尿微量白蛋白（U-ALB）免疫比濁定量QuikRead儀器法作業(yè)指導書

1、尿微量白蛋白（U-ALB）免疫比濁定量QuikRead儀器法)作業(yè)指導書實驗原理QuikRead U-ALB是一種以微粒子包被的抗人白蛋白血清為基礎的免疫比濁試驗。存在于樣本中的白蛋白和微粒子反應，溶液中濁度的最終變化通過QuikRead儀器被測定。尿樣本被加入緩沖液中在同一比濁杯中進行分析測定。試劑被預先定標，特定批號的標準曲線被記錄在試劑盒提供的磁卡當中。QuikRead U-ALB和使用比濁法獲得的結(jié)果相關性良好。 2. 標本采集2.1 標本采集前病人準備：無需特殊準備2.2 標本種類：夜尿或隨機尿2.3 標本要求：QuikRead U-ALB試劑盒直接用尿樣本（未稀釋的樣本）進行檢測。

2、尿樣本中不建議添加防腐劑。夜尿樣本的采集：采集的夜尿樣本，要求至少采集6小時的夜尿。記錄采集尿樣本的時間和尿量。白蛋白的排泄率可根據(jù)以下公式計算：總尿量（ml）*QuikRead U-ALB濃度值（mg/l）/采集時間（min）=尿微量白蛋白的排泄率（ug/min）隨機尿樣本：在隨機尿樣本中，使用首次晨尿樣本可獲得十分可靠的結(jié)果。貯存樣本在測試以前要求尿樣本達到室溫。3. 標本儲存：尿樣本2-8可貯存14天。尿樣本不應當被冰凍保存。4. 標本運輸：室溫運輸5. 標本拒收標準：細菌污染、乳糜尿6. 試劑6.1 試劑名稱：QuikRead U-ALB 試劑6.2 試劑生產(chǎn)廠家：Orion copo

3、ration Orion Diagnostica6.3 包裝規(guī)格：50Test/kit6.4 試劑盒組成：6.5試劑儲存條件及有效期：試劑2-8貯存。緩沖液可在室溫下（2-25）貯存。試劑的穩(wěn)定性可達到試劑盒上印的有效期。7. 儀器設備7.1儀器名稱：QuikRead 分析儀7.2儀器廠家：基恩科技有限公司7.3儀器型號：QuikRead 型7.4儀器通道選擇：采取兩個發(fā)光二極管：654m,950m;吸收范圍：0.0-2.57.5儀器校準程序：每個試劑盒有一個已知的校正數(shù)據(jù)，它記錄在磁卡上，用以確定分析曲線，讓磁卡通過儀器上讀卡器，該數(shù)據(jù)信息就能送入QuikRead儀器之中，然后儀器就處于等待

4、使用狀態(tài)。8. 操作步驟8.1 Read the card (閱讀磁卡)：將磁卡在儀器的閱讀槽中刷過，磁卡的磁帶面向自己。8.2 Ready for use U-ALB （準備進行U-ALB測定）8.3 Measuring blank8.3.1 使用QuikRead分液器加1ml緩沖液到比濁管中。8.3.2 用毛細吸管加20l不稀釋的尿樣本到比濁管中。（參照注意事項） 8.3.3 將U-ALB試劑帽蓋于比濁管上擰緊。輕輕混勻（不能顛倒）。不要按壓試劑帽的內(nèi)側(cè)部分。不要觸摸比濁管下部的光潔部分（光學測定部分）。8.3.4 把比濁管插入到儀器的檢測孔中8.4 Blank measure（測定空白）

5、：儀器測定樣品空白。這最多需要30秒時間。在檢測孔中讀空白期間不要觸摸比濁管。8.5 Add reagent（加試劑）8.5.1 按下試劑帽的內(nèi)側(cè)部分（例如，可以用手指或者一支筆來按）。如此將使U-ALB干粉試劑加到比濁管中。8.5.2 從檢測孔中拿出比濁管，快速地顛倒混勻。比濁管中的溶液變成白色混合物。8.6 Shake the cuvette（混勻試管）：屏幕顯示：告訴你需要多長時間來混勻比濁管（6秒時間）。移動的一串點表示你混勻的速度。8.7 Insert the cuvette for measurement （插入比濁管進行測定）：混勻結(jié)束后儀器發(fā)出三次短暫的嘟嘟聲，立即放置比濁管于

6、儀器的檢測孔中。假如比濁管沒有放置檢測孔中，三秒鐘后試驗將作廢。注意1：不要觸摸比濁管下部的光潔部分（光學測定部分）注意2：假如比濁管沒有在規(guī)定的時間內(nèi)放置于檢測孔中儀器將顯示信息“cuvette inserted too late(比濁管插入太晚)”8.8 Measuring120s （測定120s）：儀器在2分鐘內(nèi)測定出尿微量白蛋白的濃度。結(jié)果顯示在屏幕上，單位是mg/l.在實驗完成之前屏幕上顯示實驗所需的最多剩余時間。注意1：在結(jié)果沒有出來并記錄下來之前，不要將比濁管從測定孔中拿出來。如果拿出來的話會立刻中斷測定。注意2：檢查試劑帽的底部塑料物是否脫落在比濁管的下部。如果在比濁管的下部存

7、在試劑帽的底部塑料物，這可能干擾檢測過程。9. 結(jié)果判斷與分析：QuikRead 在5-150mg/l之間直接從儀器屏幕給出數(shù)字值。 10. 質(zhì)量控制：定期使用U-ALB 質(zhì)控液（Cat.No.67881）。QuikRead U-ALB質(zhì)控液的瓶子上標有U-ALB的靶值。11. 計算：直接讀取屏幕上顯示的數(shù)字結(jié)果即可。12 參考值范圍：夜尿樣本：20g/min； 隨機尿樣本：20mg/L13. 臨床意義：尿微量白蛋白升高是糖尿病、高血壓病并發(fā)腎病的早期的危險指標。腎病是糖尿病最普遍的并發(fā)癥之一，國際上認為糖尿病病人應當監(jiān)控早期腎?。?）。由于微量白蛋白提示早期腎病，因此糖尿病病人每年應當進行多

8、次尿白蛋白的檢測。微量白蛋白尿的及時檢測十分重要因為時期干預能阻止甚至逆轉(zhuǎn)腎病的進程。由于高血壓病人可能發(fā)展成為微量白蛋白尿，因此定期檢測尿白蛋白濃度對他們也十分有益（2）。微量白蛋白尿被定義為夜尿樣本中白蛋白的排泄率為20-200ug/min或者隨機尿樣本中白蛋白的濃度為20-200mg/L。在3-6個月期間三次尿樣本中至少有二次陽性被診斷為微量白蛋白尿（3）。14. 操作性能14.1方法成熟、結(jié)果可靠、操作簡便、報告快速（3分鐘內(nèi)出結(jié)果）、采樣方便（20l尿液）、定量測試（5-150mg/L）、尿蛋白在40g/L范圍內(nèi)不會出現(xiàn)抗原過剩無須尿蛋白化學檢測預篩。14.2 回收率：90%-107

9、%（126mg/L）14.3 檢測極限：150mg/L”。15.2 較高的濃度如果需要更精確的值時，必需稀釋樣品并重新進行測定。例如：使用0.9%NaCl對比較高濃度的尿樣本進行1：5（1+4）或者1：25（1+24）預稀釋，測定稀釋的尿樣本結(jié)果乘以稀釋比例。例如：稀釋比例1：5 稀釋比例1：251）吸取250l原尿 1）吸取100l原尿 2）加入0.9%NaCl1ml 2）加入0.9%NaCl2400l 3）混勻稀釋的尿樣本 3）混勻稀釋的尿樣本 4）和測定原尿樣本相同 4）和測定原尿樣本相同的方法進行分析 的方法進行分析5）最后尿微量白蛋白的 5）最后尿微量白蛋白的結(jié)果乘以5 結(jié)果乘以25

10、 16. 方法局限性16.1試劑中含有0.1%疊氮鈉作為防腐劑。疊氮物會和金屬反應生成易爆炸的化合物，因此，如有溢出應用水清洗掉。16.2白蛋白試劑帽中含有0.1%疊氮鈉作為防腐劑。如果吸入、吞下或者經(jīng)皮膚接觸進入人體對人體是有害的。17. 當檢驗系統(tǒng)（儀器）不能工作時，所采取的補救措施：當檢驗系統(tǒng)（儀器）不能工作時，可聯(lián)系儀器廠家，進行緊急修理，如一時不能修好，如別的實驗室有同類儀器可到別的儀器上先測，如別的實驗室無同類儀器，申請廠家送一臺能正常工作的儀器代替。18. 參考文獻18.1 Viberti GC, Mongensen CE, Passa P, et al. St Vincent

11、declaration,1994:Guideline for the prevention of diabetic renal failure.18.2 Bigazzi R, Bianchi S, Baldari D and Campese V. Microalbuminuria predicts cardiovascular events and renal insufficiency in patients with essential hypertension. J Hypertension,1998;16,1325-1333.18.3 Mogensen CE, Keane WF, Be

12、nnett PH, et al. Prevention of diabetic renal disease with special reference to microalbuminuria.Lancet,1995;346,1080-108419. 注意事項19.1本試劑只使用于體外測定使用。19.2不要用過期的試劑。19.3 質(zhì)控液中含有來源于人體的材料，已經(jīng)過測定，HIV、HCV、HBsAg呈陰性，所有材料在561小時已失去活性，但仍當它為傳染源處理。19.4 所有的試劑在使用前必須達到室溫。使用未稀釋的樣本。19.5 分液器可準確分液1ml。將分液器裝到緩沖液瓶上并擰緊。先分幾次緩沖液確定分液器功能完好，已分出的緩沖液丟棄不用。瓶中的緩沖液有多余的以用于可能需要的分液器功能的檢查。緩緩的將分液器的活塞壓到底，避免劇烈地壓活塞。壓一次