反相高效液相色譜法測(cè)定竹瀝達(dá)痰丸中黃芩苷的含量

1、反相高效液相色譜法測(cè)定竹瀝達(dá)痰丸中黃芩苷的含量【關(guān)鍵詞】竹瀝達(dá)痰丸黃芩苷反相高效液相色譜法Abstrat：bjetiveTestablishaeasureentethdfbaialin,theeffetivepnentfZhulidatanPills.ethdsTheislatinasndutednaZRBAXExtend-18lun(4.6150,5),thebilephasensistedfethanl-ater-phsphate(47530.2),thedetetinavelengthas316n.ResultsThententfbaialinshedgdlinearityinthera

2、ngef10.0477.2g/l，r=0.9998(n=7),andtheaveragereveryas100.5%n=6,RSDas1.22%.nlusinTheethdissiple,stable,andaneffetivelyntrlthequalityfthepreparatin.Keyrds：ZhulidatanPills;Baialin;RP-HPL竹瀝達(dá)痰丸由黃芩、半夏、大黃、橘紅、甘草、沉香等6味藥材加工提取制得的制劑，具有豁除頑痰，清火順氣的成效，用于痰熱上壅，頑痰膠結(jié)，咳喘痰多，大便枯燥，煩悶癲狂等病癥1。黃芩為方中主藥，主要有效成分為黃芩苷。?中國(guó)藥典?2022年版部竹瀝

3、達(dá)痰丸項(xiàng)下無(wú)含量測(cè)定項(xiàng)，為了進(jìn)步檢測(cè)手段，有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量，本文建立了黃芩苷含量的高效液相色譜測(cè)定法。1儀器與試藥1.1儀器Agillent1100高效液相色譜儀美國(guó)，ZRBAXExtend-18(4.6150,5)色譜柱，G1379A四元泵，G1314AVD檢測(cè)器，G1316A恒溫箱，G1313AALS自動(dòng)進(jìn)樣器。ettlerTledPB1502-S電子天平，ettlerTledAG204電子分析天平，超聲處理器上海船舶電子設(shè)備研究所。1.2試藥1.3樣品竹瀝達(dá)痰丸某藥廠批號(hào)20220703，20220910，20221112。2方法與結(jié)果2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)用十八烷基鍵合硅膠為

4、填充劑；以甲醇水磷酸47530.2為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)316n；柱溫室溫。理論板數(shù)按黃芩峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。2.1.1對(duì)照品溶液的制備精細(xì)稱取在60減壓枯燥4h的黃芩苷對(duì)照品適量，加50%甲醇制成每毫升含30g的溶液，即得。2.1.2供試品溶液的制備取丸劑，研細(xì)，精細(xì)稱取1.8g置具塞錐形瓶中，精細(xì)參加50%甲醇50l，稱定重量，超聲處理功率320,頻率35kHz20in，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，精細(xì)量取續(xù)濾液1l，置10l量瓶中，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。2.1.3測(cè)定法分別精細(xì)汲取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20l，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。2.2檢測(cè)

5、波長(zhǎng)確實(shí)定2.3線性關(guān)系考察對(duì)照品溶液的制備：精細(xì)稱取在60減壓枯燥4h的黃芩苷對(duì)照品19.3g，置于250l量瓶中，加50%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為77.2g/l的黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)藏溶液，然后依次精細(xì)量取濃度為77.2g/l的黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)藏溶液1.3，2.6，4.0，5.2，6.5，8l于10l容量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為10.036，20.072，30.88，40.144，50.18，61.76，77.2g/l的系列黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)溶液。按上述色譜條件分別精細(xì)汲取標(biāo)準(zhǔn)品溶液各20l進(jìn)樣測(cè)定，以色譜峰面積為縱坐標(biāo)，樣品濃度為橫坐標(biāo)回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線為：A=40.781

6、-8.6998，r=0.9998。說(shuō)明在濃度10.0477.2g/l范圍內(nèi)黃芩苷的峰面積與濃度線性關(guān)系良好。黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖3。2.4精細(xì)度實(shí)驗(yàn)精細(xì)汲取供試品溶液20l進(jìn)樣測(cè)定，一天內(nèi)重復(fù)進(jìn)樣操作6次，約1h/次，測(cè)得各次峰面積分別為1953.5，1946.2，1929.4，1931.3，1893.2，1878.5計(jì)算峰面積的RSD為1.47%，說(shuō)明樣品利用該方法一天內(nèi)測(cè)定精細(xì)度滿足要求，但含量有下降趨勢(shì)，提示樣品處理后應(yīng)盡可能短時(shí)間內(nèi)進(jìn)展分析。2.5專屬性實(shí)驗(yàn)制備缺黃芩的陰性樣品，然后同供試品溶液樣品處理法同法處理，得到黃芩陰性溶液。分別精細(xì)汲取陰性溶液、標(biāo)準(zhǔn)品溶液、供試品溶液20l，進(jìn)樣

7、測(cè)定，記錄色譜圖，見圖46。從色譜圖中可看出陰性樣對(duì)測(cè)定無(wú)干擾，制劑中黃芩苷與相鄰峰別離良好，理論板數(shù)可達(dá)3000以上。說(shuō)明此液相色譜法測(cè)定制劑中黃芩苷的專屬性良好。2.6加樣回收率實(shí)驗(yàn)按半量參加法進(jìn)展加樣回收率的測(cè)定，因本品黃芩苷含量較高，為節(jié)省標(biāo)準(zhǔn)品，樣品及溶劑按比例縮小至1/5，另外黃芩苷在水、甲醇等溶解度均較小，在50%甲醇水中的溶解度有所增大，我們?cè)趯?shí)驗(yàn)研究過(guò)程發(fā)現(xiàn)以50%甲醇水為溶劑時(shí)，當(dāng)濃度為300g/l時(shí)，溶液已呈混懸狀，因此加樣回收率測(cè)定中參加濃標(biāo)有困難，故我們采取的是用提取溶劑量的50%甲醇水溶解標(biāo)準(zhǔn)品，然后參加丸劑處理后的粉末中進(jìn)展樣品提取，詳細(xì)操作如下：精細(xì)稱取研細(xì)的丸

8、劑粉末約0.2g共6份批號(hào)050401，置具塞錐形瓶中，各精細(xì)參加以50%甲醇-水溶解的濃度為200.6g/l的標(biāo)準(zhǔn)品溶液10l，稱定重量，超聲處理功率320,頻率35kHz20in，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，精細(xì)量取續(xù)濾液1l，置10l量瓶中，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，按上述色譜條件測(cè)定，并按下式計(jì)算加樣回收率。加樣回收率%=2-1/0100%式中：2測(cè)得總量1供試品中黃芩苷量0黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品參加量結(jié)果見表2。表2丸劑測(cè)定的加樣回收率略上述加樣回收率實(shí)驗(yàn)說(shuō)明利用本方法測(cè)定丸劑的黃芩苷含量準(zhǔn)確度高，樣品處理方法可行。2.7樣品的含量測(cè)定利用該方法測(cè)定3批樣品。結(jié)果見表3。表3竹瀝達(dá)痰丸中的黃芩苷的測(cè)定結(jié)果略3討論3.1檢測(cè)波長(zhǎng)確實(shí)定對(duì)黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)展紫外掃描結(jié)果說(shuō)明黃芩苷在280n及316n處有最大吸收，且在316n處測(cè)定穩(wěn)定性好，因此吸收波長(zhǎng)確定為316n。3.2加樣回收率方法的研究3.3流動(dòng)相的選擇3.4提取時(shí)間確實(shí)定參照?中國(guó)藥典?2022年部黃芩項(xiàng)下的超聲提取方法。分別以50%甲醇，70%乙醇及稀乙醇53%作為提取溶媒進(jìn)展超聲處理實(shí)驗(yàn)，結(jié)果50%甲醇提取效果較好。應(yīng)選擇為50%甲醇提取溶媒的提取方法。取本品，研細(xì)，