又可避開(kāi)長(zhǎng)出不純菌落。由于在很多微生物的細(xì)胞內(nèi)同時(shí)含有幾個(gè)核，所以即使用單細(xì)胞懸浮液處理，還是簡(jiǎn)潔消滅不純的菌落。假設(shè)誘變劑產(chǎn)生的突變只在DNA 雙鏈中的某一條單鏈，故該突變無(wú)法反映在當(dāng)代的表型上。只經(jīng)過(guò)DNA 的復(fù)制和細(xì)胞分裂，表型才會(huì)發(fā)生變異，消滅

15、不純菌落，這就叫表型延遲。不純菌落的存在，也是誘變育種工作中初分別的菌株經(jīng)傳代后很快消滅生產(chǎn)性狀“衰退”的主要緣由。因此，經(jīng)誘變處理后的菌液要經(jīng)數(shù)小時(shí)的中間增殖培育后，再進(jìn)展分別，可避開(kāi)長(zhǎng)出不純菌落。簡(jiǎn)述加壓蒸汽滅菌和干熱滅菌的方法及其操作要點(diǎn)或留意事項(xiàng)。(5 分)加壓蒸汽滅菌法： 將待滅菌的物件放置在盛有適量水的加壓蒸汽滅菌鍋或家用壓力鍋內(nèi)，把鍋內(nèi)的水加熱煮沸，并把其中原有的空氣徹底放盡后將鍋密閉，再連續(xù)加熱就會(huì)使鍋內(nèi)的蒸汽壓漸漸上升。為到達(dá)良好的滅菌效果，一般要求溫度應(yīng)到達(dá) 121壓力為98kPa，時(shí)間維持 1520min。干熱滅菌法： 將金屬制品或清潔玻璃、陶瓷器皿放入電熱烘箱內(nèi)，在 1

16、50170下維持 12h 后，即可到達(dá)徹底滅菌的目的。在這種條件下，可使細(xì)胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性、原生質(zhì)枯燥，以及各種細(xì)胞成分發(fā)生氧化。留意滅菌過(guò)程勿翻開(kāi)電熱烘箱門(mén)。畫(huà)出曲霉和根霉的形態(tài)簡(jiǎn)圖并標(biāo)明各局部的名稱。(5 分)參照其次章第四節(jié)霉菌中圖 246 根霉 和 圖 248 曲霉 繪圖。什么是細(xì)菌生長(zhǎng)曲線？可分為哪幾個(gè)階段？各有什么特點(diǎn)？(5 分)將細(xì)菌接入肯定量的液體培育基中，置適溫下培育，每隔肯定時(shí)間，取樣測(cè)其活菌數(shù)。以培育時(shí)間為橫座標(biāo)，以活菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱座標(biāo)，繪制而成的曲線稱細(xì)菌生長(zhǎng)曲線。依據(jù)細(xì)菌生長(zhǎng)速率常數(shù)的不同，一般可把細(xì)菌的典型生長(zhǎng)曲線粗分為延遲期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期等四個(gè)時(shí)期。延遲期的微生物 菌體內(nèi)物質(zhì)量顯著增長(zhǎng)，菌體體積增大；代謝活潑, 細(xì)胞生長(zhǎng)速度漸漸加快；對(duì)外界