實(shí)時熒光定量PCR儀性能指標(biāo)對比

1、實(shí)時熒光定量PCR儀比較表StratageneMx3000PStratageneMx3005PABI,Prism7500ABIStepOne/PlusBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotorGene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480簡評光源石英鹵鎢燈石英鹵鎢燈鹵鎢燈藍(lán)光LED6個LED96個藍(lán)光LEDLED1個LED氙燈石英鹵燈激發(fā)范圍寬廣，光強(qiáng)強(qiáng)，非常適合做多通道的定量PCR,LED的激發(fā)光源是冷光源相對壽命相對也要長，但是光強(qiáng)度低，光的激發(fā)范圍受限制。通道4通道5通道5通道其中一個為校正染料通道3通道52/

2、4通道2、4、5、6不等3塊檢測濾光片/6塊檢測濾光片五通道多通道是定量PCR發(fā)展的趨勢，現(xiàn)在多通道的熒光定量實(shí)驗(yàn)也越來越多，主流的是4通道檢測器PMTPMT冷CCD光電二極管6個光電二極管1/2個PMTPMT光電二極管CCD采用CCD檢測器具有邊緣效應(yīng)，做實(shí)驗(yàn)時必須加入校正染料。采用PMT檢測器，能將光信號放大，檢測靈敏度高，無需校正染料。發(fā)光二極管的檢測靈敏度低。濾光系統(tǒng)4個激發(fā)光濾鏡與4個發(fā)射光濾鏡5個激發(fā)光濾鏡與5個發(fā)射光濾鏡5個激發(fā)光濾鏡與5個發(fā)射光濾鏡帶有3個/4個檢測端濾光片6個激發(fā)與6個檢測激發(fā)端沒有濾光片發(fā)射端有2/4個濾光片檢測濾鏡片3個/6個發(fā)射光檢測濾光鏡5個激發(fā)端濾光

3、片和6個檢測斷濾光片激發(fā)光與發(fā)射光的雙重過濾能排除雜光的影響，從而提高檢測的準(zhǔn)確性樣品通量96孔96孔96孔48孔/96孔96孔96孔36/72/1003296/38496孔通量高，可以采用多孔板方便操作。激發(fā)光范圍350-750nm350-750nm400-660nm470nm450-730nm470nm365nm/470nm/530nm/585nm/625nm/680nm/460nm470nm430-630nmStratagene擴(kuò)大了光譜的檢測范圍，從350-750nm。目前市場上所有的熒光探針都適用。優(yōu)化的4通道能減少各通道光譜之間的相互干擾。StratageneMx3000PStra

4、tageneMx3005PABI,Prism7500ABIStepOne/PlusBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotorGene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480簡評檢測光范圍350-700nm350-700nm500-660nm450-730nm460nm/510nm/555nm/610nm/660nm530,640,705nm/530,560,610,640,670,705nm430-630nmStratagene檢測光范圍最寬廣可用熒光染料ALEXAFluor350(350nm-440nm),FAM/S

5、YBRGreenI(492nm-516nm),TET(517nm-538nm),HEX/JOE/VIC(535nm-555nm),Cy3(545nm-568nm),TAMRA(556nm-580nm),ROXTM/TexasRed(585nm-610nm),andCy5(635nm-665nm).ALEXAFluor350(350nm-440nm),FAM/SYBRGreenI(492nm-516nm),TET(517nm-538nm),HEX/JOE/VIC(535nm-555nm),Cy3(545nm-568nm),TAMRA(556nm-580nm),ROX/TexasRed(585nm

6、-610nm),andCy5(635nm-665nm).FAM/SYBRGreenI,VIC/JOE,NED/TAMRA/CY,和ROXCY5FAM/SYBRGreen,VIC/JOE,andROX沒有明確注明可用染料，yrreel可用SYBRGreen,FAM,VIC,TET,HEX,ROX,JOE,TAMRAFAM/SYBRGreenI,TET,HEXVIC/JOE,/TAMRA/CY,TexasRed和ROXCY5FAM/SYB,LC610.LC710(2.0增加HEX,JOE,640,670)rCyan500/Yreen/CrRed610/rRed640/Cy5CyeR/CS/rata

7、gene的可用染料最多，開放性最好CyeCyeStratageneMx3000PStratageneMx3005PABI,Prism7500ABIStepOne/PlusBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotorGene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480簡評檢測動態(tài)范圍10個10個9個9個9個910個9個10寬廣的動態(tài)范圍有利于摸索實(shí)驗(yàn)條件溫度均一性(+/-)0.25(+/-)0.25(+/-)0.5土0.5C0.490.4+/-0.01+/)0.4(+/-)0.35Stratagene改進(jìn)了傳統(tǒng)的模塊加熱方式，

8、使得溫度非常均勻，實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性更好升降溫速度2.5度/秒2.5度/秒樣品：1.6度/秒，模塊：2.5度/秒模塊最高4.6度/秒，樣品快速功能下2.2度/秒、普通功能下1.6度/秒最高5度/秒，平均3.3度/秒鋁質(zhì)：升4度/秒，降3度/秒；銀質(zhì)：升6度/秒，降4.5度/秒15度/秒0.1-20度/秒升4.8度/秒，降2.5度/秒相比同類型產(chǎn)品,Stratagene的升降溫速度快檢測靈敏度（準(zhǔn)確性）單拷貝（區(qū)別5000個拷貝與10000個拷貝的可信度為99.7%）單拷貝（區(qū)別5000個拷貝與10000個拷貝的可信度為99.7%）單拷貝（區(qū)別5000個拷貝與10000個拷貝的可信度為99.7%）10

9、拷貝（區(qū)別5000個拷貝與10000個拷貝的可信度為99.7%）單個拷貝的基因組DNA50fMfluorescein單拷貝單拷貝單拷貝升降溫方式Peltier半導(dǎo)體Peltier半導(dǎo)體Peltier半導(dǎo)體Peltier半導(dǎo)體/steponeplus使用VeriFlex技術(shù)分為6個獨(dú)立控制區(qū)域Peltier半導(dǎo)體Peltier半導(dǎo)體空氣加熱制冷空氣加熱制冷Peltier半導(dǎo)體半導(dǎo)體加熱制冷控溫更加精確?？諝饧訜嶂评潆m然快速，但是控溫不精確。StratageneMx3000PStratageneMx3005PABI,Prism7500ABIStepOne/PlusBio-RadCFX96Eppen

10、dorf:2/4ColorSystemsRotorGene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480簡評反應(yīng)體積10100uL10100uL20100uL10-30uL150uL5-100ul(通常20ul)20ul-100ul的毛細(xì)管（反應(yīng)體積可最少到5ul）10uL-100uL(96well)and5uL-20uL(384well)PCR反應(yīng)的一般體積都是20-50ul試劑和耗材開放開放（支持FRET）專門為Taqman設(shè)計(jì)ABI專用耗材(0.ImL)低緣管開放36孔可使用0.2ml的單管，其余為專用耗材特制耗材，專用試劑封閉Stratagene試劑和耗材完

11、全開放快速PCR功能與FullVelocity配合使用可以快速至50分鐘完成與FullVelocity配合使用可以快速至50分鐘完成無有，快速功能40分鐘內(nèi)完成有有本身升降溫速度比較快。反應(yīng)時間45min1.5不等本身升降溫速度比較快。35個循環(huán)反應(yīng)20ul要30min,100ul要60min406分鐘之內(nèi)完成40個PCR循環(huán)快速PCR功能有利于縮短反應(yīng)時間，提高實(shí)驗(yàn)效率。StratageneMx3000PStratageneMx3005PABI,Prism7500ABIStepOne/PlusBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotorGene6000

12、RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480簡評軟件易用性軟件功能強(qiáng)大，支持絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、SNP分析等不同應(yīng)用模式、操作非常方便簡單，界面直觀。軟件功能強(qiáng)大，支持絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、SNP分析等不同應(yīng)用模式、操作非常方便簡單，界面直觀。支持激發(fā)光濾光片與發(fā)射光濾光片的單獨(dú)控制,能形成濾光片的錯配，從而來滿足FRET應(yīng)用。軟件操作復(fù)雜、單個軟件功能薄弱。絕對定量（標(biāo)準(zhǔn)曲線）、CT進(jìn)行相對定量分析、基因分型、融解曲線分析標(biāo)準(zhǔn)曲線分析，CT與CT進(jìn)行相對定量分析，基因分型、讀板實(shí)驗(yàn)。數(shù)據(jù)輸出方便。具有e-mail提醒功能。軟件功能比較強(qiáng)大。Stra

13、tagene定量軟件的操作簡單，有口皆碑！StratageneMx3000PStratageneMx3005PABI,Prism7500ABIStepOne/PlusBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotorGene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480簡評主體評價i開放的系統(tǒng)，寬廣的波長范圍，能采用所有可用的探針染料2孔間溫差小，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好。3.米用PMT檢測，減少激發(fā)光、檢測光交叉干擾，提高靈敏度4軟件功能強(qiáng)大，但非常簡單易用5，機(jī)器內(nèi)置芯片能保存數(shù)據(jù)，電腦死機(jī)等情況不會丟失數(shù)據(jù)。6,完全的熒光定量PCR培訓(xùn)項(xiàng)

14、目。7，個人化的熒光定量PCR儀i開放的系統(tǒng)，寬廣的波長范圍，能采用所有的定量探針染料2孔間溫差小，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好。3.米用PMT檢測，減少激發(fā)光、檢測光交叉干擾，提高靈敏度4軟件功能強(qiáng)大，但非常簡單易用5，機(jī)器內(nèi)置芯片能保存數(shù)據(jù)，電腦死機(jī)等情況不會丟失數(shù)據(jù)。6，5通道配置，支持FRET應(yīng)用。7,完全的熒光定量PCR培訓(xùn)項(xiàng)目。8，個人化的熒光定量PCR儀5通道，能與Taqman探針很好的匹配，軟件使用麻煩，需要校正染料。儀器搬動后需要校正光路。有引物探針設(shè)計(jì)軟件，但只能設(shè)計(jì)引物與Taqman探針。有單獨(dú)的相對定量軟件。目前StepOne系列的光學(xué)系統(tǒng)沒有詳細(xì)信息。只是知道LED激發(fā)所有的孔。具有梯度和快速功能LED+光電二極管（檢測靈敏度值得懷疑）；逐孔掃描（光源移動）；操作溫度30-100C有梯度功能；采用LED作為光源,光強(qiáng)弱。陣列光源有個體差異，影響檢測的重復(fù)性；是普通PCR的升級產(chǎn)品，穩(wěn)定性有待考查RG6000有5種型號：2Plex，2Plex+HRM,5Plex，5Plex+HRM,6Plex?？諝饧訜嶂评洌禍厮俣瓤?，溫度均一性好。但