干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用課件

1、干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷(snshng)修復(fù)中的應(yīng)用第一頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用子宮內(nèi)膜再生修復(fù)障礙會導(dǎo)致女性宮腔粘連、閉經(jīng)、不孕等問題。宮腔粘連臨床處理棘手，目前(mqin)尚未確切的有效治療方法。利用干細(xì)胞修復(fù)子宮內(nèi)膜的相關(guān)研究目前是國際上的熱點問題。第二頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用子宮內(nèi)膜的再生(zishng)修復(fù)與調(diào)控因素第三頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用子宮內(nèi)膜再生修復(fù)(xif)的病理修復(fù)過程包括炎癥反應(yīng)、組織形成、組織重塑三個階段。電鏡：子宮(zgng)內(nèi)膜的再生從未被退化組織覆蓋的裸露基底層腺體口區(qū)域開始，上皮從其中逐漸長

2、出，并延伸長入周圍表面完整的部位。內(nèi)膜表面完全再上皮化以后，腺體、間質(zhì)及血管也在增殖期進(jìn)行快速修復(fù)。 LUDWIGH. Microarchiteciture of the human endometrium by scanning electromicroscopy: menstrual desquamation and remodeling .Annals of the New York Academy of Sciences, 1992,622:28-46.第四頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用子宮內(nèi)膜再生修復(fù)(xif)機(jī)制的假說：1、局部殘留腺上皮增殖完成內(nèi)膜的再上皮化。2

3、、間質(zhì)、上皮及內(nèi)皮細(xì)胞通過細(xì)胞轉(zhuǎn)化重新(chngxn)形成內(nèi)膜。3、存在于內(nèi)膜間質(zhì)和上皮內(nèi)的干細(xì)胞分化形成新的內(nèi)膜組織；研究證實，內(nèi)膜中具有特殊細(xì)胞表型的W5C5+和CD146+PDGF-R+細(xì)胞亞群具有多向分化和內(nèi)膜重建的能力，位于內(nèi)膜的基底層和功能層。第五頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用子宮(zgng)內(nèi)膜再生的可能調(diào)控因素月經(jīng)來潮后隨著雌激素水平的上升，功能層腺上皮細(xì)胞大量增殖，而基底層對激素改變的刺激不敏感，增殖不活躍。殘留(cnli)內(nèi)膜組織可能參與了子宮內(nèi)膜功能層的再生。雌激素可通過調(diào)節(jié)Wnt信號通路來促進(jìn)內(nèi)膜增殖生長。第六頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中

4、的應(yīng)用新生血管形成對內(nèi)膜的再生修復(fù)很重要。血管內(nèi)皮生長因子在月經(jīng)后內(nèi)膜的修復(fù)再生早期起著重要作用(zuyng)。纖連蛋白介導(dǎo)的腔上皮遷移在子宮內(nèi)膜上皮修復(fù)過程中發(fā)揮了重要作用。第七頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用蛋白水解酶，生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子及炎性細(xì)胞等都在內(nèi)膜再生修復(fù)的過程中起重要作用(zuyng)。提示正常的創(chuàng)傷修復(fù)機(jī)制也對內(nèi)膜重建起一定的作用。子宮內(nèi)膜損傷或月經(jīng)脫落后，薄的、功能失調(diào)或萎縮的內(nèi)膜激活宮腔內(nèi)殘留的內(nèi)膜干細(xì)胞，或者循環(huán)血中骨髓來源干細(xì)胞遷移至內(nèi)膜，協(xié)助內(nèi)膜的再生修復(fù)。第八頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用通常子宮內(nèi)膜損傷后，上皮細(xì)胞迅速再生和

5、較輕的炎癥反應(yīng)使其達(dá)到完全的無瘢痕修復(fù)。但是(dnsh)一些內(nèi)膜損傷后會形成宮腔粘連。第九頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用宮腔粘連發(fā)生(fshng)的可能機(jī)制第十頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用宮腔粘連(zhnlin)的病理子宮內(nèi)膜被纖維化的間質(zhì)和無活性的立方柱狀上皮替代，腺體稀疏，無活性或囊樣擴(kuò)張，功能層和基底層不能辨別，上皮對激素刺激(cj)無反應(yīng)，缺乏血管，宮腔內(nèi)纖維性粘連形成。第十一頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用宮腔粘連發(fā)生的可能(knng)機(jī)制1、內(nèi)膜表面上皮再生延遲可能是宮腔粘連發(fā)生的重要原因。2、感染和炎癥反應(yīng)會抑制創(chuàng)傷內(nèi)膜的再生

6、。刮宮破壞了內(nèi)膜屏障，缺乏上皮細(xì)胞覆蓋宮腔表面，間質(zhì)裸露，加上炎癥反應(yīng)引起水腫(shuzhng)、炎性細(xì)胞浸潤、上皮細(xì)胞壞死等，間質(zhì)纖維活性增加，膠原沉積，導(dǎo)致子宮內(nèi)膜的纖維化，從而形成宮腔粘連。第十二頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用3、內(nèi)膜干細(xì)胞數(shù)量或功能的消失就會導(dǎo)致內(nèi)膜薄及再生失調(diào)。較深的子宮內(nèi)膜損傷累及基底層甚至肌層，使定居(dng j)于子宮內(nèi)膜的干細(xì)胞受損或丟失，內(nèi)膜失去了再生能力，導(dǎo)致宮腔粘連。第十三頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用干細(xì)胞在宮腔粘連(zhnlin)內(nèi)膜修復(fù)中的應(yīng)用第十四頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用干細(xì)胞是一種具有

7、自我更新和多向分化潛能的細(xì)胞。成體干細(xì)胞可以從骨髓、脂肪、羊水(yngshu)等多種組織中提取。目前已在臨床上成功應(yīng)用于治療血液系統(tǒng)疾病和惡性腫瘤，以及皮膚、骨和軟骨、膀胱等組織的修復(fù)。第十五頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用干細(xì)胞促進(jìn)(cjn)內(nèi)膜再生的可能機(jī)制第十六頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用1. 干細(xì)胞具有分化為子宮(zgng)內(nèi)膜細(xì)胞的能力 動物實驗證明：通過制備子宮內(nèi)膜條件培養(yǎng)液來模擬子宮內(nèi)膜生長的微環(huán)境，在體外環(huán)境下添加雌激素，發(fā)現(xiàn)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）向子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞分化；發(fā)現(xiàn)小鼠的BMSCs 與子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)， BMSCs可

8、向子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞方向分化；將大鼠BMSCs 與子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)BMSCs可以向子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞方向分化。 以上這些研究說明了干細(xì)胞向子宮內(nèi)膜樣細(xì)胞方向分化的可行性。第十七頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用2. 干細(xì)胞具有分化為血管細(xì)胞的能力干細(xì)胞具有向損傷組織趨化和遷移的能力。且可以直接分化為血管細(xì)胞。在組織發(fā)生損傷，血管結(jié)構(gòu)破壞，機(jī)體自身機(jī)制啟動血管新生。這個過程需要大量的內(nèi)皮細(xì)胞、周細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞的參與修復(fù)。當(dāng)接受干細(xì)胞移植(yzh)后，干細(xì)胞能夠分化為血管細(xì)胞，促進(jìn)和加速損傷區(qū)域新生血管的形成，進(jìn)而促進(jìn)組織的修復(fù)。第十八頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損

9、傷修復(fù)中的應(yīng)用3.干細(xì)胞具有分泌多種生物活性分子的能力移植的干細(xì)胞進(jìn)入損傷部位后可通過自分泌和旁分泌作用(zuyng)產(chǎn)生細(xì)胞因子，進(jìn)而促進(jìn)血管新生、損傷細(xì)胞恢復(fù)和抑制炎癥。干細(xì)胞分泌的外泌體對抗凋亡基因具有上調(diào)作用，對促凋亡基因具有下調(diào)作用，從而抑制損傷細(xì)胞的凋亡，對組織的修復(fù)及再生起到重要作用。當(dāng)組織損傷嚴(yán)重的情況下，內(nèi)源性的干細(xì)胞尚不足以維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)，移植外源性的干細(xì)胞，也可以發(fā)揮作用。第十九頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用4. 干細(xì)胞缺少免疫原性和具有免疫調(diào)節(jié)功能干細(xì)胞表達(dá)低水平的HLA/MHCI類分子、非組成性表達(dá)MHCII類分子、不表達(dá)共刺激分子，以及不引起(y

10、nq)同種異源淋巴細(xì)胞的活化和增殖。是移植外源性干細(xì)胞的有利條件。干細(xì)胞表達(dá)功能性Toll受體，通過TLR途徑調(diào)節(jié)免疫。第二十頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用干細(xì)胞促進(jìn)子宮內(nèi)膜修復(fù)(xif)的相關(guān)實驗研究第二十一頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用Zhao等發(fā)現(xiàn)，通過宮腔注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，可增加薄型子宮內(nèi)膜大鼠的子宮內(nèi)膜厚度。Jing等發(fā)現(xiàn)，尾靜脈注射可促進(jìn)薄型子宮內(nèi)膜的修復(fù)，提高子宮內(nèi)膜容受(rn shu)性。骨髓干細(xì)胞可向子宮內(nèi)膜募集，并向子宮內(nèi)膜的上皮細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞的方向分化。Alawadhi等發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜的機(jī)械性損傷可以促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞募集到宮腔粘

11、連小鼠模型的子宮內(nèi)膜，參與子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)，從而提高小鼠的受孕率。Song等在宮角損傷小鼠模型中，進(jìn)行胚胎干細(xì)胞結(jié)合膠原蛋白支架的移植，發(fā)現(xiàn)胚胎干細(xì)胞來源的細(xì)胞可定向分化為子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞，修復(fù)受損的子宮，恢復(fù)其結(jié)構(gòu)和功能，提高小鼠的受孕率。 不同子宮內(nèi)膜損傷的動物模型，如薄型子宮內(nèi)膜、宮腔粘連等，通過宮腔或尾靜脈注射骨髓干細(xì)胞，可促進(jìn)子宮內(nèi)膜的上皮、間質(zhì)成分增加。第二十二頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用干細(xì)胞治療(zhlio)宮腔粘連的臨床應(yīng)用第二十三頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用2011年 Nagori 等使用自體BMDSCs治療了一名33歲的重度宮腔粘

12、連患者，該患者在接受干細(xì)胞治療前已嘗試過刮宮、周期性激素治療等，效果均欠佳。對患者行刮宮后，在超聲引導(dǎo)下用注射器經(jīng)宮頸向?qū)m底及宮腔內(nèi)注入干細(xì)胞懸液，術(shù)后輔以阿司匹林和周期性激素治療。超聲檢查結(jié)果顯示患者術(shù)后子宮內(nèi)膜再生較好，并且，患者通過體外受精成功懷孕，隨訪至妊娠第8周胎兒(ti r)生長良好。 NAGORICB,PANCHALSY,PATELH. Endometrial regenerationo using autologous adult stem cells followed by conception by invotro fertilazation in a patient of

13、 severe Asherman syndrome. Journal of Human Reproductive Sciences,2011,4(1);43-48.第二十四頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用2013年，Zhao等針對反復(fù)(fnf)流產(chǎn)導(dǎo)致的難治型IUA病人，常規(guī)治療無效后，行宮腔粘連分解術(shù)，術(shù)后利用BMDSCs 聯(lián)合雌激素人工周期治療，使其成功受孕。 ZHAO Y,WANG A. Intrauterinetransplantation of autologous bone marrow derived mesenchymal stem cells followed

14、 by conception in a patient of severe intrauterine adhesions . Open Journal of Obstetrics and Gynecology, 2013,3(3);377-380.第二十五頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用2014年Singh 等對 名宮腔鏡診斷為 級宮腔粘連的生育期患者進(jìn)行了自體BMDSCs治療，她們都有繼發(fā)性閉經(jīng)或不育病史，且標(biāo)準(zhǔn)的宮腔鏡下粘連松解術(shù)及雌激素治療失敗。在超聲引導(dǎo)(yndo)下，用穿刺針經(jīng)陰道穹隆將干細(xì)胞懸液注入患者子宮宮底、前壁、后壁三處的內(nèi)膜與肌層交界區(qū)。隨訪結(jié)果顯示，治療后

15、、 個月，所有患者的內(nèi)膜厚度均較治療前有明顯增加，其中五名患者重新恢復(fù)了月經(jīng)。 SINGHN,MOHANTYS,SETHT. Autologous stem cell transplantation inrefractory Ashermans syndrome: Anovel cell based the rapy. Journal of Human Reproductive Sciences, 2014,7(2):93-98.第二十六頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用中科院遺傳發(fā)育所戴建武團(tuán)隊，研制(ynzh)出能特異結(jié)合干細(xì)胞的膠原支架。南京鼓樓醫(yī)院的胡婭莉團(tuán)隊與其合作通過

16、提取患者自身干細(xì)胞，附著在可降解的生物支架材料上，用支架材料的孔隙和干細(xì)胞的分化功能完成血管組織的再生，結(jié)合傳統(tǒng)宮腔鏡的改進(jìn)，實現(xiàn)了受損子宮內(nèi)膜的功能性修復(fù)。有病人相繼懷孕并順利生產(chǎn)，目前這項研究仍在繼續(xù)。這是干細(xì)胞在世界再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要成果，也是在生殖領(lǐng)域的成功突破。 戴建武。引導(dǎo)組織再生智能生物材料的轉(zhuǎn)化研究。生命科學(xué)，2016,28（8）：907-914。第二十七頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用問題(wnt)與展望干細(xì)胞具有廣闊的臨床應(yīng)用前景，基于其獨特的生物學(xué)功能，以干細(xì)胞為中心的再生治療或替代治療將為重度子宮(zgng)內(nèi)膜損傷的治療帶來新的希望。第二十八頁，共三十

17、二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用 但是，干細(xì)胞技術(shù)向臨床轉(zhuǎn)化還有很多問題需要解決：如何保持干細(xì)胞經(jīng)過體外大規(guī)模培養(yǎng)后的分化能力、遺傳特征和穩(wěn)定性。避免致瘤性的發(fā)生。建立與藥效作用相關(guān)的體外生物學(xué)評價方法。篩選保持活細(xì)胞穩(wěn)定的藥物制劑配方等。注射的干細(xì)胞在體內(nèi)的遷移路徑和在各個(gg)器官中的分布仍然是值得深入探索的課題。干細(xì)胞被注射后體內(nèi)的代謝形式和歸宿問題。第二十九頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)用干細(xì)胞的“干”性由于其來源(liyun)及培養(yǎng)試劑和方法不同而不完全相同，我們可以根據(jù)不同組織來源(liyun)的干細(xì)胞的一些功能差異，選擇性地將其應(yīng)用于臨床，進(jìn)而更好地為臨床服務(wù)?？傊酶杉?xì)胞對組織再生與修復(fù)的作用，還有很多困難需要克服。第三十頁，共三十二頁。干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷修復(fù)中的應(yīng)